SN∕T 5358-2021 出口茶叶中氯噻啉残留量的测定 液相色谱-质谱∕质谱法[商检].pdf

I C S6 7. 0 4 0C C S X0 4中华人民共和国出入境检验检疫行业标准S N/T5 3 5 82 0 2 1 出口茶叶中氯噻啉残留量的测定液相色谱-质谱 / 质谱法D e t e r m i n a t i o n o f i m i d a c l o t h i z r e s i d u e i n t e a f o r e x p o r tH P L C - M S/M S m e t h o d2 0 2 1 - 1 1 - 2 2发布2 0 2 2 - 0 6 - 0 1实施中华人民共和国海关总署发 布前 言 本文件按照G B/T 1. 12 0 2 0 标准化工作导则 第1部分: 标准化文件的结构和起草规则 给出的规则起草。 请注意本文件的某些内容可能涉及专利。本文件的发布机构不承担识别这些专利的责任。 本文件由中华人民共和国海关总署提出并归口。 本文件起草单位: 中华人民共和国杭州海关技术中心、 浙江省检验检疫科学技术研究院、 中华人民共和国合肥海关技术中心。 本文件主要起草人: 楼成杰、 黄超群、 崔晓美、 蒋沁婷、 吴娟、 欧阳械华、 严颖鹏、 李翼、 宋伟。S N/T5 3 5 82 0 2 1出口茶叶中氯噻啉残留量的测定液相色谱-质谱/ 质谱法1 范围本文件规定了出口茶叶中氯噻啉残留量的液相色谱-质谱/质谱测定方法。 本文件适用于绿茶、 红茶、 普洱茶、 乌龙茶中氯噻啉残留量的定量测定和确证。2 规范性引用文件 下列文件中的内容通过文中的规范性引用而构成本文件必不可少的条款。其中, 注日期的引用文件, 仅该日期对应的版本适用于本文件; 不注日期的引用文件, 其最新版本( 包括所有的修改单) 适用于本文件。 G B/T 6 6 8 2 分析实验室用水规格和试验方法3 术语和定义 本文件没有需要界定的术语和定义。4 方法提要 试样复水后用乙腈提取, 经固相萃取柱净化, 用液相色谱-质谱/质谱仪测定, 外标法定量。5 试剂和材料 除特殊注明外, 所用试剂均为分析纯, 水为G B/T 6 6 8 2规定的一级水。5. 1 乙腈: 色谱纯。5. 2 甲苯: 色谱纯。5. 3 甲醇: 色谱纯。5. 4 乙酸铵: 色谱纯。5. 5 甲酸: 色谱纯。5. 6 氯化钠。5. 7 乙酸铵-甲酸混合溶液: 称取0. 3 8 5 g乙酸铵, 用适量水溶解后加入1 mL甲酸, 用水定容至1 L,混匀。5. 8 乙腈-甲苯混合溶液(3+1,v/v) : 移取7 5 mL乙腈和2 5 mL甲苯, 混合均匀。5. 9 标准物质: 氯噻啉,C7H8C l N5O2S,C A S号 1 0 5 8 4 3 - 3 6 - 5。5. 1 0 标准储备溶液: 准确称取1 0 m g( 精确至0. 1 m g) 标准物质用乙腈溶解并定容于5 0 mL容量瓶中, 配制成溶液浓度为2 0 0 g/mL的标准储备液, 于0 4 保存, 有效期6个月。5. 1 1 标准中间液: 准确移取标准储备溶液0. 5 0 mL, 用甲醇稀释并定容至1 0 mL, 配制成溶液浓度为1 0 g/m L的标准中间液。准确移取1 0 g/mL的标准中间液1. 0 mL, 用甲醇稀释并定容至1 0 mL, 配1S N/T5 3 5 82 0 2 1制成溶液浓度为1. 0 g/mL的标准中间液, 于0 4 储存, 有效期3个月。5. 1 2 标准工作溶液: 用标准中间液配制成溶液浓度为1. 0 n g/mL、2. 0 n g/mL、5. 0 n g/mL、1 0 n g/mL 和5 0 n g/m L的标准工作液, 于0 4 储存, 有效期3个月。5. 1 3 基质混合标准工作溶液: 取适量经7. 1和7. 