2022年河南省新城疫专项监测评估.pdf

调查研究上海畜牧兽医通讯2 0 2 3年第5期2022年河南省新城疫专项监测评估王华俊，闫若潜*，刘光辉，房大学，郭洛生，方先珍（河南省动物疫病预防控制中心，河南省重大动物疫病监测预警及防控重点实验室，河南郑州450 0 0 8)摘要：为降低河南省家禽新城疫传播风险，推动家禽养殖业健康安全发展，为新城疫综合防控提供科学依据，按照河南省2 0 2 2 年动物疫病监测与流行病学调查计划要求，分阶段采集家禽血清学和病原学样品，采用HI试验和荧光RT-PCR方法进行新城疫专项监测，监测新城疫血清抗体和病毒核酸。结果显示，河南省新城疫抗体场群合格率和个体合格率均在9 7%以上，远超出国家7 0%免疫合格率的标准，检出3个场点40 份病毒核酸阳性样品，场群阳性率为2.40%，个体阳性率为1.0 9%。结果表明：河南省新城疫整体防控效果较好，免疫抗体水平较高，建立了良好的免疫屏障，但检出少数病毒核酸阳性样品，感染风险仍存在，需要做好定期监测和流行病学调查，及时补免、补防和消除隐患。关键词：新城疫；免疫抗体；监测；评估新城疫（newcastle disease,ND）是由新城疫病毒（newcastlediseasevirus，ND V）引起的一种禽类的急性、热性、高度接触性烈性传染病 1-2 ，世界动物卫生组织将其列为A类动物疫病，我国将其列为一类动物疫病,重点防控禽类疾病。NDV属于副黏病毒科，为负义、单链RNA病毒，由囊膜和核衣壳组成病毒粒子 3-41 。该病毒大小不一,形状多样。目前，科学界通常认为NDV只有1 个血清型，为APMV-1 型，但是有多个基因型 5。自从2 0 世纪50 年代开始，已有新城疫疫苗诞生并应用于临床，但该病至今仍给家禽生产造成重大危害6。家禽感染NDV后，可表现全身性的炎性出血、水肿、食欲缺乏或废绝、不愿走动、精神不佳，甚至出现严重的神经症状,死亡率较高，即使康复，生产性能也受到严重影响 7-8 。鸡感染NDV后，依据患病鸡发病时间长短和临床症状表现，可以将新城疫病分为最急性、急性、亚急性3个类型，最急性和急性类型死亡率较高。也有NDV感染人的报道，但极少见 9 。目前，疫苗免疫仍是防控新城疫最经济、最有效的防控手段。随着科学技术的不断进步，疫苗制备工艺及其佐剂技术得到提升，NDV多种毒株疫苗研制成功，灭活疫苗和弱毒疫苗同时上市，新城疫疫苗免疫保护效果较理想。为摸清河南新城疫免疫抗体和野毒感染情况，按照河南省2 0 2 2 年动物疫病监测与流行病学调查计划方案进行采样、检测，并进行统计分析，以期为该地区新城疫病防控提供数据支撑，进一步实施科学、精准、有效防控。1材料与方法1.1样品采集2022年3一4月和1 1 一1 2 月，从河南省各个省辖市共采集6 430 份样品，其中：血清学样品2 7 57 份，全部来自9 4个鸡群；病原学样品36 7 3份，分别来自1 0 1 个鸡场、9 个鸭场、2 个鹅场、8 个市场、5个野禽栖息地。采样要求：每个省辖市随机抽检种禽场、商品代场、水禽场、屠宰场、市场等5个场点，随机采集野鸟栖息地1 个。每个场点随机采样1 0 30 份。作者简介：王华俊（1 9 8 4一），男，硕士，兽医师，主要从事动物疫病实验室检测与动物疫病防控。*通信作者,E-mail:32调查研究1.2主要仪器全自动核酸提取仪，西安天隆科技公司产品；7 50 0 型荧光定量PCR仪，美国ABI公司产品；二级生物安全柜，新加坡ESCO公司产品；微量移液器，德国eppendorf公司产品。1.3 主要试剂新城疫血清抗体检测抗原及阳性血清，哈尔滨维科生物科技公司产品；新城疫病毒核酸荧光RT-PCR检测试剂盒，中山达安基因股份公司产品；核酸提取试剂盒，天隆生物科技有限公司产品。1.4检测方法及判定标准参照新城疫诊断技术(GB/T16550-2020)10I国家标准进行检测，免疫抗体测定采用血凝试验-血凝抑制试验检测，当抗体效价51 g2时，判为个体免疫合格；当个体抗体合格率7 0%时，判为群体免疫合格。采用全自动核酸提取仪提取禽咽肛拭子和环境样品病毒RNA，新城疫病毒荧光RT-PCR方法检测病毒核酸，结果判定严格按照试剂盒说明书要求判定。1.5检测结果的统计分析将血清学和病原学检测数据分别录人Excel 2010软件中,并按照不同场点、不同区域和不同种属家禽/野禽检测结果进行数据统计分析。