食品掺伪鉴别检验实验指导书.doc

食 品 掺 伪 鉴 别 检 验

实 验 指 导 书

马荣琨 编

郑州科技学院食品教研室编
二零一一年六月

目 录

实验规则……………………………………………………………1
实验一、馒头中甲醛合次硫酸氢钠的测定……………………2
实验二、食用油脂掺伪检查………………………………………4
实验三、肉制品中淀粉含量的测定……………………………5实验四、牛乳掺伪检验……………………………………………9
实验五、调味品掺假检查 ………………………………………14
实验六、蜂蜜掺假的快速鉴别…………………………………15
实验七、饮料掺假检查 …………………………………………19

20

实验规则
1、实验前必须预习实验指导书。若经提问发现未预习者，须在教师指定的时间内预习完毕，方可参加实验。
2、实验前须认真检查仪器、试剂、用具及实验材料。如有破损、短缺应立即报告指导教师，经同意后方可调换和补充。对玻璃器皿须做好清洗工作。
3、实验过程中不得随便挪动外组的仪器、用具和实验材料。不得随意拨动仪器开关或电源开关，须按实验要求进行。
4、实验材料、辅料、药品等的使用，应在不影响实验结果的前提下注意节约，杜绝浪费，在进行实验过程中，未经教师允许，不得食用原料和加工品。
5、实验室应保持肃静，不得谈笑喧哗，做与本组实验无关的事情，以免影响他人实验。
6、清洗仪器、用具、材料时，须将固形物倒入指定容器内，不得直接倒入水槽，以免造成水管堵塞。
7、实验过程中，须按操作规程仔细操作，注意观察和记录试验结果。不允许抄写他人的实验实习记录，否则，必须重做。如有疑问，应向指导教师询问清楚后方可进行。
8、实验完毕后，须将玻璃仪器、用具等清洗干净，按原来的位置摆设放置。如有破损须报告指导教师，并填写仪器损坏登记簿。
9、实验过程中如使用加工或检测设备，使用后需由使用人填写仪器使用记录。
10、实验结束后，由值日生负责打扫实验室，保持室内整洁，注意关上水、电、窗、门。

实验一 馒头中甲醛合次硫酸氢钠的测定

一、实验目的
使学生了解甲醛合次硫酸氢钠（即吊白块）作为工业用还原剂和漂白剂对人体的危害，掌握馒头等食品中甲醛合次硫酸氢钠的定量测定方法。
二、实验原理
根据吊白块在酸性条件下可分解出甲醛以及甲醛沸点很低的特点，对检样进行水蒸汽蒸馏，用水吸收，甲醛馏出后再与乙酰丙酮作用，生成黄色的二乙酰基二氢啶，然后根据颜色的深浅比色定量。
三、实验仪器、用具及试剂
1. 实验仪器、用具：721型分光光度计、粉碎机、电子天平、蒸馏装置、三角瓶。
2. 试剂：
（1）10%（V/V）磷酸溶液；
（2） 液体石蜡；
（3） 乙酰丙酮溶液：于100mL 蒸馏水中加入醋酸铵（AR）25g，冰醋酸3mL和乙酰丙酮（AR）0.40mL，振摇使其溶解，贮于棕色瓶中。此溶液可稳定1个月。
（4） 甲醛标准储备液：吸取分析纯甲醛（36%~38%）0.3mL，用蒸馏水定容至100mL，然后依下述方法标定。吸取上述储备液10.00mL，放入250mL碘量瓶中，加入0.10moL/L碘溶液25.00mL和1moL/L的NaOH溶液7.5mL，在室温放置15min后，再加入0.5moL/L硫酸10mL，放置15min。用0.025moL/L的Na2S2O3溶液滴定至淡黄色，加入淀粉溶液1mL，继续滴定至蓝色消失，记录溶液用量。同时做空白实验。
甲醛含量（mg/L）=（V1－Ｖ２）×C×15×1000/10
式中：V1——空白滴定消耗0.025moL/L硫代硫酸钠溶液mL数；
V2——滴定甲醛消耗0.025moL/L硫代硫酸钠溶液mL数；
C——硫代硫酸钠溶液当量；15为1moL/L碘相当甲醛重（mg)。
       15——与1mmoL/L 1/2I2相当的甲醛的质量，mg。
（5）甲醛标准使用液：临用时以蒸馏水将甲醛标准贮备液稀释成5ug/mL。
四、操作方法
1. 样品处理：称取经粉碎的湿样馒头5.00g，置于蒸馏瓶中，加入蒸馏水20mL，液体石蜡2.5mL和10%磷酸溶液10mL，立即通水蒸汽蒸馏。冷凝管下端应事先插入盛有10mL蒸馏水且置于冰浴的容器中的液面下，精确收集蒸馏液至150mL。同时做空白蒸馏。
2. 显色操作：视检品中吊白块含量高低，吸取检品蒸馏液2~10mL，补充蒸馏水至10mL，加入乙酰丙酮溶液1mL混匀，置沸水中浴中加热3min，取出冷却。然后以蒸馏水调零，于波长435nm处，以1cm比色杯进行比色，记录吸光度。查标准曲线计算结果。
3. 绘制标准曲线：分别吸取5uL/mL甲醛标准液0、0.50、1.00、3.00、5.00和7.00mL，补充蒸馏水至10mL，然后按上述2中对应步骤操作。减去零管吸光度后，绘制标准曲线。
4. 计算：

