双歧杆菌四联活菌联合干扰素对轮状病毒感染性腹泻患儿炎性因子、免疫功能与肠道菌群的影响.pdf

DOI：10.19893/ki.ydyxb.2023-0066第 21 卷第 2 期2023 年 6 月延安大学学报（医学科学版）Journal of Yanan University(Medical Science Edition)Vol.21 No.2Jun.2023双歧杆菌四联活菌联合干扰素对轮状病毒感染性腹泻患儿炎性因子、免疫功能与肠道菌群的影响宁启国1，陈娜2*（1.山阳县中医医院儿科，陕西 商洛 726400；2.铜川市中医医院（北京中医药大学孙思邈医院）检验科，陕西 铜川 7270061）摘要：目的观察双歧杆菌四联活菌联合干扰素治疗轮状病毒感染性腹泻对患儿炎性因子、免疫功能及肠道菌群的影响。方法将商洛市山阳县中医医院2021年1月至2022年9月收治的轮状病毒感染性腹泻患儿84例纳入研究，采用随机数字表法分为观察组和对照组（各42例）；在常规对症治疗基础上，对照组给予干扰素治疗，观察者则给予双歧杆菌四联活菌联合干扰素治疗，观察两组患儿炎性因子、免疫功能及肠道菌群的改善情况。结果治疗后观察组总有效率（95.24%）高于对照组（80.95%），差异有统计学意义（2=4.086，P0.05）。治疗后两组患儿炎性因子IFN-、IL-6、IL-10和TNF-水平均降低，且观察组明显低于对照组；免疫功能指标（血清IgM、IgG、IgA、CD4+/CD8+）含量均升高，且观察组明显高于对照组；粪便中乳酸杆菌、双歧杆菌、肠球菌含量均升高，且观察组明显优于对照组，差异均有统计学意义（P0.05）。结论双歧杆菌四联活菌联合干扰素治疗小儿轮状病毒感染性腹泻有较好疗效，可减轻炎性反应，增强患儿免疫功能，调节肠道菌群平衡，促进患儿康复。关键词：轮状病毒感染性腹泻；干扰素；双歧杆菌；肠道菌群；免疫功能中图分类号：R725.7 文献标识码：A 文章编号：1672-2639（2023）02-0083-04Effects of bifidobacterium tetravaccine live combined with interferon on inflammatory factors，immune function and intestinal flora in children with rotavirus infectious diarrheaNING Qiguo1，CHEN Na2*（1.Department of Pediatrics，Shanyang County Traditional Chinese Medicine Hospital，Shangluo 726400，China；2.Department of Laboratory Medicine，Sun Simiao Hospital，Tongchuan Traditional Chinese Medicin Hospital/Beijing University of Traditional Chinese Medicine，Tongchuan 7270061，China）Abstract：Objective To observe the effect of bifidobacterium tetravaccine live bacteria combined with interferon on inflammatory factors，immune function and intestinal flora in children with rotavirus infectious diarrhea.Methods 84 children with rotavirus infectious diarrhea admitted to Shanyang County Hospital of Traditional Chinese Medicine in Shangluo City from January 2021 to September 2022 were included in the study.They were divided into observation group and control group（42 cases each）by random number table.On the basis of routine symptomatic treatment，the control group was treated with interferon，and the observer