钙磷镁和微量元素检验PPT课件.ppt

第十三章第十三章 钙、磷和微量、磷和微量元素元素检验第一第一节 钙、磷代、磷代谢及及 平衡紊乱平衡紊乱第二第二节 镁代代谢及平衡及平衡 紊乱紊乱第三第三节 微量元素与疾微量元素与疾 病病第四第四节 钙、磷和微量、磷和微量 元素元素测定定1-掌握掌握钙、磷、磷测定的推荐方法。定的推荐方法。熟悉熟悉血清血清铁及及总铁结合力的合力的测定方法。定方法。了解了解镁、铜、锌的的测定方法，定方法，钙、磷、磷、镁代代谢及平衡紊乱，微量元素与疾病的关及平衡紊乱，微量元素与疾病的关系。系。2-第一第一节 钙、磷代、磷代谢及其平衡紊乱及其平衡紊乱一、一、钙、磷代、磷代谢（一）含量与分布（一）含量与分布钙是是体体内内含含量量最最多多的的无无机机盐，占占体体重重的的1.5%2%，总量量约7001400g，其其次次是是磷磷，占占 体体 重重 0.8%1.2%，总 量量 约 400 800g。99%以以上上的的钙和和86%以以上上的的磷磷是是以以羟磷磷灰灰石石形式沉形式沉积于骨、牙。于骨、牙。3-（二）吸收与排泄（二）吸收与排泄吸吸收收：在在pH较低低的的小小肠上上段段，钙的的吸吸收收率率随随年年龄的的增增长而而降降低低，每每增增加加10岁减减少少5%10%，婴儿儿吸吸收收率率可可达达50%以以上上，儿儿童童40%，成人，成人20%左右，故老人易左右，故老人易发生骨生骨质疏松症。疏松症。磷的吸收率磷的吸收率约70%，低磷，低磷时可达可达90%。排泄：排泄：主要通主要通过肠道和道和肾脏。钙：80%肠道道20%肾脏磷：磷：30%肠道道70%肾脏4-（三）血（三）血钙与血磷与血磷血血液液中中钙几几乎乎全全部部存存在在于于血血浆，正正常常血血清清钙2.252.75mmol/L（911mg/dl）。）。离子离子钙50%可可扩散散钙血血钙H+HCO3柠檬酸檬酸钙碳酸碳酸氢钙结合合钙50%蛋白蛋白结合合钙非非扩散散钙5-发挥生生理理作作用用的的是是离离子子钙，但但临床床实验室室测定定的的大大多多数数是是总钙。血血浆中中Ca2、H、HCO3的关系可用下式表示。的关系可用下式表示。血血磷磷是是指指血血液液中中的的无无机机磷磷酸酸盐（HPO42、H2PO4）正正常常人人血血清清无无机机磷磷0.971.61mmol/L（35mg/dl），），儿童稍高。儿童稍高。6-CaP=3540大大于于40骨骨盐沉沉积，有有利利于于骨骨钙化化。小小于于35骨骨盐溶解。溶解。（四）（四）钙、磷生理功能、磷生理功能钙：1.参与血液凝固。参与血液凝固。2.参与肌肉收参与肌肉收缩。3.维持神持神经肌肉肌肉应激性。激性。4.作作为第二信使。第二信使。7-磷：磷：1.作作为核酸、磷脂、磷蛋白合成的核酸、磷脂、磷蛋白合成的原料。原料。2.参与高能磷酸化合物的合成。参与高能磷酸化合物的合成。3.构成核苷酸构成核苷酸辅酶。4.构成磷酸构成磷酸盐缓冲冲对。8-二、二、钙、磷代、磷代谢调节1.维生素生素D3（VitD3）D325-OHD31,25-（OH）2D3促促进肠道道对钙、磷磷的的吸吸收收；促促进肾小小管管对钙、磷的重吸收；、磷的重吸收；协同同PTH促促进骨重建。骨重建。肝肝肾1-羟化化酶25-羟化化酶9-2.甲甲状状旁旁腺腺素素（PTH）甲甲状状旁旁腺腺主主细胞胞分分泌泌的的84肽。促促进溶溶骨骨作作用用，促促进间充充质细胞胞转化化成成破破骨骨细胞胞，抑抑制制破破骨骨细胞胞转化化为成成骨骨细胞胞；促促进肾小小管管对钙的的重重吸吸收收，抑抑制制磷磷的的重重吸吸收。收。3.降降钙素素（CT）甲甲状状腺腺滤泡泡旁旁细胞胞分分泌泌的的32肽，与与PTH拮拮抗抗。促促进成成骨骨作作用用，抑抑制制间充充质细胞胞转化化为破破骨骨细胞胞，促促进破破骨骨细胞胞转化化为成骨成骨细胞；抑制胞；抑制肾小管小管对钙、磷的重吸收、磷的重吸收。