PRP联合β受体阻滞剂治疗糖尿病足溃疡疗效及对血管新生、炎症反应的影响.pdf

1830 四川生理科学杂志 2023,45(10)临床论著 PRP 联合 受体阻滞剂治疗糖尿病足溃疡疗效及对血管新生、炎症反应的影响 杨天培*杨炫武 李琼洁（平顶山市第一人民医院药剂科，河南 平顶山 467000）摘要 目的：研究自体富血小板血浆（Plate rich plasm，PRP）联合 受体阻滞剂治疗糖尿病足溃疡疗效。方法：选取 2020 年 3 月至 2022 年 9 月我院收治的 96 例糖尿病足溃疡患者，采用随机数字表法分为对照组和联合组（n=48）。对照组给予 PRP 治疗（氯化钙溶液溶解凝血酶散与 PRP 依照 1:10 的比例混合，形成凝胶覆盖创面，每 7 d 更换 1 次，共治疗 4 w）；联合组采用 PRP 联合噻吗洛尔（每平方厘米的创面滴 1 滴噻吗洛尔滴眼液，共治疗 4 w）治疗。治疗前、治疗 4 w 后以彩色多普勒超声诊断仪测定两组足背动脉血流指标，以酶联免疫吸附法测定血清肿瘤坏死因子-（Tumor necrosis factor-，TNF-）、白细胞介素-6（Interleukin-6，IL-6）、S100钙结合蛋白 A8（S100 calcium binding protein A8，S100A8）、Toll 样受体 9（Toll like receptor 9，TLR9），以及血清碱性成纤维生长因子（Basic fibroblast growth factor，bFGF）、血管内皮生长因子（Vascular endothelial growth factor，VEGF）、内皮抑素（Endostatin，ES）水平，同时记录并比较两组临床疗效、创面愈合情况。结果：联合组临床总有效率明显高于对照组（P0.05）；联合组创面愈合时间短于对照组（P0.05）；治疗后联合组 TNF-、ES、IL-6、S100A8、TLR9 水平较对照组低，bFGF、VEGF 水平、足背动脉血流指标较对照组高（P0.05）。结论：PRP 联合 受体阻滞剂治疗糖尿病足溃疡疗效显著，可减轻局部炎症反应，促进血管新生，改善足背血流供应，加速溃疡愈合。关键词：PRP；噻吗洛尔；糖尿病足溃疡；血管新生；炎症介质 Effect of PRP combined with receptor blockers on diabetes foot ulcer and its influence on angiogenesis and inflammatory reaction Yang Tian-pei*,Yang Xuan-wu,Li Qiong-jie(Department of Pharmacy,Pingdingshan First Peoples Hospital,Pingdingshan 467000,Henan,China)Abstract Objective:To study the effect of the combination of autologous platelet-rich plasma(PRP)and receptor blockers on a diabetic foot ulcer.Methods:A total of 96 patients with diabetic foot ulcers admitted to our hospital from March 2020 to September 2022 were selected and randomly divided into the control group and the combined group(n=48).The control group was treated with PRP(calcium chloride solution dissolved thrombin powder was mixed with PRP in a ratio of 1:10 to form a gel to cover the wound,which was replaced every 7 days for 4 weeks).The combined group was treated with PRP combined with timolol(1 drop of timolol eye drops per square centimeter of the wound surface,for 4 weeks).The blood flow index of the dorsalis pedis artery of the two groups was measured by color Doppler