式中：V1-----样品管相当标准管体积，mL；
m1-----1mL甲醛标准溶液中甲醛的质量，ug；
m2-----样品的质量，g；
V2-----显色操作取蒸馏液体积，mL；
V3——蒸馏液的总体积，mL；
         5.133-----甲醛与吊白块的换算系数
五、说明
本法实际应用时，只需做定性检验。收集馏出液30~50mL，呈色反应呈黄色者为阳性。
样品蒸馏液可用于SO2含量的测定，可作为在甲醛存在下确定是否有吊白块的依据。
备注：
1、没有乙酰丙酮试剂，可按推荐方法处理样品后，按GB5009.69中游离甲醛的测定方法－变色酸法测定。标准系列各管浓度可同推荐方法一样。甲醛标准溶液的配制与标定也可按GB5009．69操作。
2、蒸馏瓶宜选用500ML长颈烧瓶，以保证馏液清澈；液体石腊起除泡沫作用，有部分馏去，吸取馏液时，把吸管插入近液体底部即可。
3、要采用水蒸汽蒸馏（不宜直火蒸馏），以免试样中糖分可能分解产生甲醛。
4、沸水浴加热显色时间可延长至于10分钟。
5、采样后要当天测定。
6、结果报告：如遇有微弱显色的样品，可计算测定用样品液中甲醛含量（ug扣空白后），如小于标准系列最低管2.5ug的即可报未检出。
7、对低含量（2.5－５ug)难下结论时，可同时加检二氧化硫。

实验二  食用油脂掺伪检验
一、实验目的
通过皂化法和荧光反应法鉴别植物油中是否含有矿物油，含矿物油的有荧光反应来鉴别植物油中是否有矿物油，了解植物油掺矿物油的检测方法。
二、皂化法
（一）实验原理
矿物油不会造化。
（二）实验仪器、用具及试剂
1.实验仪器及用具：125mL磨口锥形瓶、冷凝管、1mL吸管、水浴锅。
2.试剂：60%氢氧化钾溶液、无水乙醇。
（三）测定方法
取油样1mL置于125mL锥形瓶中，加入1mL60%KOH溶液和25mL无水乙醇。瓶口插1根长玻璃管作为空气冷凝管，于水浴上回流皂化5min，皂化时加以振荡。取下锥形瓶，加水25mL，摇匀。溶液如呈混浊状或有油状物析出，即表示掺（混）有不皂化的矿物油。
注：本法可检验出含量在0.5%以上的矿物油。如是挥发性矿物油，在皂化时即可嗅出气味。
三、荧光反应法
（一）实验原理
矿物油在荧光灯的照射下，出现天蓝色荧光。
（二）实验仪器、用具：滤纸、荧光灯。
（三）实验方法
取油样和已知的矿物油各1滴，分别滴在滤纸上，然后放在荧光灯下照射，如有天蓝色荧光出现，说明有矿物油存在。

