三种盐制桑螵蛸化学成分及抗氧化活性比较.pdf

82DOl:10.16720/ki.tcyj.2023.121Special Wild Economic Animal and Plant Research特产研究三种盐制桑螺化学成分及抗氧化活性比较刘雨冬1,孙文2 冀国鑫1,刘俊泽1,李正龙1,李小欢1,李硕1,王淑敏1（1.长春中医药大学，吉林长春130 117;2.吉林省药品审核查验中心，吉林长春130 0 6 2)摘要：在“成分一功效”关联模式下，探究盐制团螺、盐制长螺、盐制黑螺中水分、总灰分、酸不溶性灰分、浸出物、不同溶剂提取物的成分差异及抗氧化活性。选取3种盐制桑螺，依据国家标准对其水分、总灰分、酸不溶性灰分、浸出物进行测定。通过7 0%乙醇对3种桑螺进行超声提取，得浓缩液，蒸干，用水分散，之后用正已烷、二氯甲烷、乙酸乙酯和正丁醇依次对粗提物进行萃取，测定各萃取物中主要活性物质总蛋白、总多糖、总黄酮的含量；以DPPH自由基、ABTS自由基清除率为指标，评价3种桑螺各溶剂萃取物的抗氧化活性，同时分析抗氧化能力与总蛋白、总多糖、总黄酮之间的关系。盐制团螺的水分、总灰分、酸不溶性灰分的含量最低分别为7.6 3%、4.47%、0.91%，浸出物含量最高为13.7 2%。盐制长螺水提物中总蛋白含量最高为446.0 6 mg/g；盐制长螺水提物中总多糖含量最高为2 4.7 3mg/g；盐制团螺乙酸乙酯萃取物中总黄酮含量最高为2 8 1.42 mg/g。3种桑螺均以正丁醇提取物抗氧化活性最强。经综合比较，其清除自由基能力为盐制团螺 盐制长螺 盐制黑螺。关键词：盐制桑螺；不同溶剂；总蛋白；总多糖；总黄酮；抗氧化活性中图分类号：R284.2Comparison of Chemical Constituents and Antioxidant Activities of ThreeLIU Yudong,SUN Wen?,JIGuoxin,LIU Junzel,LIZhenglongl,LIXiaohuan,LI Shuol,WANG Shumin1x(1.Changchun University of Chinese Medicine,Changchun 130117,China;2.Jilin Food and Drug Evaluation Center,Chan-Abstract:The contents of moisture,total ash,acid insoluble ash,extract,compositional differences and antioxidant of different solvent ex-tracts from salt-processing Tenodera sinensis Saussure,salt-processing Statilia maculata(Thunberg)and salt-processing Hierodula patellif-era(Serville)were explored based on the mode of correlation of components-efficacy.Three kinds of Mantidis ootheca were selected,andtheir moisture,total ash,acid-insoluble ash and extract were determined according to national standards.The three salt-processing Mantidisootheca extracts were extracted by ultrasonic extraction with 70%ethanol,and the concentrated solution was evaporated and dispersed withwater,after which the crude extracts were extracted with n-hexane,dichloromethane,ethyl acetate and n-butanol in turn,and the contents oftotal protein,total polysaccharide and total flavonoids in each extract were determined.The antioxidant activity of each solvent extract of Man-tidis ootheca was evaluated using DPPH radical and ABTS radical scavenging rate as indicators,and the relationship between antioxidant ca-pacity and total flavonoids,total polysaccharides and total protein