食品理化检验维生素的测定培训课件.ppt

,单击此处编辑母版文本样式,第二级,第三级,第四级,第五级,单击此处编辑母版标题样式,*,食品理化检验维生素的测定,*,单击此处编辑母版标题样式,单击此处编辑母版文本样式,第二级,第三级,第四级,第五级,*,食品理化检验维生素的测定,*,单击此处编辑母版标题样式,单击此处编辑母版文本样式,第二级,第三级,第四级,第五级,*,食品理化检验维生素的测定,*,单击此处编辑母版标题样式,单击此处编辑母版文本样式,第二级,第三级,第四级,第五级,*,食品理化检验维生素的测定,*,单击此处编辑母版标题样式,单击此处编辑母版文本样式,第二级,第三级,第四级,第五级,*,食品理化检验维生素的测定,*,单击此处编辑母版标题样式,单击此处编辑母版文本样式,第二级,第三级,第四级,第五级,*,食品理化检验维生素的测定,*,食品理化检验维生素的测定,一、概述,（一）维生素的分类及共性,（二）常见维生素的生理功能,（三）维生素的测定意义,2,食品理化检验维生素的测定,（一）维生素的分类,目前已发现的维生素约有二、三十种，按,溶解性,可分为两大类：,脂溶性维生素：,A,、,D,、,E,、,K,等,；,水溶性维生素：,B,、,C,等（如,B,1,、,B,2,、,B,6,、,B,12,和,C,等）,3,食品理化检验维生素的测定,维生素都具有以下共同特点：,这些化合物或其前体化合物都在天然食物中存在；,它们不能供给机体热能；也不是构成组织的基本原料；,主要功用是通过作为辅酶的成份调节代谢过程，需要量 极小；,它们一般在体内不能合成，或合成量不能满足生理需要，必须经常从食物中摄取；,长期缺乏任何一种维生素都会导致相应的疾病。,4,食品理化检验维生素的测定,维生素,A,：,是人体必需营养素，能促进人体发育，防止眼膜,炎、夜盲症等疾病。,维生素,B,1,：,也叫硫胺素，对人体的功能主要是防脚气病、神经,炎，帮助消化，促进发育。,维生素,B,2,：,对人体功能防口角炎、皮肤炎，防止怕光现象。,维生素,C,：,防坏血病，促进外伤愈合，使机体增强抵抗力。,维生素,D,：,调节体内矿物盐的平衡，特别是对人体内钙、磷的,代谢，并能防止软骨病。,（二）常见维生素的生理功能,5,食品理化检验维生素的测定,（三）维生素的测定意义,评价食品的营养价值；,开发利用富含维生素的食品资源；,指导人们合理调整膳食结构，防止维生素缺乏症；,研究维生素在食品加工、贮存等过程中的稳定性，指导制定合理的生产工艺条件及贮存条件，最大限度地保留各种维生素；,监督维生素强化食品的强化剂量，防止维生素摄入过多引起中毒。,6,食品理化检验维生素的测定,二、脂溶性维生素的测定,脂溶性维生素的理化性质,脂溶性维生素的测定方法,7,食品理化检验维生素的测定,常与脂类物质共存于食物中，摄食时一道被人体吸收。,1.,溶解性：,不溶于水，易溶于脂肪、乙醇、丙酮、氯仿、乙醚、苯等有机溶剂；,2.,耐酸碱性：,维生素,A,、,D,对酸不稳定，对碱稳定；,维生素,E,对酸稳定，对碱不稳定，但在抗氧化剂存在下或惰性气体保护下，也能经受碱的煮沸。,（一）脂溶性维生素的主要理化性质,8,食品理化检验维生素的测定,3,耐热性、耐氧化性：,耐热性 氧化性,V,A,好，能经受煮沸,易被氧化,（,光、热促其氧化）,V,D,好，能经受煮沸,不易被氧化,V,E,好，能经受煮沸,在空气中能慢慢被氧化,（光、热、碱促其氧化）,9,食品理化检验维生素的测定,根据上述性质，测定脂溶性维生素时，通常：,皂化样品,类脂物和维生素分开,有机溶剂提取脂溶性维生素,(,不皂化物,),浓缩 溶于适当的溶剂 测定。,（食物中脂溶性维生素常与脂肪共存，一道被人体吸收，所以要除去脂肪，防止干扰。）