1064nm激光致小型猪皮肤损伤效应及其修复的研究.pdf

激光生物学报ACTALASERBIOLOGYSINICAVol.32 No.4Aug.2023第 32 卷第 4 期2023 年 8 月收稿日期：2023-05-11；修回日期：2023-06-07。基金项目：国家自然科学基金项目（81901907）。作者简介：马琼，实验师，主要从事激光生物学的研究。*通信作者：康宏向，副研究员，主要从事激光生物学的研究。E-mail:。1 064 nm激光致小型猪皮肤损伤效应 及其修复的研究马琼1，刘智搏1，隗雨2，崔玉芳1，罗振坤1，康宏向1,2*（1.中国人民解放军军事科学院军事医学研究院辐射医学研究所，北京 100850；2.河北大学生命科学学院，保定 071000）摘要：为探讨不同剂量1 064 nm激光照射后猪皮肤组织损伤效应和修复的规律，为扩大激光的临床应用提供指导，本文采用基模光纤激光器输出不同功率1 064 nm的连续激光，通过方格阵列法对活体猪皮肤进行单次照射，剂量由小到大依次照射后，即刻观察皮肤损伤反应并计算其发生率，采用加权概率单位法计算损伤阈值ED50，并在照后6 h至28 d动态观察激光皮肤损伤斑的愈合情况和病理形态学变化。随着激光辐照剂量的增加，皮肤损伤由轻到重依次出现红斑、白斑和焦斑等不同类型的损伤斑。剂量低于70.0 J/cm2时，猪皮肤损伤表现为可逆的红斑反应；剂量为192.2 J/cm2时，猪皮肤损伤以焦斑为主（发生率约为51.4%）；而剂量为425.0 J/cm2时，猪皮肤焦斑发生率可达到100.0%。1 064 nm激光致猪皮肤损伤阈值ED50为50.8 J/cm2。病理形态学观察结果显示，照射后328 d，各照射组创面均出现不同程度的修复趋势，但这种趋势随着照射强度的增加而趋于减弱，且高于192.2 J/cm2的激光辐照组恢复趋势缓慢。小型猪皮肤经1 064 nm激光照射后，辐照剂量越大，皮肤损伤越重，组织修复趋势越慢，显示出较好的量效关系。本研究为激光皮肤损伤和修复过程的医疗应用提供了重要的试验和理论依据。关键词：1 064 nm激光；小型猪；皮肤损伤阈值；皮肤损伤效应；修复中图分类号：TN249 文献标志码：A DOI：10.3969/j.issn.1007-7146.2023.04.004Research on the Damage Effects and Repair Rules of Miniature Pig Skin Induced by a 1 064 nm LaserMA Qiong1,LIU Zhibo1,WEI Yu2,CUI Yufang1,LUO Zhenkun1,KANG Hongxiang1,2*(1.Institute of Radiation Medicine,Academy of Military Medical Sciences,Beijing 100850,China;2.College of Life Sciences,Hebei University,Baoding 071000,China)Abstract:The damage effects and repair rules of pig skin tissue after different doses of 1 064 nm laser irradiation were ex-plored,so as to provide guidance for expanding the safe application of laser in clinical practice.This article used a fundamental mode fiber laser to output 1 064 nm continuous laser with different powers.Live pig skin was irradiated at multiple spots one time by using a grid-array method.The skin injury reaction was observed and its incidence was calculated immediately after la-ser irradiation from low to high doses.The weighted probit method was used to calculate the damage threshold ED50.The heal-ing and pathological changes after laser-induced skin injury were observed dynamically within 6 h and for 28 d after laser irra-diation.With the increase of irradiation