was treated with bifidobacterium tetravaccine live combined with interferon.The improvement of inflammatory factors，immune function and intestinal flora in the two groups were observed.Results The total effective rate of the observation group（95.24%）was higher than that of the control group（80.95%），and the difference was statistically 作者简介：宁启国（1980），男，陕西商洛人，主治医师。研究方向：儿科常见病、多发病及疑难杂症。通信作者：陈娜（1979），女，陕西铜川人，主管检验师。研究方向：临床检验医学，临床检验诊断。E-mail：83第 21 卷 延安大学学报（医学科学版）第 2 期significant（2=4.086，P0.05）.After treatment，the levels of inflammatory factors IFN-，IL-6，IL-10，and TNF-in both groups of children decreased，and the observation group was significantly lower than the control group；the levels of immune function indicators（serum IgM，IgG，IgA，CD4+/CD8+）increased，and the observation group was significantly higher than the control group；the contents of Lactobacillus iners，Bifidobacterium bifidum and Enterococcus faecium in feces increased，and the observation group was significantly better than the control group（P0.05）.Conclusion Bifidobacterium tetravaccine live combined with interferon is effective in the treatment of rotavirus infectious diarrhea in children.It can reduce inflammatory reaction，enhance the immune function of children，regulate the balance of intestinal flora，and promote the rehabilitation of children.Key words：Rotavirus infectious diarrhea；Interferon；Bifidobacterium bifidum；Intestinal flora；Immune function小儿腹泻是儿科常见的消化系统疾病，其在儿科的发病率仅次于呼吸系统疾病，而轮状病毒（Rotavirus，RV）感染是造成小儿腹泻的主要原因之一。轮状病毒感染是全身性疾病，但对儿童的胃肠道影响最大，会造成患儿发热、呕吐、腹泻等，严重时可出现脱水等并发症，若不及时治疗，还会诱发心肌细胞、脑细胞损伤，影响患儿生长发育，甚至危及生命安全1-2。RV感染性腹泻尚无特效药，目前主要进行抗病毒和对症治疗，其中干扰素是常用药物，可以阻断RV的复制，发挥抗病毒作用，但该药单用对腹泻患儿炎症及肠道菌群失调现象改善效果并不理想 3。而双歧杆菌四联活菌片为微生态制剂，可调节肠道菌群平衡，抑制病原菌繁殖，可达到止泻效果4。基于此，本研究采用在干扰素抗病毒治疗基础上联合微生态制剂治疗小儿RV感染性腹泻，探讨其对患儿炎性因子、免疫功能及肠道菌群的影响。1资料与方法1.1一般资料将商洛市山阳县中医医院2021年1月至2022年9月收治的84例RV感染性腹泻患儿纳入研究，采用随机数字表法将其分为观察组和对照组，各42例。对照组中男20例，女22例；年龄7个月6岁；平均年龄（4.341.57）岁；病程 13 d，平均病程（1.220.68）d；体重 7.824.9 kg，平均（16.243.26）kg。