PAI-1、VEGF及其受体flk-1与IgAN患者肾小管间质损害程度相关性分析.pdf

实验与检验医学 2023 年 6 月第 41 卷第 3 期 Experimental and Laboratory Medicine,Jun.2023,Vol.41,No.3PAI-1、VEGF 及其受体 flk-1 与 IgAN 患者肾小管间质损害程度相关性分析张俪缘渊南昌大学第一附属医院高新医院检验科袁江西 南昌 330000 冤IgA 肾病渊IgAN冤是最为常见的一种原发性肾小球疾病袁以肾小球系膜区以 IgA 或 IgA 沉积为特点1遥 肾小管间质损害渊Tubulointerstitial lesions袁TIL冤为间质性肾炎袁研究表明袁TIL 程度已成为决定肾脏疾病的预后的重要指标2遥 早期判断 TIL 程度尤为重要袁可以避免不必要的或过度的治疗遥 近年来国内分子诊断技术飞速发展袁 纤溶酶原激活物抑制物-1 渊Plasminogen activator Inhibitor-1袁PAI-1冤是组织型纤溶酶原激活物和尿激酶型纤溶酶原激活物的主要抑制剂袁 可抑制组织和血浆纤维蛋白溶解3遥 血管内皮细胞生长因子渊Vascularendothelium growth factor袁VEGF冤 是一种对血管生长有强诱导作用并且能促进内皮细胞的增生尧迁移的生长因子4遥 本研究就 PAI-1尧VEGF 及其受体VEGF-R2渊flk-1冤与 IgAN 患者 TIL 程度相关性进行分析袁旨在为临床诊治提供新思路遥1 资料与方法1.1 一般资料 选取 2019 年 8 月至 2021 年 9 月我院收治的 IgAN 患者 86 例袁作为 IgAN 组遥 其中男 48 例袁 女 38 例袁 年龄为 3864 岁袁 平均年龄渊51.28依5.67冤岁曰根据 Katafuchi 半定量积分5评估TIL 损伤程度袁 轻度损伤者 31 例袁 中度损伤者 25例袁重度损伤者 30 例遥 纳入标准院满足 IgAN 诊断标准6曰入组前未接受规范性治疗曰临床资料完整无缺失遥 排除标准院伴有缺血性肾损伤曰合并急性或慢性感染者曰合并糖尿病尧冠心病或渊和冤恶性肿瘤疾病者曰继发性 IgAN 者遥同时以同期于我院疑似肾脏恶性肿瘤而进行病理活检且结果正常的 85 例对象作为对照组袁男46 例袁 女 39 例袁 年龄为 3663 岁袁 平均年龄渊52.87依5.43冤岁遥 IgAN 组与健康对照组性别尧年龄比较无差异袁具有可比性渊P跃0.05冤遥1.2 方法 采用免疫组化染色法检测两组 VEGF及其受体 flk-1 的表达情况遥 详细步骤为院取肾活检组织制成的石蜡袁按 2 滋m 切片尧脱蜡遥 蒸馏水冲洗袁PBS 浸泡 5 分钟遥 5%10豫正常山羊血清封闭袁孵育遥 倾去血清后滴加稀释的兔抗人 VEGF 多抗渊购自北京义翘神州科技股份有限公司冤尧 鼠抗人flk-1 单抗 渊购自杭州联科生物技术股份有限公司冤袁37 益孵育 1 h 或 4 益过夜遥 PBS 冲洗袁加稀释的生物素标记二抗袁37 益孵育 30 mim曰 或滴加第二代生物素标记二抗工作液袁37益或室温孵育 30分钟遥 PBS 冲洗袁滴加适当比例稀释的辣根酶标记链霉卵白素袁37 益孵育 30 min遥 PBS 冲洗袁显色剂显色袁冲洗尧复染尧封片遥 于 400 倍视野下每例随机选取 10 个肾小球袁 分别计算 VEGF尧flk-1 阳性面摘要:目的 分析纤溶酶原激活物抑制物-1渊PAI-1冤尧血管内皮细胞生长因子渊VEGF冤及其受体 VEGF-R2渊flk-1冤与 IgA肾病渊IgAN冤患者肾小管间质损害渊TIL冤程度相关性遥 方法 选取 2019 年 6 月至 2021 年 6 月我院收治的 IgAN 患者 86 例袁作为 IgAN 组袁以同期因疑似肾脏恶性肿瘤而进行病理活检且结果正常的 85 例对象作为对照组遥 对比不同患者 PAI-1尧VEGF及 flk-1 差异袁以散点图分析各指标与 Katafuchi 半定量积分的相关性遥结果 IgAN 组 PAI-1尧VEGF 及 flk-1 表达均高于对照组渊P约0.05冤遥 三组中袁重度 TIL 损伤组 PAI-1尧VEGF 及 flk-1 最高袁轻度 TIL 损伤组 PAI-1尧VEGF 及 flk-1 最低袁各组间 PAI-1尧VEGF 