10-PTH间充充质细胞胞破破骨骨细胞胞成成骨骨细胞胞CT三、三、钙、磷代、磷代谢紊乱紊乱（一）（一）钙代代谢紊乱紊乱总钙的异常的异常表表现为游离游离钙的异常的异常总钙和游离和游离钙的异常的异常1.低低钙血症（血症（hypocalcemia）血血钙浓度低于度低于2.25mmol/L，称，称为低血低血钙。11-常常见病因：病因：低清蛋白血症低清蛋白血症血清血清总钙降低，游离降低，游离钙多正常多正常慢性慢性肾功能衰竭功能衰竭甲状旁腺功能减退甲状旁腺功能减退,PTH分泌不足分泌不足维生素生素D缺乏缺乏电解解质代代谢紊乱紊乱12-2.高高钙血症（血症（Hypercalcemia）血血钙浓度高于度高于2.75mmol/L，称，称为高血高血钙。常常见病因病因:钙溢出溢出进入入细胞外液胞外液肾对钙的重吸收增加的重吸收增加肠道道对钙吸收增吸收增强骨髓的重吸收增加骨髓的重吸收增加原原发性甲状旁腺功能亢性甲状旁腺功能亢进和和PTH过度分泌度分泌13-（二）磷代（二）磷代谢紊乱紊乱1.低低磷磷血血症症指指血血清清无无机机磷磷浓度度低低于于0.97mmol/L。常常见病因病因:磷向磷向细胞内胞内转移移肾磷酸磷酸盐阈值降低降低肠道磷酸道磷酸盐的吸收减少的吸收减少细胞外磷酸胞外磷酸盐丢失失14-2.高磷血症高磷血症指血清无机磷指血清无机磷浓度高于度高于1.61mmol/L。常常见病因病因:常因常因肾脏排泌磷酸排泌磷酸盐的能力不足而致的能力不足而致,其他引起的因素与增加或磷酸其他引起的因素与增加或磷酸盐从从组织进入到入到细胞外液等有关。胞外液等有关。肾排泌磷酸排泌磷酸盐能力下降能力下降磷酸磷酸盐摄入入过多多细胞内磷酸胞内磷酸盐大量大量转运出运出15-第二第二节 镁代代谢及其平衡紊乱及其平衡紊乱一、一、镁的代的代谢1.镁的的含含量量与与分分布布占占体体重重的的0.03%，正正常常成成人人镁的的总量量2028g，其其中中60%存存在在于于骨骨骼骼，20%30%存存在在于于骨骨骼骼肌肌，其其余余10%存存在在于于其其它它组织中中。体体液液中中细胞胞内内液液镁的含量占的含量占总量的量的39%，而，而细胞外液胞外液仅占占1%。16-2.血血镁血血浆镁浓度度约0.671.23mmol/L，存在形式主要有三种存在形式主要有三种。离子离子镁55%血血镁碳酸碳酸氢镁、柠檬酸檬酸镁、磷酸、磷酸镁等等15%蛋白蛋白结合合镁30%发挥生理作用的是离子生理作用的是离子镁。17-3.吸吸收收与与排排泄泄食食物物镁含含量量丰丰富富，人人体体每每天天需需要要量量300350mg，镁的的吸吸收收主主要要在在小小肠，吸吸收收率率只只有有30%40%，吸吸收收率率与与肠腔腔中中镁的的含量成反比。体内含量成反比。体内镁的排泄主要通的排泄主要通过肾脏。（二）（二）镁的生理功能的生理功能1.作作为酶的的辅助助因因子子体体内内约300种种酶的的辅助因子是助因子是Mg2+。2.维持神持神经肌肉的肌肉的应激性激性Mg2+能降低神能降低神经肌肉的肌肉的应激性。激性。18-二、二、镁代代谢紊乱紊乱（一）低（一）低镁血症血症临床床上上将将血血镁浓度度低低于于0.67mmol/L时，称称为低低镁血症。常血症。常见原因：原因：1.吸吸收收障障碍碍严重重腹腹泻泻、吸吸收收不不良良综合合征征、溃疡性性结肠炎炎、肠道道大大部部分分切切除除术、肝肝硬化、胆道疾病等。硬化、胆道疾病等。2.醛固固酮分分泌泌增增多多使使肠道道镁吸吸收收和和肾小管小管镁重吸收减少。重吸收减少。19-3.肾脏疾疾病病如如慢慢性性肾盂盂肾炎炎、肾小小管管酸中毒引起酸中毒引起肾小管重吸收机能减退。小管重吸收机能减退。4.甲甲状状腺腺功功能能亢亢进及及甲甲状状旁旁腺腺功功能能亢亢进患者患者约半数以上可表半数以上可表现低低镁血症。血症。5.