实验三  肉制品中淀粉含量的测定——碘量法
一、实验目的
使学生了解肉制品中淀粉含量的测定方法，并掌握碘量法的操作。
二、原理
　  在试样中加入氢氧化钾-乙醇溶液,在沸水浴上加热后,滤去上清液,用热乙醇洗涤沉淀，除去脂肪和可溶性糖。沉淀经盐酸水解后,淀粉水解生成葡萄糖，然后用碘量法测定形成的葡萄糖，计算淀粉含量。
三、实验仪器、用具及试剂
1. 实验仪器及用具：实验室常用设备；粉碎机。
2.试剂 
   注：所用试剂均为分析纯,水为蒸馏水或相当纯度的水。
（1）氢氧化钾-乙醇溶液: 将氢氧化钾50g溶于95％乙醇溶液中,稀释至1000mL；
（2）80％乙醇溶液；
（3）1.0mol/L盐酸溶液；
（4）10g/L溴百里酚蓝乙醇溶液； 
（5）300g/L氢氧化钠溶液；
（6）蛋白沉淀剂：
　  溶液Ⅰ: 将铁氰化钾106g用水溶解，并定容到1000mL。
  　溶液Ⅱ: 将乙酸锌220g用水溶解,加入冰乙酸30mL, 用水定容到1000mL。
（7）碱性铜试剂
　　① 将硫酸铜(CuSO4·5H2O) 25g溶于100mL水中。
　  ② 将碳酸钠144g溶于300～400mL50℃的水中。
　　③ 将柠檬酸(C6H8O7·H2O) 50g溶于50mL水中。
　  将溶液③缓慢加入到溶液②中,边加边搅拌，直到气泡停止产生。将溶液①加到此混合液中并连续搅拌, 冷却至室温后,转移到1000mL容量瓶中,定容至刻度。放置24h后使用,若出现沉淀要过滤。
　  取1份此溶液加入到49份新煮沸的冷蒸馏水, pH为（10.0±0.1）。
（8）淀粉指示剂：将可溶性淀粉1g、碘化汞(保护剂)1g和30mL水混合加热溶解,再加入沸水至100mL, 连续煮沸3min, 冷却后放入冰箱备用。
（9）0.1mol/L硫代硫酸钠标准溶液。
①配制：将硫代硫酸钠(Na2S2O3·5H2O) 25g溶于1000mL煮沸并冷却到室温的蒸馏水中,再加入碳酸钠(Na2CO3·10H2O) 0.2g。该溶液应静置一天后标定。
②标定：按GB 601-77标定。
（10）10％碘化钾溶液。
（11）25%盐酸:取100mL浓盐酸稀释至160mL。
四、检验方法
1.淀粉的分离
称取试样25g (精确到0.01g)于500mL烧杯中 (如果估计试样中淀粉含量超过1g应适当减少试样量)，加入热氢氧化钾-乙醇溶液300mL,用玻璃棒搅匀后盖上表面皿,在沸水浴上加热1h,不时搅拌。然后完全转移到漏斗中过滤,用80％乙醇溶液洗涤沉淀数次。
2.水解
　　将滤纸钻个孔,用1.0mol/L热盐酸溶液100mL将沉淀完全洗入250mL烧杯中,盖上表面皿, 在沸水浴中水解2.5h,不时搅拌。
　　溶液冷却到室温后,用氢氧化钠溶液中和,pH值不超过6.5。将溶液移入200mL容量瓶中,加入蛋白沉淀剂溶液Ⅰ3mL,混合后再加入蛋白沉淀剂溶液Ⅱ 3mL,定容到刻度，混匀,再经不含淀粉的扇形滤纸过滤。向滤液中加入300g/L氢氧化钠溶液1～2滴,使之对溴百里酚蓝呈碱性。
3.测定
　　取一定量滤液(V2)稀释到一定体积(V3), 然后取25.0mL(含葡萄糖40～50mg)移入碘量瓶中,加入25.0mL碱性铜试剂,装上冷凝管,在电炉上于2min内煮沸。随后改用温火继续煮沸10min,迅速冷却到室温,取下冷却管,加入碘化钾溶液30mL,再小心加入25％盐酸溶液25.0mL,盖好盖待滴定。
　　用硫代硫酸钠标准溶液滴定上述溶液中释放出来的碘。滴定至溶液变成浅黄色时,加入淀粉指示剂1mL,继续滴定至蓝色消失,记下所消耗硫代硫酸钠溶液的体积。
　　同一试样进行两次测定并做空白试验。
五、计算
1.葡萄糖量(m1)计算
　　按下式计算消耗硫代硫酸钠的物质的量(X1，mol)
                  X1 = 10×c×(V0-V1)
式中：X1——消耗硫代硫酸钠的物质的量，mmol；
　　　c——硫代硫酸钠溶液的浓度，mol/L；
      V0——空白试验消耗硫代硫酸钠溶液的体积,mL；
　　　V1——试样消耗硫代硫酸钠的体积,mL。
　　根据X1从表中查出相应的葡萄糖量(m1/mg)。
表 硫代硫酸钠的物质的量（X1）与葡萄糖量（m1）的换算关系
X1/mmol
相应的葡萄糖量
X1/mmol
相应的葡萄糖量
m1/mg
△m1/mg
m1/mg
△m1/mg
1
2.4

13
33.0
2.7
2
4.8
2.4
14
35.7
2.7
3
7.2
2.4
15
38.5
2.8
4
9.7
2.5
16
41.3
2.8
5
12.2
2.5
17
44.2
2.9
6
14.7
2.5
18
47.1
2.9
7
17.2
2.5
19
50.0
2.9
8
19.8
2.6
20
53.0
3.0
9
22.4
2.6
21
56.0
3.0
10
25.0
2.6
22
59.1
3.1
11
27.6
2.6
23
62.2
3.1
12
30.3
2.7

2.淀粉含量的计算
                  m1          V3    200   100
        X2(％) =━━━×0.9×━━×━━×━━
                 1000         25    V2    m0

                        V3    m1      
                =0.72×━━×━━
                        V2    m0
式中：X2——淀粉含量,％;
　　　ml——葡萄糖含量,mg;
　　　V2——原液的体积,mL;
　　　V3——稀释后的体积,mL;
　　　m0——试样的质量,g;
　　 0.9——葡萄糖折算成淀粉的换算系数。
    当符合允许差要求时,则取两次测定的算术平均值作为结果,精确到0.1％。 注：同一分析者同时或相继两次测定允许差不超过0.2％。
六、说明
1.肉制品富含脂肪和蛋白质，加入KOH-乙醇溶液，是利用碱与淀粉作用生成醇不溶性的络合物，以分离淀粉与非淀粉物质。
2.滴定时，应在接近终点时才加入淀粉指示剂。如淀粉指示剂加入太早，则大量的碘与淀粉结合生成蓝色物质，这一部分碘就不容易与硫代硫酸钠反应，而产生误差。
3.本实验方法即GB/T9695.14—1988规定的测定方法。

