川芎嗪-丹参配伍前后在急性心肌缺血模型大鼠体内的组织分布差异研究.pdf

2023 年 9 月第 33 卷 第 9 期中国比较医学杂志CHINESE JOURNAL OF COMPARATIVE MEDICINESeptember,2023Vol.33 No.9李容,勾健,刘亭,等.川芎嗪-丹参配伍前后在急性心肌缺血模型大鼠体内的组织分布差异研究 J.中国比较医学杂志,2023,33(9):8-15.Li R,Gou J,Liu T,et al.Tissue distribution of ligustrazine-Salvia miltiorrhiza before and after compatibility in acute myocardial ischemia model rats J.Chin J Comp Med,2023,33(9):8-15.doi:10.3969/j.issn.1671-7856.2023.09.002基金项目国家自然科学基金(81803827);贵州省优秀青年科技人才项目(黔科合平台人才20215619 号);贵州省普通高等学校科技拔尖人才项目(黔教合 KY 字2021033)。作者简介李容(1997),女,硕士研究生,研究方向:中药药物代谢动力学。E-mail:lr30856 通信作者孙佳(1986),女,副教授,研究方向:中药药效物质基础与药动学。E-mail:392828662 川芎嗪-丹参配伍前后在急性心肌缺血模型大鼠体内的组织分布差异研究李 容1,3,勾 健1,3,刘 亭2,巩仔鹏1,陆 苑1,刘春花2,黄 勇1,孙 佳1(1.贵州医科大学 贵州省药物制剂重点实验室 省部共建药用植物功效与利用国家重点实验室,贵阳 550004;2.贵州医科大学 民族药与中药开发应用教育部工程研究中心,贵阳 550004;3.贵州医科大学 药学院,贵阳 550004)【摘要】目的 对盐酸川芎嗪与丹参配伍前后在急性心肌缺血(acute myocardial ischemia,AMI)模型大鼠体内的组织分布差异进行探讨。方法大鼠皮下注射盐酸异丙肾上腺素溶液复制 AMI 模型,分为川芎嗪组(ligustrazine,LG)、丹参组(Danshen,DS)和川芎嗪-丹参组(ligustrazine-Danshen,LD),采用 UPLC-MS/MS 方法测定不同时间点下川芎嗪和丹参素 2 种活性成分在心脏、肝、脾、肺、肾、脑组织中的含量差异。结果 注射后川芎嗪和丹参素在 AMI 大鼠各组织中分布广泛且迅速达峰;配伍前后,各组川芎嗪在脑组织中含量最高,在肝组织中含量最低;丹参素在肾组织中含量最高,在脑组织中含量最低,表明川芎嗪较丹参素更易透过血脑屏障,且主要蓄积组织有所差异;而配伍用药显著增加了川芎嗪和丹参素在靶器官心脏中的 AUC(P0.001)。结论 推测川芎嗪与丹参配伍可能是通过增加主要药效成分在心脏中的分布增强治疗作用,进而能更好地发挥药效。【关键词】川芎嗪-丹参;配伍;组织分布;差异【中图分类号】R-33 【文献标识码】A 【文章编号】1671-7856(2023)09-0008-08Tissue distribution of ligustrazine-Salvia miltiorrhiza before and after compatibility in acute myocardial ischemia model ratsLI Rong1,3,GOU Jian1,3,LIU Ting2,GONG Zipeng1,LU Yuan1,LIU Chunhua2,HUANG Yong1,SUN Jia1(1.Guizhou Provincial Key Laboratory of Pharmaceutics,State Key Laboratory of Efficacy and Utilization of Medicinal Plants,Guizhou Medical University,Guiyang 550004,China.2.Ministry of Education Engineering Research Center for Ethnic Medicine and Traditional Chinese Medicine Development and Application,Guizhou Medical University,Guiyang 550004.3.School of Pharmaceutical Sciences,Guizhou Medical University,Guiyang 550004)【Abstract】Objective To investigate the difference in tissue distribution of ligustrazine hydrochloride and Salvia miltiorrhiza(Danshen)in acute myocardial ischemia(AMI)model