乳粉检验方法.doc

法律法规
乳粉检验方法
中华人民共和国国家标准
UDC 637.143
Analytical methods for milk powder :637.127
GB 5413-85
本标准适用于喷雾方法所生产的全脂乳粉、全脂加糖乳粉和脱脂乳粉等粉末状乳制
品。
1 总则
1.1 本标准所用的试剂和水,在没有注明其他要求时, 均指分析纯试剂和蒸馏水或
相应纯度的水。
1.2 本标准分析彡的天平和容量用的玻璃仪器须定期经法定的计量检定校正合格
方可使用。
1.3 乳品专业用的一些玻璃仪器应符合本标准中各插图的技术要求。
1.4 方法选择:每个项目检验所列方法都是可行的,各地可根据具体情况选择使用。
但每项中第一个检验方法为仲载方法。
1.5 测定某一项目时, 须分别称样做平行试验,平行试验符合要求时, 应取平均值
作为检验结果报告,否则需重复测定。
1.6 测定结果通常以下列四种表示形式
1.6.1 百分含量(%):每百克样品中所含物质的克数。
1.6.2 千分含量(‰):每千克样品中所含被测物质的克数。
1.6.3 百万分含量(ppm):每千克样品中所含被测物质的毫克数。
1.6.4 十亿分含量(ppb):每千克样品中所含被测物质的微克数。
2 检验方法
2.1 铁罐密封性的检验
将铁罐除去标签,用温水清洗,仔细擦去罐折和纵缝的污物,排成一排,放入预先煮沸
过的热水中,水温不低于80～85℃,水量是罐重的四倍。罐沉浸水后, 罐上水层应保
持2～3cm厚,罐在热水中保持5～7min。结果在罐内任何部位出现连续气泡, 则说明
它是不密封的。当罐刚刚放入水中,个别地方出现一两个气泡,而后不再出现气泡者
,不能认为不密封。
2.2 净重测定
2.2.1 小铁罐净重测定可在工厂装罐过程中进行,首先将准备分装的洁净、干燥的
25听空罐(带盖)一次称重(G2),而后癣这些罐装上料,并加盖封口,再将其称重(G1)。
每个乳品罐头平均净重(G) 按式(1)计算。
G=G1-G2 (1)
25
式中:G1--25听装料罐总重,g;
G2--25听带盖空罐总重,g。
2.2.2 如果检验成品罐,首先除去商标,洗净外部, 擦拭后放干, 而后称重。 小罐
500g以下称量要准确到 0.1g,大罐称量要准确到达g,而后将罐正确开启, 倒出内容
物,仔细地清洗内部,干燥后称量,其准确度同上,按其第一次和第二次称量之差计算
其净重。
2.3 水分的测定
2.3.1 仪器

国家标准局1985-09-28发布 1986-08-01实施
GB 5413-85
带盖铝皿或带盖玻璃皿(直径50～70mm)。将皿清洗干净,在98～100 ℃烘箱内干燥0
.5h以上,或将其于电炉上细心烧灼后,置干燥器中冷却25～30min,称重,准确到0. 2
mg。
2.3.2 方法
于已恒重的铝皿或玻璃皿中称取约3～5g乳粉,准确到0.2mg,置98～100 ℃烘箱中干
燥3h,取出加盖,但不要盖紧,置于干燥器中冷却25～30min,将盖盖紧,称重。再置烘
箱中干燥1h后取出,冷却25～30min,进行第二次称重。 以后依此烘至最后两次重量
相差不超过2mg为止。从干燥后失去的重量按式(2)计算出乳粉水分的百分含量。
水分(%)=W1-W2×100 (2)
W1-W3
式中:W1--空皿加样品重量,g;
W2--空皿加样品干燥后重量,g;
W3--空皿重量,g。
两次平行试验误差不应大于0.05%。
2.4 脂肪的测定
2.4.1 罗兹-哥特里法
2.4.1.1 仪器
2.4.1.1.1 罗兹-哥特里抽脂瓶。
2.4.1.1.2 50ml烧杯。
2.4.1.1.3 100ml脂肪烧瓶:最好用索氏抽脂器上的脂肪烧瓶,用水乙醇和乙醚依次
洗净后,于100℃干燥中干燥30min,取出,冷却后称重备用。
2.4.1.2 试剂
a. 乙醚:分析纯。
b. 石油醚:分析纯,沸程30～60℃。
c. 95%乙醇:分析纯。
