SN∕T 5112-2019 进出口食用动物、饲料丙二醇含量测定 气相色谱法和气相色谱-质谱法.pdf

书 书 书犐 犆犛 犅 中华人民共和国出入境检验检疫行业标准犛犖犜 进出口食用动物、饲料丙二醇含量测定气相色谱法和气相色谱质谱法犇犲 狋 犲 狉犿 犻 狀 犪 狋 犻 狅 狀狅 犳狆 狉 狅 狆 狔 犾 犲 狀 犲犵 犾 狔 犮 狅 犾犻 狀犲 犱 犻 犫 犲犪 狀 犻 犿犪 犾 狊犪 狀 犱犳 犲 犲 犱 狊犳 狅 狉犻 犿狆 狅 狉 狋犪 狀 犱犲 狓 狆 狅 狉 狋犌犆犕犲 狋 犺 狅 犱犪 狀 犱犌犆 犕犛犿犲 狋 犺 狅 犱 发布 实施中华人民共和国海关总署发 布书 书 书前言本标准按照 给出的规则起草。本标准由中华人民共和国海关总署提出并归口。本标准起草单位：中华人民共和国拱北海关、中华人民共和国兰州海关。本标准主要起草人：薄清如、钱振杰、陈敬、罗宝正、张雅珩、刘陆、梁宁、曾俊洁、潘亮、薛良辰、丁琦、曾莹。犛犖犜 进出口食用动物、饲料丙二醇含量测定气相色谱法和气相色谱质谱法范围本标准规定了食用动物、饲料中， 丙二醇和， 丙二醇的测定方法。本标准适用于食用动物的血清、尿液、乳汁以及饲料中， 丙二醇和， 丙二醇的测定。规范性引用文件下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，仅所注日期的版本适用于本文件。凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本文件。 分析实验室用水规格和试验方法第一法气相色谱法方法提要试样中丙二醇经乙腈提取、前处理净化后，用气相色谱法测定，以保留时间定性，峰面积外标法定量。试剂和材料除另有说明外，所有试剂均为分析纯，水为 规定的一级水。 乙腈（） ，色谱纯。 乙醇（） ，色谱纯。 ， 丙二醇（） ：标准品，： ，纯度为 。 ， 丙二醇（） ：标准品，： ，纯度 。 ， 丙二醇标准储备液（ ） ：准确称取 （精确至 ）的， 丙二醇标准品至 容量瓶中，加入乙醇溶解并稀释至刻度线，摇匀。 ， 丙二醇标准储备液（ ） ：准确称取 （精确至 ）的， 丙二醇标准品至 容量瓶中，加入乙醇溶解并稀释至刻度线，摇匀。 ， 丙二醇和， 丙二醇标准使用液（ ） ：分别准确移取的， 丙二醇和， 丙二醇标准储备液 至 容量瓶中，以乙醇定容，摇匀。 ， 丙二醇和， 丙二醇标准工作溶液：用乙醇逐级稀释 的混合标准溶液，得到， 丙二醇和， 丙二醇的浓度分别为 、 、 、 、 、 、 的标准工作溶液系列。 无水硫酸镁。 净化管：具塞离心管，内装 粉， 粉和 粉末。犛犖犜 微孔滤膜： ，有机相。 载气：高纯氮气（ ） 。 辅助气：氢气（ ） 、干燥空气（ ） 。仪器和设备 气相色谱仪（） ：配氢火焰离子化检测器（ ） 。 分析天平：感量分别为 和 。 样品粉碎机 氮吹浓缩工作站。 涡旋混匀器。 超声波水浴。 高速离心机：转速 。 刻度试管：。 具塞比色管： 。 具塞离心管： 。测定步骤 试样处理 血清基质称取（精确至 ）样品至 比色管中，涡旋下缓慢加入乙腈至近刻度，加盖超声提取 ，取出放至室温，用乙腈定容，混匀。将此提取液转移至 具塞离心管中，在 下离心 。准确移取 上清液至刻度试管中，在氮吹仪中 下浓缩至 左右，再用乙醇复溶并定容，混匀，过 有机相滤膜，装瓶待上机。 尿液基质称取（精确至 ）样品至 比色管中，涡旋下缓慢加入乙腈至近刻度，加盖超声提取 ，取出放至室温，用乙腈定容，混匀。