,在皂化和浓缩时，为,防止维生素的氧化分解,，常加入,抗氧化剂,(,如焦性没食子酸、,维生素,C,等,),。,对于,A,、,D,、,E,共存的样品，或杂质含量高的样品，在皂化提取后，还需进行层析分离。,10,食品理化检验维生素的测定,常用的测定方法有,:,薄层色谱法、分光光度法、气相色谱法、高效液相色谱法等。,高效液相色谱法：,快速、高效、高灵敏度等优点，,是我国卫生标准分析方法,（二）脂溶性维生素的测定方法,11,食品理化检验维生素的测定,食品中,V,A,和,V,E,的测定,（,GB5009.82-2003),维生素,A,：,存在于动物性脂肪中，主要来源于肝脏、鱼干油、蛋类、乳类等动物性食品中；,植物性食品中不合,V,A,，但在深色果蔬中含有胡萝卜素，它在人体内可转变为,V,A,，故称为,V,A,原,;,包括,A1,和,A2,。,维生素,E,：,12,食品理化检验维生素的测定,（第一法）,HPLC,测定,V,A,和,V,E,一、原理,食品样品经,皂化处理,后，用,有机溶剂,将食品中的,脂溶性维生素,（如维生素,A,、维生素,E,）从不可皂化的部分,提取,出来，经过,浓缩,除去有机溶剂，再用适当的,溶剂溶解,后，用,HPLC,法,C,18,反相柱将,V,A,和,V,E,分离，,经紫外检测器，,用内标法,测定其含量。,13,食品理化检验维生素的测定,二、样品处理,（,1,）皂化：,称取适量样品（含,VA30g,VE40g,）于三角瓶中，加,30mL,无水乙醇，振摇使样品分散；加入,5mL,，,100g/L,抗坏血酸和,2mL,苯并,e,芘溶液（内标）混匀，加入,10mL,氢氧化钾,(1:1),，混匀，于沸水浴上 回流,30min,，使皂化完全（若有混浊现象，表示皂化完全），皂化后立即放入冰水中冷却；,14,食品理化检验维生素的测定,（,2,）提取：,将皂化液移入分液漏斗，先用,50mL,水分,2,次洗涤皂化瓶（若有渣，可经过脱脂棉过滤），再用,100mL,无水乙醚分,2,次洗涤皂化瓶及残渣，所有乙醚洗液并入分液漏斗中，振摇两分钟（注意放气），静止分层后，弃去水层；然后每次用,100mL,水将乙醚液洗至中性，需洗,4-5,次。,15,食品理化检验维生素的测定,（,3,）浓缩：,将乙醚提取液经无水硫酸钠滤入,150mL,旋转蒸发瓶内，用约,15mL,乙醚洗涤分液漏斗和无水硫酸钠,2,次，洗液并入蒸发瓶中，,于,55,水浴中减压蒸馏,并回收乙醚，待瓶中乙醚剩余约,2mL,时，取下蒸发瓶，用氮气吹干乙醚，随即加入,2mL,乙醇，充分混合、溶解提取物。将乙醇移入塑料离心管中，于离心机上离心,5min,，上清液供色谱分析用。,16,食品理化检验维生素的测定,三、所需主要仪器,高效液相色谱（带紫外分光检测器）,旋转蒸发器,高速离心机（带离心管）,恒温水浴锅,紫外分光光度计,说明：国标中用其来标定,V,A,和,V,E,的浓度,17,食品理化检验维生素的测定,四、液相色谱分析,色谱参考条件：,预柱：,ODS 10m,（,4mmx4.5cm),分析柱：,ODS 5m,（,4.6mmx25cm),流动相：甲醇：水,98,：,2,，混匀，临用前脱气；,紫外检测器波长：,300nm,，量程,0.02,；,进样量：,20L,;,流速：,1.65,1.70mL/min,18,食品理化检验维生素的测定,测定,（,1,）配制标准溶液,V,A,标准溶液：,将,V,A,标准品用无水乙醇溶解配制成浓度为,1mg/ml;,V,E,标准溶液,:,用无水乙醇分别溶解,-,生育酚、,-,生育酚、,-,生育酚,3,种标准品，配制成浓度为,1mg/ml,的标准液；,内标溶液,：将苯并,e,芘用无水乙醇配制成浓度为,10g/ml;,（,2,）绘制标准曲线,将一定量的,V,A,标准溶液、,3,种,V,E,标准溶液和内标溶液混和均匀，对其混和液进行色谱分析，以维生素峰面积和内标物峰面积之比为纵坐标，以维生素浓度为横坐标，绘制标准曲线（直线回归方程）。