dose,laser-induced skin injuries ranging from mild to severe appeared erythema,white spot and burnt spot in turn.When the dose was lower than 70.0 J/cm2,a reversible erythema predominantly occurred.When the dose was 192.2 J/cm2,a burnt spot predominantly occurred with an incidence of about 51.4%.However,the incidence of burnt 研究论文313第 4 期随着激光技术在医疗、军事和工业的应用越来越广泛1-2，激光意外损伤事故时有发生，尤其是工业或军事应用中高功率激光造成的意外损伤。一直以来，激光生物学效应的研究以往多集中在激光眼损伤，对激光所致的皮肤损伤效应研究也有报道3-5。激光辐照对皮肤的损伤程度跟激光功率密度和辐照时间的长短有关6。当前，激光在皮肤的治疗或美容医疗中已有广泛的应用7-9。多数研究认为，激光对皮肤的治疗效果、损伤效果主要是利用激光的光热效应，即激光与皮肤组织相互作用时产生的热量，使组织达到治疗应有的热效应或是损伤程度10-12。Dang等13研究发现，1 064 nm激光非消融治疗可以提高小鼠皮肤弹性，增加皮肤组织胶原蛋白。他们认为，光热效应促进了I型胶原蛋白的合成。Kim等14利用1 064 nm激光，通过光热分解效应消融大鼠的表皮和真皮，以去除良性皮肤病变。他们认为，该激光是治疗良性皮肤病的替代治疗选择。合理有效地利用激光与生物组织相互作用时产生的热量，使组织达到应有的热效应或是损伤程度，这是激光对疾病进行诊断或治疗的关键。然而，防止多余的热量对临近正常组织造成意外损伤是激光医学需要防护的最主要的内容。过大的激光剂量，如高功率工业激光或激光武器使用不当可能导致皮肤发生激光烧伤，而且不同剂量的激光辐照会对皮肤产生不一样的效果。开展多激光辐照剂量的试验研究能够为临床治疗或者损伤防护提供重要的理论支撑。当前高功率激光导致的皮肤严重损伤及愈合研究较少。激光皮肤损伤愈合是一个极复杂的过程，而且涉及的重要生物学效应及相关机制也亟待深入研究。前期本课题开展的30 W/mm2 1 064nm激光不同辐照时间对小鼠皮肤热损伤的试验研究发现：辐照时间为0100 ms时，皮肤组织损伤可恢复；150280 ms时，皮 肤 组 织 出 现 水 肿 现 象 和 热 凝 固 损 伤；280550 ms时，皮肤表皮层出现汽化现象，真皮层发生变性，损伤斑周围出现焦痂；大于 660 ms时，皮肤表皮真皮层出现汽化现象，皮下组织发生变性，伤口渗出组织液15。前期本课题组开展的400 ms 1 064 nm激光不同功率密度对小鼠皮肤热损伤的试验研究发现：功率密度小于958 W/cm2时，皮肤表皮层泛红且损伤可逆；9581 160 W/cm2 时，皮肤损伤呈白色水疱状；1 1601 370 W/cm2时，皮肤损伤呈浅坑状焦黄斑，且周围伴有鼓起的白色皮肤水疱；1 3702 190 W/cm2时，皮肤损伤呈红色坑状斑，且周围伴有黑黄色焦痂16。小型猪皮肤与人皮肤结构较啮齿类动物更相似，具有相似的皮肤生理结构、表皮形态学、更新周期以及创伤修复模式，甚至皮肤烧伤后的体液和代谢也非常相似，故小型猪可作为激光灼伤研究更理想的动物模型。本研究以1 064 nm激光为光源，采用不同剂量和多点依次单次照射方式对小型猪进行照射，建立激光猪皮肤损伤的动物模型，观察激光皮肤损伤斑及其损伤反应发生率，计算激光皮肤损伤阈值ED50，并通过观察猪皮肤损伤后的病理形态学改变，探讨1 064 nm激光照射后小型猪皮肤组织损伤效应和修复的变化特点及其剂量效应关系。1材料与方法1.1试验动物贵州白色小型香猪（Sus barbatus）6只，体重为2025 kg，购自北京科兴实验动物饲养中心，动物生产许可证编号为SCXK（北京）2017-0003，由本院实验动物中心统一单笼饲养。在试验前常规饲养7 d，观察无异常后方可进行试验。本动物试验方案spots could reach 100.0%at a dose of 425.0 J/cm2.The damage threshold ED50 of pig skin damage caused by a 1 064 nm laser is 50.8 J/cm2.328 d after irradiation,pathomorphological results showed that the wounds of each irradiation group appeared varying degrees of repair trend.However,this trend tended to be weakened with the increase