再加入约 无水硫酸镁至比色管中，加盖涡旋均匀，将此提取液转移至 具塞离心管中，在 下离心 ，取上清液过 有机相滤膜，装瓶待上机。 乳汁基质称取（精确至 ）样品至 比色管中，涡旋下缓慢加入乙腈至近刻度，加盖超声提取 ，取出放至室温，用乙腈定容，混匀。移取 上清液至净化管（ ）中，加盖涡旋均匀，在 下离心 ，取上清液过 有机相滤膜，装瓶待上机。 饲料基质试样用粉碎机粉碎，称取（精确至 ）饲料至 具塞离心管中，准确加入 乙腈，加盖振荡混匀，超声提取 ，取出放至室温，在 下离心 。吸取上清液 至 比色管中，用乙醇定容，混匀，取该稀释液过 有机相滤膜，装瓶待上机。犛犖犜 试样测定 仪器参考条件 色谱柱：键合交联聚乙二醇固定相石英毛细管色谱柱， ，或相当者。 载气：高纯氮；恒流模式，流速： 。 升温程序：柱起始温度 ，保持 ；以 速率升温至 ，保持 ，再以 速率升温至 ，保持 。 进样口温度 。 检测器温度： 。 尾吹气流量为 。 氢气流量为 。 空气流量为 。 进样量： 。 进样方式：分流进样，分流比。 标准曲线的制作将标准系列工作液分别注入气相色谱仪中，测定相应的丙二醇的色谱峰面积，以标准工作液的质量浓度为横坐标，以色谱峰的峰面积为纵坐标，绘制标准曲线。 试样溶液的测定将试样溶液注入气相色谱仪中，得到相应的， 丙二醇的色谱峰面积，根据标准曲线得到待测液中， 丙二醇和， 丙二醇的质量浓度。丙二醇的标准气相色谱图参见附图 。结果计算和表述样品中， 丙二醇和， 丙二醇含量的计算见公式（）犡犮犞犿 犳（）式中：犡 样品中， 丙二醇和， 丙二醇的含量，单位为克每千克（ ） ；犮 从标准曲线中查出的试样溶液中， 丙二醇和， 丙二醇的浓度，单位为微克每毫升（） ；犞 试样定容体积，单位为毫升（） ；犿 样品质量，单位为克（） ；犳 稀释倍数，检测血清、尿液和乳汁样品时，犳取值为，检测饲料样品时，犳取值为 。计算结果保留三位有效数字。测定低限、回收率 测定低限本方法对食用动物的血清、尿液、乳汁中， 丙二醇和， 丙二醇的测定低限均为 。本方法对饲料中， 丙二醇和， 丙二醇的测定低限均为 。犛犖犜 回收率和精密度回收率实验数据参见附录。第二法气相色谱质谱法方法提要试样中丙二醇经乙腈提取、前处理净化后，用气相色谱质谱联用仪进行测定。采用选择离子监测扫描模式（ ） ，以色谱保留时间和碎片的丰度比定性，以标准样品定量离子的峰面积外标法定量。 试剂和材料除另有说明外，所有试剂均为分析纯，水为 规定的一级水。 乙腈（） ，色谱纯。 乙醇（） ，色谱纯。 ， 丙二醇（） ：标准品，： ，纯度为 。 ， 丙二醇（） ：标准品，： ，纯度 。 ， 丙二醇标准储备液（ ） ：准确称取 （精确至 ）的， 丙二醇标准品至 容量瓶中，加入乙醇溶解并稀释至刻度线，摇匀。 ， 丙二醇标准储备液（ ） ：准确称取 （精确至 ）的， 丙二醇标准品至 容量瓶中，加入乙醇溶解并稀释至刻度线，摇匀。 ， 丙二醇和， 丙二醇标准使用液（ ） ：分别准确移取的， 丙二醇和， 丙二醇标准储备液 至 容量瓶中，以乙醇定容，摇匀。 ， 丙二醇和， 丙二醇标准工作溶液：用乙醇逐级稀释 的混合标准溶液，得到， 丙二醇和， 丙二醇的浓度分别为 、 、 、 、 、 、 的标准工作溶液系列。 载气：高纯氦气（ ） 。 仪器和设备 气相色谱质谱联用仪（ ） ，配电子轰击离子源（ ） 。 分析天平：感量分别为 和 。 样品粉碎机。 浓缩工作站。 涡旋混匀器。 超声波水浴。 