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NO.202023饲料研究FEEDRESEARCH35禽营养不同饲喂方式下发酵饲料对蛋鸡生产性能、肠道形态及其菌群的影响李悦伊1李春1刘巍廖莹1李李家明1张文辉1沈水宝*卢丽枝？（1.广西大学动物科学技术学院，广西南宁5340 0 0；2.广西壮族自治区畜牧站，广西南宁530 0 2 2）摘要：试验旨在研究不同饲喂方式下发酵饲料对2 3周龄蛋鸡生产性能、肠道形态以及菌群的影响，以探讨发酵饲料在蛋鸡生产中适宜的饲喂方式。选取广西麻鸡蛋鸡48 0 羽，随机分为4组，每组6 个重复，每个重复20只鸡。对照组（con组）鸡饲喂基础饲粮；试验组鸡为间歇性饲喂（以周为单位），G1组鸡全期饲喂发酵饲料；G2组鸡5d饲喂发酵饲料，2 d饲喂基础日粮；G3组2 d饲喂发酵饲料，5d饲喂基础日粮。预试期7 d，正式试验期56 d。结果显示，1 8 W，G 1组蛋鸡合格蛋率极显著高于其他各组（P0.01），1 4w 平均蛋重均极显著高于其他各组（P0.01）。G 2 组蛋鸡空肠绒毛高度极显著高于各组（P0.01），空肠绒毛高度/隐窝深度极显著高于con组（P0.01）；G 3组蛋鸡空肠隐窝深度以及G1组蛋鸡的回肠隐窝深度均极显著低于con组（P 0.0 1），G 1组蛋鸡十二指肠和回肠绒毛高度/隐窝深度均显著高于con组（P 0.0 5)。与con组相比，试验组蛋鸡菌群相对丰富度在属水平上具有显著差异（P0.05），同时与生产性能存在一定的相关性。研究表明，不同饲喂方式下发酵饲料对蛋鸡肠道形态以及菌群的相对丰富度具有不同程度的影响，进而影响其生产性能，建议全期饲喂发酵饲料。关键词：蛋鸡；饲喂方式；生产性能；肠道形态；肠道菌群中图分类号：S831文献标识码：A文章编号：10 0 2-2 8 13（2 0 2 3）2 0-0 0 35-0 6Doi:10.13557/ki.issn1002-2813.2023.20.007Effect of different feeding methods of fermented feedon production performance,intestinal morphology and microflora in laying hensLI Yue-yiLIChunLIUWeiLIAOYingLI Jia-mingZHANGWen-huiSHEN Shui-baoLU Li-zhiAbstract:The purpose of the experiment was to study the effect of different feeding methods on production performance,intestinal morphology and microflora of 23-week-old laying hens,and to explore the appropriate feeding methods offermented feed in laying hens.A total of 480 laying hens were randomly divided into four groups with six replicates pergroup and 20 hens per replicate.Hens in control group(con group)were fed with basal diet.The experimental group wasfed intermittently(weekly),and the Gl group was fed with fermented diet for the whole period.Hens in G2 group werefed with fermented diet for 5 d and basal diet for 2 d.Hens in G3 group were fed fermented diet for 2 d and basal diet for5 d.The pre-test lasted for 7 d and the formal test lasted for 56 d.The results showed that the qualified egg rate inGl group was extremely higher than that in other groups during the experiment 58 w(P0.01),and the average eggweight in 14 w was extremely higher than that in other groups(P0.01).The villus height of jejunum in G2 group wasextremely higher than that in all