d. 浓氨水:分析纯。
2.4.1.3 方法
称取1g样品(准确到0.2mg)于50ml烧杯中,用10ml温水(60°左右)分数次溶解, 洗入
抽脂瓶中, 加入1.25ml 浓氨水,充分摇匀,置60 ℃水浴中加热5min,再摇动2min,加
入10ml95%乙醇,充分摇匀,经冷水冷却后,加入25ml乙醚, 摇动半分钟, 加入石油醚
25ml,摇匀后静置30min,待液层分离后,读取醚层体积。放出醚层于已知重量的烧瓶
中,记录出醚层的体积。
蒸馏、回收醚后,置脂肪烧瓶于98～100℃的烘箱中干燥1h,取出,于干燥中冷却25～
30min,于天平上称重,而后再放入烘箱中干燥0.5h,冷却、称重, 直至前后两次重量
不超过2mg,即为恒重。由所得重量按式(3)算出脂肪百分含量。
脂肪(%)=W2-W1×100 (3)
W×V1
V0
式中:W--样品重量,g;
W1-烧瓶重量,g;
W2-烧瓶加脂肪重量,g;
V0-醚层总量,ml;
V1-放出醚层量,ml。
2.4.2 盖勃法
2.4.2.1 用盖勃牛乳乳脂计测定
2.4.2.1.1 仪器
a. 盖勃牛乳乳脂计:见图1。
图1 盖勃牛乳乳脂计
b. 乳脂计架。
c. 25～50ml烧杯。
d. 25ml漏斗。
e. 恒温水浴锅。
f. 盖勃离心机:离心机旋转半径与旋转速度的关系见表1。

表1
半径,mm 转速,r/min 半径,mm 转速,r/min
240 1140 265 1090
245 1130 270 1080
250 1120 275 1070
255 1110 300 1020
260 1100 325 980

注:本规定系以离心因素等于350为计算依据。
g,硫酸自动吸管:见图2。
图2 硫酸自动吸管
h. 异戊醇自动吸管:见图3。
图3 异戊醇自动吸管
2.4.2.1.2 试剂
a. 硫酸:比重为1.820～1.825。
b. 异戊醇:沸点128～132℃,比重0.8090～0.8115。
2.4.2.1.3 方法
2.4.2.1.3.1 用硫酸自动吸管向牛乳乳脂计中加入硫酸10ml。在50ml烧杯中称取1
.5g样品,称量要准确至10mg,用10ml70～75℃热水分数次(用玻璃棒搅拌) 全部洗入
乳脂计中。加异戊相离1ml,再用少量热水调节液位,使其低于乳脂计颈口4～6mm。
2.4.2.1.3.2 将乳脂计塞好,小心振荡,再重复倒转数次,使内容物完全混合, 置65
～70℃水浴锅中保持7～8mm,使蛋白质完全溶解。
从水浴锅中取出乳脂计,转入或转出橡胶塞,使脂肪柱处于乳脂计刻度部分, 然后置
离心机中,以本标准2.4.2.1.1中f内容规定的半径和转速离心5min,取出乳脂计, 复
置水浴锅中5min,取出,读数。读数时要将乳脂计中的脂肪柱下弯月放在与眼同一水
面上,观察时可移动橡皮塞使下弯月面与某一大格刻度相吻合,读取脂肪柱所占的格
数。
2.4.2.1.3.3 乳粉中脂肪百分含量按式(4)计算。
脂肪(%)=α×11 (4)
W
式中:α--脂肪柱读数(大格数):
W--样品重,g;
11--换算系统。
两次平行测定误差不应超过0.1%。
2.4.2.2 用盖勃稀奶油乳脂计测定
2.4.2.2.1 仪器
除用盖勃稀奶油乳脂计(见图4)外,其他同2.4.2.1.1内容。
图4 盖勃稀奶油乳脂计
2.4.2.2.2 试剂
a. 硫酸:比重为1.50～1.55。
b. 异戊醇:沸点128～132℃,比重0.8090～0.8115。
2.4.2.2.3 方法
2.4.2.2.3.1 在小烧杯内称取2.5g样品,要准确至10mg,加4～5ml比重为1.50 ～1
.55的硫酸,用玻璃棒搅拌使其全部溶解,而后通过小漏斗转入奶油乳脂计中,再用上
述比重的硫酸冲洗烧杯数次,将样品全部转入乳脂计中,硫酸总耗量约18～19ml, 使
液位在乳脂计颈口下6～10mm处,再加1ml异戊醇。