实验四  牛乳的掺伪检验
一、实验目的
通过对牛奶新鲜度、密度、滴定酸度等指标进行检测，并对牛乳常见掺假形式进行鉴别，使学生进一步掌握密度计、酸度计的使用和酸碱滴定操作，了解牛奶掺假的可能形式和检测方法。
二、实验内容：
1. 牛奶新鲜度检验（酒精试验）；
2. 牛奶密度检测；
3. 牛奶滴定酸度测定；
4. 牛乳掺淀粉、掺豆浆、掺食用碱、掺食盐、掺芒硝、掺尿素的鉴别实验。
三、检验方法
（一）牛奶新鲜度检验（酒精试验）
1. 原理：允许销售的牛乳，其酸度不大于20°T。酸度大于20°T的牛乳中的酪蛋白，在遇到68%的酒精时，将会形成絮状沉淀，因此，可用68%的中性酒精检验牛乳的酸度是否超标。
2.仪器及试剂：
（1）碱式滴定管、试管、吸管；
（2）1%酚酞指示剂；
40%氢氧化钠溶液：称取20g氢氧化钠溶于500mL蒸馏水中。
68%中性酒精：用吸量管精确吸取17mL95%酒精于干燥、洁净的50mL锥形瓶中，加入1~2滴1%酚酞。摇匀后，用氢氧化钠溶液滴定至酚酞指示剂刚显粉红色，记下所用氢氧化钠溶液的体积。然后用吸量管向锥形瓶中精确加入VmL（V=6.25——中和酒精所用的氢氧化钠体积）新煮沸过并冷却的蒸馏水，摇匀，即得68%的中性酒精。用橡皮塞塞住锥形瓶口备用。注：现配现用。
（3）操作步骤：在干燥、洁净的试管中，加入3mL待检乳，再加入等体积的68%的中性酒精，摇匀，观察其反应现象。若出现絮状沉淀，则说明乳的酸度超过20°T；若未出现絮状沉淀，则说明乳的酸度不高于20°T。
（二）牛奶密度检测
1.原理：密度计法。牛乳的相对密度应在20℃下测定。正常牛乳的相对密度在20℃时应为1.028~1.032.如果不是在20℃下测定，则不须加以校正，校正值的计算方法为：
校正值=（实测温度-20）×0.0002
但此种校正方法只限于实测温度在（20±5）℃。牛乳在20℃下的相对密度应为实测密度与校正值的代数和。
2.仪器及用具：乳稠计、量筒。
注：乳稠计有20℃/4℃和15℃/15℃两种。
a + 2°= b
式中：a——20℃/4℃测得的度数；
B——15℃/15℃测得的度数。
3. 操作步骤
将样品混匀后，小心倒入干燥、洁净的250mL量筒中。注意不要产生泡沫（若有泡沫，则用滤纸把泡沫吸掉）。将乳稠计小心地放入样品中，至刻度30°处，放开手，令其自由浮动，但不要与量筒壁接触。待乳稠计平稳后，读取数据。
4.牛乳相对密度的计算
（1）用15℃/15℃乳稠计测定时，计算公式为：
牛乳相对密度=1+0.001×乳稠计读数+（实测温度-20）×0.0002
（2）用20℃/4℃乳稠计测定时，计算公式为：
牛乳相对密度=1+0.001×（乳稠计读数+2）+（实测温度-20）×0.0002
说明：①读取数据时，眼睛应与筒内牛乳的液面在同一水平面上，否则读取的数据将偏低或偏高。②掺水会降低牛乳的相对密度，抽出脂肪会提高牛乳的相对密度。如果同时抽出脂肪又掺水，则不能发现牛乳相对密度的显著变化，这种情况必须结合乳脂肪的测定进行检验。
（三）牛奶滴定酸度测定（氢氧化钠滴定法）
1.原理：以酚酞为指示剂，用0.1mol/LNaOH标准溶液滴定100mL乳样中的酸，至终点时所消耗氢氧化钠溶液的体积即为牛乳的酸度。
2.仪器及试剂：
（1）碱式滴定管、250mL锥形瓶、吸管；
（2）1%酚酞指示剂；0.1mol/LNaOH标准溶液
3.操作步骤
用移液管精确吸取10mL待检乳于250mL锥形瓶中，加入20mL新煮沸过又冷却的蒸馏水和2~3滴酚酞指示剂，摇匀后，用标准氢氧化钠溶液滴定至酚酞刚显粉红色，并在1min内不退色为止，记下所消耗的NaOH溶液体积。
重复测定1次。两次滴定之差不得大于0.05mL，否则需要重复滴定。取2次所消耗的NaOH溶液体积的平均值VmL，按下式计算样品乳的酸度：
C
乳的酸度（°T ）= ———×V×10 = C×V
0.1
式中 C——实际测定中所用的氢氧化钠溶液的浓度，mol/L；
V——2次所消耗的氢氧化钠溶液体积的平均值，mL。
若测定的酸度小于16°T，可认为牛乳掺有中和剂（如碳酸钠），或者是乳腺炎乳；若在16~18°T，可认为是正常新鲜乳；若大于20°T，则为陈旧发酵乳。
（四）牛乳掺米汤（淀粉）、豆浆、食用碱、食盐、芒硝、尿素等的检验
1.牛乳掺米汤（淀粉）的检验
（1）原理：米汤中含有淀粉，淀粉与碘变蓝色。