groups(P0.01),and the villus/cryptic jejunum in con group was extremely higher thanthat in con group(P0.01).The crypt depth of jejunum of laying hens in G3 group and ileum crypt depth of laying hens inGl group were extremely lower than con group(P0.01),and duodenum and ileum wool/crypt of laying hens in Gl groupwere significantly higher than those in con group(P0.05).Compared with con group,therelative flora richness of laying hens in experimentalgroups was significantly different at genus level(P0.05),and had a certain correlation with productionperformance.The study indicates that different feedingNO.202023饲料研究FEEDRESEARCH36禽营养methods has different effect on intestinal morphology and relative abundance of flora of laying hens,and then affectedtheir production performance,it is recommended to feed fermented feed throughout the whole period.Key words:laying hens;feeding method;production performance;intestinal morphology;intestinal flora由于饲料原料价格上涨，寻找促进畜禽生产以及研发使用地源性饲料刻不容缓。发酵可提高粗蛋白水平、降低粗纤维水平。发酵饲料可将饲料中的多糖、抗营养因子（ANF）等不易被畜禽机体消化吸收的物质分解和转化为可被消化吸收利用的物质，提高营养生物利用率，能降低饲料成本，改善饲料的营养价值-2 1。研究表明，发酵饲料可提高肉鸡的平均日增重以及饲料转化率3。近年来，饲喂方式对动物机体健康的研究正逐步增多，DeLa Guardia-Hidrogo等4发现，摄食频率可以使奶牛的瘤胃微生物菌群产生昼夜波动。进食速率也会影响育肥猪的采食量和生长性能，从而影响嗣体品质5。饲喂频率对猪的采食量以及氮素利用也有影响。也有研究显示，不同饲喂方式对羊的采食量、体重、日增重等生长性能以及营养物质的消化率具有影响7-8 。不同饲喂方式饲喂乳酸菌对肉鸡的料重比、肠道形态及菌群也具有显著影响。因此，饲喂方式以及饲喂频率的改变可能会影响动物的养分摄入方式，进而影响机体对蛋白质、脂质等养分的消化、吸收、利用4)。发酵饲料的研究多以不同浓度梯度相同方式饲喂蛋鸡，不同饲喂方式对蛋鸡机体健康是否存在影响的研究较少。研究表明，家禽饲喂6%以上的发酵饲料可以改善肠道形态，改变肠道菌群组成，提高菌群群丰富度，进而改善肠道健康，提高生产性能10-12 。本试验添加10%的发酵饲料，研究不同饲喂方式对蛋鸡的生产性能、肠道形态以及微生物菌群的影响，为发酵饲料在蛋鸡养殖中的应用提供新的饲喂思路1材料与方法1.1试验设计与饲养管理试验在广西富凤蛋鸡场进行。选取2 3周龄广西麻鸡蛋鸡48 0 羽，随机分为4组，每组6 个重复，每个重复20羽。对照组（con组）蛋鸡饲喂基础饲粮；试验组为间歇性饲喂（以周为单位），G1组全期饲喂发酵饲料；G2组5d饲喂发酵饲料，2 d饲喂基础日粮；G3组2 d饲喂发酵饲料，5d饲喂基础日粮。预试期7 d，正式试验期56 d。蛋鸡自由采食，充足饮水，按正常免疫程序进行免疫接种。三层阶梯笼养，同处理组在上、中、下三层均匀分布。乳头饮水器自由饮水，自由采食，室温为2 2 25；光照周期16 h/d。饲养期间定期消毒并保持舍内自然通风。1.2试验日粮基础饲粮参照NRC（19 9 6）标准与生产实践需要配制的粉状配合饲料，基础饲粮组成及营养水平见表1。发酵饲料复合益生菌菌粉购自山东某生物工程公司，以玉米、豆粕、棉粕、麸皮等饲料原料作为发酵底物，将复合益生菌（枯草芽孢杆菌2 10 CFU/g、乳酸杆菌110CFU/g、酵母菌活菌数410 CFU/g）按发酵底物的0.2%添加，将混合好的原料和发酵菌液充分混匀，装入发酵罐中，37 下进行发酵，发酵7 2 h左右。发酵完成后将饲料取出进行干燥，以控制水分含量为12%14%，包装，贮存，以便后续使用（由广西某农牧饲料有限公司提供）。饲料发酵前后的营养水平见表2。