不同场点家禽/野禽检测结果按照种禽场、商品代场、屠宰场、市场和野禽栖息地等5类场点进行统计，不同区域家禽/野禽检测结果按照豫东、豫南、豫北、豫西和豫中等5个区域进行统计分析，不同种属家禽/野禽检测结果按照鸡拭子、鸭拭子、鹅拭子和野禽拭子进行统计，多维度综合评估河南省新城疫免疫和感染情况。2结果与分析2.1总体情况本次调查共检测9 4个场点2 7 57 份血清样品，其中抗体效价合格场点9 2 个，场群合格率为9 7.8 7%，抗体效价合格数为2 7 2 5份，个体合格率为9 8.8 4%；共检测1 2 5个场点36 7 3份病原学样品，检出3个场点40份阳性样品，3个阳性场点包括1 个屠宰场（30 份）和2 个养殖场（2 份、8 份），场群阳性率为2.40%，个体阳性率为1.0 9%。2.2不同场点禽新城疫检测结果不同监测场点血清学检测结果显示，种禽场的免疫抗体合格率最高，为9 9.37%；商品代场和屠宰场免疫抗体合格率也均在9 5.0 0%以上，免疫效果良好。病原学检测结果显示，检出8 份屠宰场样品病毒核酸阳性，阳性率为3.2 0%，商品代场检出32 份病毒核酸阳性样品，阳性率为1.2 1%，种禽场、市场和野禽栖息地均未检测阳性样品。不同场点新城疫检测结果见表1。场点类别合格率/%种禽场342商品代场2.355屠宰场60市场/野禽栖息地注：“表示无数据。上海畜牧兽医通讯2表1 不同场点禽新城疫检测结果统计表血清学检测样品数/份99.3796.1595.00/2023年第5期病原学检测样品数/份阳性率/%4502648250275501.213.2000:33调查研究2.3不同区域禽新城疫检测结果不同区域禽新城疫血清学检测结果显示，河南省各区域免疫抗体合格率均较高，其中：豫南地区免疫抗体合格率最高，为9 9.7 9%；最低的为豫东地区，为9 6.1 9%。病原学检测结果显示，全省平均病原学阳性率为1.0 9%，仅豫北地区检测出40 份新城疫病原学核酸阳性样品（阳性率2.7 3%）。不同区域禽新城疫检测结果见表2。项目场点/个豫东8豫西9豫南16豫北38豫中23合计/平均942.4不同种属禽新城疫检测结果血清学样品全部来自鸡场，全省鸡只平均免疫抗体合格率为9 8.8 4%。病原学检测结果显示：从鸭拭子中检出30 份NDV核酸阳性样品，阳性率为1 0.7 1%；其次从鸡拭子中检出1 0 份NDV核酸阳性样品，阳性率为0.30%；从鹅拭子和野禽拭子中均未检测出阳性样品。不同种属禽新城疫病原学检测结果见表3。样品种类鸡拭子鸭拭子鹅拭子野禽拭子3讨论本调查采样时间选择了3一4月份和1 1 一1 2 月份，为季节转换时节。该时节家禽传染病易暴发，采样时间代表性较强。此外，本调查采样时间集中、覆盖面较广、检测快速且操作容易、检测结果准确，具有很强的指导意义。血清学检测结果显示，河南省新城疫抗体场群合格率和个体合格率均在9 7%以上，远远超出国家群体免疫大于7 0%的标准，表明河南省ND疫苗免疫效果较好；病原学检测结果显示，共检出3个场点40份病原学阳性样品，包括1 个屠宰场和2 个养殖场，因此存在一定的感染风险，尤其是在养殖环节中检测出病毒核酸阳性，养殖场户及有关部门须高度重视，及时消灭传染源。建议省动物疫病预防控制中心在检出阳性样品和场点后及时将信息反馈给地市和县，以便及时处置和彻底消毒，消除安全隐患。禽类感染低毒力NDV往往会表现出亚临床症状,死亡率较低，但是感染强毒株NDV后临床症状明显，疾病传播快，死亡率较高，且NDV可以通过野禽传染给家禽，危害性较大 1 1。通过研究本地区NDV分子遗传变异规律，筛选合适的疫苗毒株免疫家禽是预防家禽新城疫感染非常有效且经济的手段，河南省引导广大养殖场/户及时免疫ND疫苗，同时通过省-市-县三级动物疫控部门以及养殖场实验室、第三方实验室等监测抗体效价水平，及时补免补防，形成了坚强的免疫屏障，取得了较好的防控效果，消除了安全隐患。近年来，不断有学者报道水禽感染NDV后出现死亡 1 2-1 3，通过分离毒株、PCR扩增、测序鉴定等手段，研究发现基因VI型NDV对鸭、鹅等水禽的致病力较强,其是导致我国水禽新城疫病的主要原因。