,19,食品理化检验维生素的测定,（,3,）样品测定,取试样浓缩液,20l,注入色谱仪中，进行检测；,定性：,用标准物色谱峰的保留时间定性；,定量：,根据色谱图求出某种维生素峰面积与内标物峰 面积的比值，以此比值由回归方程求出维生素含量；,五、结果计算,X,：某种维生素的含量，,mg/100g,：由标准曲线上查到的某种维生素含量，,g,/mL,V,：样品浓缩后定容体积,mL,m,：样品质量，,g,20,食品理化检验维生素的测定,水溶性维生素的理化性质,维生素,B,1,的测定,维生素,B,2,的测定,维生素,C,的测定,三、水溶性维生素的测定,21,食品理化检验维生素的测定,易溶于水，不溶于大部分有机溶剂；,在酸性介质中稳定，在碱性条件下不稳定；,易受空气、光、热、酶、金属离子的影响。,（一）水溶性维生素的主要理化性质,22,食品理化检验维生素的测定,（二）维生素,B,1,的测定,VB,1,又叫硫胺素、抗神经炎素,1,、食品中,VB,1,的存在形式,常以游离态存在；,复合脂形式存在（磷蛋白）；,辅羧酶形式存在,VB,1,在酵母、米糠、麦胚、花生、黄豆以及绿色,的蔬菜和牛乳、蛋黄中比较丰富，,动物组织不如植物,含量丰富。,23,食品理化检验维生素的测定,VB,1,在,中性、碱性下不稳定,，易分解；,VB,1,在,酸性条件下稳定,，即使加热酸性也稳定；,VB,1,为白色结晶，微溶于,C,2,H,5,OH,，不溶于乙醚或,CHCl,3,，,易溶于水,。,2.VB,1,的性质,24,食品理化检验维生素的测定,3.,维生素,B,1,的测定方法,紫外分光光度法,:,适用于,VB,1,含量高的样品,灵敏度和准 确度较差,;,高效液相色谱法,适用于食品中微量,VB,1,的测定,荧光法,世界各国都用荧光法测定,;,荧光法,是我国国家标准分析方法,（,GB/T 5009.84-2003,）,25,食品理化检验维生素的测定,原理：,硫胺素,在碱性铁氰化钾溶液中，,被氧化成,一种兰色荧光物质，即为,硫色素,，在,紫外光,下，,硫色素发出荧光,，在一定条件下，其,荧光强度与硫色素浓度成正比,，即与硫胺素含量成正比。,26,食品理化检验维生素的测定,（,2,）定量方法,标准曲线法：,配制一系列标准浓度试样测定荧光强度，绘制标准曲线，再在相同条件下测量未知试样的荧光强度，在标准曲线上求出浓度。,27,食品理化检验维生素的测定,(3).,操作步骤,试样处理,样品匀浆（或粉碎）于低温冰箱中冷冻保存。,提取,1),水解,2),酶解,称样,三角瓶,高压水解,盐酸溶液,调,pH,值,乙酸钠溶液,酶解,淀粉酶,定容,28,食品理化检验维生素的测定,吸附剂采用的是,人造浮石,。,将提取液加入,人造浮石交换柱,中，,VB1,被吸附上去，吸附上去后，再用,热水淋洗,，洗去杂质，最后用热的酸性氯化钾（,25%KCl-HAC,）把,VB1,洗脱下来，这样就得到纯,VB1,。,样品,热水,酸性氯化钾,收集酸性氯化钾定容,净化,29,食品理化检验维生素的测定,氧化,静置,过滤,脱水,反应瓶编号,标准,A,瓶,标准,B,瓶,样品,A,瓶,样品,B,瓶,加标准液或样品液,标准液,5ml,标准液,5ml,样品液,5ml,样品液,5ml,加氢氧化钠,3ml,3ml,加碱性铁氰化钾,3ml,3ml,加正丁醇,10ml,10ml,10ml,10ml,30,食品理化检验维生素的测定,荧光强度测定,(,通过荧光分光光度计可以测得,),激发波长,365nm,；发射波长,435nm,；,激发波狭缝,5nm,；发射波狭缝,5nm,。