was also analyzed.The contents of extract,total ash and acid-insoluble ashof salt-processing Tenodera sinensis Saussure were the lowest at 7.63%,4.47%and 0.91%,respectively,and the highest content of extracts was13.72%.The highest total protein content was 446.06 mg/g in the water extract of salt-processing Statilia maculata(Thunberg);the highesttotal polysaccharide content was 24.73 mg/g in the aqueous extract of salt-processing Statilia maculata(Thunberg);the highest total flavo-noid content was 281.42 mg/g in the ethyl acetate extract of salt-processing Tenodera sinensis Saussure.The three kinds of Mantidis oothecahave the strongest antioxidant activity of n-butanol extract.In a comprehensive comparison,the order of free radical scavenging ability wassalt-processing Tenodera sinensis Saussure,salt-processing Statilia maculata(Thunberg),Hierodula patellifera(Serville).Key words:salt-processing Mantidis ootheca;different solvents;total protein;total polysaccharide;total flavonoids;antioxidant activity收稿日期：2 0 2 2-12-14基金项目：吉林省中医药科技项目（JLPZGF-2020-085）作者简介：刘雨冬（1996-)，女，河南虞城人，硕士研究生，主要从事中药炮制关键技术及科学内涵研究。通讯作者：王淑敏（196 5-），女，教授，博士生导师，从事中药炮制关键技术及科学内涵研究。文献标识码：ASalt-processing Mantidis Oothecagchun 130062,China)文章编号：10 0 1-47 2 1(2 0 2 3)0 4-0 0 8 2-0 8第4期桑螺为螳螂科昆虫大刀螂Tenodera sinensisSaussure、小刀螂 Statilia maculata（T h u n b e r g）或巨斧螳螂Hierodula patellifera(Serville)的干燥卵鞘，以上3种分别习称“团螺”、“长螺”及“黑螺”1。桑螺始载于神农本草经,为我国传统药用昆虫之一 2 ,其味甘、咸、性平。传统医学认为桑螺具有补肾助阳，固精缩尿等功效，主治肾气不足、遗尿、小便频数等症 3。世效得效方中首次提出了盐水炙桑螺的方法 4,现代临床较为常用的为清蒸和盐制桑螺 5。桑螺中富含大分子蛋白质、氨基酸、糖类、酚类、挥发油、铁钙胡萝卜素色素等物质 6-10 。魏暑飓等 8 探索桑螺的植物源化学成分，首次从桑螺分离得到二类、黄酮类成分。现代药理学研究表明，桑螺具有抗动脉粥样硬化、抗菌、抗疲劳、免疫调节及抗氧化等作用 11-17 。研究表明，许多疾病的产生都与人体产生的自由基过度或得不到及时清除密切相关。自由基堆积会导致体内氧化作用失衡，从而导致机体细胞和组织被损伤，增加机体癌症、早衰等风险 18 。近年来，动物药因具有良好的生物活性受到人们的关注。Ryu等 17 从桑螺7 0%乙醇提取物中分离得到3个新的N-乙酰多巴胺衍生物，且都表现出抗氧化活性。由于不同制备方法所得提取物的成分不同，因而通过研究3种盐制桑螺不同提取溶剂的活性产物，制备具有其他广受关注功能的提取物对于桑螺资源的充分利用具有重要现实意义。目前，关于对比3种盐制桑螺的活性相关研究较少，基础理论支撑较为薄弱。现有3种桑螺不同溶剂提取物中的主要活性成分含量及其抗氧化的比较研究尚不清楚。因此，本试验在“成分一功效”关联模式下，采用不同溶剂分别提取3种盐制桑缥，进行总蛋白、总多糖、总黄酮含量比较。利用ABTS清除率、DPPH清除率进行抗氧化能力评估，通过相关性建立3种桑螺不同溶剂提取物主要活性成分一体外抗氧化功效的评价模型，旨在为桑螺在药品领域的应用提供科学信息和理论依据，促进桑螺的精深加工利用。