本次调查发现，较多的水禽养殖场户对新城疫认识不足，过于轻视，甚至毫无防控意识，认为NDV仅感染家禽，对鸭、上海畜牧兽医通讯2表2 不同区域禽新城疫检测结果统计表血清学检测样品/份合格样品/份合格率/%2362272442414724711 131111567467127572.725表3不同种属禽新城疫病原学检测结果统计表检测样品/份3.28328060502023年第5期病原学检测场点/个样品/份96.1927598.771499.792498.595099.552898.84125阳性样品/份10300034阳性样品/份阳性率/%0390072001 4634082503.67340阳性率/%0.3010.71002.731.09调查研究鹅等水禽不致病。由于未免疫新城疫疫苗，水禽存在感染新城疫的风险，且携带病毒的野禽容易将 NDV传染给水禽，进而传染家禽。为了做好新城疫防控，需要研究NDV在水禽中的传播机制，加强宣传，提高水禽养殖场户对新城疫的认识，做好新城疫免疫工作，同时有关政府部门、养殖场/户、第三方实验室等做好免疫抗体监测工作，及时发布监测预警信息，做好补免、补防。上海畜牧兽医通讯2 0 2 3年第5期参考文献1J MOLOUKI A,PEETERS B.Rescue of recombinant Newcastle disease virus:Current cloning strategies and RNApolymerase provision systemsJJ.Archives of Virology,2017,162(1):1-12.2 杨海波，王英华，宋丹，等，2 0 1 9 年河南省新城疫专项监测评估 J现代牧业，2 0 2 0，4（3）：42-45.3J BELLO M B,YUSOFF K,IDERIS A,et al.Diagnostic and vaccination approaches for Newcastle disease virus in poultry:The current and emerging perspectivesJJ.BioMed Research International,2018:7278459.4J KAPCZYNSKI D R,AFONSO C L,MILLER P J.Immune responses of poultry to Newcastle disease virus JJ.Developmental&Comparative Immunology,2013,41(3):447-453.5陈严玉，刘新鑫，李俊姣，等.gga-miRNA155介导新城疫病毒感染机制 J中国兽医学报，2 0 1 8，38（3)：458-46 3.6J UL-RAHMAN A,ISHAQ H M,RAZA M A,et al.Zoonotic potential of Newcastle disease virus:Old and novelperspectives related to public healthJJ.Reviews in Medical Virology,2022,32(1):e2246.7 范钦磊OIE开展区域化管理的动物疫病名录及无疫认证认可要求 J畜牧与兽医，2 0 1 9，51（2）：1 2 6-1 2 98王玲玲，顾盼，唐晓莲，等新城疫病毒分子生物学特性及检测方法的研究进展 J重庆理工大学学报（自然科学），2017,31(4):95-99.9J MOHARAM I,EL RAZIK A A,SULTAN H,et al.Investigation of suspected Newcastle disease(ND)outbreaks inEgypt uncovers a high virus velogenic ND virus burden in small-scale holdings and the presence of multiple pathogensJ.Avian Pathology,2019,48(5):406-415.10国家市场监督管理总局，国家标准化管理委员会。新城疫诊断技术：GB/T16550一2 0 2 0 S北京：中国标准出版社，2 0 2 0.1 1 丁壮，尹仁福，薛聪，等。新城疫流行病学新特点及鹅新城疫防控策略 J中国兽医学报，2 0 1 5，35（1)：1 59-1 6 8.1 2 刘华雷，郑东霞，孙承英，等。1 9 9 7 一2 0 0 5年中国水禽新城疫分子流行病学特点分析。畜牧兽医学报，2 0 0 9，40（1）：145-148.1 3胡北侠，杨少华，许传田，等基因V型新城疫强毒对樱桃谷鸭的致病性试验 J中国家禽，2 0 1 2，34（1 8）：1 3-1 5.本文编辑张琳35