对照组中男23例，女19例；年龄6个月5岁；平均年龄（4.211.05）岁；病程 12 d，平均病程（1.060.60）d；体重 7.423.5 kg，平均（15.643.14）kg。所有患儿监护人均签署知情同意书，经医院伦理委员会审核通过。纳入标准：患儿伴随发热、脱水、呕吐等症状，大便次数4次/d；诊断符合 儿童腹泻病诊断治疗原则的专家共识5中小儿腹泻诊断标准，大便轮状病毒抗原检测呈阳性；年龄12岁，病程7 d；病历资料完整；近期内未服用过微生态制剂及抗生素；患儿及家属依从性好。排除标准：痢疾等其他原因导致的腹泻；身体机能差或营养不良者；合并心、肝、肾或其他脏器疾病；精神障碍患儿；对本研究药物过敏者。1.2方法两组患儿入院后均进行常规对症治疗，有脱水症状者给予液盐补充，及时进行降温、纠正电解质、酸碱失衡等治疗，同时指导患儿饮食。在此基础上，对照组采用人干扰素治疗，重组人干扰素-2b（上海华新生物高技术有限公司，国药准字S20030013，规格：3 000 000 IU/瓶）肌内注射。50 000100 000 IU/（kgd），1次/d，治疗5 d。观察组在对照组基础上联合双歧杆菌四联活菌片（杭州远大生物制药有限公司；国药准字S20060010；规格：0.5 g/片），用法用量：0.5岁患儿2次/d，1片/次；0.51岁患儿2次/d，2片/次；16岁患儿 23次/d，2片/次；612岁患儿 3次/d，23片/次。婴幼儿可将片剂溶于50 温水或牛奶中服用，治疗5 d。1.3观察指标1.3.1 炎性水平 治疗前后分别抽取患儿空腹静脉血，离心处理后采用酶联免疫吸附试验（enzyme-linked immunosorbent assay，ELISA）检测血清炎性因子干扰素-（interferon-，IFN-）、白细胞介素6（interleukin-6，IL-6）、白细胞介素10（interleukin-10，IL-10）和肿瘤坏死因子 （tumor necrosis factor-，TNF-）水平。1.3.2 免疫功能 治疗前后采集患儿空腹静脉血液，离心处理后，取上清液，采用ELISA法测定免疫球蛋白 A（immune globulin A，Ig A）、免疫球蛋白 M84双歧杆菌四联活菌联合干扰素对轮状病毒感染性腹泻患儿炎性因子、免疫功能与肠道菌群的影响（immune globulin M，Ig M）、免疫球蛋白 G（immune globulin G，Ig G）水平。同时采用流式细胞术（flow cytometer，FCM）测定外周血中T淋巴细胞亚群，分析CD4+/CD8+细胞比值。1.3.3 肠道菌群情况 治疗前后分别收集患儿0.5 g的新鲜粪作为标本，稀释后进行培养基培养，提取菌群，通过菌群检测系统鉴定菌种类型，计算湿重粪便中菌落数对数值（log CFU/g）。1.3.4疗效判定治疗72 h后根据排便次数、粪便性状及临床症状改善效果来评估疗效，评价标准6：显效：患儿排便次数正常，粪便性状恢复正常，发热等症状全部消失；有效：患儿排便次数明显减少，粪便性状及症状好转；无效：患儿排便次数、粪便性状及均无明显好转或甚至加重。总有效率=（显效+有效）/总例数 100%。1.4统计学方法数据采用SPSS25.0统计学软件处理，计数资料以 n（%）表示，用2检验，计量资料以（x s）表示，用t检验，P0.05为差异有统计学意义。2结果2.1两组患儿临床疗效比较治疗后观察组总有效率（95.24%）高于对照组（80.95%），差异有统计学意义（2=4.086，P0.05，表1）。2.2两组患儿炎性因子水平比较治疗后两组患儿血清 IFN-、IL-6、IL-10 和TNF-水平较治疗前均有降低，且观察组明显低于对照组，差异均有统计学意义（P0.05，表2）。2.3两组患儿免疫功能比较治疗后两组患儿血清 IgM、IgG、IgA、CD4+/CD8+水平较治疗前均有升高，且观察组明显高于对照组，差异均有统计学意义（P0.05，表3）。2.4两组患儿肠道菌群情况比较治疗后两组患儿粪便中乳酸杆菌、双歧杆菌和肠球菌含量较治疗前均有升高，且观察组明显高于对照组，差异均有统计学意义（P0.05，#表示组间比较P0.05，表示组内比较P0.05，#表示组间比较P0.05，表示组内比较P0.05，#表示组间比较P0.05，表示组内比较P0.05。85第 21 卷 延安大学学报（医学科学版）第 2 期菌可在肠道内定植，一方面可调节腹泻导致的菌群失衡状态，另一方面形成肠道防御屏障，降低病原菌的入侵、繁殖，进一步平衡肠道菌群。