2.4.2.2.3.2 以后代.4.2.1.3.2操作至复置水浴锅中5min, 再于分离机上分离5mi
n后,在水浴锅中保温5min,取出,立即读数,读数方法同2.4.2.1.3内容。
2.4.2.2.3.3 将读数乘以2,即得乳脂肪的百分数,如果取样2g,则乘2.5。两次平行
测定误差不应超过乳脂计的一个小格,即0.5%。
注:本方法适用于不易溶解的样品的脂肪含量测定。在溶解样品时采用热硫酸溶液
,即在测定前用10ml水和30ml硫酸(比重为1.820～1.825)制成的稀酸液。
2.4.3 巴布考克法
2.4.3.1 仪器
a. 50ml烧杯。
b. 巴布考克乳脂瓶:见图5。
图5 巴布考乳脂瓶
c. 巴氏离心机:离心因素等干350,其半径与转速关系同2.4.2.1.1中f内容。
2.4.3.2 试剂
a. 硫酸:比重为1.825。
b. 冰乙酸:分析纯。
2.4.3.3 方法
称取样品2～3g10mg(准确至10ml)于50ml烧杯中,用10m温水分数溶解乳粉,并洗入乳
脂瓶中,加8ml冰乙酸,充分摇匀,量取10ml硫酸,用5ml洗涤烧杯,倒入乳脂瓶中,其余
硫酸分数次倒入乳脂瓶中;每次加入硫酸后,立即旋转、摇动混合液呈深咖啡色时表
明硫酸已适量,摇动2min后,置巴氏离心机中,以表1规定的转速离心5min,取出,加80℃
热水至乳脂瓶颈,再离心2min,最后加水至刻度4%处,再离心1min,置65℃水浴中保温
5min,取出立即读取脂肪柱最高点所占的刻度数(读取方法同盖勃法),而后按式(5)
计算其脂肪百分含量。
乳粉中脂肪(%)=α×18 (5)
W
式中:α--乳脂计脂肪柱读数;
18--换算系数;
W--样品重,g。
两次平行测定误差不应超过0.1%。
2.5 酸度测定
2.5.1 仪器
a. 250ml三角烧瓶。
b. 1ml刻度吸管。
c. 50ml烧杯。
d.　5ml微量滴定管。
2.5.2　试剂
a. 0.1N氢氧化钠标准溶液。
b. 酚酞指示剂(0.5%酚酞乙醇溶液）：取0.5g酚酞，用乙醇溶解，并稀释至100ml。
2.5.3　方法
称取约4g样品（准确至10mg）于50ml烧杯中，用煮沸过的水96ml，分数次将样品溶
解，洗入250ml三角烧瓶中，加酚酞指示剂1.5ml，摇匀。徐徐滴入0.1N氢氧化钠标
准溶液，直至溶液呈微红色（参见GB 5409-85《牛乳检验方法》2.1.1中注）， 在
1min内不消失为止。其结果按式(6)或(7)计算。
酸度(°T)=N×10×V×12　　　　　　　　(6)
　　　　　W×(1-B)
乳酸(%)=N×10×V×12×0.009 (7)
　　　　W×(1-B)
　　　=T×0.009
式中：N--氢氧化钠标准溶液的当量浓度ml;
V--滴定时消耗氢氧化钠标准溶液量,g;
T--样品滴定酸度数,°T;
B--样品中水分含量,%;
12--12g乳粉相当100ml;鲜乳;
0.009--乳酸换算系数,即1ml0.1N氢氧化钠标准溶液相当0.009g乳酸。
两次平行试验结果差值不大于0.5°T。
2.6　溶解度测定
2.6.1　溶解度指数法
2.6.1.1　仪器
a.　溶解度指数样品混合瓶：见图6。
b.　样品混合机
RH-RJ-1型溶解度指数搅拌器：见图7。
电机：JX-062型单项电容电动机。
搅拌桨转速：3600r/min。
c.　溶解度指数离心管（见图8)它适应于本项d规定的离心机。
d. 离心机：离心机旋转半径与旋转速度的关系见表2。
图6　溶解度指数样品混合瓶
图7 RH-RJ-1型溶解度指数搅拌器
1-轴;2-叶轮
图8 溶解度指数离心管

表2
半径,mm 转速,r/min 半径,mm 转速,r/min
125 1085 225 809
150 991 250 767
175 917 275 732
200 858 300 700
注:①本规定系以离心因素等于165为计算依据。
②旋转半径系由离心机旋转轴中心线至离心管底水平状态时的距离。
e. 玻璃虹吸管.
