SN∕T 0147-2016 出口茶叶中六六六、滴滴涕残留量的检测方法(出入境检验检疫).pdf

中华人民共和国出入境检验检疫行业标准SN/T 0147-2016 代替SN0147-1992 出口茶叶中六六六、滴滴涕残留量的检测方法Determination of BHC and DDT in tea for export 2016-08-23发布中华人民共和国国家质量监督检验检疫总局2017-03-01实施发布SN/T 0147-2016 目。昌本标准按照GB/T1.1-2009给出的规则起草。本标准代替SN0117-1992(出口茶叶中六六六、滴滴沸残留量检验方法儿与SN0117-1992相比，除编辑性修改外，主要技术变化如下:修改了样品提垠步骤;将样品测定填充色谱柱改成毛细管色谱柱;增加了气相色谱质谱确lf法;一一略去了抽样步骤。请注意本文件的某些内容可能涉及专利。本文件的发布机构不承担识别这些专利的责任。本标准由国家认证认口n监督管理委员会提出并归口。本标准起草单位:中华人民共和|同上海出入境检验检疫局。本标准主要起草人:时逸吟、杨惠琴、由栗、盛水刚、樊彦莉、伊雄海、朱坚。本标准所代替标准的历次版本发布情况为:SN 0147-19920 1 范围出口茶叶中六六六、滴滴涕残留量的检测方法本标准规定了出口茶叶中六六六、滴滴沸残留量的检测和|确证方法。本标准适用于出口茶叶中六六六、滴滴涕残留量的检测和确证o2 规范性引用文件SN/T 0147-2016 下列文件对于本文件的应用是必不口J少的。凡是注日期的寻|用文件，仅注日期的版本适用于本文件。凡是不注日期的引用文件.其最新版本(包括所有的修改单)适用于本文件。GB/T 6682 分析实验室用水规格和|试验方法3 方法提要试样中残留的六六六、滴滴沸用丙田间正己皖超声提垠，提取液经浓硫酸磺化，用带有电子捕获检测器气相色谱测定，外标法定量，如有必要用气相色谱质谱联用仪进行确证。4 试剂材料除非另有说明，所用试剂均为分析纯，水为GB/T6682规定的一级水。4.1 丙酣:色谱纯。4.2 正己悔:色谱纯o4.3 浓硫酸:优级纯。4.4 元水硫酸讷:于6.50飞下灼烧1h，冷却贮于密闭容器中备用。4.5 丙酣-正己烧 0+1，体积比)j容液:量取500mL丙四目和500mL正己烧至1000 mL 试剂瓶中。4.6 2%硫酸呐j容液:称取20g :J水硫酸呐榕解，用水定容至1000 mLo 4.7 农药标准物质:-六六六(-BHC，CAS号:319-84-6) ;-六六六(卢-BHC，CAS号:319-85-7) ; y-六六六(y-BHC，C八S号:5Hl9-9);六六六(B日C，C八S号:319-S6-S) ;户，f滴滴滴(户，-DDD，C八S号:72-54-8)， p-滴滴伊(p，p-DDE, CAS号:72-55-9)川，p-滴滴i弟(，p-DDT，CAS号:789-02-6);户，p-滴滴涕(户，-DDT，CAS号:50-29-3) ，纯度均大于98%0 4.8 标准储备液的配制:分别称取约0.01g(精确至0.0001 g)-六六六、卢-六六六、y-六六六、-六六六、户，p-滴滴滴、户，-滴滴伊、hi-滴滴讯和|户，p-滴滴沸的标准品于10mL的容量瓶中，用正己知配制成约1000g/mL的标准储备陪液，低于5oC避光冷战保存。4.9 1，昆合标准中间珞液的配制:各移取述的标准储备液l.00mL至100mL容量瓶中，用正己烧稀释至刻度，现配现用。5 仪器与设备5.1 气相色谱仪:配有电子捕获(ECD)检测器。SN/T 0147-2016 5.2 气相色谱-质谱联用仪:配有负化学电离源(NCI)。5.3 超声提取仪。5.4 涡报也匀器。5.5 氮吹仪。5.6 塑料离心管:50mL。5.7 玻璃离心管:50mL，其塞。5.8 低迫离心机:-3000 r/min, 5.9 天半:感量0.0001 g,O.Ol g各一台。6 试样的制备与保存6.1 试样制备将样品全部磨碎，混匀，均分成两份试样，装入沽净的容器内，密封，标明标记。6.2 试样保存试样于常温状态下保存。在制样的操作过程中，应防止样品受到污染或发生残留物含量的变化。7 分析步骤7.1 t.lVI 称垠2g样品(精确至0.01g)于50mL塑料离心管中.加入10.0mL蒸情水.超声15分钟。在离心管中加入10.0mL丙田间-正己皖(l十1，体积比)也合液，涡旋混匀2min，在:-3000 r/min下离心10 min。取出上清液于50mL玻璃离心管中。残渣中再加入10.0mL丙酬正己知(1十1.体积比)，同卜操作，合并有机层提取液。7.2 净化在述提取液中加入约1mL的浓硫酸，盖盖子，轻轩振荡后静置，:-l000 r/min离心:-3mm，将层有机相转移到另一玻璃离心管中，继续阳入1mL浓硫酸，同上操作23次，直至浓硫酸层变颜色变浅，弃去下层硫酸榕液。在有机相中加入10mL 2%硫酸呐珞液，涡旋混匀后:-3000 r/min离心:-3min, 上层有机相经无水硫酸讷脱水后于40C氮吹浓缩至干，准确力日入1.0mL正己皖j容液供GC测定。