表1基础饲粮组成及营养水平（风干基础）原料组成含量/%营养水平玉米61.25代谢能/(MJ/kg)13.98豆25.00粗蛋白/%16.20小麦麸2.50粗纤维/%4.05石粉7.25钙/%1.42磷酸氢钙1.40磷/%0.38赖氨酸0.20蛋氨酸0.10食盐0.30预混料2.00合计100.00注：1.预混料为每千克饲粮提供：VA8000IU、VB,4mg、VB,3.6 mg、VB,40mg、VB。4m g、VB12 0.0 2 m g、VD,30 0 0 IU、VE2 0 IU、VK，2 m g、生物素0.15mg、叶酸1.0 mg、D-泛酸1lmg、烟酸10mg、抗氧化剂10 0 mg、Cu 10 mg、Fe 8 0 mg、M n 8 0 mg、Zn 75 mg、1 0.40 mg、Se 0.30 mg。2.营养水平均为实测值。表2 饲料发酵前后营养水平（风干基础）单位：%项目发酵前发酵后pH值5.98 0.694.32 0.38粗蛋白质16.20 6.8716.32 5.23粗纤维4.05 0.023.98 0.02钙1.42 0.021.38 0.01磷0.38 0.010.40 0.01赖氨酸0.28 0.030.29 0.01蛋氨酸0.19 0.050.21 0.021.3测定指标及方法1.3.1生产性能试验期间每天记录蛋鸡产蛋数量、总蛋重、不合格蛋数等，计算各组的产蛋率、平均蛋重、合格蛋率、料蛋比产蛋率=总产蛋数/(鸡数天数)10 0%(1)平均蛋重=总蛋重/总产蛋数(2)平均日采食量=总采食量/（鸡数天数）(3)料蛋比=总采食量/总蛋重(4)蛋合格率=合格蛋数/产蛋数10 0%(5)NO.20.2023饲料研究FEEDRESEARCH禽营养色1.3.2肠道形态试验结束前，蛋鸡空腹12 h，每个重复选取1只体况接近的蛋鸡，选取每个肠段同一位置的十二指肠、空肠、回肠各1cm左右，生理盐水冲洗，常温固定保存在4%多聚甲醛中，进行切片制作，苏木精-伊红（HE）染色，显微镜镜检，测定绒毛长度以及隐窝深度，计算绒毛长度/隐窝深度（V/C）值。1.3.3盲肠菌群16 SrRNA测定试验结束前，蛋鸡空腹12 h，每个重复选取1只体况接近的蛋鸡，采用无菌的冻存管收取盲肠内容物并放入液氮中进行冻存。使用保存好的盲肠样品中内容物，根据Qiagen试剂盒提取DNA；利用ThermoNanoDrop2000紫外微量分光光度计和1%琼脂糖凝胶电泳进行总DNA质检；选择V3-V4区，用通用引物为F341和R806设计并合成引物并进行PCR扩增和产物的纯化，使用Qubit进行文库定量，并根据每个样品的数据量要求，进行相应比例的混合；使用IlluminaMiseq平台进行上机测序（送样至上海美吉生物有限公司委托测序），通过其云平台进行生物信息学分析。1.4数据统计与分析采用SPSS24.0统计软件进行单因素方差分析，采用LSD法和SNK法进行多重比较。结果以“平均值标准差”表示，P0.05表示差异显著，P0.01表示差异极显著。2结果与分析2.1不同饲喂方式下发酵饲料对蛋鸡生产性能的影响(见表3）表3不同饲喂方式下发酵饲料对蛋鸡生产性能的影响项目时间/Wcon组G1组G2组G3组P值14117.67 8.45118.29 6.44117.35 10.71117.83 10.710.455平均日采食量/g/(只d)58120.07 8.45121.29 7.34121.35 8.65121.32 11.340.2271474.69 5.2676.15 5.1574.85 6.2873.29 4.180.337产蛋率/%5873.19 4.7574.93 4.3473.94 3.2473.55 4.130.5661447.21 0.62B47.83 0.68446.97 0.82B46.91 1.05B0.001平均蛋重/(g/枚)5848.05 0.6849.51 0.7148.58 2.1947.90 3.530.0841497.49 1.56B98.04 1.58496.72 1.60B96.60 1.6480.009合格蛋率/%5896.45 2.91B98.20 1.36496.95 0.87B95.95 2.67B0.004142.76 0.282.71 0.312.81 0.332.87 0.310.390料蛋比583.36 0.443.23 0.213.35 0.223.43 0.320.549注：同行数据肩标不同小写字母表示差异显著（P0.05），不同大写字母表示差异极显著（P0.05)；表4与此同。由表3可知，5 8 W，G 1组合格蛋率极显著高于其他各组（P0.01），1 4w 平均蛋重均极显著高于其他各组（P0.05）。与con组相比，5 8 w，G 1组、G2组平均蛋重分别提高了3.0 4%、1.10%（P0.05）。2.2不同饲喂方式下发酵饲料对蛋鸡肠道形态的影响(见表4)（见表4）由表4可知，G2组蛋鸡空肠绒毛高度极显著高于其他组（P0.01），空肠绒毛高度/隐窝深度极显著高于con组(P0.01)；G 3组蛋鸡空肠隐窝深度以及G1组蛋鸡的回肠隐窝深度均极显著低于con组（P0.01），G 1组蛋鸡十二指肠和回肠绒毛高度/隐窝深度均显著高于con组（P0.05)。