2步骤处理的空白样品基质溶液于进样瓶中, 用氮气缓缓吹至近干, 加入等体积的标准工作溶液溶解混匀, 用于做标准工作曲线。现用现配。5. 1 4 石墨化炭黑/氨基固相萃取柱(C a r b/NH2柱) :5 0 0 m g/5 0 0 m g,6 mL( 或相当者) , 使用前用5 m L乙腈-甲苯混合溶液(4. 8) 活化。5. 1 5 微孔滤膜:0. 2 2 m, 有机相。6 仪器和设备6. 1 液相色谱-质谱/质谱仪, 配有电喷雾离子源。6. 2 分析天平: 感量0. 0 0 0 1 g和0. 0 1 g。6. 3 涡旋混合器。6. 4 均质机。6. 5 台式离心机: 转速不低于4 0 0 0 r/m i n。6. 6 旋转蒸发仪。6. 7 固相萃取仪。6. 8 移液枪:1 mL。7 试样制备与保存7. 1 试样的制备 取代表性样品约5 0 0 g, 用粉碎机粉碎并通过4 0目标准筛, 混匀, 装入洁净的盛样容器中, 密封并标明标记。在制样的操作过程中, 应防止样品受到污染或发生残留物含量的变化。7. 2 试样的保存 试样于室温下保存。8 测定步骤8. 1 提取 称取试样2 g( 精确至0. 0 1 g) , 置于5 0 mL塑料离心管中, 加入1 0 mL水, 浸泡至少3 0 m i n, 再加入2 0 m L乙腈, 高速均质提取1 m i n, 加入3. 5 g氯化钠, 涡旋混匀3 0秒, 以4 0 0 0 r/m i n离心4 m i n, 上清液待净化。8. 2 净化 将2. 0 m L上清液转移至已活化的固相萃取柱(5. 1 4) 内, 接收流出液, 再用8. 0 mL乙腈-甲苯混合溶液(5. 8) 洗脱, 收集全部洗脱液,4 5 水浴减压浓缩至近干, 加入2. 0 mL甲醇溶解, 经微孔滤膜过滤,供液相色谱-质谱/质谱仪测定。2S N/T5 3 5 82 0 2 18. 3 测定8. 3. 1 液相色谱-质谱/质谱条件 液相色谱-质谱/质谱参考条件列出如下:a) 色谱柱:C1 8,1 5 0 mm4. 6 mm( 内径) ,5 m, 或相当者; b) 流动相: 乙酸铵-甲酸混合溶液(5. 7) 和乙腈, 梯度洗脱程序参见表1; c) 柱温:3 0 ; d) 流速:0. 8 0 mL/m i n; e) 进样量:1 0 L; f) 离子源: 电喷雾离子源; g) 扫描方式: 正离子扫描; h) 监测方式: 多反应监测;i) 监测离子对参见附录A中表A. 1。表1 梯度洗脱程序时间/m i n乙酸铵-甲酸混合溶液/%乙腈/%0. 0 08 02 01. 0 08 02 04. 0 02 08 06. 0 02 08 07. 0 059 51 0. 0 059 51 2. 0 08 02 01 4. 0 08 02 08. 3. 2 定性测定 按照上述仪器条件测定样液和标准工作溶液, 如果定性离子均出现, 且信噪比大于等于3, 且样液与标准工作液中待测物质色谱峰相对保留时间偏差在2. 5%范围内, 定性离子对的相对丰度与浓度相当的标准工作溶液的相对丰度一致, 相对丰度允许误差不超过表2规定的范围, 则可判断样品中存在相应的被测物。表2 相对离子丰度最大容许误差相对离子丰度( 基峰)%5 02 05 01 02 01 0最大容许误差%2 02 53 05 08. 3. 3 定量测定 按7. 3. 1仪器条件测定基质混合标准工作溶液和样液, 以外标曲线法计算样液中的氯噻啉含量。3S N/T5 3 5 82 0 2 1如果样液中氯噻啉的含量超出标准曲线范围, 用甲醇稀释后再进行分析, 同时应考虑样品的基质效应,做好基质混合标准工作溶液再定量, 对使用本方法前处理净化后稀释1 0 0倍及以上的样品, 已不存在显著的基质效应, 可直接用标准工作溶液定量。在上述条件下, 氯噻啉的参考保留时间约为4. 