糖糖尿尿病病酸酸中中毒毒尿尿镁显著著增增加加，可可引引起起低低镁血血症症，用用胰胰岛素素治治疗后后，镁向向细胞胞内内转移，可加重低血移，可加重低血镁。6.药物物的的应用用如如长期期应用用利利尿尿剂、庆大霉素、免疫抑制大霉素、免疫抑制剂，使，使肾排排镁增加。增加。20-临床表床表现：1.神神经肌肌肉肉系系统手手足足搐搐搦搦最最常常见，大大多多是是因因合合并并甲甲状状旁旁腺腺素素分分泌泌过少少及及血血钙过低低而致。而致。2.心心血血管管系系统心心电图常常见为QT延延长、ST段段压低低、T波波增增宽呈呈低低而而平平，其其他他各各种种心心律紊乱。律紊乱。3.其其他他低低镁可可促促进血血管管收收缩，正正常常尿尿镁可可以以抑抑制制尿尿中中钙盐结石石形形成成，长期期低低镁者者易易发生尿路生尿路结石。石。21-（二）高（二）高镁血症血症临床床上上将将血血镁浓度度大大于于1.04mmol/L时，称称为高高镁血症。常血症。常见原因：原因：1.以以急急性性或或慢慢性性肾功功能能衰衰竭竭多多见，但但一一般般肾功功能能衰衰竭竭患患者者血血镁大大多多仍仍能能维持持正正常常或或正正常偏高水平，且无高常偏高水平，且无高镁血症血症导致的症状。致的症状。2.甲甲状状腺腺素素可可抑抑制制肾小小管管镁重重吸吸收收、促促进尿尿镁排排出出，故故某某些些黏黏液液性性水水肿的的患患者者可可发生生高高镁血血症症。醛固固酮也也有有抑抑制制肾小小管管镁重重吸吸收收、促促进尿尿镁排排出出的的作作用用，故故Addison病病患患者者可可有有高高镁血症。血症。22-临床表床表现：高高镁血血症症的的临床床表表现与与血血清清镁升升高高的的幅幅度度及及速速度度均均有有关关。短短时间内内迅迅速速升升高高者者临床床症状症状较重。重。1.对神神经-肌肌肉肉的的影影响响血血清清镁升升高高可可抑抑制制神神经-肌肌肉肉接接头以以及及中中枢枢神神经乙乙酰胆胆碱碱的的释放，故表放，故表现为呼吸肌无力和中枢抑制状呼吸肌无力和中枢抑制状态。2.对心心脏的的影影响响主主要要表表现为自自律律性性细胞胞的的抑抑制制作作用用，表表现为窦性性心心动过缓、各各种种情情况的况的传导阻滞。阻滞。23-3.对血血管管的的影影响响高高血血镁可可抑抑制制交交感感神神经节前前纤维乙乙酰胆胆碱碱的的释放放，相相应去去甲甲肾上上腺腺素素释放放减减少少，故故表表现为血血管管平平滑滑肌肌舒舒张，皮皮肤肤潮潮红，血，血压下降。下降。4.对消消化化系系统的的影影响响高高血血镁抑抑制制自自主主神神经递质的的释放放，并并直直接接抑抑制制胃胃肠道道平平滑滑肌肌，患患者可表者可表现有腹有腹胀、便秘、便秘、恶心、呕吐等。心、呕吐等。5.对呼呼吸吸系系统的的影影响响严重重高高血血镁可可使使呼呼吸吸中中枢枢兴奋性性降降低低和和呼呼吸吸肌肌麻麻痹痹，导致致呼呼吸吸停停止。止。24-第三第三节 微量元素与疾病微量元素与疾病是是指指含含量量占占体体重重0.01%以以下下的的元元素素。体体内内约50多种。多种。必需的必需的Fe、Cu、Zn、V、Co、Mo、Ni、Cr、Sn、Mn、Se、Si、I、F非必需的非必需的Rb、As、B、Al、Ba等等有害的有害的Bi、Be、Cd、Hg、Pb等等微微量量元元素素25-一、必需微量元素的共同特征一、必需微量元素的共同特征1.必需微量元素多数必需微量元素多数为金属元素；金属元素；2.必必需需微微量量元元素素多多数数位位于于元元素素周周期期表表中中居前部的位置；居前部的位置；3.必必需需微微量量元元素素具具有有高高度度生生物物学学活活性性及及催化生化反催化生化反应的能力；的能力；4.各各种种微微量量元元素素之之间有有相相互互影影响响、拮拮抗抗或或协同作用。同作用。