脊椎动物浸制标本的制作.doc

（二）脊椎动物浸制标本的制作
　　1．鱼类的浸制标本制作
　　 （1）整理姿态：将新鲜的鱼用纱布包好，干燥致死。然后用清水将鱼体表的粘液冲洗干净（勿损伤鳞片）。用注射器从腹部向鱼体内注射10%的福尔马林溶液，以固定内脏，防止腐烂。然后，将鱼的背鳍、臀鳍和尾鳍展开，用纸板及曲别针加以固定。把整理好的标本侧卧于解剖盘内。鱼体向解剖盘一侧可适量放些棉花衬垫，特别是尾柄部要垫好，以防标本在固定时变形。
　　（2）防腐固定：加入10%的福尔马林溶液至浸没标本，作为临时固定，待鱼硬化后取出。
　　（3）装瓶保存：用适当大小的标本瓶（标本瓶要长于鱼体6cm左右，以便贴上标签后仍能从瓶外看到标本全貌），将固定好的鱼类标本，头朝下放入。或根据标本瓶的内径和高度截一玻璃片，将标本用两条丝线分别从鳃盖骨后缘体侧和尾柄部穿入，缚扎在玻璃片上。用橡胶瓶塞或软木塞剔好小槽做成4个玻片固定脚，分别嵌在玻片两侧，将玻片和标本缓缓装入标本瓶内。最后，将10%福尔马林倒入瓶内至满，盖严瓶盖。
　　（4）贴标签：将注有科名、学名、中名、采集地、采集时间的标签贴于瓶口下方。标签贴好后，可在标签上用毛笔刷一层石蜡液，以防字迹褪色。
　　2．两栖、爬行类浸制标本制作：
　　（1）整理姿态：把活的蛙、蜥蜴、蛇、龟等动物放入大小适宜的标本缸或厚塑料袋内，用脱脂棉浸透乙醚或氯仿放入其中，盖严缸盖或封紧袋口，使动物麻醉。待致死后，立即进行整形，按它们生活的姿态，用大头针固定在蜡盘上。体形大的标本应事先在体内注射10%的福尔马林溶液。
　　（2）固定保存：与鱼类标本的固定保存方法相同。个体中等或较小的标本应头朝上绑于玻璃板上，再放入瓶中保存，使外形结构更易观察且展示性更强。
　　3．解剖标本的浸制制作：解剖标本的制作目的是观察内脏，应按解剖的一般方法除去体壁，以露出内脏。如要展示某一器官系统时，还须小心地除去不需要的部分，展示部分的各器官仍保持其自然位置，然后浸泡于10%福尔马林液中。如为标明各器官名称，可用打印好的名词签（或用铅笔书写），用水胶贴在各器官上，待粘牢晾干后，浸入保存液中即可。
　　（三）浸制标本长期保存时应注意的问题
　　1．某些新制作的浸制标本，经过一段时间，溶液会变黄或混浊，是动物体内的浸出物所造成。标本在浸泡1～3个月后，根据情况更换固定液2～3次，直到浸液不再发黄为止。
　　2．瓶口应密封，以防药液挥发。当标本不能全部淹没在保存液中时，应及时添加药液，否则露出部分会变干、变形，甚至发霉变质。
　　3．要注意浸制液的浓度。当打开标本瓶，可嗅到较强烈的气味时，表明浓度恰当，若无任何气味时，则表示浸制液的浓度不够，须立即更换。
鱼类浸制标本褪色的原因及克服方法

鱼类色彩丰富（例如家养的金鱼、锦鲤、热带鱼及某些野生的彩色种），据资料记载，认为其绚丽程度超过昆虫和鸟类。但传统上用甲醛浸泡的方法保存都会褪色。作者从1989年开始，用红娘子鱼、真鲷、小黄鱼、梅童鱼、金鱼、鲐鱼、黄姑鱼、蓝猪齿鱼等做了几十次试验，取得了一些经验，制作了一批彩色标本，观察至今已4～5年，证明效果可靠。现将试验情况及结果报告如下。
1．彩色鱼类浸制变色原因的探讨
据有关记载，彩色鱼类呈色的因素有4，即红色素细胞、黄色素细胞、黑色素细胞和光彩细胞。
1．1 显微观察 取彩色材料一小片（例如彩色鱼类的一片鱼鳞或一小片皮肤），用普通显微镜观察，就可以看到这些细胞。其中红色素细胞和黑色素细胞呈辐射的多分裂叶状，而黄色素细胞内含黄色脂滴状物质。光彩细胞则内含许多针状结晶，据文献记载，其化学本质为鸟粪素。例如蓝绿色就是由黑色素细胞、黄色素细胞加上鸟粪素晶体对光的折射和色散形成。
1．2 红色素细胞的化学性质 通过实验得知，遇75％酒精和8％甲醛都会慢慢变色，甲醛为1～2天，酒精为1周或更久，并因种类不同而异，例如金鱼色素抵抗力较强，但在保存中却最不稳定。红色素可被NaNO２或K2SO3溶解于水提取，此色素可被３％H2O2氧化破坏，加酸变黄，加碱变红，可见氧化和pH能使它变色。可能在它的分子结构中有一个可因pH改变的发色基团。根据实验，它对1％～3％苯酚稳定，原因可能是苯酚微酸而接近中性，又具有还原性，能抵抗氧化。
1．3 黄色素细胞的化学性质 能溶于脂溶性溶剂，所以忌用酒精．也能被NaNO２或K2SO3提取，提取液加酸加碱，只能引起微浊，
不象红色素那样有变色反应，能３％H2O2氧化漂白．对甲醛稳定，