及 flk-1 表达比较差异有显著性渊P约0.05冤遥 PAI-1尧VEGF 及 flk-1 均与肾小管间质损害程度呈正相关性渊P约0.05冤遥 结论PAI-1尧VEGF 及其受体 flk-1 与 IgAN 患者肾小管间质损害程度显著相关袁 监测各指标水平有利于判断肾小管病理损伤程度遥关键词:IgAN曰肾小管间质损害曰PAI-1曰VEGF曰Flk-1中图分类号：R692.6文献标识码：A文章编号：1674-1129(2023)03-0274-03DOI院10.3969/j.issn.1674-1129.2023.03.008 检验与临床 20220653274窑窑实验与检验医学 2023 年 6 月第 41 卷第 3 期 Experimental and Laboratory Medicine,Jun.2023,Vol.41,No.3积占肾小球面积的百分比袁 取其均值为最终表达量遥PAI-1院抽取所有研究对象肘静脉血 5 mL袁离心提取血浆袁采用酶联免疫吸附测定法渊ELISA冤测定袁人 ELISA PAI-1 试剂盒购自北京义翘神州科技股份有限公司(Sino Biological Inc.)袁按照试剂盒说明书进行操作遥1.3 统计学方法 本研究数据均采用 SPSS 18.0 软件进行统计分析袁计量资料采用渊x依s冤描述袁两组间比较行 t 检验袁多组间比较行 F 检验曰相关性采用Pearson 相关性分析曰P0.05 为差异有统计学意义遥2 结果2.1 不同组别 PAI-1尧VEGF 及 flk-1 表达的对比IgAN 患者 PAI-1尧VEGF 及 flk-1 表达均高于对照组袁比较有统计学意义渊P约0.05冤袁见表 1遥2.2 不同 TIL 损伤患者 PAI-1尧VEGF 及 flk-1 表达的比较 在 IgAN 患者中袁以重度 TIL 损伤组 PAI-1尧VEGF 及 flk-1 最高袁 轻度 TIL 损伤组 PAI-1尧VEGF 及 flk-1 最低袁各组间 PAI-1尧VEGF 及 flk-1表达比较有统计学意义渊P约0.05冤遥 见表 2遥2.3 PAI-1尧VEGF 及 flk-1 与肾小管间质损害程度的相关性分析 PAI-1尧VEGF 及 flk-1 均与肾小管间质损害程度呈正相关性渊P约0.05冤袁见表 3尧图 1-3遥3 讨论IgAN 常伴无症状性血尿及不同程度蛋白尿袁随着病情的发展最终可诱发终末期肾病 渊Endstage renal disease袁ESRD冤7遥 肾小管间质病变程度与 IgAN 患者肾功能密切相关袁是影响预后的病理组织学改变的因素之一遥 因此袁准确判断肾小管间质损伤程度有利于了解临床诊治疗效及预测疾病PAI-1（g/L）VEGF（%）81.3521.3656.2610.579.7170.00115.762.389.141.3322.4170.001flk-1（%）20.693.7414.712.0512.9440.001组别nIgAN 组对照组tP8685表 1 不同组别 PAI-1、VEGF 及 flk-1 表达的对比PAI-1（g/L）VEGF（%）70.5318.5479.8519.3587.6120.335.920.00414.281.3919.672.5723.391.84168.810.001flk-1（%）17.361.7421.852.3825.611.52147.060.001组别n轻度 TIL 损伤组中度 TIL 损伤组重度 TIL 损伤组FP312530表 2 不同 TIL 损伤患者 PAI-1、VEGF 及 flk-1 表达对比0.0060.0010.001自变量PAI-1VEGFflk-10.2920.8100.853PKatafuchi 半定量积分r表 3 PAI-1、VEGF 及 flk-1 与肾小管间质损害程度的相关性分析图 1 PAI-1 与肾小管间质损害程度的相关性分析散点图图 2 VEGF 与肾小管间质损害程度的相关性分析散点图图 3 flk-1 与肾小管间质损害程度的相关性分析散点图275窑窑实验与检验医学 2023 年 6 月第 41 卷第 3 期 Experimental and Laboratory Medicine,Jun.2023,Vol.41,No.3发展遥PAI-1 即内皮细胞型纤溶酶原激活物抑制因子袁属于丝氨酸蛋白酶抑制物遥 