26-种种类体内含量体内含量主要分布主要分布每日需要量每日需要量铁35g红细胞、肝、脾胞、肝、脾11.5mg锌23g骨、肌肉、皮肤、骨、肌肉、皮肤、1020mg铜100150mg肌肉、肝、肌肉、肝、肾、心、毛、心、毛发、脑1.52mg锰1220mg肝、肝、肾、骨、松果体、垂体、乳腺、骨、松果体、垂体、乳腺2.57mg钴1.11.5mg肝、肝、肾、骨、心、脾、胰、小、骨、心、脾、胰、小肠0.150.45mg铬6mg骨、皮肤、脂肪、骨、皮肤、脂肪、肾上腺、大上腺、大脑0.050.2mg钼10mg肝、肝、肾、骨、皮肤、骨、皮肤150g二、必需微量元素含量、分布及生理功能二、必需微量元素含量、分布及生理功能（一）必需微量元素含量与分布（一）必需微量元素含量与分布27-种种类体内含量体内含量主要分布主要分布每日需要量每日需要量镍610mg骨、肺、骨、肺、肾、皮肤、皮肤30g硒硒1421g肝、胰、肝、胰、肾、心、脾、牙釉、心、脾、牙釉质3050g碘碘2536mg甲状腺、唾液腺、胃粘膜、泌乳期甲状腺、唾液腺、胃粘膜、泌乳期乳腺乳腺0.10.3mg钒25mg牙、骨、肺、脾、肝、牙、骨、肺、脾、肝、肾3g锡520mg骨、牙、肝、脾骨、牙、肝、脾3mg氟氟2.6g骨、牙、甲状腺、皮肤骨、牙、甲状腺、皮肤12mg硅硅1518g肌腱、骨肌腱、骨骺、结缔组织、皮肤、皮肤2mg人体内必需微量元素含量、分布与每日需要量人体内必需微量元素含量、分布与每日需要量28-（二）必需微量元素的生理功能（二）必需微量元素的生理功能1.促促进机机体体的的生生长发育育铁、铜、锌、锰、钴、碘等，作、碘等，作为酶和激素的重要和激素的重要组成成分。成成分。2.对神神经系系统结构构和和功功能能的的影影响响铁、铜、锌、锰、钴、碘碘等等缺缺乏乏时可可导致致神神经系系统结构构和功能的异常，智力低下。和功能的异常，智力低下。3.对内内分分泌泌系系统的的影影响响铜、铁、锌、锰、铬等元素的缺乏或等元素的缺乏或过量可引起内分泌功能失常。量可引起内分泌功能失常。29-4.对免免疫疫系系统的的影影响响铁、铜、锌等等缺乏缺乏时可降低机体的免疫力。可降低机体的免疫力。5.对心血管疾病及心血管疾病及创伤的影响的影响适量的适量的锌、锰、铬、硒等元素有利于心血管的、硒等元素有利于心血管的结构和功能。如食物中的构和功能。如食物中的锌/镉比与高血比与高血压的的发生和生和预后密切相关。多种微量元素后密切相关。多种微量元素还能能影响核酸和蛋白影响核酸和蛋白质的生物合成，故有利于的生物合成，故有利于创伤的愈合和疾病的恢复。的愈合和疾病的恢复。30-三、必需微量元素与疾病的关系三、必需微量元素与疾病的关系（一）微量元素缺乏症与（一）微量元素缺乏症与过多症多症1.微量元素缺乏症微量元素缺乏症元素元素功能功能缺乏症缺乏症铁造血原料，构成造血原料，构成细胞色素胞色素类缺缺铁性性贫血血锌细胞分裂，核酸代胞分裂，核酸代谢，辅助因子助因子伊朗伊朗乡村病，村病，肠原性肢端皮炎原性肢端皮炎铜Hb合成，合成，结缔组织代代谢贫血，毛血，毛发异常，异常，脑功能障碍功能障碍铬构成葡萄糖耐量因子构成葡萄糖耐量因子糖耐量糖耐量，糖尿病，糖尿病，动脉硬化脉硬化碘碘构成构成T3、T4，促，促进生生长、发育育地方性甲状腺地方性甲状腺肿，呆小病，呆小病钴构成构成维生素生素B12，造血，造血恶性性贫血，甲基丙二酸尿症血，甲基丙二酸尿症硒硒抗氧化抗氧化克山病，大骨克山病，大骨节病病锰多种多种酶的激活的激活剂生生长发育育迟缓，中枢神，中枢神经系异常系异常氟氟骨、牙骨、牙齿形成形成龋齿31-2.微微量量元元素素的的过多多症症铁过剩剩的的血血色色沉沉着着病病，铁吸吸收收过多多，在在心心、胰胰腺腺、睾睾丸丸、肝肝内沉内沉积，导致致组织纤维化。化。（二）微量元素与地方病（二）微量元素与地方病地地方方性性甲甲状状腺腺肿是是因因长期期缺缺碘碘所所引引起起的的以以甲甲状状腺腺增增生生为主主的的慢慢性性地地方方病病。