G4-RKD患者血清sFLC、LAMP-2及NGAL表达水平与病程发展及肾功能的相关性.pdf

四川生理科学杂志 2023,45(10)1963 临床研究 G4-RKD 患者血清 sFLC、LAMP-2 及 NGAL 表达水平与病程发展及肾功能的相关性 乔玲*（新乡和平医院检验科，河南 新乡 453002）摘要 目的：探讨免疫球蛋白（Ig）G4 相关疾病伴有肾损害患者（G4-RKD）血清游离轻链（sFLC）、溶酶体相关膜蛋白 2（LAMP-2）及中性粒细胞明胶酶相关脂质运载蛋白（NGAL）表达水平与病程发展及肾功能的相关性分析。方法：选取 2019 年 2 月2021 年 2 月我院收治的 94 例 IgG4-RKD 患者（型 51 例，型 43例）设为观察组。选择 50 例同期健康体检者作为对照组。分别检测患者的血清 sFLC、sFLC、LAMP-2、NGAL 水平及肾功能指标，计算 SFLC/比值。采用 Pearson 检验分析血清 sFLC、LAMP-2 及 NGAL水平与血肌酐（Scr）、血尿素氮（Blood urea nitrogen，BUN）及 24 h 尿蛋白定量之间的相关性。根据患者肾损伤程度将其分轻度（n=28）、中度（n=47）、重度（n=19）三组，并采用 logstic 回归分析分析 sFLC、LAMP-2 及 NGAL 水平对 IgG4-RKD 患者病程发展及肾功能损伤的影响。结果：型 IgG4-RKD 患者 sFLC水平和 SFLC/比值均显著高于对照组，型 IgG4-RKD 患者 sFLC、sFLC 水平较对照组明显偏高，SFLC/比值显著低于对照组。观察组血清 LAMP-2 及 NCAL 水平均显著高于对照组（P0.05）。不同程度肾功能受损患者血清 sFLC、NACL、LAMP-2 水平及肾功能指标水平之间均存在显著差异（P0.05）；重度肾功能损伤患者血清 sFLC、NCAL、LAMP-2、Scr、BUN 及 24 h 尿蛋白定量水平均较轻度、中度肾功能损伤患者偏高（P0.05）；中度肾功能损伤患者 sFLC水平及 sFLC/比值均高于轻、重度患者（P0.05）。IgG4-RKD 患者中，sFLC、sFLC、sFLC/与 eGFR 呈负相关；与 Scr、BUN 之间无相关性；LAMP-2 与 IgG4-RKD 患者 Scr、BUN 水平及 24 h 尿蛋白呈正相关；NGAL 水平与 Scr、BUN、24 h 尿蛋白水平均呈正相关。logistic 多元回归分析显示，LAMP-2 及 NGAL 均是影响 IgG4-RKD 患者病程发展及肾功能损伤的独立危险因素，sFLC/是风险因素但无法作为独立预测参考指标。结论：血清 sFLC、LAMP-2 及 NGAL表达水平变化均与 IgG4-RKD 的病程发生及肾功能相关，其中 LAMP-2、NGAL 与患者的肾功能指标存在明显的相关性，sFLC 为弱相关性。关键词：G4-RKD；sFLC 水平；LAMP-2 水平；NGAL 水平；病情发展；肾功能 IgG4 相关性疾病（IgG4-RD）是一种以纤维炎性病变为主的系统性自身免疫性疾病，可累及全身多处组织及器官1。IgG4 相关性肾病指的是IgG4-RD 累及肾脏，可分为 IgG4 相关的小管间质性肾炎（IgG4-TIN）和 IgG4 相关的膜性肾病（IgG4-MN）两类，以 IgG4-TIN 最为常见。IgG4-TIN 的发病机制尚未完全明确2。临床主要以免疫球蛋白增高、外周血嗜酸性粒细胞增多及低补体血症等实验室检查结果对IgG4-TIN 进行诊断。血清游离轻链（sFLC）的代谢主要依靠肾脏，其表达水平会随着肾功能的改变而改变3。溶酶体相关膜蛋白 2（LAMP-2）是一种主要表达与中性粒细胞和内皮细胞之中的糖蛋白，在血管炎的活动中起着极为重要的作用。