2.6.1.2 试剂
消泡剂:用离心沉淀后的桂酸二甘醇。
2.6.1.3 方法
准确量取100ml24±0.5℃的水于样品混合瓶中， 加三滴消泡剂（亦可不加）和13g
全脂乳粉（称量要准确至0.01g),15.6g全脂加糖乳粉或9g脱脂乳粉。
将混合瓶置于混合机上，用搅拌尺以3600r/min的转速搅拌内容90s，立即将内容物
均匀地分倒在两只离心管内至50ml刻度。将两只离心管对称地放入离心机中，按规
定转速离心5min。
离心后立即用虹吸管吸出离沉淀物表面5ml以上的澄清液。注意操作勿使沉淀混浊。
加约25ml24±0.5℃的水，用一金属丝慢慢搅动沉淀物，并轻轻摇荡使其分散。 再
加同样温度的水至50ml，再转动几次内容物混匀。
放入离心机中，再离心5min，小心取出，保持垂直，合沉淀物界面与眼平齐，读取
沉淀物的体积，即刻度数。如果界面倾斜，按上、下界面的平均数读取。所读取的
毫升数即为溶解度指数。
两次平行试验结果差值不应大于0.1ml。
2.8　乳糖和蔗糖的测定（莱因－埃农氏法）
2.8.1　试剂
2.8.1.1 20%的乙酸铅溶液：取20g乙酸铅，溶解于100ml水中。
2.8.1.2　草酸钾－磷酸氢二钠溶液：取草酸钾3g，磷酸氢二钠7g，溶解于100ml水
中。
2.8.1.3　费林试液（甲液及乙液）
a.　甲液：取34.639g硫酸铜，溶于水中，加入0.5ml浓硫酸，加水至500ml。
b.　乙液：取173g酒石酸钾钠及50g氢氧化钠溶解于水中，稀释至500ml，静止两天
后过滤。
2.8.1.4 1%次甲基蓝溶液。
2.8.1.5 1:1盐酸溶液。
2.8.1.6 30%氢氧化钠溶液。
2.8.1.7 0.2%甲基红乙醇溶液：取0.2g甲基红，溶于100ml20%乙醇溶液中。
2.8.2　费林试液的标定
2.8.2.1　用乳糖标定
称取预先在95℃烘箱干燥2h的纯乳糖约0.75g（准确到0.2mg），用水溶解并稀释至
250ml。用10m费林试液（甲、乙液各l5ml),按2.8.3.2和2.8.3.3操作，最后用乳糖
液滴定至终点，按式(8)和(9)求出测乳糖时费林试液的校正值(f1)。
A1=V1×g1×100=4×V1×g1 (8)
250
f1=4×V1×g1 (9)
AL1
式中:a1--实测乳糖数,mg;
V1--滴定时消耗配制乳糖量,ml;
　　 g2--称取乳糖重,g;
AA1--由乳糖液滴定毫升数查表4所得的乳糖数,mg。
2.8.2.2　用蔗糖标定
称陬在105℃烘箱中干燥2h的蔗糖约0.2g（准确到0.2mg）， 用50ml 水溶解并洗入
100ml容量瓶中，按2.8.4.2操作，得出滴定10ml费林氏液（甲、乙液各5ml ）所消
耗的转化糖量。按式(10)和(11)求出测蔗糖时费林试液的校正值(f2)。
A2=V2×g2×1000=10.5263×V2×g2 (10)
100×0.95
f2=10.5263×V2×g2 (11)
AL2
式中:A2--实测转化糖量,ml;
V2--滴定消耗转化糖量,ml;
g2--称取蔗糖重,g;
AL2--蔗糖液滴定毫升数查表4所得的转化糖数,mg。
2.8.3　乳糖测定方法
2.8.3.1　样品处理
称取2.5～3g样品（准确到0.1g)，用100ml水分数次溶解并洗入250ml容量瓶中，加
4ml乙酸铅、4ml草酸钾－磷酸氢二钠溶液，每次加入试剂时都要徐徐加入，并摇动
容量瓶，用水稀释至刻度，摇匀。静置数分钟，用干燥滤纸过滤，弃去最初25ml，
所得样液作滴定用。
2.8.3.2　预备滴定
