病理生理学-第二十九章--真菌学概述.ppt

,Click to edit Master text styles,Second level,Third level,Fourth level,Fifth level,Click to edit Master title style,*,第二十九章,真菌学,概述,病原生物学,学习目标,掌握,：,真菌的形态结构和培养特性。,熟悉,：,真菌的致病性与免疫性；熟悉真菌感染的微生物学检查及防治原则。,第一节,真菌,的生物学性状,真菌,(fungus),是一大类真核细胞型微生物,。,细胞核,高度分化，有核膜和核仁，胞质内有完整细胞器，不含叶绿素，不分根茎叶。,第一节,真菌,的生物学性状,真菌在自然界分布广泛，种类繁多，有十万余种,。,绝大多数,真菌对人体无害，甚至有益，如有的真菌用于食品工业和抗生素的生产等,。,与,医学有关的真菌约四百余种，包括致病菌、机会致病菌、引起中毒性与超敏反应性疾病的真菌，以及与人类某些肿瘤有关的真菌,。,第一节,真菌,的生物学性状,一、形态结构,真菌,比细菌大数倍至数百倍，其结构和化学组成也比细菌复杂，具有分化程度较高的细胞核，胞质内有完整的细胞器,。,体外,有坚硬的细胞壁，但不含肽聚糖，由大分子几丁质,(chitin),、蛋白质、多糖等构成,。,故,青霉素类抗生素对真菌无作用,。,真菌,按形态可分为单细胞和多细胞两大类。,第一节,真菌,的生物学性状,（一）单细胞真菌,单细胞真菌呈圆形或卵圆形，常见为酵母菌,(Yeast),和类酵母菌,(Yeast-like fungus),。前者如新生隐球菌，后者如白假丝酵母菌,。,这,类真菌以芽生方式繁殖，但后者芽体可伸长形成与母体相连的假菌丝。,第一节,真菌,的生物学性状,（二）多细胞真菌,多细胞真菌大多长出菌丝和孢子，交织成团，称丝状菌,(filamentous fungus),，又称霉菌（,mold),。,不同,种类的真菌其菌丝和孢子的形态不同，是鉴别多细胞真菌的依据之一。,第一节,真菌,的生物学性状,1.,菌丝,(hypha),真菌,在适宜环境中，由孢子出芽长出芽管，并逐渐延长呈丝状，称菌丝,。,菌丝,再继续延长、分枝、交织成团，形成菌丝体,(mycelium),。,有,的菌丝伸入培养基或寄生物体中吸取营养，称为营养,菌丝；有,的向空气中生长，称为气生菌丝；产生孢子的气生菌丝称为生殖菌丝,。,第一节,真菌,的生物学性状,1.,菌丝,(hypha),有,的菌丝内能形成横隔膜，把菌丝分成数个相连的细胞，通过隔膜上的孔，细胞质可在细胞间流通,。,多数,致病性丝状菌为有隔菌丝,。,有些,真菌菌丝无横隔，由多个核的细胞构成，为无隔菌丝,。,真菌,菌丝形态有多种，随真菌种类不同而异，有助于鉴别真菌（见图,29-1,）。,第一节,真菌,的生物学性状,图,29-1,真菌的各种菌丝,第一节,真菌,的生物学性状,2,孢子,(spore),是,真菌的繁殖结构，由生殖菌丝产生,。,一,条菌丝可形成多个孢子，在环境适宜时，每个孢子又可发芽形成菌丝,。,和,细菌的芽胞不同，孢子的抵抗力不强，湿热,60,70,时迅速死亡,。,第一节,真菌,的生物学性状,2,孢子,(spore),真菌,的孢子可分为有性孢子和无性孢子两类,。,有,性孢子是由同一菌体或不同菌体两个细胞融合形成,。,无性孢子,是由菌丝上的细胞分化或出芽形成，按形态分为叶状孢子（包括芽生孢子、厚膜孢子、关节孢子）、分生孢子（包括大、小分生孢子）和孢子囊孢子等,(,见图,29-2),病原性真菌大多形成无性孢子。,第一节,真菌,的生物学性状,图,29-2,真菌的各种无性孢子,第一节,真菌,的生物学性状,二、培养特征,真菌对营养要求不高，常用沙保,(Sabouraud),培养基,(,含,4%,葡萄糖、,1%,蛋白胨、琼脂、,NaCl),培养,。,最,适,pH 4.0,6.0,。,浅部,感染真菌最适生长温度为,22,28,，需较高的湿度与氧,。,浅部,感染性真菌生长缓慢，常需,1,4,周才能长出典型的菌落；深部感染性真菌的培养条件与一般病原性细菌相似，最适生长温度为,37,，生长较快，经,2,4,天多能长出典型的菌落,。