表4不同饲喂方式下发酵饲料对蛋鸡肠道形态的影响项目con组G1组G2组G3组P值十二指肠绒毛高度/um1285.32 78.651352.68 68.541 342.25 112.051 293.17 109.850.058隐窝深度/m260.26 13.25230.12 12.85220.56 15.85236.58 18.980.170绒毛高度/隐窝深度5.98 0.51b7.62 0.6.3a5.68 0.93b6.71 0.58a0.013空肠绒毛高度/m1 071.87 68.71B1 112.61 80.50B1614.57 72.47A1 094.57 299.99B0.001隐窝深度/m182.64 9.17A183.17 11.084169.74 12.21AB153.18 21.24B0.001绒毛高度/隐窝深度5.88 0.47B6.10 0.754B9.52 0.51A7.13 1.64AB0.001回肠绒毛高度/m951.87 46.15923.3674.35873.80 54.78932.83 148.560.058隐窝深度/m160.07 14.71A125.98 9.32B154.30 17.01A138.87 17.44B0.05)表5不同饲喂方式下发酵饲料对蛋鸡肠道菌群多样性的影响项目覆盖率/%Sobs指数Shannon指数Simpson指数Ace指数Chao指数con组99.99 0.0515.00 1.411.01 0.170.46 0.0516.69 1.4715.25 0.95G1组100.00 0.0315.75 0.500.97 0.120.47 0.0316.21 0.2515.83 0.33G2组100.00 0.0314.75 0.950.89 0.070.52 0.0115.24 0.7314.87 0.85G3组100.00 0.0415.00 0.000.92 0.020.46 0.0515.46 0.6515.12 0.25P值0.7980.4490.5180.1660.1380.2772.3.2OTU比较结果(见图1）由图1可知，con组、G1组、G2组、G3组的OTUs个数分别是8 0 2、9 0 5、8 6 0、8 7 9 个。从相交程度来看，4组共有6 7 6 个相同的OTUs，c o n 组、G1组、G2组、G3组特有的OTUs为8、34、13、19 个。G1组G2组CON组3413G3组211523326681967631223012图1OTU比较结果2.3.3不同饲喂方式下发酵饲料对蛋鸡肠道门水平上菌群相对丰度的影响（见图2）由图2 可知，门水平上拟杆菌门（Bacteroides）、厚壁菌门（Firmicutes）占据绝对优势，占比达9 5%以上；随着拟杆菌门相对丰度的降低，厚壁菌门所占比例相应提升，但各组菌门间相对丰度差异不显著（P 0.0 5)。100BacteroidotaFirmicutesActinobacteriota80SynergistotaPatescibacteria2/丰Tothers604020对照组GI组G2组G3组组别图2门水平上菌群物种的分布2.3.4不同饲喂方式下发酵饲料对蛋鸡肠道属水平上菌群相对丰度的影响(见图3 图5）由图3可知，属水平上各组的优势菌属均为拟杆菌(Bacteroides）、理研菌属（Rikenellaceae_RC9_gut_group）和乳酸杆菌（Lactobacillus），其中Gl组理研菌属的丰富度高于各组，但差异不显著（P0.05）100BacteroidesHRikenellaceae_RCOgulgroupLactobacillusunclassifiedoBacteroidalesParabucleroides80Ruminococclislorgues.groupPrevotellaceueUCG-ojSubdoligranulumLachnoclostridiumPhascolarctobacteriumnorankMuribaculaceae60OlsenetlaunclassifiedfLachnospiraceaePrevotellaceaeGabAlgrour.noranknoranko ClosridiaUCG-1tChristensenellaceae_R-i_groupBlautia40UCG-O05norankfRuminococcaceuemAlistipesOribacteriumBuyricicoccusFaecalibacterium20PeptococclsEnormaSynergistesRomboursiaCandidaus SaccharimonasMothersCON组G1组G2组G3组组别图3属水平上菌群物种的分布多组检验采用Kruskal-WallisHtest，结果见图4。