九篇维生素类药物分析.ppt

,单击此处编辑母版标题样式,*,*,单击此处编辑母版文本样式,第二级,第三级,第四级,第五级,第九章 维生素类药物的分析,主要内容,维生素,A,维生素,D,维生素,E,维生素,B,维生素,C,脂溶性,水溶性,维生素,维持人体正常生理机能所必须的生物活性物质,40%,谷类和麦类主食,12%,水果,18%,蔬菜,10%,肉类、蛋类,制品,10%,乳类制品,10%,油、脂肪,及甜品,人体缺少某种维生素，就会引起维生素缺乏症，而影响人体的正常生理机能。,例如：,VA,夜盲症,VB1,脚气病,VD,缺乏,佝偻病,按溶解性分类,脂溶性：,VA,、,VD,、,VE,、,VK,等,水溶性：,B,族，,VC,、烟酸、叶酸、,泛酸等,维生素,A,的分析,结构特点：具有共轭多烯侧链的环己烷，有多种异构体,性质：有强紫外吸收，易被氧化，脂溶性,维生素,A,醇,维生素,A,醋酸酯,维生素,A,棕榈酸酯,结构特点：,环己烯,+,共轭多烯侧链,天然,VA,侧链为全反式,天然来源主要是鱼肝油，人工合成醋酸酯，棕榈酸酯,鉴别试验,三氯化锑反应：维生素,A+,三氯化锑显蓝色渐变成紫红色,紫外吸收光谱：维生素,A,的无水乙醇,-,盐酸溶液在,326nm,波长处有单一吸收峰，将该溶液加热后再测定，在,348,，,367,，,389nm,处出现,3,个尖锐吸收峰。这是维生素,A,在盐酸催化下加热，发生脱水反应所致,含量测定,紫外分光光度法（三点校正法）,维生素,A,醋酸酯的环己烷溶液在,328nm,有最大吸收，吸收系数,E=1530,维生素,A,醇的异丙醇溶液在,325nm,有最大吸收，吸收系数,E=1820,由于维生素,A,中稀释用油和有关杂质也具有紫外吸收，干扰测定，故采用三点校正法测定含量,等波长差法,等吸收差法,中国药典收载方法,第一法（维生素,A,醋酸酯的测定）,将维生素,A,溶于环己烷，在规定波长测定吸收度，计算吸收度比值（,A/A,328,）,数据处理,如果,max,在,326-329nm,之间，且,A/A,328,比值未超过规定值的,0.02,，可直接按下式计算含量：,换算因子,F,的由来,换算因子,F=,效价（,IU/g,）,/E,1%,1cm,规定,1IU=0.334,g,维生素,A,醋酸酯,则,1g,维生素,A,醋酸酯,=1,10,6,/0.344=2907000IU,维生素,A,醋酸酯的,E,1%,1cm,=1530,故,F=2907000IU/1530=1900,数据处理,如果,max,在,326-329nm,之间，且,A/A,328,比值超过规定值的,0.02,，需按校正公式计算校正值：,是否需要校正值的判断,如果,max,不,在,326-329nm,之间，也用第二法测定,第二法（维生素,A,醇的测定）,不能用第一法的样品采用第二法测定,方法：维生素,A,醇皂化提取滤过浓缩干燥维生素,A,酯制成异丙醇溶液，在规定波长测定吸收度,数据处理：,是否需用校正值的判断,如果：,不需校正，用,A,325,计算,则,讨论,干扰物质主要由,异构体、氧化产物、合成中间体及溶剂油,校正公式的推导,假定这些杂质在,310-340nm,处吸收呈直线，根据吸收度加和性原则，选择三个波长，用数学方法，即,维生素,B,1,的分析,又称盐酸硫胺，结构特点：,有两个碱性基团，有紫外吸收，在水中易溶,嘧啶环,噻唑环,鉴别反应,沉淀反应,氯化物反应,本品为盐酸盐，显氯化物反应,硝酸铅反应,与氢氧化钠共热，分解产生硫化钠，与硝酸铅生成黑色沉淀,THANK YOU,SUCCESS,2025/1/15 周三,24,可编辑,硫色素反应,维生素,B1,在氢氧化钠溶液中，与铁氰化钾作用，被氧化成硫色素，在正丁醇中显蓝色荧光，加酸，荧光消失，加碱，荧光又出现,这是维生素,B1,的专属反应,含量测定,非水溶液滴定法,用于原料药测定,加醋酸汞消除盐酸干扰,1mol,维生素,B1,与,2mol,高氯酸相当,紫外分光光度法,片剂、注射剂采用此法,以吸收系数法计算含量,硫色素荧光法,对照品对照法计算含量，方法专属，不受氧化产物干扰,硅钨酸重量法,维生素,B1+,硅钨酸白色沉淀，趁热过滤,沉淀依次用热盐酸、水、丙酮洗涤,80,干燥至恒重,样品,%=,（沉淀重,0.1939,）,/,取样量,100%,式中,0.1939,为重量换算因子，维生素,B1,的,M=337.27,，沉淀的,M=3479.22,，由于,维生素,C,的分析,结构特点,二烯醇结构，有强还原性,C,3,显酸性，可成钠盐,具共轭双键，有紫外吸收,两个手性碳，有旋光性,水中易溶，有糖类性质,鉴别试验,硝酸银反应,维生素,C,被氧化，银被还原成黑色银沉淀,使高锰酸钾、亚甲蓝褪色,与碱性酒石酸铜作用，产生红色氧化铜沉淀,二氯靛酚钠反应,二氯靛酚被还原成无色,糖类性质,维生素,C+HCl,（三氯乙酸）水解成戊糖失水糠醛,+,吡咯蓝色,杂质检查,澄清度与颜色,控制氧化变色产物，以测定一定波长下吸光度控制有色杂质,原料,溶液应澄清无色，若有色，在,420nm,处测定吸光度，不得过,0.03,片剂,在,440nm,处测定吸光度，不得过,0.07,注射剂,在,420nm,处测定吸光度，不得过,0.06,铁、铜离子,采用原子吸收分光光度法测定,含量测定,碘量法,维生素,C,分子中的烯二醇基具有还原性，能被,I,2,定量的氧化成二酮基,测定方法,取本品约,0.2g,，精密称定，加新沸过的冷水,100mL,与稀醋酸,10mL,，振摇使溶解，加淀粉指示液,1mL,，立即用碘滴定液（,0.1mol/L,）滴定，至溶液显蓝色并持续,30,秒钟不褪。