（2）试剂：1%碘溶液（用蒸馏水溶解KI 4g，I2 2克，移入100mL容量瓶中，加蒸馏水至刻度制成）。
（3）操作步骤：取被检牛乳5mL于试管中，稍煮沸，冷却后加入2~3滴碘液。如出现蓝色或蓝青色，则表明乳样中掺有淀粉或米汤。
2.牛乳掺豆浆的检验
方法一：脲酶检验法
（1）原理：豆浆含有脲酶，脲酶催化水解碱-镍缩二脲试剂后，与二甲基乙二肟的酒精溶液反应，生成红色沉淀。
（2）试剂：①碱-镍缩二脲试剂：取1g硫酸镍溶于50mL蒸馏水后，加入1g缩二脲，微热溶解后加入15mL1mol/L NaOH，滤去生成的氢氧化镍沉淀，置于棕色瓶中保存。本试剂存放时间过长会出现浑浊，经再次过滤后仍可使用。②1% 二甲基乙二肟的酒精溶液。
（3）操作步骤：在白瓷点滴板上的2个凹槽处各加入2滴碱-镍缩二脲试剂澄清液，再向1个凹槽滴加1滴调成中性或弱碱性的待检乳样，另一个中滴加1滴水。在室温下放置10~15min，然后往每个凹槽中再各加入1滴二甲基乙二肟的酒精溶液。若有二甲基乙二肟络镍的红色沉淀生成，则说明牛乳中掺有豆浆。作为对照的空白试剂，应仍维持黄色或仅有趋于变成橙色的微弱变化。
方法二：加碱检验法
（1）原理：豆浆中含有皂角素，可与浓NaOH（或KOH）溶液反应生成黄色物质。
（2）试剂：乙醇-乙醚(1：1)混合液，25％NaOH溶液。
（3）操作步骤：取2个50mL锥形瓶，1个加入乳样20mL，另一个加入20mL新鲜、正常的牛乳作为对比。向2个锥形瓶中各加入乙醇-乙醚(1：1)混合液3mL，25％NaOH溶液5mL，摇匀后放置5~10min。
对照瓶中牛乳应呈暗白色。待检乳样呈微黄色，表示有豆浆掺入。本法灵敏度不高，当豆浆掺入量大于10%时才能检出。
3. 牛乳掺食用碱的检验
（1）玫瑰红酸法
①原理：玫瑰红酸与碱性物质呈现玫瑰红色。
②试剂：0.05%玫瑰红酸的酒精溶液(溶解0.05克玫瑰红酸于100毫升95％酒精中制成)。
③操作步骤：取被检牛乳5mL于试管中，加入5mL0.05％玫瑰红酸酒精溶液，摇匀，观察其颜色反应。若出现玫瑰红色，表示牛乳中掺有像碳酸钠这样的碱性物质。天然乳呈淡褐黄色。
4. 牛乳掺食盐的检验
（1）原理：牛乳中加入一定量的铬酸钾溶液和硝酸银溶液，由于正常、新鲜牛乳中氯离子含量很低（0.09%~0.12%），硝酸银主要与铬酸钾反应，生成红色铬酸银沉淀。如果牛乳中掺有NaCl，由于氯离子浓度很大，硝酸银则主要与氯离子反应，生成AgCl沉淀，并且被铬酸钾染成黄色。
（2）试剂：①10%铬酸钾溶液；②0.01mol/L AgNO3溶液：精确称取1.700g AgNO3于烧杯中，用少量去离子水溶解后，定量转移至1000mL容量瓶中，定容，保存于棕色瓶中。
（3）操作步骤：
取5mL 0.01mol/L硝酸银溶液和2滴10％铬酸钾溶液于洁净试管中混匀，此时可出现红色铬酸银沉淀。再加入待检乳样1mL，充分混匀。如果牛乳呈黄色，说明乳中Cl-的含量大于0.14％，可能掺有食盐；若仍为红色，则说明没有掺入氯化钠。
5. 牛乳掺芒硝（Na2SO4·10H2O）的检验
（1）原理：牛乳中掺有芒硝，可通过对SO42-的鉴定来检验，而SO42-的鉴定又可通过它干扰钡离子（Ba2+）与玫瑰红酸钠溶液的反应得到确认。钡离子可与玫瑰红酸溶液反应生成红棕色沉淀。若有SO42-存在，则钡离子首先与SO42-反应生成硫酸钡白色沉淀。
（2）试剂：1%氯化钡、20%醋酸、1%玫瑰红酸钠（此试剂最多保存2d）。
（3）操作步骤：在试管中加入5mL待检乳样，1~2滴20%醋酸，4~5滴1%氯化钡溶液和2滴玫瑰红酸钠溶液，摇匀，静置。
正常新鲜牛乳由于生成玫瑰红酸钡沉淀而呈粉红色。掺有芒硝的牛乳，因大量SO42-存在，使钡离子首先与SO42-反应生成硫酸钡白色沉淀，并被玫瑰红酸钠溶液染色而呈现黄色。
6. 牛乳掺尿素的检验
（1）原理：尿中含有肌酐，肌酐与苦味酸在pH12条件下，反应生成红色或橙红色苦味酸肌酐复合物。可检验是否掺尿。
（2）试剂：①饱和苦味酸溶液：取2g苦味酸，加入蒸馏水100mL，加热煮沸，静置冷却，取上层清液置于棕色滴瓶中保存；②10% NaOH溶液。
（3）操作步骤：
取5毫升待检牛乳于试管中，加入4～5滴NaOH溶液，混匀，再加入0.5mL饱和苦味酸溶液，摇匀，放置10~15min。正常牛乳呈现苦味酸固有的黄色，若呈现明显的红褐色则说明乳中掺有尿素或被牛尿污染了。