在50ml滴定管中注入上述待测样液15ml。取费林试液10ml （甲、 乙液各5ml ）于
250ml三角烧瓶中。置电炉上加热，使其在2min内沸腾，沸腾后关小火焰， 保持沸
腾状态15s，加入次甲基蓝液3滴,徐徐滴入样液至蓝色完全褪尽为止,读取所用样液
的毫升数。
2.8.3.3　精密滴定
取10ml费林液（甲、乙液各5ml），一次加入比预备滴定量少0.5～1.0ml的样液，
置于电炉上使其在2min内沸腾，沸腾后关小火焰，维持沸腾状态2min，加入3 滴次
甲基蓝　液，一滴一滴地滴入样液，待蓝色褪尽即为终点，以此滴定量作为计算
的依据（在同时测定蔗糖时，此即为转化前滴定量）。
计算：
乳糖(%)=F1×f1×250×100 (12)
V1×W
式中:V1--滴定消耗样液量,ml;
W--样品重,mg;
F1--由消耗样液的毫升数查表4所得乳糖数,mg;
f1--费林试液乳糖校正值。
2.8.4　蔗糖测定方法
2.8.4.1　转化前转化糖量的计算
利用测乳糖时的滴定量，自表4中查出相对应的转化糖量，按式(13)计算。
转化前转化糖量(%)=F2×f2×250×100 (13)
V1×W
式中:F2--由测定乳糖时消耗样液的毫升数查表4所得转化糖折数,mg;
f2--费林试液蔗糖校正值;
V1、W同式(12)。
2.8.4.2 样瘁的转化及滴定
取50ml样液于100ml容量瓶中,加20ml水,再加入10ml1:1的盐酸,置75℃水浴锅中,时
时摇动,在2min30s至2min45s之间使瓶内升温至67℃，自达到67 ℃后继续在水浴中
保持5min，于此时间内使其温度升至69.5℃，取出，用冷水冷却，当瓶内温度至35℃
时，加甲基红指示剂2滴，用30%氢氧化钠中和呈中性，冷却至20℃，用水稀释至刻
度，摇匀。并在此温度下保温半小时后再滴定。
转化后转化糖量(%)=F3×f3×500×100 (14)
V2×W
式中:F3--由V2查得转化糖的数,mg;
V2--转化后消耗样液量,ml;
f2、W同式(13)。
蔗糖量计算:
蔗糖(%)=(L1-L2)×0.95 (15)
式中:L1--转化后转化糖的含量,%;
L2--转化前转化糖的含量,%。

表4 乳糖及转化糖因数表(10ml费林试液)
滴定量,ml 乳糖,ml 转化糖,mg 滴定,ml 乳糖,ml 转化糖,mg
15 68.3 50.5 33 67.8 51.7
16 68.2 50.6 34 67.9 51.7
17 68.2 50.7 35 67.9 51.8
18 68.1 50.8 36 67.9 51.8
19 68.1 50.8 37 67.9 51.9
20 68.0 50.9 38 67.9 51.9
21 68.0 51.0 39 67.9 52.0
22 68.0 51.0 40 67.9 52.0
23 67.9 51.1 41 68.0 52.1
24 67.9 51.2 42 68.0 52.1
25 67.9 51.2 43 68.0 52.2
26 67.9 51.3 44 68.0 52.2
27 67.8 51.4 45 68.1 52.3
28 67.8 51.4 46 68.1 52.3
29 67.8 51.5 47 68.2 52.4
30 67.8 51.5 48 68.2 52.4
31 67.8 51.6 49 68.2 52.5
32 67.8 51.6 68.3 52.5
注:“因数”系指与滴定量相对应的数目，可自表4中查得。若蔗糖含量与乳糖的比