,（,4,）方法说明,本方法适用于各类食物中硫胺素的测定，但,不适用于,有,吸附硫胺素能力的物质和含有影响硫色素荧光物质的样品,；,酸解、水解的目的：,使结合型的,VB,1,成为游离型的,；,紫外线会破坏硫色素，所以硫色素形成后，,反应瓶,要用,黑布遮盖或在暗室中进行荧光测定,，并且要,迅速测定,；,31,食品理化检验维生素的测定,维生素,B,2,又称核黄素,测定方法主要有：,微生物法、荧光法、,HPLC,法,GB/T 5009.85-2003,荧光法（第一法）,微生物法（第二法）,（三）维生素,B,2,的测定,32,食品理化检验维生素的测定,荧光法测维生素,B,2,1.,原理,核黄素在,440,500nm,波长光照射下发生黄绿色荧光。在稀溶液中其荧光强度与核黄素的浓度成正比。在波长,525nm,下测定其荧光强度。试液再,加入低亚硫酸钠,(Na,2,S,2,O,4,),，将,核黄素还原为无荧光的物质,，然后再测定试液中残余荧光杂质的荧光强度，两者之差即为食品中核黄素所产生的荧光强度。,为使,VB,2,游离出来，采用需经酸解和酶解,为消除干扰，试样通过氧化处理和柱层析处理。,33,食品理化检验维生素的测定,2.,测定步骤,（,1,）样品提取,称样,三角瓶,高压水解,盐酸溶液,调,pH,值,氢氧化钠溶液,酶解,淀粉酶,定容,蛋白酶,34,食品理化检验维生素的测定,（,2,）氧化去杂,样品提取液,具塞试管,水,双氧水,冰乙酸,高锰酸钾,氧化去杂,褪色,标准液按相同方法进行,35,食品理化检验维生素的测定,（,3,）柱层析,样品液,水,丙酮,-,乙酸,-,水混合液,水,收集洗脱液,定容,*,标准液按相,同操作进行,36,食品理化检验维生素的测定,（,4,）荧光测定,激发光波长,440nm,，发射光波长,525nm,，测量样品管及标准管的,荧光值,。,待样品及标准的荧光值测量后，在各管的剩余液中加,0.1mL 20%,低亚硫酸钠,溶液，立即混匀，在,20s,内,测出各管的荧光值，作为各自的,空白值,。,37,食品理化检验维生素的测定,3.,计算,X,：样品中核黄素含量，,mg/100g,A,：试样荧光值,B,：试样空白荧光值,C,：标准荧光值,D,：标准空白荧光值,m,：样品质量，,g,m,1,：标准管中核黄素含量,g,f,：稀释倍数,100/1000,：样品核黄素含量的换算系数,38,食品理化检验维生素的测定,维生素,C,是一种已糖醛基酸，有抗坏血病的作用，所以被人们称做,抗坏血酸,;,广泛存在于,植物组织中,，,新鲜的水果、蔬菜,，特别是枣、辣椒、苦瓜、柿子叶、猕猴桃、柑橘等食品中含量较多。它是氧化还原酶之一，本身易被氧化，但在有些条件下,又是一种抗氧化剂,。,（三）维生素,C,的测定,39,食品理化检验维生素的测定,维生素,C,具有较强的还原性，对光敏感，,氧化后,的产物称为,脱氢抗坏血酸,，仍然具有生理活性；进一步,水解,则生成,2,，,3-,二酮古乐糖酸,，失去生理作用。,在食品中维生素,C,就是以,还原型、脱氢型和二酮古乐糖酸型,这,3,种形式存在的；食品分析中的所谓,总抗坏血酸是指抗坏血酸和脱氢抗坏血酸二者的总量，,不包括,2,，,3-,二酮古乐糖酸和进一步氧化的产物。,40,食品理化检验维生素的测定,维生素,C,的测定方法,测定维生素,C,的方法有：,荧光法，高效液相色谱法，,2,，,4,二硝基苯肼比色法，,2,，,6,二氯靛酚滴定法,，,等,GB/T 5009.862003,蔬菜、水果及其制品中,总抗坏血酸,含量测定方法,第一法：荧光法,第二法,：,2,，,4,二硝基苯肼比色法,41,食品理化检验维生素的测定,（,1,）,原理：,试样中,还原型抗坏血酸,经活性炭氧化为,脱氢抗坏血酸,后，与,邻苯二胺,反应生成有荧光的,喹唔啉,，其荧光强度与抗坏血酸的浓度在一定条件下成正比，以此测定食品中抗坏血酸和脱氢抗坏血酸的总量。