LAMP-2 水平在肾小球肾炎患者中显著升高。中性粒细胞明胶酶相关脂质运载蛋白（NGAL）是一种急性肾损伤标志物，可有效反映患者的肾功能损伤程度4。现阶段关于 sFLC、LAMP-2 及 NGAL 的研究大多集中于分析其与肾功能改变的联系，鲜少*作者简介：乔玲，女，主管检验师，主要从事临床检验，Email：。研究其与肾功能指标及病情发展的相关性。基于此，本研究分析sFLC、LAMP-2及NGAL在 IgG4-RKD 患者血清中的表达水平，探究其与病程发展和肾功能的相关性。1 资资料与方法料与方法 1.1 一般资料 选取2019年2月2021年2月我院收治的94例 IgG4-RKD 患者（型 51 例，型 43 例）设为观察组。选择 50 例同期于我院行健康体检者作为对照组。其中，观察组中男性 53 例，女性 41 例，平均年龄为（62.1814.09）岁；对照组中男性 28 例，女性 22 例，平均年龄为（61.8913.74）岁。两组的一般资料无统计学差异（P0.05）。均知晓该研究方案且签署同意书，我院伦理委员会已批准本研究开展。纳入标准：均符合 2015 年中国中西医结合学会肾脏疾病专业委员会汇编的IgG4 相关小管间质性肾炎的筛选及诊断标准的分析5中关于 1964 四川生理科学杂志 2023,45(10)IgG4-RKD 的相关诊断标准；均伴有不同程度尿液或肾功能检查异常；未服用影响肾功能指标的相关药物；患者及其家属均签署知情同意书。排除标准：排除合并神经系统疾病；排除伴有肝、肾功能不全；合并其他恶性肿瘤；临床资料不全；无法配合研究。1.2 方法 1.2.1 血清指标检测 采集 5 mL 肘静脉血，离心后分离血清，采用免疫散射比浊法检测血清游离羟链（sFLC），检测仪器采用 IMMAGE800 全自动免疫散射浊度仪，由美国 Beckman 公司生产。SFLC、检测试剂盒由美国 The Binding Stie 公司（Freelite TM）提供。通过酶联免疫法（ELISA）检测溶酶体相关膜蛋白 2（LAMP-2）、中性粒细胞明胶酶相关脂质运载蛋白（NGAL）水平。LAMP-2 试剂盒购自南京凯基生物科技有限公司，NGAL 检测试剂盒由美国 R&D 公司提供。所有检测操作均严格按照说明书执行。1.2.2 肾功能检测 应用美国雅培 Gi6200 全自动生化分析仪测定血肌酐（Scr）、血尿素氮（BUN）水平，并评估24h 尿蛋白定量。所有检测操作均严格按照说明书执行。1.3 统计学方法 本采用 spss19.0 进行数据分析，以n(%)表示计数资料，行2检验，以（XSD）表示计量资料，行 t 检验，采用 person 相关性分析法分析偏态分布资料及等级资料相关性，P0.05 为差异有统计学意义。2 结果结果 2.1 各组血清游离轻链（SFLC、）结果及比值比较 型 IgG4-RKD 患者 sFLC 水平和 SFLC/比值均显著高于对照组，型 IgG4-RKD 患者sFLC、sFLC 水平较对照组明显偏高，SFLC/比值显著低于对照组，详见表 2。2.2 血清 LAMP-2 及 NGAL 水平比较 观察组血清LAMP-2及NCAL水平均显著高于对照组（P0.05）。详见表 3。2.3 不同程度肾功能受损患者血清 sFLC、NACL、LAMP-2 水平及肾功能对比 不同程度肾功能受损患者血清sFLC、NACL、LAMP-2 水平及肾功能指标水平之间均存在显著差异（P0.05）；重度肾功能损伤患者血清 sFLC、NCAL、LAMP-2、Scr、BUN 及 24 h 尿蛋白定量水平均较轻度、中度肾功能损伤患者偏高（P0.05）；中度肾功能损伤患者 sFLC水平及 sFLC/比值均高于轻、重度患者（P0.05）。