实验五 调味品的掺假检验

一、实验目的
通过旋光法测定味精的谷氨酸钠含量以确定味精的纯度，并进一步熟悉学习旋光法测定的操作。
二、实验原理
谷氨酸钠分子结构中含1个不对称碳原子，具有旋转偏光振动平面的能力，旋转通过其间的偏振光线的偏光平面的能力，以角度表示，叫做旋光度。可用旋光仪测定其旋光度。
三、实验设备与用具
旋光仪、分析天平、干燥箱、100mL容量瓶、温度计、
三、检验方法
称取于 98±1℃干燥5h之样品10g(称准至0.0001g)，加50ml水溶解并移入100ml容量瓶中，加20ml盐酸，混匀，待冷却至室温，补加水至刻度，摇匀。在恒温室(20℃)里，将上述样液倒入旋光管（2dm）中，按一般旋光法操作，测定其旋光度，同时记录样液温度。
注：用旋光法测定含量时,比旋光度应在＋24. 91°～＋25.29°范围内。
四、计算
1. 若样液温度为20℃时，直接按下式计算：
α×50×187.13
X = ——————————×100
5×2×32×147.13
式中：X——样品中谷氨酸钠的含量（含1个分子结晶水），g/100g；
α——20℃时观察样品所得的旋光度；
32——纯谷氨酸钠在20℃下的旋光度；
187.13——含1个分子结晶水的谷氨酸钠的相对分子质量；
147.13——谷氨酸的相对分子质量；
2——旋光管长度。
2.如果样液温度低于或高于20℃，需要校正后计算。谷氨酸钠的校正值为0.06。
d = [32+0.06（20-t）]×147.13/187.13 = 25.16+0.047（20-t）
α×50×100
X = ——————————————
5×2×[25.16+0.047（20-t）]
式中 X——样品中谷氨酸钠的含量（含1个分子结晶水），g/100g；
α——t℃时观察样品所得的旋光度；
t——测定时的温度；
25.16——谷氨酸钠的比旋光度[a]。
0.047——温度校正系数。
注：同一样品进行两次测定,取平均值，结果修约到保留一位小数。