7.3 测定7.3.1 气相色谱参考条件色谱测定条件如下:a) 色i普柱:DB-5石英毛细管柱，长30m，内径。.32mm，膜)旱0.25m，或相当者;b) 柱温:初始温度50C，保持0.5min，以20C min升温至140C，再以11C/min升温至275 C，保持20min; c) 进样口温度:280C; d) 检测器温度:300 C; c) 载气:氮气，纯度大于等于99.999% :恒流模式;流速:0.6mL/min; f) 进样量:l.0L;不分流进样，0.6min开阀;g) 尾吹气:氮气，60mL/min, 2 7.3.2 气中目色谱-质谱参考条件气相色谱-质i普参考条件如下:SN/T 0147-2016 a) 色谱柱:DB-5石英毛细管柱.长:-30日1，内径。.:-32日llll，膜厚0.25lll，或相当者;b) 性温:初始温度50C，保持0.5min.以20C/min升温至140C，再以11C /min升温至275 C，保持20mi川c) 载气:氨气.纯度大于等于DD.DDD% ;恒流模式;流速:1.0mL/mi川d) 进样口Mt度:280 C; e) 离子源温度:150。七f) GC-MS接口温度:280 C; 引进样量:1.0L.不分流进样;h) 电离方式:负化学电离(飞JCD，反应气:叩院;i) 测定方式:选择离子监测模式(SIM)，详见表L表1六六六和DDT的监测离子及其丰度比名称监测离子(川丛)/amu-/ 181. .219.217,145 -1、*、1、181侈，21日，217，145y六六六181 .219,217,;5 -六六六181笋，21日，217，145咽户-DDE246俘，318，235，165，237户，-DDD23 ，237，16S啕318，2 斗6。，p-DDT23, ,237,16S,246,318 户，户-DDT235 ，237圃65.246，38x表示定量离子。7.3.3 气中目色谱测定监测离子丰度比1%100 : 90 : 70 : 20 100 : 90 : 70 : 20 100 : 90 : 70 : 20 100 : 90 : 70 : 20 100:80:2:0.S O.S 100 : 6马402 1 100 : 65 40: 10 : 1 100 : 6 S : Ij 0 : 10 : 1 7.3.3.1 标准曲线:采用也合标准储备液，分别自己制成0.005fJ-g/mL、0.01fJ-g/mL、0.02fJ-g/mL、0.05g/mL、0.20g/mL、0.50fJ-g/mL标准语液，直技进气相色谱测定，峰面积对浓度作线性回归曲线，计算相关系数o7.3.3.2 根据样液中被测物含量情况，选取浓度相近的标准工作液。标准工作液和样液中待测物的响应值均应在仪器检测的线性范罔内。标准工作陪液和|样液等体积穿插进样测定。标准品的色谱罔参见附录Ao7.3.4 气中目色谱-质谱确证根据样液中被测组分含量.选定浓度相近的标准工作j容液。其响应值均应在仪器检测的线性范围内。对标准工作洛液与样液等体积参捅进样测定，以色谱峰面积按外标法定量。在相同实盼条件下.式样中待测物质的保罔时间与标准工作陪液中对应的保罔时|、口j偏差在士2.5%之内;并且被测样品与标准品的质语回相似.所选择的伞部监测离子均出现且丰度比也相一致，其允许偏差不超过表2规定的范围时，则叫确定为样品中存在这种药物残留。-六六六、卢-六六六、y-六六六、-六六六、户，p-DDD、户，p-SN/T 0147-2016 DDE、，-DDT和户，-DDT的选悍离子监测总离子流固和全扫描质语国参见附录Bo表2定性确证时相对离子丰度的最大允许偏差相对离子乍度允许的相对偏差7.4 空白试验二叩%士20%除不加试样外，均按上述操作步骤进行。8 结果计算和表述20%至，0%士25%10%至20%士30%豆10%士50%用色i首处理软件中的外标法绘制标准曲线，试样中六六六、滴滴沸各组分残留量分别按式(1)计算。计算结果需扣除空白值O式中:X 1 000 X 二xVm X 1 000 X一一样品中六六六、滴滴沸残罔量，单位为毫克每千克Cmg/kg): . ( 1 ) c 从标准曲线中得到六六六、滴滴涕标准工作洛液的浓度，单位为拉克每毫升(f1g/mL); v 样品定容体积，单位为毫升(mL); m 样品称样量，单位为克(g)。9 测定低限、回收率9.1 测定低限本方法对所测定的六六六、滴滴涕残留量的测定低限均为:0.005日19/kg0 9.2 回收率茶叶添力日浓度及回收率试验数据详见表3。表3茶叶添加浓度及回收率试验数据农纠名称添加浓度Cmg/kgl红茶同收率/%绿茶同收率/%乌龙茶同4久率%0.00 90.61川RR.61l6 gz.，10:) iii 。.010R4.100 lJ.6104 R9.l 102 0.020 92.5107 ll.0107 94.5109 0.200 的.，i97.。lR.0101 J:). 0 1 07 0.00,) J4.l104 RR.RlB J:).2 102 。，01080.098.。88.9103 89.1106 卢-i、*、i、。.02085.510J 88.5102 9斗.5109。.20091.0102 92.5 109 90.5 107 0.00豆93.2 102 89.8 112 91.6103 。.01076.096.0 l9.6101 l9.l110 -六六六0.020 R9.510 的.510690.5107 0.200 91.0102 93.0109 J1.5106 4 SN/T 0147-2016 表3(续):次约名称添加浓度/(mg/kg)红茶同收率/川绿茶同收率/川乌龙茶同4业率/%。 .005l9.29l.l 90.0l1l 93.8 101 0.0。80.0g4.。87.9llO 的.8106 Y六六六0.020 89.0 105 93.5 108 9!I.J106 0.2。!J:).O 104 90.510; ll.0106 0.005 8:l.4!J8.。的.011197.01l5 户.-DDE0.010 8!1.096.0 87.9门。90.6 ()3 。.0209l.0106 93.010l 94.0 107 ().20() 88.()1Cl7 !J.510; !Jl.O 1G 0.005 93.0105 90.斗11595.2103 户，-DDD。.010lO.096.0 l9.9103 96.9113 ().()2() 88.()101 92.5()3 g().51Cl7 。.20090.5100 91.5104 川.J106。 .00593.4105 ll.61l4 93.8 101 。.()1()78.0 100 8l.l100 90.1106 。，户-DDT。.020!J4.015 !J2.5101 !Jl.; 10l 0.200 92.0103 90.01()!1 91.5106 。 .005l7.097.6 92.0114 95.0 102 户，户-DDT(). ()。80.()g4.。!JO.1 107 的.!J106().()2() 87.011 !Jl.106 !Jl.; 103 0.200 89.0 101 91.51()3 9().J103 3 SN/T 0147-2016 附录A(资料性附录)六六六、DDT标准品的气相色谱图罔A.l给出了六六六、DDT标准品的气相色谱罔。1 200 1 000 800 600 400 200 。13 14 15 16 17 18 19 说明图中曲线依次为六六六、卢六六六、六六六、y六六六、户，户-DDE、，户-DDD、，户-DDT和，户-DDL图A.1六六六、DDT标准品的气中目色谱图(0.005g/mL)6 SN/T 0147-2016 附录B(资料性附录)六六六、DDT标准晶气相色谱-质谱图罔B.l罔B.9给出了六六六、DDT标准品气相色谱-质谱罔。16 600 14.0 15.0 16.0 17.0 18.0 19.0 19.9 ITIln TIC*l. 00 TlC*l. 00 / 说明快|中向线依次为六六六、卢六六六、六六六、y六六六、.户-DDE、户，户-DDD、仆-DDT和户户-DDL100 50 。图B.1六六六、DDT标准品标准品选择离子监测总离子流图(0.20g/mL) 183 219 109 51 85 Cl Cl、/人，CIcl Y、CICl 254 20 30 40 50 60 70 80 90 100 110 120130 140 150 160 170 180 190 200210 220 230 240 250 260 270280 290 300 图B.2-六六六全扫描质i蔷图7 SN/T 0147-2016 100 50 。100 50 。100 50 。8 219 181 109 Cl Cl、人CICl、丫、CICl 20 30 40 50 60 70 80 90 100 110 120130140 150 160 170 180 190200 210 220230240250 260270280 290300310 图8.3-六六六全担描质谱图109 183 51 85 75 205 219 Cl CL人，C1CICl Cl 254 288 20 30 40 50 60 70 80 90 100110 120 130 140150 160 170 180 190 200210 220 230240 250260 270280 290 300 时:CI CI 、/人，C1Cl丫ClCl 图8.4-六六六全担描质谱图181 219 109 10 20 30 40 50 60 70 80 90100110120130140150160170180190200210220230240 250260270280290300310 图8.5-六六六全担描质谱图100 50 。100 50 。100 50 。SN/T 0147-2016 39 7、二、105 246 318 176 30 40 50 60 70 80 90 100 110120130140 150160170180190200210220230240250260270280290300 310320330 图B.6p，p-DDE全扫描质i普图235 习工可165 199 282 320 20 30 40 50 60 70 80 90 100110120130 140150160170 180 190200 210220230240250260270 280290 300310 320330 图B.7P ，p-DDD全扫描质i普图235 Fhl 165 20 30 40 50 60 70 80 90100110120130140 160 180 200 220 240 260 280 300 320 340 360 150 170 190 210 230 250 270 290 310 330 350 370 图B.80 ,p -DDT全扫描质谱图9 SN/T 0147-2016 100 235 50 l c 50% 20% to 50% 10% to 20% 三三10%Permitted tolerances 土20%土25%土30%土50%16 SN/T 0147-2016 7.4 81ank te5t The operation of the blank test is the same as described in the method of determination, but with the omission of sample addition. 