细菌一般染色方法(课堂PPT).ppt

書式設定,書式設定,第 2,第 3,第 4,第 5,.,*,常用的细菌染色方法,革兰染色,抗酸染色,细菌基本形态结构观察,1,.,2,.,细菌染色意义,由于细菌个体微小，基本上无色透明，故将其用适当染料染色观察，方能显示它的形态、大小、构造及染色特性等，在细菌鉴别上有重要意义。,革兰染色是细菌学中使用最广泛的一种染色方法，籍此染色法，可将所有细菌区分为两大类。,3,.,细菌染色方法及原理,常采用美蓝，结晶紫等碱性染料进行染色。多数染料都是中性有机盐。据着色基的不同可分为以下类型：,碱性染料（,basic dye,）,带正电染料。其阳离子部分为发色基团，可与细胞中带负电的组分结合。,酸性染料（,Acid dye,）,带负电染料。其阴离子部分为发色基团，可与细胞中带正电的组分结合。,4,.,革兰染色原理,细菌的等电点较低，约在,pH 2,5,之间，故在中性、碱性或弱碱性溶液中，菌体蛋白质电离后带负电荷，易与带正电荷的碱性染料如龙胆紫及碱性复红等结合，使细菌被染成紫色或红色。,5,.,一、细菌染色标本片的制备,细菌染色检查，首先要进行细菌标本制备。制备细菌标本一般包括涂片、干燥、固定三步。,6,.,固定的目的和方法,使细菌的细胞凝固，使菌体与玻片粘得更牢固,可改变菌体对染料的通透性,加热固定可杀死细菌，比较安全,固定的方法将制成的标本匀速通过火焰三次,7,.,革兰染色,染色：,初染,（结晶紫）,媒染,（碘液）,脱色（酒精）,复染,（复红）,滤纸吸干,油镜镜检,safranin,Crystal violet,8,.,染色步骤,结晶紫初染,卢戈碘液媒,染,乙醇脱色,复红复染,（）,（）,（）,（）,分钟水洗,分钟水洗,秒水洗,秒水洗吸干,9,.,Germ,is stained,violet,or,red,10,.,结晶紫初染分钟 水洗,11,.,碘液媒染分钟,水洗,12,.,酒精脱色秒,水洗,13,.,复红复染秒,水洗,14,.,滤纸吸干,油镜镜检,15,.,抗酸染色法,(acid-fast stain),分枝杆菌属的细菌（包括结核分枝杆菌、麻风分枝杆菌等）为抗酸性细菌，一般染色法不易着色，须用抗酸染色法。,注意事项,涂片要略厚,加温染色或延长染色时间，加温时随时补加染色液,分枝杆菌呈红色,(+),其他细菌和背景为蓝色,(-),。,16,.,操作过程,取痰液 涂片（略厚）干燥固定,石炭酸复红加温染色,810,分钟后,用,3%,的盐酸酒精脱色约,12,分钟，,脱色时轻摇玻片，直到涂片颜色脱去为止,水洗后，用碱性美蓝复染,1,分钟水洗，,印干 镜检,17,.,形态：,细长，略弯曲的杆菌，多聚集成团。无鞭毛,芽胞。,染色性：,不易着色，抗酸染色阳性。菌体呈红色，背景中其他物质蓝色。,结核分枝杆菌,(M.tuberculosis),18,.,细菌基本形态结构观察,基本形态,球菌,杆菌,弧菌,特殊结构,芽孢 枯草杆菌，破伤风梭菌,荚膜 肺炎球菌,鞭毛 变形杆菌,葡萄球菌,链球菌,肺炎球菌,脑膜炎球菌,革兰阳性,革兰阴性,19,.,20,.,21,.,肺炎（双）球菌 荚膜,22,.,23,.,24,.,25,.,26,.,27,.,28,.,