of laser irradiation intensity,and the recovery trend of laser irradiation groups higher than 192.2 J/cm2 was slow.After irradiation with the 1 064 nm laser on pig skin,the higher the laser irradiation dose is,the more serious the skin injury is and the slower the wound repair is,indicating a good dose-effect correlative relationship.This study provides an important experimental and theoretical basis for the medical ap-plication of laser irradiation-induced skin injury and repair process.Key words:1 064 nm laser;miniature pig;skin damage threshold;skin damage effects;repair （Acta Laser Biology Sinica,2023,32(4):312-320）页眉文章标题马琼等：1 064 nm激光致小型猪皮肤损伤效应及其修复的研究马琼等：1 064 nm激光致小型猪皮肤损伤效应及其修复的研究激光生物学报314第 32 卷获得了本院实验动物中心批准，并根据IACUC-DW-ZX-2019-502指南对猪进行所有动物试验。1.2激光皮肤损伤的照射方法小型猪经 3%戊巴比妥钠肌肉麻醉后剃毛备皮，在脊柱单侧皮肤上画定一个510方格阵列的激光照射区域，方格边长为3 cm，面积为15 cm30 cm。本试验采用国防科技大学自主研制的基模光纤激光器，输出的1 064 nm连续激光经光纤传导与激光输出头耦合，经透镜扩束和准直后，照射活体猪皮肤；通过电脑程序控制激光功率和照射时间，并通过PD300-3W-V1激光功率计测量激光照射功率；定位环用于控制激光装置尖端到皮肤的距离为10 cm。该激光器连续输出激光的功率P的范围为121 112 W，激光器的输出功率稳定，与电流具有良好的线性关系（线性相关系数R20.99）。设定激光辐照时间t为0.3 s，光斑直径d为1 cm，利用公式 Q=Pt 和 H=4Qd2计算激光能量 Q 和激光辐照剂量 H，得出激光照射的最小激光辐照量为4.59 J/cm2，最大激光辐照量为425.00 J/cm2。每个方格为一个照射点位，每列5个方格给予相同的激光辐照剂量，激光功率由小到大依次进行照射。激光照射活体小型猪皮肤的光路如图1所示。试验的照射方法如图2所示。图1激光照射活体小型猪皮肤的光路图Fig.1Light path diagram of laser irradiation on living miniature pig skin图2小型猪皮肤激光照射区域510方格阵列和照射方法Fig.2Laser radiation area of 510 grid arrays and method on pig skin（a）试验用小型猪；（b）方格阵列照射区域；（c）照射中；（d）照射后。(a)Experimental pig;(b)Grid array in the irradiated region;(c)During laser irradiation;(d)After laser irradiation.1.3激光皮肤损伤和愈合的宏观观察激光辐照剂量低时，皮肤主要出现红斑反应；辐照剂量增加到一定数值时，皮肤出现中心小白色凝固斑，伴外周较大环状红斑；剂量再增大时，白色凝固斑面积增大，中心部位的皮肤出现淡褐色焦斑17。激光照射功率由低到高依次照射，照射过程中记录各类型损伤斑（红斑、白斑和焦斑）以及出现时的辐照剂量，特别是于照后即刻动态记录红斑颜色及持续时间；于照射后6 h、3 d、7 d、14 d、21 d和28 d共6个时间点宏观观察并拍照记录皮肤损伤创面的愈合情况。1.4损伤反应的发生率及皮肤损伤阈值的计算激光照射后皮肤出现红斑是最轻的反应，也是可逆反应。红斑反应的发生率是以照后即刻出现315第 4 期肉眼可见的红斑（血管充血）为判定标准的，由两人观察核对为准。记录红斑发生的点数和照射的总点数，据此计算红斑反应发生率（计算公式：发生率=损伤斑点数照射点总数100%）；照后观察并记录白斑包括中心小白斑发生点数和照射总点数，据此计算白斑反应的发生率；同样的方法计算焦斑反应的发生率。激光损伤阈值研究的经典统计学方法是加权概率单位法，即Bliss法18，以激光剂量的对数值为横坐标，以红斑反应百分率转化成概率单位为纵坐标，建立线性回归方程，求出50%损伤（概率单位为5）对应的激光剂量，即为损伤阈值，并用ED50来表示。