,注意：脱氢抗坏血酸可与硼酸结合生成复合物，而不与邻苯二胺,反应生成荧光物质，由此可以消除杂质的干扰。（空白试验）,（第一法）荧光法（测总抗坏血酸）,42,食品理化检验维生素的测定,（,2,）试剂：,偏磷酸,冰醋酸溶液：称取,15g,偏磷酸，加入,40mL,冰醋酸，加水稀释至,500mL,过滤后，贮存于冰箱中；,硫酸：,0.15mol/L,偏磷酸,乙酸,硫酸溶液：称取,15g,偏磷酸，加入,40mL,冰醋酸，用,0.015molL-1,硫酸稀释至,500mL,；,乙酸钠溶液：称取,500g,乙酸钠溶解并稀释至,1L,；,硼酸,乙酸钠溶液：称取硼酸,9g,，加入,35mL,乙酸钠溶液，用水稀释至,1000mL,；,邻苯二胺溶液：称取,20mg,邻苯二胺盐酸盐溶于,100mL,水中；,43,食品理化检验维生素的测定,（,4,）操作步骤：,试样的制备：,称取,100,克鲜样,加,100mL,偏磷酸,-,乙酸溶液，倒入捣碎机内打成匀浆，先取少量样品加入,1,滴百里酚蓝，若显红色,(pH=1.2),，即用偏磷酸,冰醋酸溶液定容至,100mL,；若显黄色,(pH=2.8),，即用偏磷酸,冰醋酸,硫酸溶液定容至,100mL,，定容后过滤备用。,测定：,氧化处理：,将上述滤液及抗坏血酸标准使用液各,100ml,转入三角瓶中加入,1,2g,活性炭振摇,1,2,分钟，过滤。即试样氧化液和标准氧化液，待测定。,45,食品理化检验维生素的测定,各取,10mL,标准氧化液,于,2,个,100mL,容量瓶中，分别标明“标准”及“标准空白”,各取,10mL,试样氧化液,于,2,个,100mL,容量瓶中，分别标明“试样”及“试样空白”,于“标准空白”及“试样空白”中各加,5mL,硼酸,-,乙酸钠溶液，,混合摇动,15min,，用水稀释至,100mL,，在,4,冰箱中放置,23,小时，即得“标准空白”溶液及“试样空白”溶液，备用。,于“试样”及“标准”中各加,5mL/L,乙酸钠溶液，用水稀释至,100mL,即得“试样”溶液及“标准”溶液，备用。,46,食品理化检验维生素的测定,标准曲线的制备：,取上述“标准”溶液（抗坏血酸含量,10g/mL,）,0.5,、,1.0,、,1.5,和,2.0mL,标准系列，取双份分别置于,10mL,带盖试管中，再用水补充至,2.0mL,。（平行,2,次，做标准曲线）,取中“标准空白”溶液，“样品空白”溶液及“样品”溶液各,2mL,，分别置于,10mL,带盖试管中。在暗室中迅速向各试管中加入,5mL,邻苯二胺溶液，振摇混合，在室温下反应,35min,，于激发光波长,338nm,、发射光波长,420nm,处测定荧光强度。标准系列荧光强度分别减去标准空白荧光强度为纵坐标，对应的抗坏血酸含量为横坐标，绘制标准曲线或进行相关计算，其直线回归方程供计算时使用。,47,食品理化检验维生素的测定,（,5,）结果计算：,式中,X-,试样中抗坏血酸及脱氢抗坏血酸总含量，,mg/100g,；,c-,由标准曲线查得或由回归方程算得试样溶液浓度，,g/mL,m-,试样的质量，,g,；,V-,荧光反应所用试样体积，,mL,；,F-,试样溶液的稀释倍数。,48,食品理化检验维生素的测定,（第二法）,2,，,4,二硝基苯肼比色法,1.,原理,先将样品中的还原型抗坏血酸用活性炭氧化为脱氢抗坏血酸，加,2,，,4,二硝基苯肼生成红色脎，根据脎在硫酸溶液中的含量与总抗坏血酸含量成正比进行比色测定。