1材料与方法1.1村材料与仪器1.1.1材料与试剂团螺、长螺、黑螺经长春中医药大学王淑敏教授鉴定分别为螳螂科昆虫大刀螂、小刀螂和巨斧螳螂的干燥卵鞘(以上药材均购自河北仁心药业有限公司）；芦丁（批号：DST200308-016，成都乐美天医药），DPPH（纯度98%，上海源叶生物刘雨冬，等：三种盐制桑螺化学成分及抗氧化活性比较83科技有限公司）；ABTS（纯度9 8%，上海麦克林生化科技有限公司）；过硫酸钾（分析纯，上海沃凯生物技术有限公司）；抗坏血酸（纯度98%）、亚硝酸钠、水杨酸、硝酸铝、过氧化氢、硫酸亚铁、氢氧化钠(分析纯，天津市光复精细化工研究所)；乙酸乙酯、苯酚、二氯甲烷、无水乙醇、石油醚、正丁醇（分析纯，天津市永大化学试剂有限公司）。实验用水为娃哈哈纯净水。BCA（Bic in c h o n in ic a c id）蛋白浓度测定试剂盒（批号：P0012，上海碧云天生物技术有限公司）。1.1.2主要仪器设备InfinteM200Pro多功能酶标仪（TECAN帝肯有限公司）；双光束紫外可见分光光度计(TU-1901,北京普析通用仪器有限责任公司)；电子天平（ME204E,梅特勒一托利多国际有限公司）；旋转蒸发仪（RE-52AA，上海亚荣生化仪器厂）;KDM调温电热套（山东城华鲁电热仪器有限公司）；SX2-4-10一体式马弗炉（上海合恒仪器设备有限公司）。1.2方法1.2.1盐制桑螺供试品的制备取团螺药材2 0 0 g，加入50 mL盐水（药材与食盐比为10 0:2），110 条件下炒制10 min，即得盐制团螺饮片 19。盐制长螺、盐制黑螺供试品溶液制备方法同上。1.2.2样品的制备称取2 0 0 g盐制团螺干燥粉末，料液比为1:10 g/mL，用7 0%乙醇超声提取 2 0,2 1（12 0 W，频率40 kHz)1h，重复3次，合并提取液，滤过，减压浓缩，干燥至恒重，得浸膏2 5.6 2 g。取浸膏18.72g，加适量蒸馏水制成悬浊液，依次用等体积的正已烷、二氯甲烷、乙酸乙酯、正丁醇进行萃取，各萃取3次，合并萃取液，过滤，减压浓缩，干燥至恒重，得不同极性萃取物，备用。另外取盐制团螺粉末50 g，加水500mL，加热回流提取3次，每次1h，滤过，合并滤液，减压干燥，得盐制团螺水提物浸膏。分别称取盐制团螺水提物，7 0%醇提物及不同溶剂萃取物部分，用7 0%乙醇配制供试品溶液，浓度为2.0 mg/mL。盐制长螺、盐制黑螺供试品溶液制备方法同上。1.2.3水分、灰分、浸出物测定根据2 0 2 0 年版中国药典（四部）通则项下的烘干法（通则0 8 32）、总灰分测定法、酸不溶性灰分测定法（通则2 30 2）、醇溶性浸出物测定法的热浸法（通则2 2 0 1)测定水分、总灰分、酸不溶灰分以及浸出物含量，均平行测定3次 1。1.2.4总蛋白含量测定数据分析采用BCA检测试剂盒进行蛋白含量测定。蛋白质含量计算公式如(1)所示：84W=CxVxN100%M式中：W为桑螺中总蛋白含量，C为样液中总蛋白的浓度（mg/mL），V为试样定容后的体积（mL）；N为稀释倍数；M为试样的质量(mg）。1.2.5总多糖含量测定数据分析按照邵佩等 2 2 方法稍作修改，在具塞试管中，依次加入2 mg/mL的各溶剂萃取物溶液1mL，再分别加入5%苯酚溶液1mL和浓硫酸5mL，摇匀，室温下避光反应15min。以无水葡萄糖作为对照品制作标准曲线；以7 0%乙醇代替各萃取物溶液，同法操作，作为空白对照。在490 nm波长下测定吸光度，计算3种桑螺不同部位总多糖含量，计算公式同总蛋白含量测定公式。1.2.6总黄酮含量测定数据分析按照赵彤等 2 3方法稍作修改，用7 0%乙醇将各溶剂萃取物配制成2.0mg/mL的溶液，吸取50 0 L不同浓度提取液于离心管中，加50 L5%亚硝酸钠溶液，混匀，反应5min后，加50 L10%硝酸铝溶液，静置5min后加入2 50 L4%氢氧化钠溶液，摇匀，在510 nm波长处测定吸光度，各浓度平行3次。在同样条件下使用不同浓度芦丁的对照品溶液制备标准曲线，计算3种桑螺不同极性部位总黄酮含量，计算公式同总蛋白含量测定公式。1.2.7 DPPH 自由基清除能力测定根据Kedare 等 2 4和徐明哲等 2 5 的方法稍作修改,取50 L不同浓度萃取物溶液，加至96 孔板中，再加入0.2 mmol/L的DPPH乙醇溶液2 0 0 L,振摇均匀，37 避光反应2 0 min，以抗坏血酸作为对照，在517 nm下测定其孔吸光度值Table 1 Comparison of water content,ash content and extractive content of three kinds of salt-processing Mantidis ootheca(xs,n=3)单位：%盐制团螺盐制长螺成分Salt-processing Tenodera sinensisComposition水分总灰分酸不溶性灰分浸出物2.1.2总黄酮、总蛋白、总多糖含量比较分析24,可知3种桑螺均含有蛋白、多糖、黄酮类成分，但相互之间存在差别。其中，在盐制团螺中，乙酸乙酯萃取物总黄酮含量最高，水提取物总多糖、总蛋白含量最高，与贾坤静等 6 的多糖含量结果类似（1.59%)，总蛋白含量结果偏低（48.37%）。