5 2 m i n。标准溶液多反应监测色谱图参见附录B中图B. 1。8. 4 空白试验 除不加试样外, 均按上述操作步骤进行。9 结果计算和表述 用色谱数据处理机或按公式(1) 计算试样中氯噻啉的含量:X=cV1 0 0 0mR1 0 0 0( 1 ) 式中:X 试样中氯噻啉的含量, 单位为毫克每千克(m g/k g) ;c 从标准曲线上得到的样液中氯噻啉的浓度, 单位为微克每毫升(g/mL) ;V 样液最终定容体积, 单位为毫升(mL) ;m 样品称样量, 单位为克(g) ;R 样品分取比例; 计算结果应扣除空白值, 保留两位有效数字。1 0 定量限 本方法对于绿茶、 红茶、 普洱茶、 乌龙茶中氯噻啉的定量限均为0. 0 1 m g/k g。1 1 回收率和精密度 本方法回收率和精密度试验数据见表3。表3 回收率和精密度试验数据(n =6)添加水平m g/k g绿茶红茶普洱茶乌龙茶回收率范围(%)精密度(%)回收率范围(%)精密度(%)回收率范围(%)精密度(%)回收率范围(%)精密度(%)0. 0 19 8. 81 0 83. 09 1. 51 0 86. 28 4. 79 3. 74. 57 6. 28 6. 14. 20. 0 29 5. 51 0 43. 79 2. 59 6. 51. 68 6. 09 5. 03. 78 1. 58 6. 52. 10. 1 09 9. 71 0 62. 59 0. 29 6. 62. 69 3. 69 9. 72. 48 7. 99 4. 42. 33. 09 3. 39 6. 01. 29 0. 09 2. 71. 19 0. 79 7. 32. 39 7. 09 9. 31. 04S N/T5 3 5 82 0 2 1附 录 A( 资料性)仪器参数与监测离子1)A. 1 仪器参数与监测离子参考条件列出如下:a) 电喷雾电压:4 5 0 0 V;b) 离子源温度:6 5 0 ;c) 雾化气压力:0. 3 4 MP a;d) 辅助气压力:0. 3 8 MP a;e) 气帘气压力:0. 2 4 MP a;f) 碰撞气压力: 中等;g) 雾化气和辅助气均为零级空气; 气帘气和碰撞气为高纯氮气; 使用前应调节各参数使质谱灵敏度达到检测要求;h) 监测离子对信息、 碰撞能量等参数参见表A. 1。表A. 1 多反应监测条件化合物母离子m/z子离子m/z碰撞能量(C E)V去簇电压(D P)V碰撞室出口电压(C X P)V氯噻啉2 6 21 8 1*2 01 2 24 01 2 01 41 5 注: 带“*” 离子为定量离子。 1) 非商业性声明: 附录A所列参考质谱条件是在A B 5 5 0 0 Q TA P液质联用仪上完成, 此处列出试验用仪器型号仅是为了提供参考, 并不涉及商业目的, 鼓励标准使用者尝试不同厂家或型号的仪器。5S N/T5 3 5 82 0 2 1附 录 B( 资料性)标准溶液多反应监测(MRM) 色谱图图B. 1 氯噻啉的多反应监测(MRM) 色谱图(1 n g/m L标准溶液)6S N/T5 3 5 82 0 2 112028535 T/NS中华人民共和国出入境检验检疫行 业 标 准出口茶叶中氯噻啉残留量的测定液相色谱-质谱/质谱法S N/T 5 3 5 82 0 2 1*中国海关出版社有限公司出版发行北京市朝阳区东四环南路甲1号(1 0 0 0 2 3)编辑部: (0 1 0)6 5 1 9 4 2 4 2 - 7 5 0 9网址 www. c u s t o m s k b . c o m/b o o k中国标准出版社秦皇岛印刷厂印刷*开本8 8 01 2 3 0 1/1 6 印张0. 7 5 字数1 8千字2 0 2 1年 月第一版 2 0 2 1年 月第一次印刷印数 1 *书号: 1 5 5 1 7 57 5 3 定价1 8. 0 0元