ultrasound before and after treatment,and the serum inflammatory mediator levels,including tumor necrosis factor-(TNF-),Interleukin-6(IL-6),S100 calcium-binding protein A8(S100A8),Toll-like receptor 9(TLR9),and serum angiogenesis-related indicators,such as basic fibroblast growth factor(bFGF),vascular endothelial growth factor(VEGF),and endostatin(ES)were measured by enzyme-linked immunosorbent assay.Meanwhile,the clinical efficacy and wound healing of the two groups were recorded and compared.Results:The total clinical effective rate of the combined group was notably higher than that of the control group(P0.05).The wound healing time of the combined group was shorter than that of the control group.Post-treatment,the levels of TNF-,ES,IL-6,S100A8,and TLR9 in the combined group were lower than those in the control group,while the levels of bFGF,VEGF,and blood flow index of dorsal foot artery were higher than those in the control group(P0.05).Conclusion:PRP combination with receptor blockers are effective in the treatment of diabetic foot ulcers,which can reduce the local inflammatory reaction,promote angiogenesis,improve the blood supply of the foot dorsum,and accelerate ulcer healing.Key words:PRP;Timolol;Diabetic foot ulcers;Angiogenesis;Inflammatory mediator 糖尿病足溃疡是糖尿病最严重的并发症之一，若治疗不及时，可导致病情恶化，影响患肢功能，严重时甚至需要截肢1。因此，临床应及时采取有效治疗措施，控制病情进展。自体富血小板血浆（Plate rich plasm，PRP）富含促进伤口愈合的多种生长因子，可有效抑制局部细菌生长，促进组织神经修复，加速创面愈合，目前已被广泛应用于慢性难愈性创面治疗中，*作者简介：杨天培，男，主管药师，主要从事药物联合治疗糖尿病足研究，Email：。但相关研究表明，其单独使用，对部分患者效果欠佳2-3。受体阻滞剂常用于控制心率，最近有实验结果显示，其可促进患者创伤部位的血管管腔形成，加速伤口愈合4。目前，临床关于上述两种药物联合治疗糖尿病足溃疡的研究较少，基于此，本研究采取对照实验原则，旨在探讨 PRP 联合 受体阻滞剂治疗糖尿病足溃疡的效果。四川生理科学杂志 2023,45(10)1831 1 资料与方法资料与方法 1.1 一般资料 本研究经我院伦理委员会审核批准，选取2020 年 3 月至 2022 年 9 月我院收治的 96 例糖尿病足溃疡患者，采用随机数字表法分为对照组和联合组（n=48）。纳入标准：均符合糖尿病足相关诊断标准5；经影像学、血管病学等检查确诊为糖尿病足溃疡；依从性良好；无精神病史；均签署知情同意书。排除标准：对本研究药物过敏；其它原因引发的足部溃疡；自身免疫性疾病；伴有恶性肿瘤；合并其他严重感染；肝、肾、心功能不全；伴有新冠肺炎等传染性疾病。