,第一节,真菌,的生物学性状,真菌的菌落有,3,种类型：,1.,酵母型菌落（,yeast type colony,）,由,单细胞真菌形成，与一般细菌菌落相似，菌落光滑湿润，柔软致密，如新生隐球菌的菌落,。,显微镜,下观察可见单细胞性的芽生孢子，无菌丝,。,第一节,真菌,的生物学性状,真菌的菌落有,3,种类型：,2,.,类酵母型菌落,亦,称酵母样菌落（,yeast-like type colony,），由单细胞真菌形成，菌落外观上和酵母型菌落相似，但在显微镜下可见假菌丝，如白假丝酵母菌出芽后，芽管延长不与母细胞脱离而形成假菌丝，伸入培养基内,。,第一节,真菌,的生物学性状,真菌的菌落有,3,种类型：,3,.,丝状菌落（,filamentous type colony,）,为,多细胞真菌的菌落形式，由疏松的菌丝体构成，呈棉絮状、绒毛状或粉末状，菌落正背两面可呈现不同的颜色,。,丝状,菌落的形态和颜色可作为鉴定真菌的参考。,第一节,真菌,的生物学性状,三、繁殖方式,真菌依靠菌丝和孢子繁殖，除有性繁殖外，无性繁殖是真菌的主要繁殖方式，其特点是简单、快速、产生新个体多，主要形式有下列四种：,1.,芽生,从,细胞壁发芽，母细胞进行核分裂，一部分核进入子细胞，后在母细胞和子细胞之间产生横隔，成熟后从母体分离。常见于酵母菌和酵母样真菌,。,第一节,真菌,的生物学性状,三、繁殖方式,主要,形式有下列四种：,2,.,裂殖,细胞分裂,产生子细胞，多发生在单细胞的类型中，如裂殖酵母,。,3.,萌管,有的真菌孢子以萌管方式进行繁殖，芽管延长后形成菌丝。,第一节,真菌,的生物学性状,三、繁殖方式,主要,形式有下列四种：,4,.,隔殖,有些,分生孢子是在分生孢子梗某一段落形成一横隔，随之原生质浓缩而形成一个新的孢子，孢子可再独立繁殖。,第一节,真菌,的生物学性状,四、变异性与抵抗力,真菌很容易发生变异，在培养基上经多次传代或,培养过,久，其形态、菌落性状及各种生理性状均可发生改变,。,真菌对热的抵抗力不强，湿热,60,1,小时，菌丝及孢子均可被杀死,。,对,2%,石炭酸、,2.5%,碘酊或,10%,甲醛溶液较敏感，但对干燥、日光、紫外线及一般消毒剂有较强的抵抗力,。,对,常用抗生素不敏感,。,灰黄霉素,、制霉菌素、二性霉素,B,、克霉唑、酮康唑、伊曲康唑等对多种真菌有较强的抑制作用。,第二节,真菌,的致病性与免疫性,一、致病性,真菌对人体具有一定的毒力，如白假丝酵母菌具有黏附人体细胞的能力，荚膜组织胞质菌、皮炎芽生菌、新生隐球菌等有抗吞噬作用，白假丝酵母菌、烟曲霉、黄曲霉的细胞壁糖蛋白有内毒素样活性，能引起组织化脓性反应性休克等,。,真菌,所致疾病主要有以下几种形式,：,1.,致病性真菌感染,2.,机会致病性真菌感染,3.,超敏反应性疾病,4.,毒素中毒性疾病,第二节,真菌,的致病性与免疫性,1.,致病性真菌感染,主要,为浅部真菌的外源性感染，如皮肤癣菌有嗜角质性，能产生角蛋白酶水解角蛋白，在感染的局部如表皮、毛发和指（趾）甲等部位大量繁殖，引起局部炎症等病变,。,深部,真菌具有抗吞噬作用，感染后被吞噬细胞吞噬而不被杀死，能在细胞内繁殖，引起慢性肉芽肿或组织溃疡、坏死。,第二节,真菌,的致病性与免疫性,2.,机会致病性真菌感染,主要,为内源性真菌感染，如白假丝酵母菌、曲霉、毛霉等。此类真菌致病力不强，对正常机体无致病性，但在机体免疫力低下或菌群失调时，可感染致病,。,常,发生于肿瘤、免疫缺陷、糖尿病、烧伤或长期应用广谱抗生素、糖皮质激素、放疗或化疗的患者,。,另外,，手术、导管、插管等也给真菌的入侵提供了门户，应予以重视。,第二节,真菌,的致病性与免疫性,3.,超敏反应性疾病,有些,真菌对机体无致病作用，但其抗原物质可引起机体发生超敏反应,。,当,敏感者吸人或食人某些菌丝或孢子时可导致超敏反应的发生，如哮喘、过敏性鼻炎、皮炎及荨麻疹等,。,另外,，皮肤癣菌所致的皮疹亦属此例。,第二节,真菌,的致病性与免疫性,4.,毒素中毒性疾病,某些,真菌污染粮食、食品或饲料，并在其中生长繁殖产生毒素，人或动物食入后可引起急性或慢性中毒，称为真菌中毒症,(mycotoxicosis),。,其,表现因毒素不同而异，可引起肝、肾，神经系统的损害及造血功能障碍,。