rats.Methods A rat model of AMI was induced by subcutaneous injection of isoproterenol hydrochloride solution.The rats were then divided into a ligustrazine group,Danshen group,and ligustrazine-Danshen group.Ligustrazine and Danshensu levels in the heart,liver,spleen,lung,kidney,and brain were detected at different time points by ultra-high performance liquid chromatography/tandem mass spectrometry.Results Ligustrazine and Danshensu were widely distributed and peaked rapidly in tissues of AMI rats after intravenous injection.Before and after compatibility,the content of ligustrazine was highest in brain tissue and lowest in liver tissue,while the Danshensu content was highest in kidney tissue and lowest in brain tissue,indicating that ligustrazine could penetrate the blood-brain barrier more easily than Danshensu,and the main sites of accumulation were different.The areas under the curves of ligustrazine and Danshensu in the heart as the target organ were significantly increased(P0.001).Conclusions These result suggest that the combination of ligustrazine and Danshen may enhance the therapeutic effect by increasing the distribution of the main pharmacodynamic components in the heart,thus improving the efficacy.【Keywords】ligustrazine-Salvia miltiorrhiza;compatibility;tissue distribution;differenceConflicts of Interest:The authors declare no conflict of interest.冠状动脉心脏病是全球流行病中发病率和死亡率的主要原因,心肌缺血是冠心病的代表性病理过程,其特征是心肌血氧供需失衡,引起心脏代谢紊乱、心律失常、心肌梗死、猝死1。由盐酸川芎嗪和丹参配伍组成的参芎葡萄糖注射液(Shenxiong glucose injection,SGI)在临床上广泛用于治疗无症状心肌缺血、心力衰竭、心绞痛、急性缺血性中风等多种疾病,且临床效果显著2-3。药理作用研究显示 SGI 具有抗氧化应激和抗凋亡作用4,同时 SGI可能通过环氧合酶途径等生物过程治疗缺血再灌注损伤,其主要与脂肪细胞脂解、血小板活化的调控等信号通路密切相关5。中药复方是中药临床应用的主要形式,配伍通过引起药物代谢酶和转运蛋白的改变从而导致药物的吸收、分布、代谢和排泄(ADME)过程发生变化6。而机体是否处于病理状态以及疾病的严重程度同样对药物的 ADME 过程有不同的影响,因此在病理状态下研究药物配伍前后的体内过程具有更重要的临床意义。目前对于丹参和川芎嗪的报道主要集中在正常状态下单一成分的药动学和体内分布研究7-8,课题组前期研究发现,在单次给药后,川芎嗪-丹参配伍组急性心肌缺血(AMI)大鼠体内川芎嗪的 AUC 显著降低,Vz 升高9,提示配伍降低了川芎嗪的吸收而加快了分布。可见配伍改变了活性成分在体内的药动学行为,但是对其组织分布的影响不得而知。鉴于该部分研究未见报道,本实验基于 AMI 大鼠模型,通过考察川芎嗪-丹参配伍前后各组中川芎嗪和丹参素这两种活性成分的组织分布差异,进一步从体内过程变化的角度揭示药物配伍的机理,对临床合理用药提供参考。