但十分怕光、怕氧，所以在甲醛中保存必须遮光、绝氧，但这不容易做到，主要是绝氧，因为它碰到还原剂就往往溶解于水而脱色。但在1％～3％苯酚中稳定（条件是遮光），原因恐怕还在苯酚具有弱的还原性上。
1．4 光彩细胞的化学性质 光彩细胞的虹彩作用，原因在于内含鸟粪素晶体的折射及折射引起的色散。这种折射作用是银色鱼类呈现银色的主要原因，它与色素细胞配合，使鱼类色彩更加丰富、艳丽，细看尤如天上彩虹。据笔者研究，它的主要化学性质有2，即鸟粪素晶体只在pH4.5～8之间稳定，是一种两性物质，而且它能和甲醛缓慢作用（要几个月）而溶解、消失，所以凡含鸟粪晶体的鱼类，切忌甲醛。
1．5 黑色素细胞的化学性质 比较稳定，传统方法的鱼类浸制标本，最后都变成枯草色，主要原因就是其他呈色因素都先后消失，最后只剩下它的缘故。
1．6 影响保色的其他因素 主要是鲜度、固定剂和保存剂的种类、配方、浓度及固定时间。还有保存的温度和遮光情况。原因是色素结构十分不稳定，容易破坏。而固定时间过长或渗透压不适（主要对海产鱼类），也会使原生质过度变性及水分渗出而皱缩。所以浓度和固定时间及遮光保存等都十分重要，小黄鱼等黄色鱼类浸制标本，若不遮光，则1个月内很快变色，
2．彩色鱼类浸制标本的保色方法
2．1 获得材料后，必须及时冷藏或固定消毒，以求呈色结构尽量少受损害。
2．2 用肉眼或显微镜观察材料呈色情况，判定它属于纯红、纯黄或是杂色，然后分别对待。因为黄色主要是遮光、绝氧，并且不能和脂溶性溶剂（如酒精）接触，而红色则主要和氧化及pH有关。另外，它们对甲醛和酒精的耐受力也不同。若为杂色则必须兼顾红、黄两种色素的性质处理，而且杂色不是单指一条鱼上有几种颜色，也包括纯红、纯黄以外“单纯”的“混合色”。例如金红、橙黄、蓝绿等，它们看上去是“单纯”的一种颜色，其实是几种色素均匀分布（混合）而形成。所以，只要不是纯粹红色素细胞或纯粹黄色素细胞形成，而含有此两种细胞的色彩就是杂色。一般纯黄色与杂色都不能接触酒精，因为黄色素大都为脂溶性物质。但也有例外，例如某些鲽形目和鲀形目身上的黄色斑纹，还有某些金鱼就能数日、甚至数周地抵抗75％酒精。怕光也是这样，一般黄色鱼类都怕光，但也有例外。可见不同鱼种，在色素上也有一些特殊性。
2．3 固定 总的原则是固定液浓度不可太大，时间不要太长。笔者试用了3％苯酚，75％酒精和6％～8％甲醛等，各有优缺点。
3％苯酚：3％苯酚的优点是对色素性质温和，而且有轻度还原性，能抵抗氧化；pH近中性（微酸），所以只要遮光就对任何颜色鱼类都适用。即使固定消毒时间7～8天也无影响，是一种适用性广、比较保险、容易成功的固定液。缺点是：（1）有的鱼类体外有一厚层粘液，容易固化结成一层白色的壳。克服办法是事先洗去；或事后细心剥去，则壳内鱼体颜色依然鲜艳。（2）透入性能较差，不易硬化。克服办法是事先用3％苯酚腹腔注射，或事先用酒精或甲醛浸泡5h左右。有时固定后因为硬化不充分，蛋白质散入保存液会影响保存液透明度，克服办法是让它泡在保存液中继续硬化完全，再换一次保存液。（3）3％苯酚浓度较大，还原性较强，对某些红色素有微溶现象。但只要在固定消毒后，换上1％～1.5％苯酚保存液色溶就会停止。所以消毒固定用苯酚不要超过3％，否则，色素容易溶解。用3％苯酚消毒固定，是一种容易成功的方法。
6％～8％甲醛： 甲醛对色素损害较大，所以用6％～8％的较低浓度。红色素对它十分敏感，红娘子鱼浸泡后36h就完全变白。用甲醛固定红色鱼类时间要短，最好不要超过8～10h。小黄鱼、梅童鱼等黄色鱼类在甲醛中较稳定，但要避光绝氧，否则，很快变白。如固定材料很多时，只要把固定材料严实堆叠并盖上多层纱布，用甲醛淹没，则光氧两缺，自然会保色。但如材料数量很少则较难处理。笔者曾在6％～8％醛中加入2％苯酚还原，效果较好。甲醛固定12h即可，太久，原生质蛋白变性太大，保存时容易皱缩。用酒精固定也然。
75％酒精固定： 酒精对红色素的损害也较大，但比甲醛温和。其溶解黄色素能力十分明显，一般不能用于黄色和杂色鱼类，例如对梅童鱼、棕黄色。笔者曾用75％酒精浸泡各色金鱼数天，不见变色，但保存期间，却效果不如其他鱼类。
2．4 保存 曾试用过多种办法，但以1％～1.5％苯酚最好。而甲醛和酒精则次之。重要的是黄色鱼类一定要遮光。另外，保色持久程度也和材料鲜度、固定强度和时间长短有关。标本缸要用玻璃的，塑料能和酚作用，慢慢地使透明度下降。缸口和缸盖吻合处，要用黄油或蜡密封，以防苯酚氧化变色。保存温度以低度为宜。但一定要避光。
以上保色方法，对有色两栖类和爬行类如青蛙、小鲵、草蜥、竹叶青蛇等也都有一定效果。