超过3:1时，遇在滴定量中加表5中的校正数后计算。
溶液中乳糖、蔗糖共存时，测定乳糖时应在滴定量中加上的校正数见表5。

表5
滴定至终点时所用的糖液量,ml 用10ml费林试液蔗糖对乳糖量的比
3:1 6:1
15 0.15 0.30
20 0.25 0.50
25 0.30 0.60
30 0.35 0.70
35 0.40 0.80
40 0.45 0.90
45 0.50 0.95
50 0.55 1.05

2.9 铜、铅的测定
2.9.1 样品处理
2.9.1.1 湿法处理
取乳粉5g(准确至0.2mg)于500ml或250ml凯氏烧瓶中,先加少许水润湿, 再加入浓硝
酸20ml、浓硫酸20ml、玻璃珠数粒,先以小火加热,剧烈反应停止后,加大火力, 分4
次加入20ml过氧化氢溶液直至溶液透明或呈淡绿色为止。继续加热数分钟至浓白烟
锝逸出，冷却，加入25ml饱和草酸铵溶液，继续加热到冒白烟后代谢min为止， 冷
却内容物，移入50ml容量瓶中，以二次蒸馏水稀释至刻度，作分析铜、铅用。同时
做空白试验。
2.9.1.2 干法处理
称取样品5g（准确至0.2mg)于瓷坩埚中，加氧化镁1g及15%硝酸镁溶液10ml， 混　
匀，于水浴锅上蒸干，先用微火炭化，至无烟后移至高温炉加热至550℃，灼烧3～
4h，冷却后取出。加水5ml润湿灰分，用玻璃棒搅拌， 用少量水冲洗玻璃棒上附着
的灰分至坩埚内。再置水浴上蒸干后移至高温炉上于550 ℃灰化2h ， 冷却后加水
5ml润温灰分，慢慢加入6N盐酸10ml，最后将溶液移至50ml容量瓶内，用6N 盐酸洗
涤坩埚三次，每次5ml，再用水洗涤三次。每次5ml，洗　液并入容量瓶中，加水稀
释至刻度，混匀。此液每10ml相当样品1g，相当加入盐酸量1.5ml， 同时做试剂空
白试验。
2.9.2 铜的测定
2.9.2.1 试剂
2.9.2.1.1 硝酸:优级纯。
2.9.2.1.2 硫酸:优级纯。
2.9.2.1.3 柠檬酸铵--乙二胺四乙酸二钠溶液:取柠檬酸铵20g 及乙二胺四乙酸钠
5g溶于水中,稀释至100ml。
2.9.2.1.4 2N硫酸溶液：取硫酸20ml,缓缓倒入300ml水中，冷却后稀释至36ml。
2.9.2.1.5 1:1氨水:浓氨水加水稀释一倍。
2.9.2.1.6 酚红指示剂: 0.1%乙醇溶液。
2.9.2.1.7 铜试剂溶液: 0.1%二乙基二硫代氨基甲酸钠溶液,必要时过滤贮于冰箱
中,可用一周。
2.9.2.1.8 四氯化碳:优级纯。
2.9.2.1.9 铜标准溶液:精密称取含5个结晶水的硫酸铜0.1964g,加2N 硫酸溶液溶
解,移入500ml容量瓶中,用2N硫酸溶液稀释至刻度,混匀(此溶液浓度为0.1mg/ml)。
临用时精密吸取此液10ml于100ml容量瓶中,加2N硫酸溶液稀释至刻度,混匀。 此溶
液每毫升相当铜10μg。
2.9.2.2 方法
2.9.2.2.1 铜标准曲线绘制
准确吸取铜标准溶液0、0.2、0.4、0.6、0.8、1.0ml（相当铜0、2、4、6、8、 10
μg），分别置于)125ml分液漏斗中，各加2N硫酸溶液20ml， 柠檬酸铵－乙二胺四
乙酸钠溶液5ml及酚红指示剂3滴，混匀。滴加1:1氨水调节pH为9～9.2 （溶液由红
变黄再变红后，再多加2滴），加铜试剂溶液1ml、四氯化碳10ml，猛烈振摇2min，
静止分层。将四氯化碳层通过脱脂棉滤于2cm比色杯中，以零管调节零点， 于波长
440nm下测吸光度，绘制标准曲线。
2.9.2.2.2 样品测定