详见表 4。2.4 各指标间相关性分析 IgG4-RKD 患者中，sFLC、sFLC、sFLC/与 eGFR 呈负相关；与 Scr、BUN 之间无相关性；LAMP-2 与 IgG4-RKD 患者 Scr、BUN 水平及 24 h 尿蛋白呈正相关；NGAL 水平与 Scr、BUN、24 h 尿蛋白水平均呈正相关。2.5 影响 IgG4-RKD 患者病程发展的相关因素分析 logistic 多元回归分析显示，LAMP-2 及NGAL 均是影响 IgG4-RKD 患者病程发展及肾功能损伤的独立危险因素，sFLC/是风险因素但无法作为独立预测参考指标。见表 5。表表 1 1 不同型别不同型别 IgG4IgG4-RKDRKD 患者患者 sFLCsFLC 检测结果比较（检测结果比较（SDSD）分组 例数 sFLC(mgL-1)sFLC(mgL-1)SFLC/IgG4-RKD 型 51 134.0387.12 13.723.65 8.116.79 IgG4-RKD 型 43 25.8712.98 159.3376.53 0.110.34 对照组 50 7.449.34 14.0112.87 0.261.13 F 84.238 176.602 61.396 P 0.000 0.000 0.000 表表 2 2 两组血清两组血清 LAMPLAMP-2 2 及及 NGALNGAL 表达水平比较（表达水平比较（SDSD）分组 例数 NCAL(gL-1)LAMP-2(gL-1)对照组 50 97.4814.21 6.931.34 观察组 94 169.2620.78 29.785.47 t 21.843 29.034 P 0.000 0.000 四川生理科学杂志 2023,45(10)1965 表表 3 3 不同程度肾功能损伤者血清不同程度肾功能损伤者血清 sFLCsFLC、NACLNACL、LAMPLAMP-2 2 水平及肾功能指标比较水平及肾功能指标比较（SDSD）指标 轻度(n=28)中度(n=47)重度(n=19)F P sFLC(mgL-1)18.925.13 69.1211.09 1877.41237.44 2256.694 0.000 sFLC(mgL-1)16.535.12 38.986,73 22.544.17 144.053 0.000 sFLC/1.830.25 1.970.18 1.850.21 4.737 0.011 NCAL(gL-1)135.4717.33 159.2318.18 184.2920.14 44.662 0.000 LAMP-2(gL-1)7.181.27 15.223.48 44.735.86 640.57 0.000 Scr(molL-1)150.4812.24 173.4527.47 196.4930.12 20.162 0.000 BUN(molL-1)17.483.13 22.113.06 27.843.17 63.331 0.000 24 h尿蛋白定量(g24h-1)153.2413.17 176.3828.15 194.7631.08 15.909 0.000 表表 4 IgG44 IgG4-RKDRKD 患者病程发展的多因素分析患者病程发展的多因素分析 影响因素 值 SE Wald 值 P OR 值(95%CI)sFLC/1.974 1.052 3.521 0.061 7.199(0.91656.595)LAMP-2 0.692 0.216 10.264 0.001 1.998(2.3083.051)NGAL 1.099 0.358 9.424 0.002 3.001(1.4886.054)3 讨论讨论 IgG4-RD 是近年来新发现的一种病因不详的慢性免疫疾病。