1 材料和方法1.1 实验动物 79 周龄 SPF 级健康雄性 Sprague-Dawley(SD)大鼠 96 只,体重为 230270 g,由辽宁长生生物技术股份有限公司提供SCXK(辽)2020-0001,实验动物饲养于贵州医科大学实验动物中心SYXK(黔)2018-0001,于温度为 2225、相对湿度为45%60%的动物房内适应性饲养 1 周后用于后续实验。所有实验方案研究都得到了贵州医科大学动物伦理委员会的批准(1801210),并按实验动物使用的 3R 原则给予人道关怀。1.2 主要试剂与仪器 丹参浸膏(贵州景峰注射剂有限公司,批号07200801);盐酸异丙肾上腺素(上海阿拉丁生化科技股份有限公司,批号 G2028261,纯度99%);丹参素、盐酸川芎嗪、葛根素对照品(上海源叶生物科技 有 限 公 司;批 号 分 别 为 H09N10S102463、X08O9C71471、S02 M9B54875,纯度均98%);木犀草苷对照品(成都埃法生物科技有限公司,批号AF20072618,纯度 98%);甲 醇(色 谱 纯,美 国Fisher 公司);乙腈、甲酸(色谱纯,德国 Merck 公司);其他试剂均为分析纯;实验用水为屈臣氏蒸馏水。ACQUITY UPLC I-Class/Xevo TQ-S 型超高效液相串联三重四极杆质谱联用仪(TQS,美国 Waters公司)、ACQUITY UPLC-TQD 型超高效液相串联三重四极杆质谱联用仪(TQD,美国 Waters 公司);低温高速离心机(Allegra 64R,美国 Beckman Coulter 公司);氮吹浓缩装置(MTN-2800D,天津奥特赛恩斯仪器有限公司);电子天平(EL204,上海梅特勒-托利多有限公司);匀浆机(T10 basic,德国 IKA 公司)。1.3 实验方法1.3.1 供试品的制备 临床上 SGI 的单次每日剂量为 100 200 mL。9中国比较医学杂志 2023 年 9 月第 33 卷第 9 期 Chin J Comp Med,September 2023,Vol.33,No.9因此,按物种间转换计算后大鼠所需剂量为 10.521.0 mL/kg。然而,实验所需的注射量将超过大鼠的正常注射量(10 mL/kg)。因此按照参芎葡萄糖注射液国家药品标准(WS-10001-(HD-1136)-2002)“处方”和“制法”项下进行供注射用实验样品的制备,川芎嗪组(LG,不含丹参提取物)、丹参组(DS,不含川芎嗪)和川芎嗪-丹参组(LD)同比例加入葡萄糖、甘油和注射用水量,调至 pH=5.56.5,并进行过滤、灭菌。采用 HPLC 测得 LD 组中各成分的质量浓度为川芎嗪1.368 mg/mL、丹参素0.378 mg/mL。1.3.2 盐酸异丙肾上腺素溶液的配制 称取盐酸异丙肾上腺素 0.1 g 于 10 mL 容量瓶中,加入生理盐水溶解并定容至刻度,配制成质量浓度为 10 mg/mL 的盐酸异丙肾上腺素溶液,现配现用。1.3.3 对照品溶液的配制 精密称取丹参素、盐酸川芎嗪、木犀草苷(TQD内标)、葛根素(TQS 内标)对照品适量至 10 mL 容量瓶,加甲醇适量,超声溶解并定容至刻度,得丹参素、川芎嗪、木犀草苷、葛根素的浓度分别为 1.030 mg/mL、0.9986 mg/mL、1.052 mg/mL、1.023 mg/mL的储备液。分别精密吸取丹参素、川芎嗪对照品储备液适量,加 50%甲醇稀释得 8.240 g/mL、29.958 g/mL 的混合对照品母液,再用 50%甲醇 2 倍逐级稀释得到不同浓度梯度的混合对照品工作液。1.3.4 色谱与质谱条件 采用实验室前期建立的色谱和质谱条件9,保护柱:Waters Van Guard BEH C18(2.15 mm,1.7 m),色谱柱:Waters BEH C18(2.1 150 mm,1.7 m),柱温:40,流速:0.35 mL/min,流动相:0.1%甲酸水-0.1%甲酸乙腈,梯度洗脱:01.0 min,92%A;1.01.5 min,92%70%A;1.52.0 min,70%60%A;2.02.5 min,60%10%A;2.53.0 min,10%A;3.0 4.0 min,10%92%A,进样体积:1 L。由于 SGI 中川芎嗪与丹参素在仪器中响应差别较大,故本实验中川芎嗪采用 TQD 检测(内标为木犀草苷),丹参素采用 TQS 检测(内标为葛根素)。采用电喷雾电离源(ESI),电毛细管电压 3 kV,离子源温度 120,喷雾气与反吹气 N2,去溶剂气温度350,去溶剂气流速 650 L/hr,扫描方式为多反应监测(MRM),Masslynx 4.1 工作站进行数据采集及处理。TQS 中用于定量分析的离子对分别为丹参素为 m/z 197.5162.7、葛根素(内标)m/z 415.1267.0,锥孔电压分别为 25、35 V,碰撞电压分别为20、25 V,均为负离子扫描模式;TQD 中用于定量分析的离子对分别为川芎嗪为 m/z 137.155.1、木犀草苷(内标)m/z 449.1250.9,锥孔电压分别为40、30 V,碰撞电压分别为 20、25 V,均为正离子扫描模式。1.3.5 动物分组、给药与组织样品收集 取 96 只健康 SD 大鼠,实验前禁食 12 h,自由饮水。