对照组男 29 例，女 19 例，年龄 4976 岁，平均 59.653.14 岁；糖尿病病程 516 y，平均10.172.14 y；溃疡时间 430 d，平均 17.753.22 d；糖尿病足 Wagner 分级：II 级 31 例，III 级 17例；联合组男 25 例，女 21 例，年龄 5274 岁，平均 60.173.58 岁；糖尿病病程 415 y，平均9.891.96 y；溃疡时间629 d，平均 18.123.58 d；糖尿病足 Wagner 分级：II 级 33 例，III 级 15 例；两组基线资料均衡可比（P0.05）。1.2 方法 两组均给予降糖、控制血脂血压、抗感染、清创、合理饮食运动等基础治疗。对照组采用 PRP 治疗，具体方法为：患者入院后，抽取 10 mL 外周静脉血，以血细胞分离机（北京海富达科技有限公司，型号：MCS+）制备PRP，血小板浓度控制在 11012，采用氯化钙溶液溶解凝血酶散（珠海同源药业有限公司，批准文号：H44023937，2000 单位），依照 1:10 的比例与PRP 混合，激活血小板后形成凝胶，清洁创面后，覆盖凝胶，每 7 d 更换 1 次，共治疗 4 w。联合组在对照组基础上联合噻吗洛尔治疗，当创面可见健康肉芽生长，溃疡边缘可见上皮爬行时，局部滴马来酸噻吗洛尔滴眼液（河北康芝制药有限公司，批准文号：H20055531，5 mL：25 mg），每平方厘米的创面滴 1 滴，2 d次-1，共治疗 4 w。1.3 观察指标 1.3.1 疗效评估 评估标准：无效：溃疡面减小面积低于 30%，创面体征无明显变化；有效：溃疡面减小面积30%，创面体征显著改善；显效：溃疡面基本愈合，肉芽良好，炎症消退，血液循环正常。总有效率=显效率+有效率。1.3.2 创面愈合情况 比较两组溃疡面肉芽组织出现时间、溃疡愈合时间。1.3.3 足背动脉血流指标 治疗前、治疗 4 w 后以彩色多普勒超声诊断仪（美国 GE 公司，型号：Voluson E8）测定两组足背动脉搏动指数、血管内径、血流速度。1.3.4 血清炎症介质水平及血清血管新生相关指标 于治疗前后抽取患者晨起空腹静脉血 3 mL，常规分离（离心半径 8 cm，转速 3500 rmin-1，时间 15 min）取血清，以酶联免疫吸附法测定血管内皮生长因子（Vascular endothelial growth factor，VEGF）、肿瘤坏死因子-（Tumor necrosis factor-，TNF-）、碱性成纤维生长因子（Basic fibroblast growth factor，bFGF）、白细胞介素-6（Interleukin-6，IL-6）、S100 钙结合蛋白 A8（S100 calcium binding protein A8，S100A8）、Toll 样受体 9（Toll like receptor 9，TLR9）、内皮抑素（Endostatin，ES）水平。1.4 统计学分析 采用 EXCEL 软件建立数据库，常规进行逻辑检错；采用 SPSS22.0 对数据进行分析，计量资料以均数标准差（XSD）表示，采用 t 检验，计数资料以例或率（n（%）表示，采用 2检验，P0.05 表示差异有统计学意义。2 结果结果 2.1 临床疗效比较 联合组临床总有效率为 97.92%（47/48）、对照组临床总有效率为 83.33%（40/48），联合组明显高于对照组（P0.05），见表 1。2.2 两组创面愈合情况比较 联合组溃疡面肉芽组织出现时间、溃疡愈合时间均短于对照组（P0.05），见表 2。2.3 足背动脉血流指标比较 与治疗前相比，各组治疗后足背动脉搏动指数、血管内径、血流速度明显升高，其中联合组更为显著（P0.05），见表 3。2.4 血清炎症介质水平比较 治疗后联合组血清 TNF-、IL-6、S100A8、TLR9 水平降低幅度明显大于对照组（P0.05），见表 4。1832 四川生理科学杂志 2023,45(10)2.5 血清血管新生相关指标比较 与对照组相比，治疗后联合组血清 bFGF、VEGF 水平明显升高，ES 水平明显降低（P0.05），见表 5。表表 1 1 临床疗效比较（临床疗效比较（n n（%），），n=48n=48）组别 显效 有效 无效 总有效率 联合组 28(58.33)19(39.58)1(20.83)47(97.92)对照组 24(50.00)16(33.33)8(16.67)40(83.33)2 4.414 P 0.036 表表 2 2 创面愈合情况比较（创面愈合情况比较（SDSD，n=48n=48）组别 溃疡面肉芽组织出现时间(d)溃疡愈合时间(d)联合组 6.851.63*18.634.28*对照组 8.371.55 30.545.07 注：与对照组相比，*P0.05。