在在胎胎儿儿或或婴儿儿时期期严重重缺缺碘碘，可可引引起起克克汀汀病病（俗俗称称呆呆小小病病），以以中中枢枢神神经系系统损害害、甲甲状状腺腺功功能能低低下下及及生生长发育育停停滞滞为主主要要病病变。患患者者身身材材特特别矮矮小小、精精神神迟钝、智智力力低低下下，甚甚至至发生生聋哑和痴呆。和痴呆。32-克克山山病病1935年年在在黑黑龙江江省省克克山山县首首次次暴暴发流流行行，由由于于当当时对病病因因不不了了解解，故故以以地地名名命命名名为“克克山山病病”。经流流行行病病学学调查，发现病病区区在在内内外外环境境方方面面均均处于于低低硒硒状状态。临床床表表现主主要要是是以以心心肌肌坏坏死死造造成成的的心心源源性性休休克克和和充血性心力衰竭充血性心力衰竭。伊伊朗朗乡村村病病1961年年，一一名名英英国国医医生生在在伊伊朗朗的的乡村村发现一一些些儿儿童童和和青青少少年年食食欲欲很很差差，生生长发育育缓慢慢，身身材材矮矮小小而而成成为株株儒儒。后后来来经营养学家研究养学家研究发现是由于缺是由于缺锌所致。所致。33-一、一、钙的的测定定血血钙测定方法很多。定方法很多。化学法化学法滴定法（氧化滴定法（氧化还原滴定，原滴定，络合滴定）；合滴定）；比色法（比色法（邻甲酚甲酚酞络合法，甲基麝香合法，甲基麝香草酚草酚蓝法）。法）。物理法物理法火焰光度法；火焰光度法；ISE法；法；原子吸收分原子吸收分光光度法；光光度法；同位素稀同位素稀释质谱法。法。血血钙测定定第四第四节 钙、磷和微量元素、磷和微量元素测定定34-1.EDTA-Na2络合合滴滴定定法法在在碱碱性性溶溶液液中中，血血清清钙与与钙红指指示示剂结合合成成可可溶溶性性的的复复合合物物，使使溶溶液液呈呈淡淡红色色，EDTA-Na2对钙有有很很大大的的亲和和力力，能能与与复复合合物物中中的的钙络合合，使使钙红指指示示剂重重新新游游离离，溶溶液液变蓝色，根据色，根据EDTA-Na2滴定用量可滴定用量可计算出血清算出血清钙含量。含量。钙钙红钙-钙红复合物复合物淡淡红色色钙-钙红复合物复合物EDTA-Na2EDTACa钙红蓝色色35-钙指指示示剂除除钙红外外，还有有依依地地铬黑黑T（红蓝），钙黄黄绿素素（黄黄绿），紫紫红酸酸铵（红紫紫）。钙红指指示示剂终点点明明显，不不受受血血清清镁干干扰，镁在在强碱碱性性条条件件下下生生成成Mg（OH）2，指指示示剂在在强碱碱性性条条件件下下不不稳定定，加加指指示示剂后后应立立即滴定。即滴定。操操作作简便便，无无需需特特殊殊仪器器设备，适适合合于于基基层医医院院，但但终点点判判断断人人为误差差较大大，溶溶血血、黄黄疸影响疸影响终点判断。点判断。36-2.邻甲甲酚酚酞络合合酮法法（O-CPC）邻甲甲酚酚酞络合合酮是是一一种种金金属属络合合染染料料，也也是是一一种种酸酸碱碱指指示示剂，在在碱碱性性溶溶液液中中能能与与钙和和镁螯螯合合，生生成成紫紫红色色螯螯合合物物（吸吸收收峰峰575nm），作作钙测定定时，加加入入8-羟基基喹啉啉消除消除镁的干的干扰。37-Mg2+8-羟基基喹啉啉可溶性可溶性络合物合物Ca2+邻甲甲酚酚酞络合合酮紫紫红色色螯螯合合物物灵灵敏敏度度很很高高，试管管、器器皿皿如如有有微微量量的的钙污染染亦亦会会引引起起误差差，最最好好使使用用一一次次性性试管管，所所有有试剂置塑料瓶中保存。置塑料瓶中保存。38-3.甲甲基基麝麝香香草草酚酚蓝法法（MTB）血血清清钙 在在 碱碱 性性 溶溶 液液 中中 与与 甲甲 基基 麝麝 香香 草草 酚酚 蓝（MTB）结合合，生生成成一一种种蓝色色络合合物物，加加入入8-羟基基喹啉消除啉消除镁干干扰。显色色稳定定，线性性范范围大大，溶溶血血、黄黄疸疸无干无干扰。39-4.