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*,单击此处编辑母版标题样式,单击此处编辑母版文本样式,第二级,第三级,第四级,第五级,本资料仅供参考，不能作为科学依据。谢谢。本资料仅供参考，不能作为科学依据。本资料仅供参考，不能作为科学依据。谢谢。本资料仅供参考，不能作为科学依据。,3.2体外受精和早期胚胎培养,1/62,中国第一例试管婴儿郑萌珠 1988年，中国第一例试管婴儿郑萌珠在北医三院出生，女婴出生时体重3900克，身长52厘米。,2/62,我国首例试管奶牛“滔滔”诞生 1989年，在被称为中国“试管动物研究之父”范必勤主持下，全国第一只冷冻体外受精胚胎试管牛在南京诞生。这是我国首例采取冷冻体外受精胚胎移植成功试管牛。,3/62,试管动物技术,是指经过人工操作使,卵子,和,精子,在,体外条件,下成熟和受精，并经过培养发育成,早期胚胎,后，再经移植产生后代技术。,4/62,一、体外受精,1、概念：,采取雌性动物卵细胞和雄性动物精子，使其在,体外培养条件下受精,。,2、过程：,（1）卵母细胞搜集和培养；,（2）精子搜集和获能；,（3）获能精子和卵细胞受精,5/62,实现良种牛快速大量繁殖首先要做是（）和（）培养,体外受精,早期胚胎,（1）体外受精：采取雌性动物（）和雄性动物（），使其在（）中受精。,卵细胞,精子,试管,注：但发育主要场所是（）,母体子宫中,从试管牛说起,6/62,体外受精,1.卵母细胞搜集和培养,对不一样动物,采取卵母细胞方法不一样,7/62,思索：为何搜集卵母细胞要经体外培养后才能与获能精子受精？该过程包括了我们前面所学哪项技术？,8/62,2.精子搜集和获能,1)搜集方法:,假阴道法,手握法,和,电刺激,等,2)获能处理:,培养法：啮齿动物、,家兔和猪,化学法：牛、羊,9/62,3.受精,在,获能溶液,或,专用受精溶液,中完成受精过程,10/62,二、胚胎早期培养,培养液:,水、无机盐、有机盐、维生素、激素、氨基酸、核苷酸以及动物血清等.,11/62,12/62,采集良种母牛卵母细胞,卵母细胞体外培养,采集良种公牛精子,精子体外获能,体外受精,良种牛体外受精胚胎,胚胎移植,代孕母牛,良种犊牛,成熟期牛,屠宰加工厂,市场,采集卵巢中,卵母细胞,“试管牛”工厂化生产技术流程图,13/62,辨析：,试管婴儿,克隆羊,判断依据：,是否由,受精卵,发育而来,无性生殖,有性生殖,14/62,复习：克隆动物培育流程,15/62,辨析:体外受精与人工授精,人工授精是指用人工方法，使公畜精液进入母畜生殖道内，使精卵细胞结合。属于体内受精。,16/62,3.3 胚胎工程的应用及前景,17/62,胚胎移植实际上是生产胚胎,供体,和孕育胚胎,受体,共同繁殖后代过程。,一、胚胎移植,18/62,1.胚胎移植概念,将雌性动物早期胚胎,或者经过其它方式得到胚胎,移植到,同种,、,生理状态相同,其它雌性动物体内,使之发育为新个体技术。,雌性动物早期胚胎或体外受精及转基因、核移植等,胚胎起源：,供体：,受体：,受体条件：,提供胚胎个体。,接收胚胎个体。,同种（同一物种）、生理状态相同。,19/62,2、胚胎移植优 势：,充分发挥雌性个体繁殖潜力,（缩短供体本身繁殖周期；增加供体一生繁殖后代数）,加速育种工作和品种改良；,保持供体优良特征,节约成本费用,可用于保护珍稀动物,.,.,（意义）,20/62,思索？,1、准备移植小牛胚胎，移植到任,何一头母牛子宫内都能发育吗？,2、供体与受体之间进行胚胎移植,会不会发生免疫排斥反应？,3.胚胎移植生理学基础,21/62,请认真阅读书本P76，思索讨论：,(1)胚胎移植生理学基础四点内容是什么？,(2)在胚胎移植操作中，怎样才能使胚胎在,移植前后所处生理环境保持一致,？比如，供、受体发情时间要一致吗？供体胚胎移入受体子宫位置，应与在供体内位置相同或相同吗？,(3)有些人认为胚胎移植实质上是早期在相同生理环境条件下空间位置转移。你认为这么概括正确吗？,22/62,生理学基础,意义,2.