按 50 mg/kg 剂量皮下注射盐酸异丙肾上腺素,每天给药 1 次,连续给药 2 d 制备 AMI 模型大鼠9。造模后,随机分为川芎嗪组(ligustrazine,LG)、丹参组(Danshen,DS)和川芎嗪-丹 参 组(ligustrazine-Danshen,LD)(每组 30 只)、空白组 6只。除空白组大鼠给予等量生理盐水,其余组大鼠按 10 mL/kg(相当于川芎嗪 13.68 mg/kg,丹参素3.78 mg/kg)剂量进行尾静脉注射。于给药后 1、5、10、30、60 min 处死大鼠,空白组于注射 60 min 后处死,在冰床上迅速剥离心脏、肝、脾、肺、肾、脑组织,各组织按 w v=1 2 加入生理盐水在冰浴中匀浆,8000 r/min 离心 10 min,分离上清液于-20保存备用。1.3.6 组织样品前处理 对实验室前期采用的样品处理方法9进行优化后用于本部分实验。取上述组织匀浆上层液 200 L,依次加入 20 L 内标(葛根素 1 g/mL,木犀草苷 150 g/mL),60 L 盐酸(1 mol/L),1 mL 乙酸乙酯,涡混 5 min,超声 10 min,于 4下 14 000 r/min离心 10 min,取上清液 a;沉淀中依次加入 40 L NaOH(1 mol/L),1 mL 乙酸乙酯,涡混 5 min,超声10 min,于 4下 14 000 r/min 离心 10 min,取上清液加入 100 L 盐酸甲醇溶液(1 mol/L),得 b 液,合并 a、b 液,30氮气吹干,剩余残渣用 200 L 50%甲醇溶解,于 4下 15 000 r/min 离心 10 min,取上清液进样分析。1.4 统计学方法 采用 WinNonLin 8.2(Phoenix,美国 Pharsight公司)软件中的非房室模型计算川芎嗪和丹参素在组织中的 AUC0-t参数。用 SPSS 22.0 软件对数据进行统计分析,实验结果以平均数标准差(xs)表示,采用独立样本 t 检验进行组间比较,以 P0.05计为差异具有统计学意义。01中国比较医学杂志 2023 年 9 月第 33 卷第 9 期 Chin J Comp Med,September 2023,Vol.33,No.92 结果2.1 方法学考察 通过对心脏、肝、脾、肺、肾、脑各组织间基质效应比较,质量控制样本(QC)在不同基质中没有明显的基质效应影响。因此随机抽取了心脏、肝两个组织进行了方法学考察。注:A:空白组织;B:空白组织加入混合对照品;C:含药组织。图 1 大鼠组织中两种成分及内标的 MRM 专属性色谱图Note.A,Blank tissue.B,Add mixed reference substance to blank tissue.C,Medicated tissue.Figure 1 MRM specific chromatograms of two components and internal standards in rat tissues2.1.1 专属性 取各空白组织匀浆上层液、加入一定浓度对照品溶液和内标溶液的空白组织匀浆上层液、大鼠给药后的组织匀浆上层液各 200 L,分别按“1.3.6”方法操作,进样分析分别得到色谱图。在选定的色谱条件和质谱条件下,空白组织匀浆上层液中的内源性物质不干扰丹参素等成分的测定,各成分的分离度和峰形良好,提示该方法专属性良好(图 1)。2.1.2 标准曲线和线性范围 取各空白组织匀浆上层液 200 L,加入混合标准品溶液 20 L,配制成相当于大鼠血浆药物浓度,其余按“1.3.6”项下方法操作,进样分析,以 2 种待测成分的峰面积与内标的峰面积之比(A/Ai)为纵坐标(Y),各物质浓度(C)为横坐标(X),以 1/X2为加权系数,求得直线方程,即为标准曲线。两种成分在相应的线性范围内线性关系良好,相关系数 R2均大于 0.9907,结果见表 1。11中国比较医学杂志 2023 年 9 月第 33 卷第 9 期 Chin J Comp Med,September 2023,Vol.33,No.9表 1 川芎嗪和丹参素在组织中的标准曲线Table 1 Standard curves of the ligustrazine and Danshensu in tissues成分Compound组织Tissue回归方程Standard curves线性范围(g/mL)Linear range相关系数R2定量限(g/mL)Limit of quantitation川芎嗪Ligustrazine心脏 HeartY=5.2164X-0.13290.05929.9580.99780.059肝 LiverY=11.882X+0.00060.05929.9580.99940.059脾 SpleenY=4.9389X+0.12440.01514.9790.99170.015肺 LungY=1.8399X+0.34920.01529.9580.99110.015肾 