298t00*20&200*80tt00*66S2001988:00*0.400.35CON组0.30GI组%/a7kfG2组0.25口G3组0.200.150.100.050DTU089BarnesiellaUCG-011ButyricimonasStreptococcusEubacterium_halli_groupDefluvitaleaceae_t肠道菌祥（a）对照组与试验组属水平差异分析2082002.88:007881002.88:0099S800*0.08*GI组0.07G2组0.06G3组%/a7f0.050.040.030.020.010DTU089_UCG-011ButyricimonasDefuvitaleaceae_norankf_ChristensenelaceaeLachnospiraceae_FCS020_group肠道菌群（b）试验组属水平差异分析图4对照组与试验组属水平上菌群物种的分布差异NO.202023饲料研究FEEDRESEARCH39禽营养色由图4可知，各组间在巴内西埃拉菌属（Ba r n e s i e l l a）、哈利氏真杆菌属（Eubacterium_halligroup）等在属水平上差异显著（P0.05）；试验组间也在丁酸梭菌属（Bu t y r i c i m o n a s）、毛螺菌属（La c h n o s p i r a c e a e _FCS0 2 0 _g r o u p）等5种属水平上差异显著(P0.05)。两组检验采用Welchst-test差异分析，结果见图5。由图5可知，发酵饲料不同饲喂方式下肠道菌群在属水平上均有显著差异早（P0.05)。0.6FG1组5G2组%/4710.430.21-10-3BanesiellaButyricimonas5434028unclassifiedf_Ruminococcaceae0.0.300.0280.040.83Lachnospiraoeae_FCsnorankfnorank_o,肠道菌群P值(a)G1组与G2组属水平差异分析0.8r5*GI组0.6G3组%/4/713间风U需%S60.40.2-10-3Butyricimonas-5Defuvitaleaceae_UCG-onl0.017760.01857肠道菌群P值(b)G1组与G3组属水平差异分析0.6*5*G2组G3组0.430.210-3DTU089-50.031060.014.83Defuvitaleaceae_UcG-o1l肠道菌群P值(c)G2组与G3组属水平差异分析图5试验组属水平上菌群物种的分布差异2.3.5蛋鸡肠道菌群与鸡生产性能Spearman相关性分析(见图6)由图6 可知，对属分类水平丰富度差异菌群进行生物学途径的Spearman相关分析，横向表示环境因子信息，纵向表示丰富度差异菌群。由图6 可知，哈利氏真杆菌属相对丰富度与蛋重显著负相关，与合格蛋率显著正相关。丁酸单胞菌属与合格蛋率极显著正相关，表明发酵饲料不同的饲喂方式下对肠道菌群属水平相对丰度有一定影响，且与生产性能有一定的相关性。0.6Lachnospiraceae_FCS020_group0.4Eubacteriun_halli_group0.20Butyricimonas-（.2-（0.4Barnesiella一0.6norankf_ChristensenellaceaeDTU089Defluvitaleaceae_UCG-o1lStreplococcus蛋重料蛋比产蛋率合格蛋率注：“*表示影响显著（P0.05），“*表示影响极显著(P0.01)。图6肠道菌群与生产性能Spearman相关性分析3讨论3.1不同饲喂方式下发酵饲料对蛋鸡生产性能的影响研究表明，添加生物发酵饲料可使育肥猪平均日增重和平均日采食量提高10.8 9%和5.8 6%13)、料重比显著降低4。曹山川等5 研究发现，不同饲喂方式对猪的平均日采食量和料重比具有一定影响。本试验中，G3组鸡蛋的蛋重以及合格蛋率与对照组相比有降低趋势，可能由于试验期较短且发酵饲料添加量较低，产生肠道应激降低蛋重以及合格蛋率。G1组鸡蛋的合格蛋率、平均蛋重高于其他各组，原因可能是发酵饲料对肠道健康具有积极作用，能够降低胃肠pH值和致病微生物活性，增加短链脂肪酸含量，提高饲料消化率，减少由于间隔饲喂对的肠道的影响，从而提高了蛋鸡生产性能3.2不同饲喂方式下发酵饲料对蛋鸡肠道形态的影响肠道是动物消化以及吸收营养物质的重要场所。Peng等6 在日粮中添加发酵饲料可提高肉鸡肠道绒毛高度、十二指肠绒毛高度/隐窝深度。Liu等发现，添加6%以上的发酵混合饲料降低了蛋鸡隐窝深度，增加绒毛高度/隐窝深度。常玲玲等17 研究表明，不同饲喂方式对乳鸽肠道消化吸收具有明显的差异影响。本研究中，试验组肠道的绒毛高度/隐窝深度高于对照组，表明发酵饲料能够有效改善肠道形态。发酵饲料可以通过增加肠道内有益菌数量以及有益菌在肠道的富集、降低饲料ANFs含量、增加饲料中小肽等易消化物质含量等方式共同作用。