,与,细菌性食物中毒不同，真菌中毒无急性胃肠炎症状，没有传染性，但有明显的季节性和地区性,。,粮食,在食用前多次搓洗对真菌中毒症有一定的预防作用。,第二节,真菌,的致病性与免疫性,此外，某些真菌的产物与肿瘤有关，如研究最多的黄曲霉毒素，毒性很强，小剂量即有致癌作用,。,在,肝癌高发区，粮食和油料作物中的黄曲霉污染率很高，是肝癌病因中的重要因素之一,。,其他,致癌的真菌毒素还有赭曲霉产生的黄褐毒素等。,第二节,真菌,的致病性与免疫性,二、免疫性,(,一,),天然免疫,人体,对真菌有较强的天然免疫力,。,主要,包括皮肤黏膜的屏障及分泌作用、正常菌群的拮抗作用、吞噬细胞的吞噬作用和体液中杀真菌物质的作用,。,皮肤,黏膜一旦受损，真菌即可入侵,。,皮脂腺,分泌的不饱和脂肪酸有杀真菌作用，由于儿童的分泌量比成人少，故儿童易患头癣,。,第二节,真菌,的致病性与免疫性,二、免疫性,(,一,),天然免疫,成人,因掌跖部缺乏皮脂腺且局部汗多潮湿，故易患手足癣,。,人体,的正常菌群对寄生部位（如口腔、肠道、阴道）的白假丝酵母菌等有拮抗作用，可防止其大量繁殖，若长期应用广谱抗生素，破坏了菌群的拮抗作用，则假丝酵母菌大量繁殖，引起机会性感染,。,另外,，吞噬细胞被激活后释放的,H,2,O,2,、次氯酸、防御素,(defensin),以及正常体液中存在的转铁蛋白、促癣吞噬肽,(tuftsin),等在抗真菌感染方面也起一定作用。,第二节,真菌,的致病性与免疫性,(,二,),获得性免疫,包括细胞免疫和体液免疫,。,一般,认为，真菌感染的恢复主要靠细胞免疫，如患恶性肿瘤、艾滋病或长期应用免疫抑制剂导致细胞免疫功能低下者，均易发生真菌感染，甚至发生播散性真菌感染,。,真菌,感染也能刺激机体产生抗体，但抗体的抗真菌作用尚难肯定，即使有补体存在也不能将真菌完全杀灭。抗体可阻止某些深部真菌（如白假丝酵母菌）的再感染。,第三节 真菌感染的检查与防治,原,一、病原生物学检查,（一）标本的采集,浅部感染可取病变部位的鳞屑、病发或甲屑。深部真菌感染则取病变部位分泌物、排泄物、体液、痰液及血液等。,标本采集应注意,：,标本量应充足，如血液、脑脊液不少于,5mL,，胸水不少于,20mL,；,标本应新鲜，取材后立即送检，最长不超过,2,小时,；,严格无菌操作，避免污染。,第三节 真菌感染的检查与防治,原,（二）形态学检查,1,直接显微镜检查,粘稠,或含角质的甲屑类标本，先用,10%KOH,微加热处理后，不染色直接镜检，如见到孢子或菌丝可初步诊断为真菌病,。,深部,真菌感染，如疑似白假丝酵母等感染，可取分泌物或体液标本离心沉淀物作涂片和革兰染色后镜检，若发现卵圆形、大小不均、着色不匀，还有芽生孢子，甚至有假菌丝的革兰染色阳性菌体即可初步诊断,。,怀疑,新生隐球菌感染时取脑脊液作墨汁负染色观察，见有肥厚荚膜的酵母型菌体即可确诊,。,第三节 真菌感染的检查与防治,原,（二）形态学检查,2,分离培养,一般,常用含抗生素和放线菌酮（抑制细菌和放线菌的生长）的沙保培养基，温度,25,（丝状真菌）或,37,（酵母型真菌）进行培养,。,对于,丝状真菌可在培养后，乳酸酚棉兰染色显微镜下观察菌丝、孢子的特征，结合菌落特征作出鉴定。,第三节 真菌感染的检查与防治,原,（三）真菌抗原和抗体的检测,深部真菌病，可用,ELISA,法检测血清中或脑脊液中的特异性抗体或抗原，荧光抗体染色法对标本中抗原进行鉴定和定位。,第三节 真菌感染的检查与防治,原,二、防治原则,真菌性疾病目前尚无特异性预防方法,。,关于,皮肤癣菌感染的预防，应以避免和去除诱因，提高机体抵抗力为主要措施。应注意,：,避免与患者直接或间接的接触，以切断传播途径,；,注意皮肤卫生，保持皮肤清洁、干燥,；,保持皮肤黏膜完整性，阻止皮肤癣菌感染。当皮肤破损、糜烂、潮湿时，更易引起感染,。,深部,感染的真菌多为机会致病菌，应提高机体免疫力以防止感染,。,第三节 真菌感染的检查与防治,原,二、防治原则,癣,病以局部治疗为主，可用水杨酸、苯甲酸、十一烯酸、咪康唑、酮康唑和克霉唑软膏等外用药,。,若,疗效不佳或深部真菌感染可用口服抗真菌药，如二性霉素,B,与氟胞嘧啶合用、制霉菌素、咪康唑等及副作用较小的新药酮康唑、氟康唑、伊曲康唑等。,Thank You!,