胚胎移植生理学基础,同种动物供体和受体排卵后，,生殖器官,是相同。,生理改变,为供体胚胎移入受体提供,相同,。,生理环境,早期胚胎形成后，在一定时间内,不会与母体子宫建立组织上联,系，而是处于,状态。,为胚胎搜集提供了可能,游离,受体对移入子宫外来胚胎,基本上不发生,。,免疫排斥反应,供体胚胎可与受体子宫建立正常,和,联络，但其,不受影响。,生理,组织,遗传特征,为胚胎在受体内存活,提供了可能,为移植后胚胎继续发育,提供了营养等方面保障,23/62,思索与讨论:,1、在胚胎移植操作中，怎样才能使胚胎在移植前后所处生理环境保持一致？比如，供、受体发情时间要一致吗？供体胚胎移入受体子宫位置，应与在供体内位置相同或相同吗？,应对供体和受体母畜,进行同期发情处理,，,使它们生理条件到达同时，这么才能使供体胚胎移入受体后有相同或相同生存条件,，这是,胚胎移植成功是否关键。,所以，必须做到供、受体母畜发情时间一致。同时还要做到移入受体子宫胚胎位置应该与其在供体内位置相同或相同，移入胚胎一侧受体子宫对应卵巢必须有黄体存在。,24/62,2、胚胎移植,实质,你认为这么概括正确吗？,是早期胚胎在相同生理环境条件下,空间位置转移。,正确。,25/62,胚胎移植成功是否要有两个条件,（,1）胚胎移植普通应在,同种雌性,供体和受体之间进行。,（2）进行胚胎移植供体和受体,生理状态要相同,。,26/62,3、胚胎移植基本程序,请认真阅读书本P77，图3-19，思索讨论：,（1）胚胎移植基本程序包含哪些？,（2）每一步技术操作作用怎样？,（3）为何要进行这些操作？,27/62,选择及同期发情处理,超数排卵处理,配种或人工授精,胚胎搜集,胚胎检验,胚胎保留,胚胎移植,妊娠检验,分娩,3、胚胎移植基本程序,28/62,（1）对供体、受体进行选择,供体：,遗传性能和生产性能优异个体；,受体：,健康和正常繁殖能力个体,处理：,同期发情,详细做法：,注射相关激素。,29/62,（2）,超数排卵处理,详细做法：,注射促性腺激素,30/62,（3）配种或人工授精,精子起源：,同种优良雄性动物。,31/62,（4）胚胎搜集,在配种或输精后第7天，用特制冲卵装置，把供体母牛子宫内胚胎冲洗出来。,冲卵是把母牛卵子冲出来吗？,不是，冲卵是将供体母畜,体内早期胚胎冲出来。,32/62,（5）对胚胎进行质量检验,你知道检验目标吗？此时胚胎处于什么时期？,检验胚胎发育情况，,处于,桑椹胚或囊胚进行胚胎移植时间,33/62,（6）胚胎保留或移植,胚胎保留条件是什么？胚胎为何在此条件下保留？,-196摄氏度液氮，能够保留搜集到多出质量好胚胎，用于下次胚胎移植。,34/62,（7）胚胎移植,方法一：手术法,详细做法：引出受体子宫和卵巢，将胚胎注入子宫角，缝合创口。,方法二：非手术法,将装有胚胎移植管送入受体母牛子宫对应部位，注入胚胎。,35/62,（8）对受体母牛进行是否妊娠检验,36/62,（9）受体母牛产下胚胎移植犊牛,37/62,选择,供体母牛,受体母牛,同期发情,处理*,超数排卵,*,供体公牛,配种,取出,早期胚胎,质量检验,胚胎移植,妊娠检验,分娩（胚胎移植犊牛）,3、胚胎移植过程：,未配种,同期发情技术：主要是借助,外源激素,剌激卵巢，使其按照预定要求发生改变，使处理母畜卵巢生理机能都处于相同阶段，从而到达同期发情。,38/62,1.以下对于优良种畜胚胎移植说法不正确是（）,A.供体母牛必须是同一物种良种,B.受体母牛必须是同一物种良种,C.供体公牛必须是同一物种良种,D.受体母牛能够是同一物种普通健康牛,B,练习,39/62,练习,2.以下相关动物胚胎移植叙述中，错误是（）,A.受孕母畜体内受精卵或胚胎均能移植,B.受体母畜必须处于与供体母畜同时发情状态,C.超数排卵技术要使用一定激素,D.试管婴儿只是受精及早期卵裂过程在试管中进行,A,40/62,D,41/62,3.供体胚胎移植到受体后，游离胚胎在发育过程中形成胎盘与受体相连，并经过胎盘与受体血液进行物质交换。以下说法正确是（）,A.