B细胞淋巴瘤SHP1基因甲基化状态及其意义.doc

B 细胞淋巴瘤 SHP-1 基因甲基化状态及其意
义

作者：汪清铭， 吴祥元， 王东宁， 林曲， 董敏， 温景芸

【摘要】 【目的】 探讨 JAK/STAT 信号转导途径负调控子 SHP-1

基因启动子区域 CpG 岛异常甲基化在 B 细胞淋巴瘤中的意义。 【方法】

收集存档石蜡包埋组织标本 61 例（52 例 B 细胞非霍奇金淋巴瘤标本，

9 例良性增生淋巴结标本） 健康人外周血单个核细胞 DNA 标本 15 例， ，

用甲基化特异性 PCR（methylation-specific PCR,MSP）和非甲基化

特异性 PCR（unmethylation-specific PCR,un-MSP）检测 SHP-1 启动

子区域 CpG 岛甲基化状态，MSP、un-MSP 和 RT-PCR 方法分别检测接受

或未接受去甲基化处理的 Burkitt 淋巴瘤细胞系 Raji 的甲基化状态及

mRNA 的表达，MTT 法检测接受去甲基化干预后细胞生长受抑情况。结 【

果】 SHP-1 基因启动子区域在弥漫性大 B 细胞淋巴瘤和滤泡性淋巴瘤

甲基化频率分别为 94％及 97％，对照组 9 例淋巴结良性增生标本和

15 例正常人外周血单个核细胞标本中 SHP-1 基因启动子区域甲基化频

率为 0。经去甲基化干预后，Raji 细胞 SHP-1 基因启动子区域呈去甲

基化状态，基因恢复表达，细胞生长受到抑制。 论】 SHP-1 基因 【结

启动子区域启动子区域 CpG 岛在 B 细胞淋巴瘤中存在高度甲基化，由

其所致的 SHP-1 基因沉默可能是 B 细胞淋巴瘤发生的一个重要因素，

SHP-1 基因的甲基化可作为一个良好的分子诊断标记及可能的治疗靶

点。

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【关键词】 淋巴瘤； SHP-1； 甲基化

Abstract: 【Objective】 To investigate the methylation

state of CpG island in the SHP-1 gene promoter which is one of

the negative regulators of JAK/STAT signaling pathway and to

evaluate its significance in B-cell lymphoma. 【 Methods 】

Sixty-one paraffin specimens including 52 specimens of B-cell

non-Hodgkin lymphoma and 9 specimens of benign lymphnodes

proliferation and 15 specimens of blood mononuclear cells from

health individuals were studied, methylation state of CpG island

in SHP-1 gene in the specimens and Raji cell line were detected

by methylation specific PCR(MSP) and unmethylation-specific

PCR(un-MSP). The expression level of SHP-1 in Raji cells with

or without 5-aza-2'-deoxyoytidine treatment were detected by

reverse transcriptase PCR(RT-PCR).The inhibitory ratio of Raji

cells were measured by MTT assay. 【Results】 The frequency of

methylation in SHP-1 gene promoter in large B-cell

lymphoma(DLBCL) and follicular lymphoma(FL) were 94% and

97%,respectively.In control group, however,9 specimens of

benign lymphnodes proliferation and 15 specimens of blood

mononuclear cells from health individuals showed no methylation

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in CpG island of SHP-1 gene promotor （ P< 0.0001 ） . The

expression of SHP-1 was recovered and the cell growth was

inhibited when the cell exposed to the demethylating reagent.

【 Conclusion 】 SHP-1 gene silencling with aberrant CpG

methylation is probably one of the critical events to the onset

of B-cell lymphoma as well as important implications for the

diagnostic markers and the target of gene therapy.

Key words: lymphoma; SHP-1; methylation

[J SUN Yat-sen Univ(Med Sci), 2007, 28(1): 92-96] SHP-1

是一种天然存在于胞浆内的酪氨酸磷酸酶，其通过催化受体相关酪氨

酸 激 酶 （ Janus Kinase, JAKs ） 去 磷 酸 化 导 致 JAK/STAT(Janus

kinase/signal transducer and activator of transcription)信号

转导途径活性下调，是 JAK/STAT 途径主要负调控子之一，可对抗蛋白

酪氨酸激酶的潜在促生长和致癌活性，因此，近年来有学者认为其可

能是候选的抑癌基因[1]。研究表明，基因启动子区域异常甲基化可导

致基因沉默，抑癌基因的甲基化及由其所导致的抑癌基因失表达促进

肿瘤的发生发展。本研究检测 B 细胞恶性淋巴瘤中 SHP-1 基因的甲基

化状态，并对 Raji 细胞系进行去甲基化干预，观察肿瘤细胞 SHP-1

基因表达情况及其生长状态的改变，探讨 SHP-1 基因甲基化在 B 细胞

淋巴瘤发生发展中的意义，为 B 细胞淋巴瘤的诊断和治疗提供新的方

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