IgG4-RD 累及肾脏器官引发相关的肾脏病变被统称为 IgG4-RKD。IgG4-RKD 的发病机制尚未完全明确，临床研究已证实 IgG4-RKD 治疗的开始时间与疗效优劣有着紧密的联系1,2。由此可见，积极探索特异性、敏感性更高的诊断指标对改善疾病的预后有着积极的意义。免疫球蛋白重链类型可分为 IgA、IgE、IgM、IgD、IgG 型，轻链只有 和 型1,2。正常的状态下，人体血清中/通常保持在 2；1，正常人尿液中也不会存在过多轻链，一旦出现过量 uFLC，则表明肾小管重吸收功能下降或受损1,2。本研究结果显示，重度肾功能损伤患者血清sFLC 水平均较轻度、中度肾功能损伤患者偏高，中度肾功能损伤患者sFLC水平及sFLC/比值均高于轻、重度患者。结合两种类型患者 sFLC/水平与对照组患者之间的关系，推测型IgG4-RKD 患者型轻链增生明显，型 IgG4-RKD 患者存在两种轻链增生，且型增生幅度更大。相关性分析结果显示，sFLC、sFLC、sFLC/与 eGFR 呈负相关，与 Scr、BUN 之间无相关性。sFLC/是风险因素但无法作为独立的预测参考指标。LAMP-2 在慢性肾小球肾炎患者血清和尿液中的表达水平显著升高，且血液和尿液中的LAMP-2 是抗中性粒细胞胞质抗体（ANCA）相关性肾炎的高危因素3。本研究结果显示，观察组血清 LAMP-2 及 NCAL 水平均显著高于对照组，且随着肾功能受损程度的加重，表达水平升高。相关性分析结果显示，LAMP-2 与 IgG4-RKD 患者Scr、BUN 水平及 24 h 尿蛋白呈正相关，LAMP-2 是影响 IgG4-RKD 患者病程发展及肾功能损伤的独立危险因素3。尿NGAL浓度的升高可有效反映肾间质早期的结构变化4。NGAL 常用于预测肾脏早期受损情况。本研究发现，观察组血清 NCAL 水平显著高于对照组，且会随着肾功能损伤加重而表达增高。相关性分析结果显示，NGAL 水平与 Scr、BUN、24 h 尿蛋白水平均呈正相关，NGAL 均是影响 IgG4-RKD 患者病程发展及肾功能损伤的独立危险因素4,6。综上所述，IgG4-RKD 患者在疾病发展及肾功能受损过程中的血清 sFLC、ADP、LAMP-2 及NGAL 水平均会出现一定程度的改变，均表现为浓度升高。可考虑检测三项因子水平结合常规肾功能检查来共同诊断 IgG4-RKD 的发生或用于评估此类患者的肾功能损伤程度。参考文献参考文献 1 Saeki T,Kawano M,Nagasawa T,et al.Validation of the diagnostic criteria for IgG4-related kidney disease(IgG4-RKD)2011,and proposal of a new 2020 version.Clin Exp Nephrol.2021 Feb;25(2):99-109.2 李春梅,缪卫华,张梅香,等.不同类型慢性肾病患者血清游离轻链表达及对预后判断的价值J.国际免疫学杂志,2019(06):594-595-596-597-598.3 李小伟,刘志红.抗溶酶体相关膜蛋白 2 抗体在抗（下接第1962页）1962 四川生理科学杂志 2023,45(10)表表 3 3 两组凝血指标比较（两组凝血指标比较（SDSD，n n=34=34）组别 凝血酶原时间(s)活化部分凝血活酶时间(s)纤维蛋白原(gL-1)治疗前 治疗后 治疗前 治疗后 治疗前 治疗后 对照组 9.351.23 9.470.86 18.311.54 19.061.87 5.060.53 5.100.29 观察组 9.541.02 13.210.78 17.961.65 31.191.52 