NY∕T 3139-2017 饲料中左旋咪唑的测定 高效液相色谱法(农业).pdf

ICS 65.120 B 46 NY 中华人民共和国农业行业标准NY/T 3139一2017饲料中左旋眯略的测定高效液相色谱法Determination of levamisole in feeds一High performance Iiquid chromatography 2017 -12-22发布2018-06-01实施中华人民共和国农业部发布目。吕本标准按照GB/T1. 1一2009给出的规则起草。本标准由农业部畜牧业司提出。本标准由全同饲料工业标准化技术委员会(SAC/TC76)归口。本标准起草单位:农业部饲料质量监督检验测试中心(广州)。本标准主要起草人:林海丹、吴荔琴、廖雁平、江庆姊、陈运勤、伍宏凯、邓罔东。NY/ T 3139-2017 I NY/ T 3139-2017 饲料中左旋眯瞠的测定高效液相色谱法范围本标准规定了饲料中左旋咪瞠含量测定的高效液相色谱法。本标准适用于配合饲料、浓缩饲料、精料补充料及添加剂预混合饲料中左旋咪哩的测定。本标准中左旋眯瞠在配合饲料中的检出限为生主旦g/kg，定量限为0.5mg/ kg;在浓缩饲料、精料补充料、添加剂预混合饲料中的检出限马国且rng/kg。2 规范性引用文件下列文件对于本文件。凡是不注日期的引GB/ T 6682 GB/ T 14699. GB/ T 20195 3 原理4 除非另有4.1盐4.2 乙睛:色4. 3 甲醇:色4. 4 乙酸乙醋。4.5 正己烧。4.6 5 mol/L氢氧4.7 0.02 mol/L磷即得。4. 8 流动相:0.02mol/L 4. 9 左旋眯瞠标准储备溶液:精确至0.01mg)，置于10mL容量瓶液。该储备洛液于20C80C保存，保存期6/j )=:10 ，正己;皖净1000 mL，海匀ng(相当于左旋咪瞠10mg, ，配制成1mg/mL标准储备溶4.10 左旋眯瞠标准工作溶液:准确量取左旋咪I哇标准储备、溶液(4.9)1 mL，置于10mL容量瓶中，用甲醇(4.3)溶解并定容至刻度，配制成0.1mg/mL标准工作溶液。该工作溶液于20C80C保存，保存期3个月。4. 11 pH试纸:范罔914。5 仪器设备5.1 高效液相色谱仪:配二极管阵列检测器。1 NY/T 3139-2017 5. 2 分析天平:感茧O.OOlg;感量0.01mgo 5. 3 天平:感茧0.01g。5. 4 氮吹仪。5. 5 超声波清洗器。5. 6 振荡器。5. 7 涡旋混合器。5. 8 高速离心机:转速为12000r/ min及以上。5. 9 微孔滤膜:0.45m，有机相。6 采样和试样的制备按照GB/T14699.1的规定抽取有代表性的样品，四分法缩减取样。按照GB/T20195的规定制备试样，粉碎后过0.45mm孔径筛，充分混匀，装人密闭容器中备用。7 分析步骤7. 1 样品提取称取配合饲料2g(浓缩饲料、精料补充料、添加剂预混合饲料1g，精确到0.001g)样品于50mL离心管中，加水10mL，用5mol/L氢氧化纳溶液(4.6)调pH至1213。涡旋?昆匀1min，超声20min，准确加入乙酸乙醋(4.4)20.0mL，振荡30min，以6500r/min离心5min。准确移取上清液5.0mL于试管中，置于500C氮气吹干。准确加入流动相(4.8)2. 00 mL超声溶解，加入正己皖(4.5)2 mL，涡旋1 min，静量分层。取下层液，高速离心12000r/ min离心10min，过滤膜(5.9)作为试样榕液，上机测定。7.2 标准曲线制备准确量取左旋眯瞠标准工作溶液(4.10)适量，用流动相(4.8)逐级稀释配制成浓度为0.05g/mL、O. 10g/mL、O.20g/mL、O.50g/mL、1.00g/mL、5.00g/mL和10.0g/mL的系列标准榕液，供高效液相色谱分析。以色谱峰面积为纵坐标、对应的标准溶液浓度为横坐标，绘制标准曲线，求回归方程。8 测定8. 1 液相色谱参考条件色谱柱:SCX柱(强阳离子交换柱)，柱长250mm，内径4.6mm，粒径5m;或性能相当者;流动相:0.02mol/L磷酸二氢铀榕液+乙睛=75+25(V+V); 流速:1. 0 mL/ min; 检测波长:215nm; 进样量:20L;柱温:300C。8.2 定性测定在仪器最佳工作条件下，试样中待测物的保留时间与左旋咪瞠标准榕液中对应的保留时间相对偏差在士2.5%之内，且二者光谱罔一致，则可判定试样中存在对应的待测物。光谱罔参见附录A中的图A. 10 8. 3 定量测定按照上述液相色谱条件测定试样榕液和标准榕液，以色谱峰面积进行单点或多点校正定茧，试样溶液中待测物的响应值应在仪器测定的线性范罔内。标准溶液的高效液相色谱阁参见罔A.2。NY/T 3139-2017 9 结果计算与表示9. 1 结果计算9. 1. 1 单点校准试样中左旋咪l些的含茧x，以质量分数表示，单位为毫克每千克(mg/kg)，按式(1)计算。x=xCs xxr(1) AsXm J 式中:X 试样中左旋咪I哇的含量，单位为毫克每千克(mg/kg); Cs一一标准溶液中左旋咪瞠的浓度，单位为微克每毫升(g/mL); A一试样榕液中左旋咪l些的峰面积;As一一标准、溶液中左旋眯瞠的峰面积;V 净化后定容的体积，单位为毫升(mL);m一一试样的质茧，单位为克(g); f 稀释倍数。9. 1.2 多点校准试样中左旋眯I哇的含土重x，以质量分数表示，单位为毫克每千克(mg/kg)，按式(2)计算。x=旦乙圣王Xr . (2) m 式中:c.r一一由标准曲线得出的试样榕液中左旋眯瞠的浓度，单位为微克每毫升(g/mL)。9.2 结果表示测定结果以平行测定的算术平均值表示，结果保留3位有效数字。10 重复性在重复性条件下获得的2次独立测定结果的绝对差值不大于这2个测定值的算术平均值的20%。3 NY/T 3139一2017A. 1 左旋眯瞠标准溶液光谱图见罔A.l。mAU 16 14 12 10 8 6 4 2 。-2 附录A(资料性附录)左旋眯瞠标准溶液光谱图和色谱图。2 4 、-.，.每a.10 1叫豆豆豆算扩4 16 18 t, rrun r、.;. . ON|的ZHFZ中华人民共和国农业行业标准饲料中左旋咪瞠的测定高效液相色谱法NY/ T 3139- 2017 * * -x -中国农业出版社出版(北京市朝阳区麦子店街18号楼)(邮政编码100125网址_ccap. COll1. cn) 北京印刷一厂印刷新华书店北京发行所发行各地新华书店经销. 4兴书等争导开本880rnrnX1230rnrn 1/16 印张O.75 字数15千字2018年5月第1版2018年5月北京第1次印刷书号16109 4345 定价18.00元版权专有僵权必究举报电话[phone]