1.5皮肤损伤创面愈合的病理学观察于激光照射后6 h、3 d、7 d、14 d、21 d和28 d共6个时间点，分别安乐死处死1只动物进行皮肤创面组织取材，置于4%中性福尔马林溶液中保存，制成石蜡切片，然后进行苏木精-伊红染色（hematoxy-lin-eosin staining，HE），光镜下观察皮肤创面组织在激光照射后不同时间的病理形态学变化（放大倍数为100）。1.6统计学分析采用SPSS软件进行数据分析，直接使用软件进行概率单位加权回归法计算损伤阈值ED50以及95%置信区间。2结果与分析2.1激光皮肤损伤创面愈合的宏观变化小型猪皮肤经 29.3425.0 J/cm2剂量的1 064 nm激光由低到高依次照射0.3 s后，即刻进行皮肤损伤部位的宏观观察，发现：随着剂量增高，皮肤损伤由轻至重依次为红斑、中心小白斑、白斑、中心小焦斑、焦斑等各种类型的损伤，其中红斑出现数秒、数十秒或10 min后消失；而中心小白斑、白斑、中心小焦斑和焦斑外周均伴有环形红斑，且30 min或大于1 h后才消失，如图3所示。激光照射后6 h、3 d、7 d、14 d、21 d和28 d，依图3激光照射后1 h猪皮肤各类型损伤斑的变化Fig.3The Changes of different wounds on pig skin at 1 hour after laser irradiation（a）激光照射后即刻；（b）激光照射后1 h。(a)Immediately after laser irradiation;(b)1 hour after laser irradiation.据损伤斑严重程度选择低、中、高3个剂量，分别为134.0、192.2和308.6 J/cm2，动态观察激光照射后皮肤损伤创面的宏观愈合情况（图4）。试验动物在抓取固定过程中容易发生剧烈碰撞而导致伤口撕裂，多次麻醉会明显增加动物死亡的风险，因此，本试验采用不同时间点观察不同待处死动物的方法，而未采取观察28 d组动物的方法。结果显示：不同剂量照射后6 h，134.0 J/cm2低剂量组损伤斑以凝固斑为主，且创面肿胀但未发生破损，192.2 J/cm2中剂量组损伤斑以白色凝固斑和中心小焦斑为主，308.6 J/cm2高剂量组损伤斑以焦斑为主，中、高剂量组创面均发生破损，并伴有不同程度激光烧灼坑；照射后3 d，激光皮肤各类损伤斑创面干燥，未见渗出，皮肤损伤面积随剂量增加而增大；照射后7 d，各损伤斑创面开始出现不同程度的结痂，且损伤创面较初始创面有增大的趋势，尤其是308.6 J/cm2高剂量组创面结痂明显，且损伤创面变大；照射后14 d，损伤斑创面已经完全结痂，且134.0 J/cm2低剂量组创面有明显缩小的趋势；照射后21 d和28 d，除低剂量组愈合明显外，中、高剂量组损伤创面结痂仍较明显，未见脱痂迹象，创面愈合缓慢。从以上结果可看出，激光辐照剂量越大，皮肤损伤越明显（表现为创面面积大、结痂程度重等），创面愈合速度越缓慢，呈现出较好的剂量效应关系。2.2皮肤损伤反应的发生率及损伤阈值小型猪经1 064 nm激光照射0.3 s后，激光辐页眉文章标题马琼等：1 064 nm激光致小型猪皮肤损伤效应及其修复的研究马琼等：1 064 nm激光致小型猪皮肤损伤效应及其修复的研究激光生物学报316第 32 卷图4不同剂量激光照射后不同时间皮肤损伤愈合的宏观观察Fig.4Macroscopic healing of skin injury at different times after different doses of laser irradiation（a）采集照射后6 h图像的1号试验猪；（b）采集照射后3 d图像的2号试验猪；（c）采集照射后7 d图像的3号试验猪；（d）采集照射后14 d图像的4号试验猪；（e）采集照射后21 d图像的5号试验猪；（f）采集照射后28 d图像的6号试验猪。蓝色箭头示意白斑损伤斑，红色箭头示意中心小焦斑损伤斑，绿色箭头示意焦斑损伤斑。(a)Experimental pig No.1 with images collected 6 h after irradiation;(b)Experimental pig No.2 with images collected 3 d after irradiation;(c)Experimental pig No.3 with images collected 7 d after irradiation;(d)Experimental pig No.4 with images collected 14 d after irradiation;(e)Experimental pig No.5 with images collected 21 d after irradiation;(f)Experimental pig No.6 with images collected 28 d after irradiation.Blue arrow indicated the white spot,red arrow indicated the small burned dot in the center of the white spot,and green arrow indicated the burned spot.317第 4 期照剂量为 46.7 J/cm2时，猪皮肤红斑发生率仅为34.3%；剂量为52.5 J/cm2时，猪皮肤红斑发生率为43.3%；剂量达到70.0 J/cm2时，猪皮肤红斑发生率达到100.0%（表1），但未见白色凝固斑损伤。