同时，动物机体对营养物质消化吸收具有一定节律性，长时间的间隔饲喂实现生物钟重置，从而使机体细胞组织器官的各种功能活动、消化代谢等达到最佳状态，使机体各阶段能量代谢稳态平衡3.3不同饲喂方式下发酵饲料对蛋鸡肠道菌群的影响大量研究已将肠道微生物群丰富性和多样性与改善机体健康和生产性能建立起联系19-2 1。Hua等12 研究表明，不同的饲喂频率会影响后备母猪肠道微生物菌群，进而影响肠道代谢物中短链脂肪酸的浓度。Li等2 3、曹山川等151发现，不同喂养方式节奏的改变会影响肠道微菌群的相对丰富度。本试验结果表明，在门水平上，拟杆菌门、厚壁菌门为优势菌群，与张波等/2 4I的结果一致。拟杆菌门、厚壁菌门能够抵抗外来细菌定植，在能量的NO.202023饲料研究FEEDRESEARCH40禽营养产生和代谢中起重要作用。在属水平上，拟杆菌、理研菌属和乳酸杆菌是优势菌属，占蛋鸡总菌属的近50%，拟杆菌是一个重要的厌氧属，负责分解肠道生态系统中的多糖2 。拟杆菌分解多糖产生有机酸，降低肠道pH值，利于有益菌在肠道中的定植。理研菌属与黏蛋白降解细菌有关，同时也与机体的脂代谢相关2 。本研究中，随着拟杆菌门相对丰度的降低，厚壁菌门所占比例相应提升，发酵饲料中含有的有机酸可降低肠道pH值，并通过竞争排斥、抑制细菌素的产生、降解细菌阻止肠道病原体定植。属水平上，不同的饲喂方式下对肠道菌群丰富度存在显著性差异，哈利氏真杆菌属能够利用葡萄糖合成丁酸，其可使近结肠端PhIP（2-氨基-1-甲基-6-苯基-咪唑4,5-b吡啶）的转化提高了30 0 倍，远结肠端也可提升12 0 倍，减少机体对有害物质的吸收2 7 。对生产性能进行Spearman分析可知，差异菌群与生产性能存在一定的相关性，丁酸梭菌属与合格蛋率极显著正相关，丁酸梭菌属与甘油三酯水平降低密切相关2 8 ，降低蛋鸡体内甘油三酯水平，维持蛋鸡机体健康，提高蛋鸡合格蛋率等生产性能。4结论本试验条件下，发酵饲料饲喂时间越长，蛋鸡产蛋性能及肠道发育更佳，建议全期饲喂参考文献1 Guo L,L i J,Liu Y,Ma H,et al.Effects of different fermented feeds onproduction performance,cecal microorganisms,and intestinal immunityof laying hensJ.Animals(Basel),2021,11(10):2799.2 Peng W,Talpur M Z,Zeng Y,et al.Influence of fermented feed additiveon gut morphology,immune status,and microbiota in broilers).BMCVet Res,2022,18(1):218.3黄强,朱秋凤,孙亚楠,等.生物发酵饲料在养猪生产中的应用研究进展DJ.中国畜牧杂志,2 0 18,54(10):2 0-2 3,35.4 De La Guardia-Hidrogo V M,Paz H A.Influence of industry standardfeeding frequencies on behavioral patterns and rumen and fecal bacterialcommunities in Holstein and Jersey cowsJ.PLoS One,2021,16(3):e0248147.5 Carco G,Gallo L,Dalla B M,et al.The influence of feeding behaviouron growth performance,carcass and meat characteristics of growing pigsD).PLoS One,2018,13(10):e0205572.6付鑫,张琦玉,秦贵信,等.饲喂频率对猪采食量及氮素利用影响的研究进展/OL.动物营养学报：1-7 2 0 2 3-0 2-2 8 .http:/ 0 2 2,52(8):35-38.8光有英.不同饲喂方式对羊的生长与生产性能的影响.农家参谋，2022(15):8789.9程鹏,张静博,赵龙妹,等.乳酸菌不同饲喂方式对肉鸡生长性能、粗蛋白质表观代谢率及肠道健康的影响.动物营养学报,2 0 2 2,34(9):56 8 0-56 9 0.10 Li J,Guo L,Chen B,et al.Effects of different probiotic fermentedfeeds on production performance and intestinal health of laying hensj.Poult Sci,2022,101(2):101570.11 Liu Y,Feng J,Wang Y,et al.Fermented corn-soybean meal mixedfeed modulates intestinal morphology,barrier functions and cecalmicrobiota in laying