高速离心机：转速 。 刻度试管：。 具塞比色管： 。 具塞离心管： 。犛犖犜 测定步骤 试样处理 血清、尿液和乳汁等液体样品基质称取（精确至 ）样品至 比色管中，涡旋下缓慢加入乙腈至近刻度，加盖超声振荡提取 ，取出放至室温，用乙腈定容，混匀。将此提取液转移至 具塞离心管中，在 下离心 ，准确移取 上清液至刻度试管中，在 下氮吹浓缩至 左右，再以乙醇复溶并定容，混匀，过 有机相滤膜，装瓶待上机。 饲料等固体样品基质试样用粉碎机粉碎，称取（精确至 ）饲料至 离心管中，准确加入 乙腈，加盖混匀，超声振荡提取 ，取出放至室温，在 下离心 。准确吸取上清液 至 比色管中，用乙醇定容，混匀。取该稀释液过 有机相滤膜，装瓶待上机。 试样测定 仪器参考条件 色谱柱：键合交联聚乙二醇固定相石英毛细管色谱柱， （内径） （膜厚） ，或相当者。 载气为高纯氦气，恒流模式，流速为 。 升温程序：柱起始温度 ，保持 ；以 速率升温至 ，保持 ，以 升温速率至 ，保持 。 进样口温度： 。 进样量： 。 进样方式：分流进样，分流比 。 离子源温度： 。 电子轰击电离源（ ） ： 。 接口（传输线）温度： 。 选择离子监测模式（ ） ：， 丙二醇定量离子： ，定性离子： ， ；， 丙二醇定量离子： ，定性离子： ， 。 溶剂延迟时间： 。 定性测定如果样液保留时间与标准溶液相一致（ ） ，并且在扣除背景后的样品质谱图中，所选择的离子均出现，而且所选择的离子丰度比与标准样品的离子丰度比相一致，则可判断样品中存在这种被测物。使用气相色谱质谱定性分析时，相对离子丰度最大允许误差见表。表定性时相对离子丰度的最大允许偏差相对离子丰度 至 至 允许的相对偏差 犛犖犜 定量测定根据试样中被测物的含量情况，选取响应值适宜的标准工作液进行色谱分析，标准曲线工作液应至少有个浓度水平，不包括零点。标准工作液和待测液中两种化合物的响应值均应在仪器线性响应范围内。丙二醇的选择离子扫描色谱图参见附图 。 结果计算试样中丙二醇的含量按式（）进行计算：犡犮犞犿 犳（）式中：犡 样品中， 丙二醇和， 丙二醇的含量，单位为克每千克（ ） ；犮 从标准曲线中查出的试样溶液中， 丙二醇和， 丙二醇的浓度，单位为微克每毫升（） ；犞 试样定容体积，单位为毫升（） ；犿 样品质量，单位为克（） ；犳 稀释倍数，检测血清、尿液和乳汁样品时，犳取值为，检测饲料样品时，犳取值为 。计算结果保留三位有效数字。 测定低限、回收率 测定低限本方法对食用动物的血清、尿液、乳汁中， 丙二醇和， 丙二醇的测定低限均为 。本方法对饲料中， 丙二醇和， 丙二醇的测定低限均为 。 回收率和精密度回收率实验数据参见附录。犛犖犜 附录犃（资料性附录）丙二醇气相色谱图图犃 丙二醇标准溶液气相色谱法的色谱图（ 犵犿犔）犛犖犜 附录犅（资料性附录）气相色谱法添加回收率犅 气相色谱法添加浓度和回收率实验数据（）化合物基质添加水平 回收率相对标准偏差， 丙二醇血清 尿液 乳汁 饲料 ， 丙二醇血清 尿液 乳汁 饲料 犛犖犜 附录犆（资料性附录）丙二醇气相色谱质谱法色谱图和质谱图图犆 丙二醇标准溶液气相色谱质谱法选择离子扫描色谱图（ 犵犿犔）图犆 ， 丙二醇标准溶液质谱图犛犖犜 图犆 ， 丙二醇标准溶液质谱图 犛犖犜 附录犇（资料性附录）气相色谱质谱法添加回收率犇 气相色谱质谱法添加浓度和回收率实验数据（狀）化合物基质添加水平 回收率相对标准偏差， 丙二醇血清 尿液 乳汁 饲料 ， 丙二醇血清 尿液 乳汁 饲料 犛犖犜