离离子子选择电极极法法（ISE）此此法法迅迅速速、简便便、灵灵敏敏度度高高、重重复复性性好好，并并可可同同时测定定总钙和和离离子子钙，离离子子钙测定定最最好好用用血血清清，不不用用抗抗凝凝剂，在在急急需需检测结果果时可可用用肝肝素素抗凝。抗凝。【正常参考【正常参考值】成人成人总钙2.252.75mmol/L离子离子钙1.151.42mmol/L40-二、血清无机磷二、血清无机磷测定定目目前前还不不能能直直接接测定定人人体体内内的的磷磷元元素素，各各种种方方法法都都是是直直接接地地分分析析两两种种磷磷酸酸盐阴阴离离子子（HPO42、H2PO4），常常用用的的方方法有磷法有磷钼酸法，染料法，酸法，染料法，酶法。法。41-1.磷磷钼酸酸法法以以三三氯醋醋酸酸沉沉淀淀蛋蛋白白，在在无无蛋蛋白白滤液液中中加加入入钼酸酸铵试剂，与与无无机机磷磷结合合成成磷磷钼酸酸，再再以以硫硫酸酸亚铁为还原原剂，还原原成成钼蓝。（NH4）6Mo7O243H2SO44H2O7H2MoO43（NH4）2SO412H2MoO4H3PO412MoO3H3PO412H2O12MoO3H3PO4还原原剂钼蓝42-还原原剂有有很很多多种种，1-氨氨基基-2-萘酚酚-4-磺磺酸酸，应用用历史史较久久，试剂不不太太稳定定，显色色时间长，灵灵敏敏度度不不高高。氯化化亚锡，灵灵敏敏度度较高高，颜色色强度度随随显色色时间而而改改变，偏偏离离Beer定定律律。硫硫酸酸亚铁，显色色较稳定定。米米吐吐尔，不不需需去去蛋蛋白白，可可直直接接显色色，快快速速简便便。是是卫生生部部临床床检验中中心心推荐的两种推荐的两种还原原剂。43-2.酶法法GnH3PO4Gn-1G-1-PG-1-PG-6-PG-6-PNADP6-磷酸葡萄糖磷酸葡萄糖酸酸NADPHH糖原磷酸化糖原磷酸化酶葡萄糖磷酸葡萄糖磷酸变位位酶6-磷酸葡萄糖脱磷酸葡萄糖脱氢酶44-三、三、镁的的测定定化学法化学法钙镁试剂比色法，达旦黄比色法，达旦黄比色法，甲基麝香草酚比色法，甲基麝香草酚蓝比色法。比色法。传统方法方法测定方法定方法物理法物理法原子吸收分光光度法，原子吸收分光光度法，（参考方法）同位素稀（参考方法）同位素稀释质谱法（决定性方法）法（决定性方法）酶法法新新进展，将成展，将成为新的自新的自动方法方法45-1.钙镁试剂比比色色法法血血清清镁在在碱碱性性条条件件下下与与钙镁试剂生生成成紫紫红色色络合合物物，颜色色深深浅浅与与镁浓度度成成正正比比。加加入入EGTA乙乙二二醇醇双双（-氨氨基基乙乙醚）-N，N，N,N-四四乙乙酸酸，可消除可消除钙的干的干扰。吸收峰。吸收峰520nm。显色色稳定，操作定，操作简便，快速，可手工便，快速，可手工操作，也可用于自操作，也可用于自动化分析。化分析。46-2.甲甲基基百百里里香香酚酚蓝比比色色法法血血清清中中镁、钙离离子子在在碱碱性性溶溶液液中中能能与与甲甲基基百百里里香香酚酚蓝染染料料结合合，生生成成一一种种蓝色色复复合合物物，加加入入EGTA可可掩掩蔽蔽钙离离子子的的干干扰。与与同同样处理理的的镁标准准液液进行比行比较，求得血清，求得血清镁含量。吸收峰含量。吸收峰660nm。3.原原子子吸吸收收分分光光光光度度法法血血清清经酸酸性性氯化化镧溶溶液液作作50倍倍稀稀释，直直接接用用原原子子吸吸收收分分光光光光度度计检测285.2nm的吸光度。的吸光度。操操作作简便便，准准确确，精精密密度度好好，可可同同时进行行钙的的测定定422.7nm。47-酶法法测定定血血清清镁技技术的的报道道较多多，有有己己糖糖激激酶偶偶联葡葡萄萄糖糖-6-磷磷酸酸脱脱氢酶法法、葡葡萄萄糖糖激激酶偶偶联葡葡萄萄糖糖6磷磷酸酸脱脱氢酶法法、甘甘油油激激酶偶偶联甘甘油油-3-磷磷酸酸氧氧化化酶和和过氧氧化化物物酶法法、磷磷酸酸葡葡萄萄糖糖变位位酶偶偶联葡葡萄萄糖糖-6-磷磷酸酸脱脱氢酶法法、异异柠檬檬酸酸脱脱氢酶法法和和丙丙酮酸酸激激酶偶偶联乳乳酸酸脱脱氢酶法。