受体是为供体胚胎提供发育条件,B.受体与胚胎血型应相同，不然会,发生免疫排斥反应,C.受体与胚胎血液混融在一起,D.胚胎心肺功效都能正常运行,A,42/62,巩固练习,供、受体母牛选择好后，要用激素进行同期发情处理原因是（）,A、预防受体牛不愿意接收胚胎,B、只有受体与供体生理状态相同，被移植胚胎才能继续正常发育,C、只要发情排卵后，各阶段时间内改变，供、受体生理状态完全相同,D、同期发情处理后，卵细胞和精子受精结合能力强,B,43/62,遗传性能优异,健康有正常繁殖能力,同种遗传性能优异,同期发情处理,胚胎移植,超数排卵,44/62,二、胚胎分割,阅读书本，思索以下问题：,（1）胚胎分割概念,（2）胚胎分割特点,（3）胚胎分割理论基础,（4）胚胎分割操作过程,45/62,四、胚胎分割,1.概念:,2.优势:,指借助显微操作技术（采取,机械方法）,将早期胚胎切割成几等份，再移植到代孕母子宫，产生同卵多仔后代技术。,后代含有相同遗传物质。,可成倍增加胚胎数量，能够快速繁殖良种畜。,3.特点:,46/62,问题探讨：,1、分割什么时期胚胎?,2、用什么仪器来分割?,.讨论,.时期,1、发育良好，形态正常,32细胞期或囊胚,.,2、实体显微镜,和,显微操作仪；,切割刀、切割针,47/62,胚胎分割移植显微操作,48/62,受精卵,分裂,早期胚胎,胚胎分割基本过程,代孕母牛,植入,植入,分割,或酶处理,49/62,3、胚胎分割基本过程,胚胎移入培养液；,分割胚胎（机械法）；,移植胚胎给受体；,着床产仔。,50/62,4、操作注意事项：,对囊胚阶段胚胎进行分割时，要将内细胞团均等分割。,胚胎分割份数越多，操作难度会越大，移植成功率也越低。,51/62,5、胚胎分割技术缺点,（1）刚出生动物体重偏低，毛色和斑纹还存在差异；,（2）采取胚胎分割技术产生同卵多胎可能性是有限。,52/62,三.胚胎干细胞,阅读书本，思索以下问题：,（1）什么是胚胎干细胞？,简称是什么？,（2）胚胎干细胞起源。,（3）胚胎干细胞特征。,（4）胚胎干细胞应用。,53/62,1.概念：,简称ES或EK细胞,是由,早期胚胎或原始性腺,中分离出来一类细胞。,54/62,2.特点:,（1）,形态：,体积小.细胞核大,核仁显著；,（2）,功效：,含有发育全能性.可分化为成年动物体内任何一个组织细胞.体外培养可增殖不分化；,（3）在体外培养条件下，ES细胞能够增殖而不发生分化。对它能够进行冷冻保留，也能够进行遗传改造。,55/62,补充：,干（祖）细胞：是指动物胚胎及一些器官中含有,自我复制和多向分化潜能原始细胞.,56/62,按分化潜能分：,(1)全能干细胞：,含有形成完整个体分化潜能。如胚胎干细胞。,(2)多能干细胞：,含有分化出各种细胞组织潜能，失去发育成完整个体能力。,(3)专能干细胞：,只能向一个类型或亲密相关两种类型分化细胞。,如骨髓造血干细胞、皮肤生发层细胞等,。,按起源分：,(1)胚胎干细胞：,当受精卵分裂发育成囊胚时，内细胞团细胞即为胚胎干细胞。,(2)成体干细胞：,指已分化特定组织中未分化细胞，可起源于胚胎、胎儿和成人组织中，如造血干细胞、神经干细胞、成肌细胞等。,干细胞分类：,57/62,胚胎干细胞应用,（1）治疗人类顽症：,如帕金森综合症、少年糖尿病等。,（2）培育人造组织器官：,处理供体器官不足、免疫排斥等。,（3）研究体外细胞分化。,58/62,胚胎干细胞应用前景,.优点,59/62,.鼠,60/62,.应用前景,61/62,中国克隆鼠“小小”一夜成名,中国科学家首次用iPS细胞（诱导多功效干细胞）克隆出完整活体试验鼠，从而首次证实iPS细胞与胚胎干细胞一样含有全能性。干细胞过去一直只能从胚胎中取得干细胞，伦理争论由此而起。年，美国和日本科学家分别宣告发觉用皮肤细胞等普通细胞“仿制”干细胞方法，这么得到干细胞称为诱导多功效干细胞，又名iPS细胞，从而防止了伦理争论。,62/62,
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