这与李碧莹8等研究结果一致，表明益生菌对调节 RV感染性腹泻患儿肠道菌群失调有较好效果，因此观察组患儿粪便中乳酸杆菌、双歧杆菌、肠球菌含量均高于对照组。同时，RV感染性还会导致患儿的体液免疫处于抑制状态，Ig M、Ig G、Ig A处于低水平，也会影响细胞免疫，导致CD4+、CD8+T淋巴细胞等水平降低9。而病毒侵袭及腹泻都会造成肠道的炎性反应及组织损伤现象，促炎因子大量分泌，其中IFN-是活化的T细胞所分泌的细胞因子，肠黏膜淋巴细胞在受到RV感染后会产生IFN-，而IL-6、IL-10和TNF-等促炎因子具有广泛免疫学效应，能够诱导炎症反应，加剧肠道损伤，可加重RV感染性腹泻的病情10-11。本研究结果显示，干扰素的抗病毒作用可减少RV感染对患儿免疫功能的影响，降低炎症损伤，其次，双歧杆菌四联活菌补充的益生菌可以调节促炎与抗炎细胞因子之间的平衡，使肠道菌群保持最佳状态，抑制有害菌群的侵害，能减少肠源性毒素产生，进一步减少肠道的炎症反应，与李玉兰等12、盛华西13研究结果一致，表明益生菌对病毒感染性腹泻患儿炎症因子水平有降低作用。寻卫平14在微生态疗法治疗婴幼儿轮状病毒腹泻的研究中表明，研究组 Ig M、Ig A、外周血CD4+、CD3+、CD4+/CD8+比值显著高于对照组（P0.05），本研究结果也表明益生菌对患儿免疫功能的改善效果，这是因为益生菌除了通过改善炎症反应来调控免疫功能外，还能刺激肠黏膜产生分泌型免疫球蛋白，改善免疫功能，提高肠道对病毒的抵御能力。另外患儿肠道的菌群恢复平衡，也有助于营养物质的吸收，利于患儿机体合成必要的营养物质，促进免疫球蛋白水平。综上所述，双歧杆菌四联活菌联合干扰素治疗小儿RV感染性腹泻有较好疗效，可减轻炎性反应，增强患儿免疫功能，调节肠道菌群平衡，促进患儿康复，值得临床推广。参考文献：1 KIM J H，KIM K，KIM W.Genipin inhibits rotavirus-induced diarrhea by suppressing viral replication and regulating inflammatory responses J.Scientific Reports，2020，10（1）：1-112 胡德强，徐卫华，陈婷，等.醒脾养儿颗粒联合双歧杆菌三联活菌散对轮状病毒腹泻患儿免疫功能、心肌酶指标和血清IL-6、CRP的影响 J.现代生物医学进展，2022，22（6）：1147-1150，1179.3 康娟.四联双歧杆菌活菌联合重组人干扰素治疗小儿轮状病毒感染性腹泻的效果观察 J.中国校医，2021，35（5）：379-380.4 张慧，谯喜荣，孔丹.小儿腹泻治疗应用微生态制剂的临床效果观察 J.中国全科医学，2021，24（S2）：80-82.5 中华医学会儿科学分会消化学组，中华医学会儿科学分会感染学组，中华儿科杂志 编辑委员会.儿童腹泻病诊断治疗原则的专家共识 J .中华儿科杂志，2009，47（8）：634-636.6 方鹤松，魏承毓，段恕诚，等.“98全国腹泻病防治学术研讨会”纪要、腹泻病治疗新原则、疗效判断标准的补充建议 J.临床儿科杂志，1998（5）：358.7 周丽，徐派的，张红星.肠道菌群与常见功能性胃肠病相关性的研究进展 J.华中科技大学学报（医学版），2020，49（6）：756-760.8 李碧莹.益生菌对婴幼儿轮状病毒性腹泻肠道屏障功能及肠道菌群的影响 J.中国中西医结合消化杂志，2015，23（12）：871-873.9 甄小龙，贺沙沙，吴丽萍.微生态疗法治疗婴幼儿轮状病毒腹泻的疗效及对患儿免疫功能的影响 J.基础医学与临床，2018，38（7）：988-992.10 朱志萍，王朝阳，陈建群，等.布拉酵母菌散对轮状病毒肠炎患儿血清和粪便IL-6、TNF-及IFN-的影响 J.解放军医药杂志，2018，30（6）：68-71.11 祖丽皮亚 达木拉，帕尔哈提 阿不力米提.消旋卡多曲和酪酸梭菌二联活菌散在急性轮状病毒腹泻中的疗效和安全性 J.中华消化病与影像杂志（电子版），2019，9（1）：22-26.12 李玉兰，张栖，邓文辉.复合乳酸菌联合蒙脱石散治疗小儿轮状病毒感染性腹泻的疗效及对血清炎性因子的影响 J.临床合理用药杂志，2021，14（19）：147-149.13 盛华西.酪酸梭菌活菌散联合干扰素治疗轮状病毒感染性腹泻的效果及对患儿乳酸、炎症因子水平的影响 J.中国当代医药，2022，29（26）：127-129，141.14 寻卫平.微生态疗法治疗婴幼儿轮状病毒腹泻的效果与对免疫功能的影响 J.黑龙江医药，2018，31（6）：1260-1262.收稿日期 2023-03-09；责任编辑 徐文梅86