8 Calculation and expression of result According to the external calibration curve from the chromatograph software, calculate the content of BHC and DDT residue in the test sample according to the formula (1). The blank value should be subtracted from the result of calculation above. x = C x 1 000 二一一一一一一一一一xv m x 1 000 ) 4E /，、飞. . . . . . . . . . . . . . . . . where: X -the residue content of BHC and DDT in the test sample, mg/kg; C一theconcentration of BHC and DDT in the standard working solution，崎/mL;V一thefinal volume of the sample solution, mL; m一thecorresponding mass of test sample in the final sample solution, g. 9 Limit of quantitation(LOQ) and recovery 9.1 Limit of quantitation The limit of quantitation (LOQ) of the method is 0.005 mg/kg. 9.2 Recovery Spike levels of tea and recovery data are listed in Table 3. 17 SN/T 0147-2016 Table 3 Recovery range of -BHC， -BHC，-BHC， y-BHC,p,p-DDE, p,p-DDD,o,p-DDT and p, p -DDT in black tea, green tea and woloong tea by GC method. Name Spike level Recovery of black tea/% Recovery of black tea/% Recovery of woloong tea/% 0.005 90.6-103 88.6-116 92.5-103 0.010 84.0-100 89.6-104 89.8-102 -BHC 0.020 92.5-107 88.0-107 94.5-109 0.200 89.5-97.0 88.0-101 93.0-107 0.005 94.8-104 88.8-113 93.2-102 0.010 80.0-98.0 88.9-103 89.1-106 -BHC 0.020 85.5-105 88.5-102 94.5-109 0.200 91.0-102 92.5-109 90.5-107 0.005 93.2-102 89.8-112 94.6-103 0.010 76.0-96.。89.6-101 89.8-110 o-BHC 0.020 89.5-105 89.5-106 90.5-107 0.200 91.0-102 93.0-109 91.5-106 0.005 89.2-98.8 90.0-118 93.8-101 0.010 80.0-94.0 87.9-110 89.8-106 Y-BHC 0.020 89.0-105 93.5-108 94.5-106 0.200 93.0-104 90.5-105 88.0-106 0.005 83.4-98.0 89.0-111 97.0-115 0.010 84.0-96.0 87.9-110 90.6-103 p,p-DDE 0.020 98.0-106 93.0-108 94.0-107 0.200 88.0-107 90.5-105 91.0-106 0.005 93.0-105 90.4-115 95.2-103 0.010 80.0-96.。