精密吸取消化液或灰化样品和空白液各10ml,置于125ml分液漏斗中，加入柠檬酸铵
－乙二胺四乙酸二钠溶液5ml及酚红指示剂3滴，混匀，滴加1:1氨水至溶液pH9～9
.2，随后按标准曲线相同的作法，测定其吸光度，从标准曲线中求得铜含量，再计
算出铜含量。
铜(mg/kg=(A1-A2)×1000 (16)
W×V2×1000
V1
式中:A1--样品消化液中铜的含量,μg;
A2--空白消化液中铜的含量,μg;
W--样品重量,g;
V1--样品消化液总体积,ml;
V2--测定用样品消化液体积,ml;
1000--为分子、分母的单位变换倍数,即由μg/g变为mg/kg。
2.9.3 铅的测定
2.9.3.1 试剂
配制试剂用水必须是无铅水,必要时加硫酸数滴,用全玻璃蒸馏器重新蒸馏。
2.9.3.1.1 1:1氨水。
2.9.3.1.2 氯仿或四氯化碳:不应含氧化物,处理方法同2.10.2.2.9。
2.9.3.1.3 酚红指示剂:溶解0.1g酚红于100ml无水乙醇中。
2.9.3.1.4 10%和1%氰化钾溶液:必要时进行处理。取50g氰化钾, 加水溶解并稀释
至100ml,必要时用双硫腙-氯仿溶液除铅,方法同柠檬酸铵溶液。但为了除去残留在
氰化钾溶液 中的双硫腙,必须用氯仿提取10～20,分别制成10%和1%的氰化钾溶液备
用。
氰化钾为剧毒药品,使用时不可用嘴吸,使用后洗手,废氰化钾溶液也为可与酸接触
,以免发生中毒,处理时可加氢氧化钠和硫酸亚铁,使成铁氰化钾,减低毒性。
2.9.3.1.5 20%柠檬酸溶液:溶解50g柠檬铵于100ml二次蒸馏水中, 加酚红指示剂2
滴,滴加1:1氨水使pH值为8.5～9.0即溶液呈微红色,将溶液倾入250ml分液漏斗中,
加10ml(100μg ml)双硫腙溶液,振摇分出有机层,重复此操作直至双硫腙不变色为
止,再用氯仿或四氯化碳抽提残留在水溶液中和双硫腙,二次弃去氯仿层, 转入容量
瓶后,加水稀释至250ml。
2.9.3.1.6 20%盐酸羟胺溶液。
2.9.3.1.7 铅标准溶液:精密称取硝酸铅0.1598g,加1%硝酸10ml，全部溶解后，放
入100ml容量瓶中，加水至刻度，混匀，此液含铅量为1mg/ml。 测定时准确量取此
液1ml于100ml容量瓶中，加水至刻度，此液铅含量为10μg/ml。
或溶解0.1g铅于1:1硝酸溶液中，用二次蒸馏水稀释至100ml，此液铅含量为1mg/ml，
临用时可用二次蒸馏水配成10μg/ml。
2.9.3.1.8　双硫腙－氯仿溶液
2.9.3.1.8.1　双硫腙贮备液：0.05%氯仿溶液，保存于暗处。
必要时双硫腙用下述方法纯化：取双硫腙于研钵中研细，称取0.5g溶于50ml氯仿中
，如不全溶，可用滤纸过滤于250ml分液漏斗中，用1:99氨水提取双硫腙三次，每
次100ml。将提取液用棉花过滤至500ml分液漏斗中，用6N盐酸使成酸性，将沉淀的
双硫腙用氯仿提取2～3次，每次20ml。合并氯仿层，用等量水洗涤二次，弃去洗
液，在50℃蒸去氯仿，精制的双硫腙置硫酸干燥器中备用。或将沉淀出的双硫腙用
200、200、100ml氯仿提取三次，合并氯仿液作贮备液。
2.9.3.1.8.2　双硫腙A液：用双硫腙贮备液稀释成0.005%氯仿溶液(50μg/ml)。
2.9.3.1.8.3　双硫腙B液：用双硫腙贮备液稀释成0.001%氯仿溶液(10μg/ml)。
2.9.3.1.8.4　双硫腙应用液：取双硫腙A液1ml，加氯仿至10ml，混匀。用1cm比色