实验六 蜂蜜掺假的快速鉴别

一、实验目的
    了解掌握蜂蜜掺假的快速、简易的鉴别方法。
二、实验材料与设备
1.仪器与用具：50mL烧杯、波美计、量筒、试管、滤纸。
2.试剂：95%乙醇、间苯二酚、1%硝酸银溶液、1%碘化钾溶液、盐酸、1%硫酸铜溶液。
三、检验方法
1. 感官检验
量取30mL样品，倒入50mL清洁、干燥的无色玻璃烧杯中，观察其颜色（以白底为背景）。然后嗅、尝样品之味。气味和滋味的测定应在常温下进行，并在开瓶倒出后10min内完成。同时比较标准样品与待检样品的色泽、气味、滋味和结晶状况。
（1）看色泽：每一种蜂蜜都有固定的颜色，如刺槐蜜、紫云英蜜为水白色或浅琥珀色，芝麻蜜呈浅黄色，枣花蜜、油菜花蜜为黄色琥珀色。纯正的蜂蜜一般色淡、透明度好，如掺有糖类或淀粉则色泽昏暗，液体混浊并有沉淀物。
（2）品味道：质量好的蜂蜜，嗅、尝均有花香；掺糖加水的蜂蜜，花香皆无，且有糖水味；好蜂蜜吃起来有清甜的葡萄糖鼓掌，而劣质的蜂蜜蔗糖味浓。
（3）试性能：纯正的蜂蜜用筷子挑起来可拉起柔韧的长丝，断后断头回缩并形成下粗上细的塔头并慢慢消失；低劣的蜂蜜挑起后呈糊状并自然下沉，不会形成塔状物。
（4）查结晶：纯蜂蜜结晶是呈黄白色，细腻、柔软；假蜂蜜结晶粗糙，透明。
下面介绍几种常见的蜂蜜色香味及结晶，据此可初步判断是哪种蜂蜜。
紫云英蜜：呈淡白微现青色，有清香气，味鲜洁，甜而不腻，不易结晶，结晶后呈粒状。
苕子蜜：色味均与紫云英蜜相似，但不如紫云英味鲜洁，甜味也略差。
油菜蜜：浅白黄色，有油菜花清香味，稍有混浊，味甜润，最易结晶，浅黄色，呈油状结晶。
棉花蜜：呈浅黄色，味甜而稍涩，结晶颗粒较粗。
乌柏蜜：呈浅黄，具轻微酵酸甜味，回味较重，润喉较差，易结晶，呈粗粒状。
芝麻蜜：呈浅黄色，味甜，一般清香。
枣黄色：呈中等琥珀色，深于乌柏蜜，蜜汁透明，味甜，具有特殊浓烈气味，结晶粗粒。
荞麦蜜：呈金黄色，味甜细腻，吃口重，有强烈荞麦气味，颇有刺激性，结晶呈粒状。
柑橘蜜：品种繁多，色泽不一，一般呈浅黄色，具有柑橘香甜味，食之微有酸味，结晶粒粗呈油脂状结晶。
槐花蜜：色淡白，香气浓郁，带有杏仁味，甜味鲜洁，结晶后呈细粒状。
枇杷蜜：微黄或淡黄色，具荔枝香气，有刺喉粗浊之感的味道。
龙眼蜜：淡黄色，具龙眼花香气味，纯甜、没有刺喉味道。
橙树蜜：浅黄或金黄色，具有令人悦口的特殊香味，蜂巢椴权蜜带有薄菏般的清香味道。
葵花蜜：浅琥珀色，味芳香甜润，易结晶。
荆条蜜：白色，气味芳香，甜润，结晶后细腻色白。
草木犀蜜：浅琥珀或乳白色，浓稠透明，气鼓掌芳香，味甜润。
草木犀蜜：浅琥珀或乳白色，浓稠透明，气味芳香，味甜润。
甘露蜜：暗褐或暗绿色，没有芳香气味，味甜。
山花椒蜜：深琥珀或深棕色，半透明黏液体，味甜，有刺喉异味。
桉树蜜：深琥珀色或深棕色，味甜有桉树异臭，有刺激味。
百花蜜：颜色深，是多种花蜜的混合蜂蜜，味甜，具有天然蜜的香气，花粉组成复杂，一般有5~6种以上花粉。
结晶蜂蜜：此种蜜多称为春蜜或冬蜜，透明差，放置日久多有结晶沉淀，结晶多呈膏状，花粉组成复杂，风味不一，味甜。
2. 掺水的检验
方法一（定性检验法）：取蜂蜜数滴，滴在滤纸上，观察滴落后是否很快湿润滤纸。同时比较标准样品与待检样品的现象。优质的蜂蜜含水量低，滴落后不会很快浸渗入滤纸中；掺水的蜂蜜滴落后很快浸透、消散。
方法二（波美计检验法）：将蜂蜜放入口径4~5cm的500mL玻璃量筒内，待气泡消失后，将清洁、干燥的波美计较轻放入，让其自然下降，待波美计停留在某一刻度上不再下降时，即指示蜂蜜的浓度。测定时蜂蜜的温度保持在15℃，纯蜂蜜浓度在42°Bé以上。若蜂蜜的温度高于15℃，则要以增加的度数乘以0.05，再加上所测得的数值，即为蜂蜜的实际浓度。例如蜂蜜温度为25℃时，波美计度数为41°Bé，则实际浓度为：41+（25-15）×0.05=41.5°Bé。温度低于15℃时则相反。例如蜜温为10℃时，波美计读数为41°Bé，则蜂蜜实际浓度为：41-（25-10）×0.05=40.75°Bé。
3. 掺饴糖的检验
（1）原理：饴糖不溶于95%乙醇溶液，出现白色絮状物。
（2）操作步骤：取蜂蜜2mL于试管中加5mL蒸馏水，混匀，然后缓缓加入95%乙醇溶液数滴，观察是否出现白色絮状物。若呈现白色絮状物，则说明有饴糖掺入；若呈混浊则说明正常。另外，掺有饴糖的蜂蜜味不甜。
4. 掺蔗糖的检验
(1)物理检验
     将样蜜少许置于玻璃板上，用强烈日光曝晒(或用电吹风吹)，掺有蔗糖的蜜会因为糖浆结晶而成为坚硬的板结块；纯蜂蜜仍呈粘稠状。
     (2)理化检验
①原理：蔗糖与间苯二酚反应，产物呈红色；与硝酸银反应，产物不溶于水。
方法1：取蜂蜜1mL加4mL水，充分振荡搅拌。若有混浊或沉淀，滴加数滴（2滴）1%的硝酸银溶液，出现絮状物者，证明掺入了蔗糖。
方法2：取蜂蜜2mL于试管中，加入间苯二酚0.1g。若呈现红色则说明掺入了蔗糖。同时作空白对照。
6. 蜂蜜中掺淀粉的检检方法
 (1)感官检验
     向蜂蜜中掺淀粉时，一般是将淀粉熬成糊并加些蔗糖后，再掺入蜜中。因此这种掺伪蜜混浊而不透明，蜜味淡薄，用水稀释后仍然混浊。
(2)理化检验
①原理：淀粉遇碘液呈蓝、紫色。
     ②操作步骤：取样蜜5毫升，加20mL蒸馏水，煮沸后放冷，加入碘试剂(取1～2粒碘溶于1%碘化钾溶液20毫升中制成)2滴，如出现蓝色、紫色，则说明掺入了淀粉类物质；如呈现红色，则说明掺有糊精；若保持黄褐色不变，则说明蜂蜜纯净。
7. 蜂蜜中掺羧甲纤维素钠的检验方法
    (1)感官检验
    掺有羧甲基纤维素钠的蜂蜜，一般都颜色深黄、粘稠度大，近似于饱和胶状溶液；蜜中有块状脆性物悬浮且底部有白色胶状颗粒。
    (2)理化检验
①原理：羧甲基纤维素钠不溶于乙醇，与盐酸反应生成白色羧甲基纤维素沉淀；与硫酸铜反应产生绒毛状浅蓝色羧甲基纤维素沉淀。
②操作步骤： 取样蜜10g，加20mL95%乙醇溶液，充分搅拌（10min），即析出白色絮状沉淀物。取白色沉淀物2g，置于100mL温热蒸馏水中，搅拌均匀，放冷备检。
     取上清液30ml，加入3ml盐酸后产生白色沉淀为阳性。
     取上清液50ml，加入100mL1%硫酸铜溶液后产生绒毛状浅蓝色沉淀为阳性。    若上述两项试验皆呈现阳性结果，则说明有羧甲基纤维素钠掺入。