KidneyY=4.6624X+1.09180.05929.9580.99930.059脑 BrainY=0.4248X+0.44690.05929.9580.99780.059丹参素Danshensu 心脏 HeartY=1.6432X-0.18750.0168.240.99160.016肝 LiverY=1.2287X-0.0620.0168.240.99360.016脾 SpleenY=1.9472X-0.03080.0160.5150.99070.016肺 LungY=0.2955X-0.03210.0168.240.99370.016肾 KidneyY=1.7293X-0.03950.0088.240.99790.008脑 BrainY=0.3455X-0.00070.0040.1280.99570.0042.1.3 准确度和精密度 取心脏和肝空白组织匀浆上层液 200 L,加入低、中、高 3 个浓度的 QC 样本,再按“1.3.6”项下方法操作,每个浓度平行 5 个样本,日内连续进样,且与标准曲线同时进行,3 个浓度连续测定 3 d,分别计算日内和日间准确度、精密度。川芎嗪和丹参素在心脏和肝组织中的日内准确度范围为 87.00%106.66%,日间准确度范围为 89.32%108.20%,日内、日间精密度 RSD 均小于 15%。提示该方法重现性好,符合生物样品分析方法的基本要求,见表 2。2.1.4 提取回收率和基质效应 取心脏和肝空白组织匀浆上层液 200 L,加入低、中、高 3 个浓度的 QC 样本,每个浓度平行 5 份,按“1.3.6”项下操作(样品 A);另取空白组织匀浆上层液 200 L(不加混合标准溶液和内标)按“1.3.6”项下操作,向获得的上清液中加入低、中、高浓度的混合标准溶液和内标,氮气吹干,残渣以200 L 初始流动相溶解(样品 B);另取低、中、高浓度的混合标准溶液与内标,氮气吹干,残渣以 200 L 初始流动相溶解(样品 C)。以 A 样品与 B 样品色谱峰面积之比为提取回收率,以 B 样品与 C 样品的色谱峰面积之比为基质效应。心脏和肝组织中川芎嗪和丹参素在低、中、高 3 个浓度下的提取回收率在 97.87%112.38%,基 质 效 应 在 95.47%106.05%,RSD 均小于 15%,说明该方法提取回收率良好,不存在明显的基质效应。2.1.5 样品稳定性 配制低、中、高 3 个浓度的 QC 样本,每个浓度平行 5 份,考察心脏和肝样品在自动进样器放置 24 h,-20条件下冻存 30 d 和经-20至室温反复冻融 3 次的稳定性。结果显示 3 种条件下心脏和肝组织样品中川芎嗪和丹参素的稳定性良好,RSD 均小于 15%,符合生物样品体内分析方法要求。2.2 丹参素和川芎嗪在 AMI 大鼠体内的组织分布 AMI 模型大鼠静脉注射 DGI、LGI 和 SGI 后,川芎嗪和丹参素在大鼠心脏、肝、脾、肺、肾、脑组织中不同时间点下的含量见表 2,药物浓度-时间曲线见图 2、图 3。除 SGI 组大鼠的心脏、肝、脾组织中川芎嗪分别在给药后 10 min、10 min 和 5 min 达分布峰值,其余组织中川芎嗪和丹参素在各组织中均在 1 min 达分布峰值,丹参素可在心脏中快速分布并消除,10 min 后心脏中未能检测到丹参素。川芎嗪在大鼠脾、肾、脑组织中含量较高,其中脑组织中含量最高,与 LGI 组相比,SGI 组大鼠各组织中川芎嗪的AUC0-t有所增加,其中心脏、脾、肺、肾、脑组织中分别增加 12.39 倍、0.28 倍、0.56 倍、0.29 倍、0.87倍,差异有统计学意义(P0.05)。丹参素在大鼠心脏、肺、肾组织中含量较高,其中肾中含量最高;与DGI 组相比,SGI 组大鼠各组织中丹参素的 AUC0-t有所增加,其中心脏、肝、脾、脑组织中分别增加1.04 倍、0.47 倍、0.83 倍,含量增加有统计学意义(P0.05)。其中川芎嗪和丹参素在心脏中的含量均显著增加(P0.001),可见配伍延长了川芎嗪分布至靶器官心脏的达峰时间,同时增加了川芎嗪和丹参素在心脏中的含量。21中国比较医学杂志 2023 年 9 月第 33 卷第 9 期 Chin J Comp Med,September 2023,Vol.33,No.9表 2 川芎嗪和丹参素在不同给药组大鼠体内的分布(xs,n=6)Table 2 Distribution of the ligustrazine and Danshensu in rats among different administration groups成分Compound组织Tissue组别Groups含量(g/g)Concentration1 min5 min10 min30 min60 min药时曲线下面积(g/(gmin)AUC0-t川芎嗪Ligustrazine心脏 Heart肝 Liver脾 Spleen肺 Lung肾 Kidney脑 BrainLG1.121.100.880.590.450.280.390.180.220.1226.217.78LD3.511.38 