图5激光剂量对数与红斑发生概率单位的关系Fig.5Relationship between laser logarithmic dose and probit of erythema incidence 页眉文章标题马琼等：1 064 nm激光致小型猪皮肤损伤效应及其修复的研究马琼等：1 064 nm激光致小型猪皮肤损伤效应及其修复的研究表1激光辐照剂量与猪皮肤红斑发生率Tab.1Laser irradiation dose and incidence of erythema in pig skinGroupLaser power/WIrradiation dose/(Jcm-2)Injured/ExposedIncidence of erythema/%1122.346.712/3534.32137.552.518/3551.43152.758.425/3083.34167.964.227/3090.05183.270.030/30100.0红斑反应是激光皮肤损伤最轻且可逆的损伤反应，利用上表中红斑反应发生率数据并通过加权概率单位法计算激光皮肤损伤阈值，以激光剂量的对数值为横坐标，以红斑反应百分率转化成概率单位为纵坐标，建立线性回归方程y=13.039x-17.23，且线性相关系数R2=0.966 2，求出50%损伤（概率单位为5）对应的激光剂量作为损伤阈值，用ED50来表示。计算得出ED50=50.8 J/cm2，且置信系数=0.05时，即95%置信区间为47.953.0 J/cm2（图5）。进一步对激光照射后，损伤斑发生率的分析结果显示：辐照剂量为104.9 J/cm2时，猪皮肤红斑和白斑发生率分别为13.3%和86.7%（n=30）；剂量增加到192.2 J/cm2时，白斑、焦斑发生率分别为48.6%和51.4%（n=35）；剂量增加到308.6 J/cm2时，白斑、焦斑发生率分别为11.4%和88.6%（n=35）；而当剂量达到425.0 J/cm2时，猪皮肤焦斑发生率达到100.0%。以上结果表明，激光剂量越高，皮肤损伤越重。2.3激光皮肤损伤创面愈合的病理学变化1 064 nm激光照射后6 h、3 d、7 d、14 d、21 d和28 d，动态观察小型猪皮创面愈合的病理形态学改变（图6）。照后6 h，真皮浅层腺体周围结构松散，192.2 J/cm2组表皮和真皮间出现裂隙，308.6 J/cm2组表皮下胶原变性、局部表皮细胞明显坏死。照后 3 d，134.0 J/cm2组局部表皮增厚，仍可见真皮浅层腺体结构松散；192.2 J/cm2和 308.6 J/cm2组可见大片表皮坏死脱落，胶原变性、表皮细胞坏死加重。照后7 d，各组新生粗厚表皮向创面延伸生长，192.2 J/cm2和308.6 J/cm2组真皮浅层局部可激光生物学报318第 32 卷见变性坏死的胶原纤维和大量的炎性细胞。照后14 d，134.0 J/cm2组局部表皮较厚且已经完全覆盖创面，表皮下真皮浅层新生胶原纤维和肉芽组织明显，且肉芽组织中含有较多梭形的成纤维细胞；192.2 J/cm2组新生表皮形态不佳，真皮浅层新生胶原纤维明显并向创面中心延伸生长；308.6 J/cm2组新生表皮向创面延伸生长但未覆盖创面表面，仍可见片状炎性细胞浸润灶，真皮浅层胶原增生不良。照后21 d，134.0 J/cm2组除局部表皮较厚外，表皮和真皮层基本恢复至正常组织结构；192.2 J/cm2组新生粗厚表皮下可见部分肉芽组织，真皮浅层新生胶原纤维明显增加；308.6 J/cm2组坏死脱落的表皮下新生表皮已覆盖创面但粗厚形态欠佳，真皮浅层可见明显的肉芽组织、胶原纤维增多但纤细且结构混乱。照后28 d，134.0 J/cm2组表皮厚度变薄，表皮真皮层基本恢复至正常组织结构；192.2 J/cm2组新生表皮仍较厚，真皮浅层胶原纤维明显增多但仍未达到正常水平；308.6 J cm2组新生表皮较厚，真皮浅层图6激光照射后不同时间皮肤创面愈合的病理形态学变化（HE，100）Fig.6Pathomorphological changes in skin wound healing at different times after laser irradiation(HE,100)蓝色箭头示意激光皮肤组织损伤及修复的区域。