89.9-103 96.9-113 p,p-DDD 0.020 88.0-101 92.5-103 90.5-107 0.200 90.5-100 91.5-104 94.5-106 0.005 93.4-105 88.6-114 93.8-101 0.010 78.0-100 88.8-100 90.1-106 o,p-DDT 0.020 94.0-105 92.5-101 91.5-108 0.200 92.0-103 90.0-104 91.5-106 0.005 87.0-97.6 92.0-114 95.0-102 0.010 80.0-94.0 90.1-107 89.9-106 p, p-DDT 0.020 87.0-101 91.0-106 91.5-103 0.200 89.0-101 91.5-103 90.5-103 18 SN/T 0147-2016 Annex A ( i nforma t i ve annex) GC chromatogram of BHC and DDT standard 1 200 1 000 800 600 400 200 。13 14 15 16 17 18 19 Figure A.1 GC chromatogram of BHC and DDT standardCO.005g/mU Followed by -BHC、BHC，o-BHC, y-BHC, Heptachlor. p圃p-DDE、p，p-DDD、o.p-DDTand p，p二DDT19 SN/T 0147-2016 16 600 14.0 Annex B (Informat ive annex) TIC and SCAN chromatograms of BHC and DDT 15.0 16.0 17.0 18.0 19.0 19.9 口1mFigure B.1 TIC of BHC and DDT standard on SIM modeCO.20g/mU Followed by -BHC、-BHC，o-BHC, Y-BHC，Heptachlor，p二DDE、p句p二000、0，二DDTand p，p 二DDT100 109 50 51 。183 219 Cl Cl、/人，Clcl Y、ClCl TlC*l. 00 TlC*l. 00 / 20 30 40 50 60 70 80 90 100 110 120 130 140 150 160 170 180 190 200210 220 230 240 250 260 270280 290 300 Figure B.2 SCAN chromatogram of -BHC 20 100 50 。100 50 。100 50 。219 181 109 SN/T 0147-2016 Cl Cl、人CICl、丫、CICl 20 30 40 50 60 70 80 90 100 110 120130140 150 160 170 180 190200 210 220230240250 260270280 290300310 Figure 8.3 SCAN chromatogram of -8HC 109 219 183 51 85 75 205 CI CL /,Cl Cl丁ClCI 254 288 20 30 40 50 60 70 80 90 100110 120 130 140150 160 170 180 190 200 210 220 230240 250260 270280 290 300 1:1 Figure 8.4 SCAN chromatogram of-8HC CI Cl、/人，ClCl丁rClCl 181 219 109 10 20 30 40 50 60 70 80 90100110120130140150160170180190200210220230240 250260270280290300310 Figure 8.5 SCAN chromatogram of y-8HC 21 SN/T 0147-2016 100 246 318 50 二、176 105 。39 句30 40 50 60 70 80 90 100 110120130140 150160170180190200210220230240250260270280290300 310320330 Figure 8.6 SCAN chromatogram of p, p二DDE235 100 50 口Ll nL 165 199 。282 320 20 30 40 50 60 70 80 90 100110120 130 140 150 160 170 180 190200 210220230240250260270280290 300310 320330 Figure 8.7 SCAN chromatogram of p, p -DDD 100 235 50 l 165 。20 30 40 50 60 70 80 90100110120130140 160 180 200 220 240 260 280 300 320 340 360 150 170 190 210 230 250 270 290 310 330 350 370 Figure 8.8 SCAN chromatogram of 0, p -DDT 22 100 50 。SN/T 0147-2016 235 飞卢了l165 20 30 40 50 60 70 80 90100110120130140 160 180 200 220 240 260 280 300 320 340 360 150 170 190 210 230 250 270 290 310 330 350 370 Figure 8.9 SCAN chromatogram of p, p -DDT