3.441.45 10.634.68 6.743.33 1.570.76 351.0659.3 LG0.820.500.290.120.180.060.220.060.150.0713.923.01LD0.090.04 0.100.090.210.130.080.05 0.050.02 5.951.72 LG7.451.106.441.474.760.793.790.641.150.47223.1815.48LD6.793.349.901.858.770.96 3.591.471.630.69288.6544.7 LG11.284.444.023.071.150.580.870.480.220.1594.3317.49LD8.076.484.413.754.272.621.40.570.930.70147.1650.33LG30.589.4816.306.5213.342.027.382.581.710.92545.1487.5LD30.1118.8124.125.7319.322.69 8.040.924.092.20705.12102.27LG39.4213.9333.7523.9516.647.0314.424.076.203.09958.3131.65LD90.8370.2643.7734.4545.4421.626.756.70 4.313.00179.1498.74 丹参素Danshensu心脏 Heart肝 Liver脾 Spleen肺 Lung肾 Kidney脑 BrainDS0.680.140.370.05-2.830.48LD1.470.41#0.590.12#-5.801.27#DS0.580.070.310.070.210.060.120.010.110.0010.460.88LD0.990.420.60.21#0.240.100.170.030.130.0114.971.76#DS0.570.250.270.070.150.070.070.010.050.017.441.53LD0.610.150.420.06#0.280.04#0.110.04#0.060.0210.950.69#DS2.390.501.000.260.780.180.30.030.230.0132.671.52LD2.470.251.090.050.810.160.30.050.270.0234.351.51DS45.149.1917.617.4310.082.900.980.370.350.18377.2564.9LD40.5613.8130.1411.18#12.473.171.810.74#0.490.23468.2798.86DS0.100.020.060.030.030.01-0.630.13LD0.080.030.060.010.040.020.020.00-1.220.19#注:与 LG 组相比,P0.05,P0.01,P0.001;与 DS 组比较,#P0.05,#P0.01,#P0.001;-,未检出。Note.Compared with LG group,P0.05,P0.01,P0.001.Compared with DS group,#P0.05,#P0.01,#P肾脾肺心脏肝,配伍后其含量顺序为脑肾心脏脾肺肝。川芎嗪在心脏、脑组织中的含量远高于其他组织,表明该药物在 AMI 状态下更易于分布,且配伍后能显著提高川芎嗪在靶器官心脏中的含量。配伍前后丹参素在各组织中的含量顺序均为肾肺肝脾心脏脑,丹参素在肾、肺、心脏等组织中含量较高,可见丹参素对上述血流较丰富的组织具有较好的亲和力,也证实了丹参素的分布取决于组织器官的血流和灌流速度14,这与其具有防治心血管疾病和肺保护作用的药理活性相对应15-16。同时有研究报道显示丹参素主要经肾通过尿液排泄17,与本研究中其在肾中含量较高的结论一致。现有文献报道有机阴离子转运蛋白 1(OATP1)和 3(OATP3)在肾中特异性表达,介导了许多药物的肾积累18,而丹参素对有 OATP1 和 OATP3 表现出竞争性抑制作用19。丹参素为酸性化合物,符合OATP1 和 OATP3 的底物特性,但丹参素是否为OATP1 和 OATP3 的底物,目前尚无相关报道。本研究发现,配伍后丹参素和川芎嗪在肾中含量有增加趋势,推测可能与 OATPs 的抑制有关。丹参素在给药 60 min 后基本从体内清除,没有明显的蓄积反应;川芎嗪消除较丹参素慢,60 min 未完全消除。现有文献报道川芎嗪在各组织中的半衰期在 3967 min20,本研究发现川芎嗪在病理状态下消除较正常组更快,但其配伍后在心脏中消除明显减慢。结合课题组前期研究结果,盐酸川芎嗪与丹参合 用 后,介 导 川 芎 嗪 相 代 谢 的 CYP1A2、CYP2C11、CYP3A2 这 3 种酶表达升高,使川芎嗪的代谢加快9,AMI 大鼠体内血药浓度降低,但是二者联用可显著增加川芎嗪和丹参素在靶器官心脏中的 AUC,且在体内滞留更久,消除更慢,从而以协同作用增强对心脑血管疾病的治疗效果。