在盐制长螺和盐制特产研究(1)A2，溶剂代替DPPH溶液吸光度值为A1，溶剂代替不同萃取物溶液吸光度值A0。计算公式如（2)所示：清除率=1-4-4,1100%A01.2.8ABTS自由基清除能力测定等 2 6 和李婧雯等 2 7 的方法稍作修改，配制2.5mmol/L过硫酸钾溶液，7.4mmol/LABTS溶液，两种溶液1:1混匀，避光静置反应12 h16h，在7 34nm波长处用70%乙醇稀释至吸光度值为（0.7 0 0.0 2），得到ABTS工作液。依次在9 6 孔板中加入50 L不同浓度的各溶剂萃取物溶液，再加入2 0 0 LABTS工作液，室温下避光反应 10 min,以抗坏血酸作为对照,在 7 34 nm下测定其孔吸光度值A2，溶剂代替ABTS工作液吸光度值为A1,溶剂代替不同萃取物溶液吸光度值Ao。计算公式同DPPH自由基清除率公式。1.3数据处理运用软件 Excel、G r a p h Pa d Pr i s m 8.0、SPSS 2 1.0对数据进行单因素方差分析（ANOVA）、相关性分析及图像绘制。2结果与分析2.1含量分析2.1.1水分、灰分、浸出物含量比较分析水分、灰分、浸出物是药物的重要检测指标。由表1可知，盐制团螺的水分为7.6 3%，总灰分为4.47%，酸不溶性灰分含量为0.91%，均在3种桑螺中最低，浸出物含量(13.72%)在3种桑螺中最高，证明盐制团螺的品质较好。表13种盐制桑螺水分、灰分、浸出物含量对比(xs,n=3)Salt-processing Statilia maculataSaussure7.630.664.470.350.910.1313.720.292023年第45卷第4期(2)根据Rajurkar盐制黑螺Salt-processing Hierodula patellifera(Thunberg)8.010.235.420.341.090.2612.320.51斤由表黑螺中，水提取物总多糖、总蛋白含量最高，乙酸乙酯萃取物总黄酮含量最高。3种桑螺中，总蛋白含量最高的依次为盐制长螺蜻水提物组（446.0 6 mg/g）盐制团螺蜻水提物（42 2.93mg/g）盐制黑螺水提物组（37 8.7 7 mg/g）。3种药物不同溶剂萃取物总蛋白含量最少的均为正己(Serville)9.060.245.920.071.020.1110.880.22第4期烷萃取物组，以盐制黑螺正已烷组(96.12 mg/g)为最低。总多糖含量最高的依次为盐制长螺水提取物组(24.73mg/g)盐制团螺水提取物组（18.47 mg/g)盐制黑螺水提取物组（14.36 mg/g）。3种药物不同溶剂萃取物总多糖含量最少的均为正已烷萃取物组，以盐制黑螺正已烷萃取物组（3.34mg/g0.39mg/g)为最低。总黄酮含量最高的依次为盐制团螺乙酸乙酯萃取物组（2 8 1.42 mg/g）盐制长螺乙酸乙酯萃取Table 2 Determination results of salt-processing Tenodera sinensis Saussure(xs,n=3)组分Component水提取物70%乙醇提取物正已烷萃取物二氯甲烷萃取物乙酸乙酯萃取物正丁醇萃取物注：同列中不同字母表示差异显著（P0.05)。下表同。Note:Different letters in the same column indicate significant differences(P 0.05).The same as below.Table 3 Determination results of salt-processing Statilia maculata(Thunberg)(xs,n=3)单位：mg/g组分总蛋白ComponentTotal protein水提取物446.0632.61a70%乙醇提取物417.4013.44a正已烷萃取物108.135.49c二氯甲烷萃取物240.1818.16b乙酸乙酯萃取物249.7819.43b正丁醇萃取物438.6937.24a表4盐制黑螺含量测定结果(xs,n=3)Table 4 Determination results of salt-processing Hierodula patellifera(Serville)(xs,n=3)组分Component水提取物70%乙醇提取物正已烷萃取物二氯甲烷萃取物乙酸乙酯萃取物正丁醇萃取物2.2抗氧化活性分析2.2.1DPPH自由基清除活性刘雨冬，等：三种盐制桑螺化学成分及抗氧化活性比较表2 盐制团螺含量测定结果(xs,n=3)总蛋白总多糖Total proteinTotal polysaccharide422.9323.46a18.471.17a419.028.85a16.760.23a109.8511.66c5.740.18d 218.7916.26b7.941.22c232.0713.93b8.840.56c376.2561.33a12.801.36b表3盐制长螺含量测定结果(xs,n=3)总多糖Total