法。这些些方方法法均均是是根根据据镁离离子子为酶激激动剂原原理理进行行血血清清镁离离子子测定定，优点点为方方法法灵灵敏敏，特异，准确性与精密度好，抗干特异，准确性与精密度好，抗干扰性性强。48-PEP和和ADP在在PK催催化化下下生生成成丙丙酮酸酸和和ATP，丙丙酮酸酸又又与与LDH系系统偶偶联经LDH催催化化生生成成乳乳酸酸，同同时，NADH氧氧化化为NAD+。镁离离子子的的存存在在可可使使PK活活性性显著著增增强，故故NADH在在340nm波波长时的的吸吸光光度度变化化，可可间接反映血清接反映血清镁离子离子浓度。反度。反应式如下：式如下：49-在在两两种种金金属属螯螯合合剂EDTA和和EGTA的的适适当当浓度度中中，以以镁离离子子作作为激激活活剂，通通过异异柠檬檬酸酸脱脱氢酶催催化化异异柠檬檬酸酸脱脱氢，使使NADP还原原成成NADPH。在在同同样的的条条件件下下，与与镁的的标准液比准液比较，即可求得血清，即可求得血清镁的含量。的含量。1.批内批内CV2.4，批，批间CV3.5。2.在在5mmol/L以内成以内成线性。性。3.血血清清中中钙的的浓度度高高达达4.15mmol/L时，对镁的的测定无干定无干扰。50-四、微量元素四、微量元素铁测定定（一）（一）铁代代谢概况概况铁是体内合成是体内合成Hb的重要原料之一，故人的重要原料之一，故人体内大部分体内大部分铁存在于存在于Hb中，缺中，缺铁使使红细胞中胞中Hb减少，而出减少，而出现贫血。正常成人血。正常成人铁的的总量，量，男性男性为35g，女性稍低。，女性稍低。Hb70%1ml血液含血液含铁0.51mgMb5%Cyt、含、含铁酶类1%储存形式存形式铁铁蛋白、含蛋白、含铁血黄素血黄素24%血血浆运运输形式形式铁0.1%51-铁的需要量：的需要量：成年男性成年男性1mg/d；青春期；青春期妇女女2mg/d。食物食物铁一般膳食含一般膳食含铁1015mg/日，日，吸收率吸收率10%Hb分解分解释放放80%被重新利用合成被重新利用合成Hb，少量少量储存存吸收部位：吸收部位：十二指十二指肠，空，空肠上段上段。铁的的来来源源52-吸收入血的吸收入血的铁（Fe2+）在）在铜蓝蛋白催化蛋白催化下氧化成下氧化成Fe3+，然后与运，然后与运铁蛋白蛋白结合，在血合，在血液中运液中运输，大部分运至骨髓用于合成，大部分运至骨髓用于合成Hb。运运铁蛋白蛋白Fe2+Fe3+Fe3+-运运铁蛋白蛋白一一般般血血浆中中运运铁蛋蛋白白只只有有25%30%被被铁饱和和。血血清清运运铁蛋蛋白白结合合铁的的最最大大量量称称为总铁结合合力力（TIBC）。血血清清铁和和总铁结合合力力的百分比称的百分比称为铁饱和度。和度。铜蓝蛋白蛋白53-铁饱和度和度100%铁的主要生理功能：的主要生理功能：1.合合成成血血红素素的的原原料料，进而而合合成成血血红蛋蛋白，参与氧的运白，参与氧的运输。2.用用于于合合成成铁卟啉啉化化合合物物，如如细胞胞色色素素、过氧氧化化物物酶、过氧氧化化氢酶，参参与与生生物物氧氧化化过程。程。血清血清铁总铁结合力合力54-（二）血清（二）血清铁测定定血清血清铁测定的方法有分光光度法定的方法有分光光度法（亚铁嗪比色法比色法）、原子吸收光、原子吸收光谱法和溶出伏安法等。法和溶出伏安法等。血清血清铁测定定血清血清铁测定定血清血清总铁结合力（合力（TIBC）测定定亚铁嗪比比色色法法可可用用于于自自动化化分分析析，也也可可用用于于手手工操作。工操作。55-运运铁蛋白蛋白-(Fe3+)2运运铁蛋白蛋白2Fe3+Fe3+还原原剂Fe2+Fe2+3亚铁嗪Fe2+-亚铁嗪(紫紫红色色)TIBC测定定，在在血血清清中中加加入入一一定定铁标准准液液，使使之之与与未未带铁的的运运铁蛋蛋白白结合合，多多余余的的铁用用轻质碳碳酸酸镁粉末吸附除去，然后粉末吸附除去，然后测定血清定血清总铁含量。