41中国比较医学杂志 2023 年 9 月第 33 卷第 9 期 Chin J Comp Med,September 2023,Vol.33,No.9参考文献:1 Li ZW,Hou JJ,Deng YP,et al.Exploring the protective effects of Danqi Tongmai tablet on acute myocardial ischemia rats by comprehensive metabolomics profiling J.Phytomedicine,2020,74:152918.2 Liu XT,Ren PW,Peng L,et al.Effectiveness and safety of ShenXiong glucose injection for acute ischemic stroke:a systematic review and GRADE approach J.BMC Complement Altern Med,2016,16:68.3 陈艳娟,韩杲.参芎葡萄糖注射液联合左卡尼汀治疗冠心病心绞痛的临床效果 J.中国当代医药,2019,26(10):39-42.4 Lu DY,Sun J,Zheng J,et al.Shenxiong glucose injection inhibits H2O2-induced H9c2 cell apoptosis by activating the ERK signaling pathway J.Biomed Pharmacother,2021,143:112114.5 李长健,马贤鹏,聂红.基于网络药理学和分子对接探究参芎葡萄糖注射液抗心肌缺血再灌注损伤的作用机制 J.中国中药杂志,2022,47(10):2759-2766.6 陆兔林,苏联麟,季德,等.CYP450 酶与中药代谢相互作用及酶活性测定的研究进展 J.中国中药杂志,2015,40(18):3524-3529.7 周陆怡,鲁澄宇.丹参素在大鼠主要组织分布中的动力学特征 J.中国组织工程研究与临床康复,2010,14(37):6938-6942.8 刘小娟,章嵘,杨力,等.丹参川芎嗪注射液中盐酸川芎嗪在小鼠体内药动学和组织分布研究 J.中国药学杂志,2014,49(19):1734-1739.9 孙佳,张静雅,李容,等.川芎嗪-丹参配伍前后对药动学及CYP450 酶的影响及其相关性 J.中国中药杂志,2022,47(23):6348-6354.10 陆定艳,吴忠秀,孙佳,等.基于蛋白质组学分析参芎葡萄糖注射液拮抗 H2O2诱导 H9c2 细胞氧化损伤的作用机制 J.中国实验方剂学杂志,2022,28(1):141-149.11 Wang LL,Shen X,Mi L,et al.Simultaneous determinations of four major bioactive components in Acacia catechu(L.f.)Willd and Scutellaria baicalensis Georgi extracts by LC-MS/MS:application to its herb-herb interactions based on pharmacokinetic,tissue distribution and excretion studies in rats J.Phytomedicine,2019,56:64-73.12 Yang B,Xu YY,Wu YY,et al.Simultaneous determination of ten Aconitum alkaloids in rat tissues by UHPLC-MS/MS and its application to a tissue distribution study on the compatibility of Heishunpian and Fritillariae thunbergii Bulbus J.J Chromatogr B,2016,1033-1034:242-249.13 卫平,马钦海,任孟月,等.配伍对麻黄甘草药对中麻黄类生物碱在大鼠体内组织分布的影响 J.药学研究,2016,35(4):187-192.14 Shi XQ,Tang YP,Zhu HX,et al.Comparative tissue distribution profiles of five major bio-active components in normal and blood deficiency rats after oral administration of Danggui Buxue Decoction by UPLC-TQ/MS J.J Pharm Biomed Anal,2014,88:207-215.15 冯科冉,李伟霞,王晓艳,等.丹参化学成分、药理作用及其质量标志物(Q-Marker)的预测分析 J.中草药,2022,53(2):6