polysaccharide24.730.13a19.430.10b5.000.66c6.170.70e9.820.50d13.091.60c总蛋白总多糖Total proteinTotal polysaccharide378.7737.26a14.364.88a346.8328.92a13.380.24a96.1213.50c3.340.39c147.8114.21c5.262.02c265.9126.67ab7.250.15bc207.1783.77bc11.480.27ab处有最大吸收的稳定自由基，其本身紫红色褪色程度EDPPH是一种在 517 nm与能提供自由基清除剂作用的电子数有关，清除自由85物组（2 33.49mg/g）盐制黑螺乙酸乙酯萃取物组(211.31mg/g）。3种药物不同溶剂萃取物总黄酮含量最少的均为正已烷萃取物组，以盐制黑螺正已烷萃取物组(36.6 0 mg/g)为最低。3种药物物质含量在二氯甲烷、正已烷萃取物中含量较低，表明3种桑螺中所含有的多糖、黄酮类化学物质可被中强极性(水、乙酸乙酯、正丁醇)溶剂富集，推测3种药物内部含有较多中强极性物质。单位：mg/g总黄酮Total flavonoids184.292.88c198.243.12c51.237.46e111.692.85d281.428.98a249.9710.67b总黄酮Total flavonoids103.831.32c143.455.13b44.505.09d100.531.58c233.495.13a222.834.05a总黄酮Total flavonoids95.971.19c96.451.21c36.603.69d94.708.65c211.314.36a196.297.68b单位：mg/g86基能力用半数清除率IC50表示，IC5o数值越小表明清除能力越强 2 4。由图1 3、表4 6 可知，3种桑螺不同溶剂萃取物均对DPPH自由基清除具有一定作用，呈现一定的量效关系。其中,在3种桑螺中,正丁醇萃取物清除DPPH自由基能力最强，3种药物正已烷萃取物清除DPPH自由基能力最弱。3种桑螺正丁醇萃取物在质量浓度为2.0 mg/mL时,DPPH自由基清除率分别达96.56%、91.54%和95.8 7%。盐制团螺的正丁醇萃取物IC5o为0.36 mg/mL，清除效率明显高于其他溶剂提取物，并且略高于阳性对照。盐制长螺的正丁醇萃取物ICso为0.50 mg/mL，清除效果弱于盐制团螺及阳性对照。盐制黑螺的正丁醇萃取物IC5o为0.6 7 mg/mL。综上，DPPH自由基清除能力总体上盐制团螺 盐制长螺 盐制黑螺。10080604020F0图1盐制团螺不同溶剂提取物的DPPH自由基清除率曲线(n=3)Fig.1DPPH free radical scavenging rate curves of differ-ent solvent extracts of salt-processing Tenodera sinensis%/甲斗100r8060F4020H0图2盐制长螺不同溶剂提取物的DPPH自由基清除率曲线(n=3)Fig.2 DPPH free radical scavenging rate curves of differentsolvent extracts of salt-processing Statilia maculata(Thun-特产研%/甲图3益盐制黑螺不同溶剂提取物的DPPH自由基清除率曲线(n=3)Fig.3DPPH free radical scavenging rate curves of differ-ent solvent extracts of salt-processing Hierodula patellifera2.2.2ABTS自由基清除活性通过ABTS自由基清除活性比较3种桑螺的抗氧化能力。ABTS法测抗坏血酸水提取物一70%乙醇提取物二氯甲烷萃取物正已烷萃取物乙酸乙酯萃取物中正丁醇萃取物0.51.0质量浓度/(mg/mL）ConcentrationSaussure0.51.0质量浓度/（mg/mL）Concentrationberg)(n=3)究10080F60F4020F定自由基清除活性过程中，ABTS经硫酸钾氧化后产生稳定的蓝绿色物质ABTS+26。由图4 6、表5 7 可知,3种桑螺ABTS自由基清除能力与各溶剂萃取物浓度有一定量效关系。盐制团螺、盐制长螺和盐1.52.0口抗坏血酸水提取物70%乙醇提取物+二氯甲烷萃取物1正已烷萃取物乙酸乙酯萃取物中正丁醇萃取物1.52.02023年第45卷第4期抗坏血酸水提取物+70%乙醇提取物+二氯甲烷萃取物正已烷萃取物乙酸乙酯萃取物中止丁醇萃取物0.51.0质量浓度/（mg/mL）Concentration(Serville)(n=3)制黑螺正丁醇萃取物在质量浓度为2.0 mg/mL时，ABTS自由基清除率分为9 6.19%、9 6.51%和9 4.6 8%。在盐制团螺中，正丁醇萃取物的清除能力最强（IC50为0.51mg/mL)，正已烷萃取物清除能力最弱（ICso为3.25mg/mL）。