杯以氯仿调节零点，于波长510nm下测吸光度(D)，用式(17)算出配制100ml 双硫腙
应用液（70%透光率）所需双硫腙A液的毫升数(V)。
V=10(2-lg70)=1.55 (17)
D D
2.9.3.1.9 1%硝酸溶液。
2.9.3.2　方法
2.9.3.2.1　样品处理：同本标准2.9.1。
2.9.3.2.2　标准曲线的绘制
精密吸取上述标准铅溶液0、0.1、0.3、0.5、0.7、0.9ml（相当铅0、1、3、5、7、
9μg)，分别置于125ml分液漏斗中，各加1%的硝酸溶液至20ml，各加柠檬酸铵溶液
2ml、盐酸羟胺溶液1ml、酚红指示剂2滴，用1:1氨水调节pH值至9.0～9.5（颜色由
黄变红）。再各加氰化钾溶液2ml，混匀， 各准确加入双硫腙B 液或双硫腙应用液
10ml，强烈振摇1min，静止分层后，弃去水层。氯仿层用10%氰化钾溶液洗涤， 每
次10～20ml，至氯仿层没有双硫腙颜色为止。经脱脂棉将氯仿层滤至1cm比色杯中，
以零管调节零点，于波长510nm下测吸光度，做出标准曲线。
2.3.2.3　样品测定
精密吸取样品消化液10～20ml（相当于样品1～2g)和相同量的试剂空白液，分别置
于125ml的分液漏斗内，各加水至20ml，以下与做标准曲线的步骤相同。 最后也在
同样条件下测吸光度。在标准曲线上查出铅含量，再按式(18)计算铅含量。
铅(mg/kg)=(A1-A2)×1000 (18)
W×V2×1000
V1
式中:A1、A2--样品液和空白溶液相当的铅量,μg;
W--样品重,g;
V1--样品消化液总体积,ml;
V2--测定样品消化液体积,ml。
2.10 汞的测定
2.10.1 测汞仪法
2.10.1.1 原理
汞蒸气对波长253nm的紫外光具的强烈的吸收作用。样品经过硝酸-硫酸消化使汞转
为离子状态,在强酸性中被氯化亚锡还原成单质汞,以氮气作为载体,将汞吹出,进行
紫外光吸收测定,与标准比较定量。
2.10.1.2 仪器
2.10.1.2.1 测汞仪。
2.10.1.2.2 消化装置:500ml磨口锥形瓶和长400mm磨口球形冷凝器。
2.10.1.2.3 汞蒸气发生器:见图9,容积为50ml,玻璃磨口。
图9 汞蒸气发生器
2.10.1.2.4 抽气装置。
2.10.1.3 试剂
2.10.1.3.1 硝酸:优级纯。
2.10.1.3.2 硫酸:优级纯。
2.10.1.3.3 30%氯化亚锡溶液:取氯化亚锡(分析纯)30g,加少量水,再加硫酸(优级
纯)2ml,使其溶解后加水至100ml。
2.10.1.3.4 无水氯化钙:干燥用。
2.10.3.5 5N混合酸液：取硫酸（优级纯）10ml，硝酸（优级纯）10ml，慢慢倒入
50ml水内，冷却后再加水至100ml。
2.10.3.6　汞标准溶液：精密称取于105℃下干燥过的分析纯二氯化汞0.1354g加混
合酸溶解后，稀释至100ml，混匀。临用时精密吸取此液1ml于100ml容量瓶中， 加
混合酸液至刻度，混匀。再精密吸取稀释液1ml于100ml容量瓶中，加混合酸液至刻
度，混匀。每毫升相当汞0.1μg。
2.10.1.4 方法
称取乳粉样品2.5g（测其他产品的取样量：牛乳20g，甜炼乳8g，淡炼乳6g， 干酪
4g),准确至0.2mg于500ml圆底烧瓶中加玻璃球数粒，连接冷凝器，通水冷却。比冷
凝器的上端加硝酸30ml、硫酸5ml（牛乳、酸牛乳加10ml），小心转动烧瓶， 防止
局部炭化。小火加热。待开始发泡时停止加热，发泡停止后，加热回流2h，如加热