肾小管间质损害与细胞外基质降解受到抑制有关袁而在这一过程中袁PAI-1 则其重要作用8遥 马燕等9研究发现袁血清PAI-1 水平在原发性 IgA 肾病患者中随病情程度加剧持续增高袁 血清 PAI-1 水平有利于评估原发性 IgA 肾病病情程度遥本研究结果显示袁IgAN 患者PAI-1 表达高于对照组袁随着肾小管间质损害程度的加重袁PAI-1 水平明显升高遥 其原因是 PAI-1 在高水平状态下不仅可导致肾内肾小球血管硬化袁同时还可促进肾小管间质纤维化袁 加速病变发展10遥VEGF 是一种选择性的内皮有丝分裂原袁其受体则属于络氨酸激酶 c-fms 中的一种遥本研究结果显示袁VEGF 及 flk-1 均与肾小管间质损害程度呈正相关性袁表明 VEGF 及其受体参与 IgAN 患者肾小管间质损害的进展遥 进一步分析其原因袁VEGF对肾小球功能的影响基于刺激新生血管生成尧刺激内皮细胞增殖与转移以及免疫抑制作用等生物学功能11遥 此外袁安丽丽等12研究指出袁VEGF 与受体 flk-1 结合后可促使下游炎性介质聚集袁诱发炎性反应综合征曰 而炎症反应的爆发继而可破坏肾小管上皮细胞完整性袁刺激系膜细胞增生袁改变细胞外基质遥 基于上述研究袁我们认为 PAI-1尧VEGF及其受体 flk-1 在 IgAN 肾损伤发生发展中扮演重要角色袁临床可单独或联合检测三者水平变化袁及时评估临床诊治的进展遥综上所述袁PAI-1尧VEGF 及其受体 flk-1 与 I鄄gAN 患者肾小管间质损害程度显著相关袁 监测各指标水平有利于判断肾小管病理损害程度遥参考文献1Tortajada A,Gutierrez E,Pickering M C,et al.The role of comple鄄ment in IgA nephropathyJ.Mol Immunol,2019,114(21):123-132.2Coppo R.The Gut-Renal Connection in IgA NephropathyJ.SeminNephrol,2018,38(5):504-512.3李卉袁王林群袁张雪荣袁等.金水清合剂对 IgA 肾病大鼠 TGF-茁1尧CTGF尧VEGF 表达的影响J.世界中医药,2020,15(07):1016-1020.4祁云.IgA 肾病患者的血浆 Hcy 水平变化与肾小球内皮功能及VEGF 关系的临床研究D.山西医科大学,2019.5杨淑芬,崔建英,陆晨.单纯血尿 IgA 肾病病理与炎症因子关联性研究J.新疆医学,2019,49(5):30-33.6雷清凤袁艾俊英袁马特安.EGF尧ET-1尧TNF-琢 与 IgA 肾病发生发展的相关性研究J.湖南师范大学学报(医学版),2019,16(01):50-52.7Schena F P,Nistor I.Epidemiology of IgA Nephropathy:A GlobalPerspectiveJ.Semin Nephrol,2018,38(5):435-442.8Suzuki H,Suzuki Y.Murine Models of Human IgA NephropathyJ.Semin Nephrol,2018,38(5):513-520.9马燕.原发性 IgA 肾病患者血清 CTGF尧PAI-1 水平变化及临床意义J.慢性病学杂志,2018,19(10):1437-1438.10方辉袁张旭环袁张辰颉袁等.雷公藤多苷联合科素亚对老年 IgA肾病患者的临床疗效及对 TGF-茁1尧PAI-1 及 VEGF 表达的影响J.重庆医学,2017,46(21):2937-2939.11Melincovici C S,Bo?ca A B,?u?man S,et al.Vascular endothe鄄lial growth factor(VEGF)-key factor in normal and pathologicalangiogenesisJ.Rom J Morphol Embryol,2018,59(2):455-467.12安丽丽,郭登洲.PDGF,VEGF 及受体 Flk-1 与 IgA 肾病相关性的研究进展J.中国医药导报,2019,016(033):36-39.(收稿日期 2022-12-29)责任编辑院温涛本文校对院程茂东276窑窑