实验七 饮料的掺假检验

一、实验目的
通过亚甲蓝、果胶试验可定性判断产品中的掺杂物质、还原糖、转化糖、果胶的存在。了解真果汁中必含成分，对果汁真假的进一步鉴别作好准备。
二、实验内容
1.汽水中掺洗衣粉的检验
2.果胶质的检验
3.还原糖的检验
三、检验方法
（一）汽水中掺洗衣粉的检验
1.实验原理：洗衣粉是含十二烷基苯磺酸钠阴离子的合成洗涤剂。十二烷基苯磺酸钠与亚甲基蓝试剂反应，产物在三氯甲烷层呈现蓝色。
2.仪器、用具及试剂：
带塞比色管（50mL）、吸管；亚甲基蓝溶液：称取亚甲蓝30mg，溶于500mL蒸馏水中，再加入浓硫酸68mL和磷酸二氢钠50g，溶解后用蒸馏水稀释至100mL。
3.操作步骤：取饮料2mL置于50mL的带塞比色管中，加水至25mL，再加入亚甲基蓝溶液5mL，剧烈振摇1min，静置分层。如果三氯甲烷层呈现蓝色，则为阳性，说明其中掺入了洗衣粉。
（二）果胶质的检验
1.原理：成熟果实中果胶质主要以可溶性果胶形式存在。果胶质可以从其水溶液中被酒精沉淀出来，由此可检验果胶质的存在。假果汁中没有果胶质存在。
2.仪器、用具及试剂：
100mL烧杯、吸管、量筒；5mol/LH2SO4溶液、95%乙醇溶液。
3.操作步骤：取待检果汁10mL于100mL烧杯中，加入蒸馏水10mL，5mol/L H2SO4溶液1mL及95%乙醇溶液40mL，搅拌均匀后放置10min。如无絮状沉淀析出，则证明没有果胶质存在，即为伪造果汁饮料。同时用真果汁饮料做对照。
（三）还原糖的检验
1.原理：果汁中的还原糖与费林试剂反应，生成Cu2O砖红色沉淀。
2. 仪器、用具及试剂：试管、电炉；菲林试剂甲、乙液。
3.操作步骤：
取样品3mL，置于试管中，加裴林试剂甲液(取硫酸铜7g，溶于水成100ml制成)、乙液(取酒石酸钠35g、氢氧化钠10g，溶于水成100ml制成)各2ml，加热观察。如含有真果汁就呈砖红色沉淀。如无砖红色沉淀则为假果汁。
注：本法可查证真假果汁水、真假含果汁汽酒等。真的果汁中应含有还原糖，因而可以通过检验还原糖的有无来识别真假果汁。但以蜂蜜代替果汁的则出现假阳性，此时可用镜检法来检查其沉淀物中的花粉。
附：“三精水”的检验方法
“三精水”也称“颜色水”，系指以糖精、香精、色素代替蔗糖和果汁调配而成的假饮料。可以通过检验饮料中是否含有蔗糖来鉴别是不是“三精水”。?
操作步骤：取驱除二氧化碳后的样品50ml于250ml容量瓶内加水稀释至刻度，摇匀。取稀释液约10ml，置于50ml锥形瓶中，加入浓盐酸0.6m