hensJ.Animals(Basel),2021,11(11):3059.12 Lu Z,Zeng N,Jiang S,et al.Dietary replacement of soybean meal byfermented feedstuffs for aged laying hens:Effects on laying performance,egg quality,nutrient digestibility,intestinal health,folicle development,and biological parameters in a long-term feeding periodj.Poult Sci,2023,102(3):102478.13周映华,胡新旭,下巧,等.无抗发酵饲料对生长育肥猪生长性能、肠道菌群和养分表观消化率的影响.动物营养学报,2 0 15,2 7(3):8 7 0-8 7 7.14刘辉,季海峰,王四新,等.复合乳酸菌发酵饲料对生长猪生长性能、粪便菌群、血清免疫和抗氧化指标的影响.动物营养学报,2 0 2 2,34(2):783-794.15曹山川,许铭洙,张莉,等.饲喂模式对猪生长性能、养分消化率和肠道微生物组成的影响.中国畜牧杂志,2 0 19,55(1):10 1-10 6.16 Peng W,Talpur M Z,Zeng Y,et al.Influence of fermented feedadditive on gut morphology,immune status,and microbiota in broilersDJ.BMC Vet Res,2022,18(1):218.17常玲玲,卜柱,刘敏,等.不同生产模式对乳鸽生长性能、屠宰性能和肉品质的影响.中国家禽,2 0 2 2,44(7):8 4-8 9.18陈亚琼,刘雅欣,王蕾,等.生物钟节律与肝脏代谢稳态.生理学报,2021,73(5):734-744.19 Ma M,Geng S,Liu M,et al.Effects of different methionine levels inlow protein diets on production performance,reproductive system,metabolism,and gut microbiota in laying hensJ.Front Nutr,2021,8:739676.20 Stanley D,Denman S E,Hughes R J,et al.Intestinal microbiotaassociated with differential feed conversion efficiency in chickensl.Appl Microbiol Biotechnol,2012,96(5):1361-1369.21 Wang Y,Wang H,Wang B,et al.Effects of manganese and Bacillussubtilis on the reproductive performance,egg quality,antioxidantcapacity,and gut microbiota of breeding geese during laying periodj.Poult Sci,2020,11:6196-6204.22 Hua L,Zhao L,Mao Z,et al.Beneficial effects of a decreased meal frequencyon nutrient utilization,secretion of luteinizing hormones and ovarianfollicular development in giltsJ.J Anim Sci Biotechnol,2021,12(1):41.23 Li G,Xie C,Lu S,et al.Intermittent fasting promotes white adiposebrowning and decreases obesity by shaping the gut microbiotaj.CellMetab,2017,26(4):672-685.24张波,黄晨轩,陈一凡,等.桑叶提取物对蛋鸡生产性能、肠道免疫功能、肠道组织形态及盲肠菌群结构的影响.动物营养学报,2 0 2 2,34(8):4977-4987.25 Backhed F,Ley R E,Sonnenburg J L,et al.Host-bacterial mutualism inthe human intestine).Science,2005,307(5717):1915-1920.26 Fan P X,Bian B L,Teng L,et al.Host genetic effects upon the earlygutnicrobiotain a bovine model with graduated spectrum of geneticva