,49,食品理化检验维生素的测定,2.,试剂,提取,Vc,用：,20g/L,草酸，,10 g/L,草酸,氧化处理用：活性炭（经,HCl,处理无铁离子）,控制氧化用：,20g/L,硫脲、,10g/L,硫脲,显色用：,20g/L,2,，,4,二硝基苯肼溶液，硫酸,1mg/mL,抗坏血酸标准溶液,3.,主要仪器,恒温箱或恒温水浴锅,紫外可见分光光度计,组织捣碎机,50,食品理化检验维生素的测定,4.,操作步骤,样品中,Vc,的提取和处理,提取（样品制备）,干样：,样品（,1-4g,）,+,适量,10 g/L,草酸，磨成匀浆，用,10 g/L,草酸定容至,100mL,容量瓶。过滤，得提取液。,鲜样：,样品,+,等量的,20 g/L,草酸，捣碎成匀浆，取,10,40g,匀浆，用,10 g/L,草酸定容至,100mL,容量瓶。过滤，得提取液。,注意：不易过滤的样品，可离心沉淀后取上清液再过滤。,51,食品理化检验维生素的测定,氧化处理,取,25mL,提取液,+2g,活性炭，振摇,1min,，过滤。要弃去初滤液；,取,10mL,氧化提取液,+10mL20g/L,硫脲；,此,20mL,氧化稀释液为待测液，相当于把提取液稀释了,2,倍。,52,食品理化检验维生素的测定,（,2,）呈色反应,取,3,支带塞试管，各加入,4mL,氧化稀释液,，,留一支空白，另两支各加,1.0mL20g/L2,，,4,二硝基苯肼溶液，,37,恒温,3h,。,取出，空白管在室温下冷却，另两支放入冰水中冷却。空白管冷却至室温后加,1.0mL20g/L 2,，,4,二硝基苯肼溶液，,15min,后放入冰水中冷却。,在冷却中，分别向每支试管滴加,5ml,（,9+1,）硫酸，滴加完毕取出，在室温放置,30min,后，用,1cm,比色皿，以空白管调零，,500nm,测吸光度。,53,食品理化检验维生素的测定,（,3,）制标准曲线,取,50mL 1mg/mL,抗坏血酸标准溶液，加,2g,活性炭，振摇,1min,，过滤，弃去初滤液，取,10mL,滤液，加,5.0g,硫脲，用,10 g/L,草酸稀释至,500mL,容量瓶中，得,20ug/mL,的抗坏血酸使用液；,分别取,5,、,10,、,20,、,25,、,40,、,50,、,60mL 20ug/mL,的抗坏血酸使用液,分别放入,7,个容量瓶中，用,10 g/L,硫脲稀释定容，得标准比色系列为：,1,、,2,、,4,、,5,、,8,、,10,、,12ug/mL,；,按（,2,）步骤呈色，并测定吸光度；,以吸光度为纵坐标，以抗坏血酸标准比色系列为横坐标，绘标准曲线。,54,食品理化检验维生素的测定,（,4,）计算,从标准曲线查出氧化稀释液的维生素,C,的浓度，,g/mL,按下式计算总抗坏血酸含量：,X:,样品中抗坏血酸含量，,mg/100g,P:,由标准曲线得“样品氧化液”中总抗坏血酸的浓度，,g/mL,V:,试样用,1,草酸溶液定容的体积，,mL;,f:,样品氧化处理过程中的稀释倍数,m:,称取的样品质量，,g,55,食品理化检验维生素的测定,1,、原理,在中性或弱酸性条件下，,还原型抗坏血酸,可以,还原染料,2,，,6-,二氯靛酚,该染料在酸性溶液中呈红色,(,在中性或碱性溶液中呈蓝色,),，,被还原后颜色消失,;,还原型抗坏血酸,本身被,氧化成脱氢抗坏血酸,。,在没有杂质干扰时，样品中抗坏血酸的含量与消耗的染料量成正比。,2,，,6,二氯靛酚滴定法,（测定还原型抗坏血酸）,56,食品理化检验维生素的测定,2,、方法说明,滴定前，,2,，,6-,二氯靛酚溶液,需要用已知浓度的,标准抗坏血酸溶液标定,，得到,2,，,6-,二氯靛酚溶液的准确浓度；,需要做空白试验。,57,食品理化检验维生素的测定,