每,1mL,碘滴定液（,0.1mol/L,）相当于,8.806mg,的,C,6,H,8,O,6,讨论：滴定前加入稀醋酸可减缓维生素,C,受空气氧化，用新沸过的冷水做溶剂，除去水中溶解氧对测定的影响,维生素,C,片也采用碘量法测定含量，但需过滤除去辅料,维生素,C,注射液含量测定,精密量取本品适量（约相当于维生素,C0.2g,）加水,15mL,与丙酮,2mL,，摇匀，放置,5min,，加稀醋酸,4mL,与淀粉指示液,1mL,，用碘滴定液（,0.1mol/L,）滴定，至溶液显蓝色并持续,30s,不褪。每,1mL,碘滴定液（,0.1mol/L,）相当于,8.806mg,的,C,6,H,8,O,6,：滴定前加丙酮是用来消除注射液中含有的抗氧剂亚硫酸钠对测定的干扰，丙酮与亚硫酸钠形成加成物而消除影响,2,6-,二氯吲哚酚法,以,2,6-,二氯吲哚酚为滴定剂，终点时，过量一滴的滴定剂在酸性溶液中显玫瑰红色而指示终点，无需另加指示剂,此法较碘量法专属性强，但滴定剂不稳定,维生素,D,的分析,为一类抗佝偻病的维生素总称，都是甾醇的衍生物，,ChP,收载维生素,D,2,（,Ergocalciferol,），,D,3,有多个烯键，不稳定，易氧化变质，使毒性增加，多个手性碳，具旋光性,鉴别试验,显色反应（甾类化合物的反应）,D,2,+,醋酐,-,浓,H,2,SO,4,黄红紫绿色,D,3,+,醋酐,-,浓,H,2,SO,4,黄红紫蓝绿绿色,比旋度,t,D,测定,D,2,无水乙醇液：,+102.5,+107.5,D,3,无水乙醇液：,+105,+112,D,2,、,D,3,区别反应,维生素,D,的醇溶液,+85%,H,2,SO,4,含量测定,采用正相,HPLC,法,根据样品纯度，,ChP,采用三种方法,第一法（适用于无,VitA,醇及其它杂质干扰）,对照品（,D,2,、,D,3,）,+,异辛烷超声助溶，充氮，避光,0,保存,内标液：邻苯二甲酸甲酯,-,正己烷溶液,色谱柱：硅胶柱,流动相：正己烷,-,正戊醇（,997,：,3,）,检测波长：,254nm,测定方法,光照：使产生前维生素,D,3,，反式维生素,D,3,，速甾醇,D,3,，连同维生素,D,3,，进行系统适用性试验,重复进样，维生素,D,3,的峰值,RSD2.0%,分离度,R1.0,采用校正因子法计算维生素,D,总量,维生素,E,分析,结构特征：具有苯并二氢吡喃结构，苯环上有,1,个乙酰化的酚羟基，易被水解、氧化；为脂溶性维生素。有四种异构体，其中,型活性最强,鉴别,与硝酸反应,维生素,E,与硝酸共热，显橙红色（生育红）,水解后氧化反应,维生素,E,在碱性条件下水解，与联吡啶和三氯化铁作用，显血红色。在该反应中，维生素,E,水解游离出生育酚，还原,Fe,2+,Fe,3+,，后者与联吡啶生成血红色配位离子,杂质检查,合成型,检查有关物质（,GC,）,天然型,检查生育酚,生育酚,采用硫酸铈滴定法,生育酚限量计算,规定：,0.1g,维生素,E,消耗硫酸铈滴定液（,0.01mol/L,）不得过,1.0mL,含量测定,采用,GC,法,色谱条件,色谱柱：硅酮（,OV-17,），载气：,N,2,检测器：,FID,内标：正三十二烷（正己烷溶液）,系统适用性试验,以维生素,E,峰计算应不低于,500,（毛细管柱,5000,），维生素,E,与内标的分离度应大于,2,测定方法,校正因子测定：取正三十二烷适量，加正己烷溶解并稀释成每,1mL,中含,1.0mg,的溶液，摇匀，作为内标溶液。另取维生素,E,对照品约,20mg,，精密称定，置棕色具塞锥形瓶中，精密加入内标溶液,10mL,，密塞，振摇使溶解，取,1-3,L,注入气相色谱仪，计算校正因子,样品测定：取本品约,20mg,，精密称定，置棕色具塞锥形瓶中，精密加入内标溶液,10mL,，密塞，振摇使溶解，取,1-3,L,注入气相色谱仪，计算含量,掌握重点,1,、维生素,A,的三氯化锑鉴别反应,2,、维生素,A,三点矫正法测定含量的原理、方法与计算,3,、维生素,E,的鉴别试验和游离生育酚的检查,4,、维生素,B1,的鉴别试验与含量测定方法,5,、维生素,C,的结构与性质，鉴别试验和含量测定方法,THANK YOU,SUCCESS,2025/1/15 周三,47,可编辑,