Blue arrow indicated the regions of laser irradiation-induced skin injury and repair.319第 4 期仍可见晚期肉芽组织，胶原纤维仍纤细且含量远不及正常水平。3讨论激光生物学效应的研究一直是激光医学领域研究的前沿内容，而激光对皮肤的损伤效应的研究又是激光生物学研究的重要内容，目前涉及此方面的研究还非常少。皮肤作为人体最外层的器官，相较于其他组织更易遭受热损伤。在激光热疗过程中，皮肤表面温度会瞬间升高到一定的值，这一过程极易引起皮肤灼伤，进而诱发皮肤胶原蛋白变性，生物组织内部的蛋白质以及细胞器的结构发生变化，导致细胞死亡甚至组织坏死19。本研究采用与人的皮肤结构相似的小型猪作为试验动物。小型猪表皮层同样是由基底层、棘层、颗粒层、透明层和角质层组成，真皮层则由乳头层和网织层构成，还包含皮下组织及皮肤附属器20-21。1 064 nm激光照射后猪皮肤损伤和修复的宏观观察结果显示，随着辐照剂量的增加，猪皮肤损伤由轻到重依次出现红斑、中心小白斑、白斑、中心小焦斑和焦斑。激光照射皮肤出现红斑、白斑、焦斑的辐照剂量分别为46.7、104.9、134.0 J/cm2；皮肤白斑损伤创面在照后37 d仍清晰可见，14 d时消退结痂；皮肤焦斑损伤创面在照后37 d形成薄痂，14 d结痂明显，并且在照后28 d仍清晰可见；以白斑损伤为主的134.0 J/cm2组皮肤创面愈合较快，且在28 d基本愈合，以焦斑损伤为主的192.2 J/cm2组和308.6 J/cm2组皮肤创面愈合缓慢，在28 d时结痂仍较明显且未见脱痂迹象。以上结果表明，激光辐照剂量越高，皮肤损伤越严重，愈合速度越缓慢。马宝章等22研究发现，1.06 m连续激光照射白毛猪的皮肤损伤阈值ED50为59.4 J/cm2。本研究获得的皮肤损伤阈值ED50为50.8 J/cm2，两者数值接近。猪品种、激光照射条件不相同导致数值存在一定的差异；试验动物个体差异（皮肤厚度、颜色、部位等）导致相同剂量照射后皮肤损伤斑并不完全一致，如192.2 J/cm2时，白斑、焦斑发生率分别为48.6%和51.4%，另外，皮肤组织的高度不均匀性导致激光辐射热传导过程复杂，且存在较大差异。皮肤创面损伤和修复的病理形态学观察结果显示：激光照射后早期（6 h和3 d），192.2 J/cm2组表皮和真皮间出现裂隙；随着剂量增大，308.6 J/cm2组表皮下出现胶原变性，局部表皮坏死。照射后中期（7 d和14 d），134.0 J/cm2组修复明显，而192.2 J/cm2和308.6 J/cm2组新生表皮向创面延伸生长但形态不佳，后者甚至还未覆盖创面表面。照射后后期（21 d和28 d），134.0 J/cm2组基本愈合，而192.2 J/cm2和308.6 J/cm2组新生表皮仍较厚，真皮浅层胶原纤维增多，但仍未达到正常水平。激光照射后，皮肤创面组织的愈合趋势分析结果显示：照射后3 d，各照射组创面均出现不同程度的修复趋势，但这种趋势随着激光照射强度的增加而趋于减弱；照射后714 d，各照射组创面修复趋势明显，但剂量高于192.2 J/cm2时，皮肤焦斑损伤创面恢复趋势明显减弱；照射后2128 d，134.0 J/cm2组白斑损伤创面基本修复，而中高剂量组创面未完全修复且趋势缓慢。以上结果也表明，激光辐照剂量越大，皮肤损伤越重，而其愈合趋势越慢。综上，小型猪经1 064 nm激光辐照后，随着剂量的增加，皮肤损伤由轻到重依次出现红斑、白斑和焦斑不同类型的损伤斑块，这些损伤斑的发生发展和消退均显示出各自的特点或规律。本研究试验条件下所得到的激光皮肤损伤阈值ED50为50.8 J/cm2。皮肤创面的病理形态与宏观观察结果均表明，激光辐照剂量越大，皮肤损伤越重，组织修复趋势越慢，并显示出较好的量效关系。以上结果无疑为扩大激光的临床应用提供了较好的试验和理论依据。参考文献（References）：1 NAFISAH S,TUKIRAN Z,SHENG L W,et al.Laser technology applications in critical sectors:military and medicalJ.Penerbit UTHM,2021,2(1):38-48.2 王狮凌,房丰洲.大功率激光器及其发展 J.激光与光电子学进展,2017,54(9):51-64.WANG Shiling,FANG Fengzhou.High power laser and its de-velopmentJ.Laser&Optoelectronics Progress,2017,54(9):51-64.3 陈鹏,康宏向,高荣莲,等.KGF-2治疗激光角膜灼伤的形态计量学研究 J.首都公共卫生,2010,4(4):151-152.CHEN Peng,KANG Hongxiang,GAO 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