含量。【正常参考【正常参考值】1.血清血清铁男男1130mol/L女女9.027mol/L2.血清血清总铁结合力合力5077mol/L3.铁饱和度和度20%55%酸性酸性562nm56-五、微量元素五、微量元素铜测定定（一）（一）铜代代谢概况概况正正常常成成人人铜的的总量量约100150mg。分分布布于于各各组织，以以肝肝、脑、心心含含量量较多多。大大多多以以铜蛋蛋白白的的形形式式存存在在。成成人人血血清清铜含含量量为0.02mmol/L。铜的的需需要要量量：婴儿儿和和儿儿童童0.51mg/kgd，成人，成人1.52.0mg/d吸吸收收部部位位：十十二二指指肠。吸吸收收率率5%10%。与与有有机机物物结合合的的铜其其吸吸收收率率比比无无机机铜盐高高。大多大多与与SOD和和巯基金属蛋白基金属蛋白结合而吸收。合而吸收。57-铜的生理功能的生理功能1.血血液液中中的的铜大大部部分分用用于于合合成成血血浆铜蓝蛋白蛋白，少数与白蛋白和，少数与白蛋白和球蛋白球蛋白结合。合。2.参参与与造造血血过程程和和铁的的代代谢影影响响铁的的吸吸收收、运运输和和利利用用。使使无无机机铁转化化成成有有机机铁，Fe3+变为Fe2+，动员储存存铁进入入骨骨髓，加速血髓，加速血红蛋白的合成。蛋白的合成。3.参参与与多多种种酶的的合合成成如如细胞胞色色素素c、酪酪氨氨酸酸酶、抗抗坏坏血血酸酸氧氧化化酶。构构成成SOD和和MAO的活性中心成分。的活性中心成分。58-（二）血清（二）血清铜测定定血清血清铜测定的方法有定的方法有分光光度法分光光度法（双双环己己酮草草酰二二腙比色法、比色法、5-Br-PADAP法法）、原子吸收、原子吸收光光谱法等。法等。2-（5-溴溴-2-吡吡啶偶氮）偶氮）-5-二乙氨基酚二乙氨基酚双双环己己酮草草酰二二腙比比色色法法选择性性好好，但但灵灵敏敏度度低低，血血清清用用量量大大，需需制制备无无蛋蛋白白血血滤液液，不不能能自自动化化。5-Br-PADAP法法不不需需去去蛋蛋白白可可用用于于自自动化化分分析，也可用于手工操作。析，也可用于手工操作。59-【参考范参考范围】成年男性：成年男性：1122mol/L成年女性：成年女性：12.624.4mol/L儿童：儿童：12.629.9mol/L（三）血清（三）血清铜和和铜蓝蛋白蛋白测定的定的临床意床意义1.血血清清铜增增高高肝肝硬硬化化、甲甲亢亢、感感染染、创伤和和肿瘤瘤时增加增加2.血血清清铜降降低低肝肝豆豆状状核核变性性（Wilson病）血清病）血清铜和和铜蓝蛋白含量降低蛋白含量降低60-本章小结1.钙、磷磷代代谢和和调节（含含量量、分分布布及及生生理理功功能能，吸吸收收与与排排泄泄，PTH、CT、1，25-（OH）2-D3对钙磷代磷代谢的的调节）。2.血血清清钙测定定离离子子钙的的测定定（离离子子选择电极极法法），总钙测定定（邻甲甲酚酚肽络合合酮法法、甲甲基基麝麝香香草草酚酚蓝法法、EDTA络合合滴滴定定法法、原原子子吸吸收收分分光光光光度法）原理及方法度法）原理及方法评价价。3.血血清清磷磷的的测定定（磷磷钼酸酸还原原法法、酶法法）原原理及方法理及方法评价价。4.铁的的测定（定（亚铁嗪比色法）原理。比色法）原理。61-复复习思考思考题1.体内含量最多的无机体内含量最多的无机盐是什么？是什么？2.什么是微量元素？什么是微量元素？3.简述述血血清清总钙测定定（邻甲甲酚酚肽络合合酮法）原理及注意事法）原理及注意事项4.什么是什么是铁饱和度？和度？62-参考文献：参考文献：现代代临床生物化学床生物化学检验主主编张秀明秀明人民人民军医出版社医出版社临床生物化学及生物化学床生物化学及生物化学检验主主编周周新新人民人民卫生出版社生出版社结束束预习内容：内容：第十四章第十四章 肝功能肝功能检验63-