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山茱萸总皂苷的提取分离与含量测定.doc

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资源描述
山茱萸总皂苷的提取分离与含量测定 作者:吴红,梁恒,刘永红,袁忠海 【关键词】 山茱萸 【Abstract】 AIM: To review effects of different methods of extracting total saponins from Cornus officinalis so as to provide an effective way to accurately determine total saponins. METHODS: ① Methanol reflux, ② Ether degreasing Methanol reflux, ③ Ultrasonic abstraction, ④ Method of macroreticular absorption resin and ⑤ Ethanol reflux were compared. With Ginsenoside Re and Oleanolic acid as standard, chromatometry was used respectively to determine total saponins of different extraction solution. RESULTS: The content of total saponins determined by methods of ①, ②, ③ and ⑤ was 5.95%, 6.98%; 2.87%, 3.12%; 3.80%, 3.92%; 6.17% and 8.13% respectively, and by method of ④ , it was 1.52% and 1.73%. CONCLUSION: Different extracting methods have much influence on determining total saponins in Cornus officinalis. 【 Keywords 】 cornus officinalis; total saponins; extraction; content determination 【摘要】 目的: 考察不同提取方法对山茱萸总皂苷测定的 1 影响,为准确测定山茱萸皂苷的含量提供可行方法. 方法: ① 甲醇 回流法;② 乙醚脱脂甲醇回流提取法;③ 超声法;④ 大孔树脂法; ⑤ 乙醇回流法. 上述方法分别用人参皂苷 Re、齐墩果酸作对照,比 色法测定不同提取液中总皂苷的含量. 结果:①, ②, ③和⑤提取法 所测总皂苷含量分别为:5.95%,6.98%;2.87%,3.12%;3.80%, 3.92%; 6.17%和 8.13%. ④ 法测定总皂苷含量为 1.52%和 1.73%. 结论: 不 同提取方法对山茱萸总皂苷含量的测定有较大的影响. 【关键词】 山茱萸;总皂苷;提取;含量测定 0 引言 随着现代文明的飞速发展,延缓衰老,健康长寿已为人们日 益期盼,名贵中药山茱萸因含有丰富的营养成分和珍贵的保健成分日 益成为研究热点. 山茱萸(Cornus officinalis sieb. et Zucc.)又名 枣皮,是我国 40 种用量大的骨干药材之一,是中、日、朝三国使用频 率最高的 25 种植物药之一,具有补肝肾、涩精气、降血糖、抗菌、利 尿、降压和免疫等功效[1]. 近代药理学研究表明,山茱萸水溶液提 取物(总皂苷)有明显的免疫抑制活性,并对肾阳虚动物模型生命质 量及多个脏器具有保护作用[2]. 山茱萸的化学成分主要含有环烯醚 萜苷类、皂苷、多糖、熊果酸、齐墩果酸、鞣质等[1, 3]. 化学成 分分析表明,山茱萸中疗效保健成分主要是齐墩果烷系皂苷(其水解 后的苷元为齐墩果酸和熊果酸)马钱素及莫诺苷等苦味素物质. 目前 、 已发现山茱萸中含有 8 种苷[1] 但对总皂苷的含量报道不一[4, 5]. , 2 皂苷由其苷元与多分子糖或糖醛酸组成,鉴于目前尚无山茱萸皂苷类 成分的法定对照品,我们选用结构与山茱萸皂苷类成分接近的单体皂 苷(人参皂苷 Re)及其苷元(齐墩果酸)作对照,采用比色法计算总 皂苷含量. 由于比色法中总皂苷的提取方法及分离方式直接影响比色 测定的结果,因此我们对 5 种不同提取方法的总皂苷含量进行了比 较. 1 材料和方法 1.1 材料 F120 型高速药物粉碎机(80~200 目) Unico 2100 ; 型紫外可见分光光度计 (尤尼柯上海仪器有限公司 );DZF 型真空干 燥箱; Sartorius BP221S 电子天平;SB5200D 超声清洗器. 山茱萸药 材样品由汉江制药厂提供并鉴定;HPD300 型大孔树脂 (河北沧州宝恩 化工有限公司) ;人参皂苷 Re、齐墩果酸标准品 (中国药品生物制品 检验所 );香草醛、高氯酸、冰醋酸、甲醇均为分析纯;GF254 薄层 板;展开剂:正丁醇乙酸乙酯水(4∶1∶5)上清;100 g・L-1 硫酸显色. 1.2 方法 1.2.1 山茱萸总皂苷提取方法① 甲醇回流法: 精密称定 60℃ 干燥至恒重的山茱萸粉末(80 目)2.0010 g,置 50 mL 圆底烧瓶中, 准确加入甲醇 25 mL,水浴回流 6 h,倾出提取液,续加甲醇 20 mL, 回流提取 3 h,离心过滤,减压浓缩,定容至 10 mL. ② 乙醚脱脂甲 醇回流提取法:取 60℃干燥至恒重的山茱萸粉末 2.0011 g,置索氏抽 3
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