表表 3 3 治疗前、后足背动脉血流指标比较（治疗前、后足背动脉血流指标比较（SDSD，n=48n=48）组别 搏动指数 血管内径(mm)血流速度(mLs-1)治疗前 治疗后 治疗前 治疗后 治疗前 治疗后 联合组 1.580.43 3.550.74a*1.550.36 2.270.51a*0.800.14 1.130.20a*对照组 1.610.39 2.960.58a 1.580.34 1.880.46a 0.790.16 1.010.18a 注：与治疗前比较，aP0.05；与对照组相比，*P0.05。表表 4 4 治疗前、后血清炎症介质水平比较（治疗前、后血清炎症介质水平比较（SDSD，n=48n=48）组别 TNF-(gmL-1)IL-6(ngL-1)S100A8(ngmL-1)TLR9(ngmL-1)治疗前 治疗后 治疗前 治疗后 治疗前 治疗后 治疗前 治疗后 联合组 18.743.11 7.122.03a*257.1624.33 147.3116.78a*8.061.73 3.951.12a*5.691.24 2.640.61a*对照组 19.033.45 10.173.19a 259.4826.39 168.4218.29a 8.112.14 5.471.38a 5.721.33 3.910.75a 注：与治疗前比较，aP0.05；与对照组相比，*P0.05。表表 5 5 治疗前、后血清血管新生相关指标比较（治疗前、后血清血管新生相关指标比较（SDSD，n=48n=48）组别 bFGF(ngL-1)VEGF(gL-1)ES(ngmL-1)治疗前 治疗后 治疗前 治疗后 治疗前 治疗后 联合组 32.185.79 98.3711.06a*408.3236.71 965.2374.02a*67.816.49 31.285.64a*对照组 31.855.11 72.469.35a 411.2737.29 843.3580.34a 68.027.11 43.566.07a 注：与治疗前比较，aP0.05；与对照组相比，*P0.05。3 讨论讨论 局部生长因子受抑制是阻碍溃疡愈合的重要因素6-7。PRP 是从患者外周血提取的血小板浓缩物，进入机体后，可释放成纤维细胞生长因子、血管内皮细胞生长因子及表皮生长因子等多种生长因子，促进内皮细胞、新生血管增殖，成纤维细胞增生，细胞再上皮化，从而有效修复创面，加速伤口愈合8。但相关研究结果显示，单独使用PRP 治疗效果欠佳9。近年来，受体阻滞剂逐渐被尝试运用于糖尿病足溃疡的治疗中，研究发现 受体阻滞剂可作为治疗糖尿病慢性皮肤溃疡的辅助手段，能促进创面愈合10。本文结果显示，联合治疗溃疡愈合时间更短，疗效更佳，说明 受体阻滞剂可促进成纤维细胞、角质形成细胞迁移，增强血管生成，加速再上皮化，上调体内生长因子水平，从而进一步促进创面愈合11。此外，伤口炎症反应、新生血管再生也与创面愈合密切相关。本研究结果显示，联合治疗可有效调节炎性因子及血管新生相关指标水平。创面感染过程中受病原体侵袭，导致机体大量释放TNF-，进一步加重局部炎症反应，影响病情恢复12。IL-6 可影响成纤维细胞及内皮细胞的生长，阻碍创面愈合；S100A8、TLR9 则可促进 TNF-释放，加剧机体炎症损伤，导致糖尿病足溃疡迁延不愈13。因此，及时控制炎症反应，有助于减轻创面损伤。此外，bFGF、VEGF 均为促血管生长因子，bFGF 不仅促进细胞修复及再生，还可刺激上皮组织及肉芽组织增生，加速新生血管的形成；VEGF 可为新生血管提供营养，从而进一步促进新生血管的形成，而 ES 则会抑制 VEGF 表达。梁渝捷等11指出，皮肤溃疡后可导致机体肾上腺素水平升高，通过激活 2 受体/磷酸化肾上腺素能受体激酶-Toll样受体2-髓样分化因子88通路，促进 IL-6 等炎性因子的释放，加重机体炎症反应，噻吗洛尔则能直接阻断上述通路，抑制炎性因子表达。此外，受体阻滞剂还可刺激 四川生理科学杂志 2023,45(10)1833 VEGF 分泌，促进血管生成和组织再生，从而进一步改善足背动脉血流供应14。综上所述，PRP联合 受体阻滞剂治疗糖尿病足溃疡疗效确切，可加速血管新生，减轻炎症反应，改善足背血液供应，促进创面愈合。但本研究样本量较小，临床还应多中心、多渠道取样，以进一步研究。参考文献参考文献 1 Carro GV,Saurral R,Witman EL,et al.Ataque de pie diabtico.Descripcin fisiopatolgica,presentacin clnica,tratamiento y evolucin Diabetic foot attack.Pathophysiological description,clinical presentation,treatment and 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