5.240.74 3.160.41 t 0.693 13.761 0.904 29.350 1.153 22.525 P 0.488 0 0.366 0 0.249 0 表表 4 4 两组不良妊娠结局比较两组不良妊娠结局比较nn（%）组别 胎 儿 发 育不良 早产 产后出血 产后高血压 胎盘早剥 子痫 总 发 生 率(%)对照组(n=34)1(2.94)2(5.88)1(2.94)3(8.82)2(5.88)3(8.82)35.29 观察组(n=34)0 0 1(2.94)0 0 0 2.94 2-11.508 P-0.001 本研究结果显示，肝素联合硝苯地平治疗的观察组患者，妊娠高血压的降压治疗和症状缓解的总有效率明显高于对照组；两组患者治疗后收缩压和舒张压水平较都有降低，但观察组较对照组的降压效果更理想，能够使患者的血压水平降至正常区间，并稳定维持，而对照组患者血压则仅是接近正常水平；两组患者治疗后 24 h 尿蛋白定量分析显示观察组患者尿蛋白改善明显，能够将至正常水平；从不良妊娠结局发生情况来看，除产后出血两组各有 1 例外，观察组均无其余不良妊娠结局发生。本研究结果进一步表明：肝素联合硝苯地平治疗 HDP 患者能更有效控制血压并且改善妊娠结局。观察组患者的血液高凝状态较对照组改善明显。分析其原因为，单一使用降压药能降低 HDP 患者血压，但无法改善患者的病理性血液高凝状态，而硝苯地平联合肝素治疗，在降压的同时改善血液高凝状态。既往研究表明7，肝素通过降低血液粘稠度能够有效的缓解血管内皮的损伤，而 HDP 的发病机制与血管内皮损伤关系密切，联合应用两种药物，可以从两个不同角度控制改善血压，以达到一个更好的妊娠结局。综上所述，硝苯地平联合肝素治疗 HDP 患者疗效确切，可以通过在直接降血压治疗的基础上改善患者血的血液高凝状态而达到一个更理想的降压效果和满意的妊娠结局，同时肝素抗凝治疗并不会带来严重的产后出血风险，说明硝苯地平联合肝素的临床使用是有足够安全性的。因此，这一治疗方案对于 HDP 患者有较高的临床应用价值。参考文献参考文献 1 杨萱.硝苯地平用于妊娠期高血压对产妇妊娠结局的影响J.大医生,2022,7(21):82-85.2 徐静.阿司匹林及低分子肝素对妊娠期高血压患者血液高凝状态及妊娠结局的意义分析J.中国实用医药,2022,17(2):172-174.3 中华医学会妇产科学分会妊娠期高血压疾病学组.妊娠期高血压疾病诊治指南（2020）J.中华妇产科杂志,2020,55(4):227-238.4 颜雪梅,孔繁娟,王爱华.20122019 年妊娠期高血压疾病流行现状及妊娠结局分析J.中国生育健康杂志,2021,32(3):252-256.5 唐瑶,顾蔚蓉,李笑天.2021年ISSHP妊娠期高血压疾病临床指南解读J.实用妇产科杂志,2022,38(11):832-838.6 刘颖.低分子肝素联合硝苯地平缓释片对妊娠期高血压疾病患者血管内皮生长因子、胎盘生长因子、脂联素水平的影响J.医学理论与实践,2022,35(17):2969-2971.7 段利利,张婵,李志斌,等.硝苯地平联合依诺肝素对重度子痫前期剖宫产的影响J.西北药学杂志,2022,37(3):144-148.（收稿日期：2023-5-29）（上接第1965页）中性粒细胞胞质抗体相关血管炎肾损害中的研究进展J.肾脏病与透析肾移植杂志,2013,22(05):455-460.4 朱志伟.NGAL 检测对急性肾小球肾炎早期肾损伤诊断的临床意义J.数理医药学杂志,2021,34(05):678-679.5 汤绚丽,朱斌,胡云琴,等.IgG4 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