在盐制长螺中，正丁醇萃取物的清除能力最强（IC5o为0.59mg/mL），正已烷萃取物清除能力最弱（IC5o为1.8 6 mg/mL）。在盐制黑螺中，正丁醇萃取物清除能力最强为(IC50为0.8 0 mg/mL），正已烷萃取物清除能力最弱（ICso为7.0 1mg/mL）。3种桑螺ABTS自由基清除能力：盐制团螺 盐制长螺盐制黑螺。10080604020F图4盐制团螺不同溶剂提取物的ABTS自由基清除率曲线(n=3)Fig.4 ABTS free radical scavenging rate curves of differentsolvent extracts of salt-processing Tenodera sinensis Saus-1.50.51.0质量浓度/(mg/mL）Concentrationsure(n=3)2.0+水提取物+770%乙醇提取物二氯甲烷萃取物正已烷萃取物乙酸乙酯萃取物中正丁醇萃取物1.52.0抗坏血酸第4期刘雨冬，等：三种盐制桑螺化学成分及抗氧化活性比较87100806040200图5盐制长螺取物的ABTS自由基清除率曲线(n=3)Fig.5ABTS free radical scavenging rate curves of differentsolvent extracts of salt-processing Statilia maculata(Thun-Table 5 Scavenging of DPPH free radicals and ABTS free radicals with different solvent extracts of salt-processing70%乙醇提取物正已烷萃取物二氯甲烷萃取物乙酸乙酯萃取物正丁醇萃取物表6 盐制长螺不同溶剂萃取物清除DPPH自由基和ABTS自由基 IC50o值(XS,n=3)Table 6Scavenging of DPPH free radicals and ABTS free radicals with different solvent extracts of salt-processing组分Component抗坏血酸水提取物70%乙醇提取物正已烷萃取物二氯甲烷萃取物乙酸乙酯萃取物正丁醇萃取物%/率制清甲月SL8V抗坏血酸水提取物70%乙醇提取物二氯甲烷萃取物正已烷萃取物乙酸乙酯萃取物中正丁醇萃取物0.51.0质量浓度/(mg/mL)Concentrationberg)(n=3)表5盐制团螺不同溶剂萃取物清除DPPH自由基和ABTS自由基IC50值(X+s,n=3)Tenodera sinensis Saussure occidentalis ICso(xs,n=3)组分Component抗坏血酸水提取物100806040201.52.0Statilia maculata(Thunberg)occidentalis ICso(xs,n=3)抗坏血酸水提取物70%乙醇提取物二氯甲烷萃取物正已烷萃取物乙酸乙酯萃取物中正丁醇萃取物00.5质量浓度/mg/mL）Concentration图6盐制黑螺取物的ABTS自由基清除率曲线（n=3)Fig.6 ABTS free radical scavenging rate curves of differentsolvent extracts of salt-processing Hierodula patellifera(Ser-单位：mg/g盐制团螺IC50Salt-processing Tenodera sinensis Saussure ICsoDPPH 自由基DPPH free radicals0.370.01d0.530.06d0.770.05c4.170.11a1.580.06b0.480.04d 0.360.02dSalt-processing Statilia maculata(Thunberg)IC5oDPPH 自由基DPPH freeradicals0.370.01d0.830.05cd1.270.16bc4.220.67a1.870.08b0.530.02d0.500.05cd1.0ville)(n=3)ABTS自由基ABTS free radicals0.530.01de0.880.05c1.010.06c3.250.12a1.950.05b0.690.03d0.510.01e盐制团螺蜻IC50ABTS 自由基ABTS free radicals0.530.01e1.000.11c1.130.06bc1.860.08a1.250.04b0.790.06d0.590.03e1.52.0单位：mg/g88Table 7Scavenging of DPPH free radicals and ABTS free radicals with different solvent extracts of salt-processing组分Component抗坏血酸水提取物70%乙醇提取物正已烷萃取物二氯甲烷萃取物乙酸乙酯萃取物正丁醇萃取物2.3抗氧化能力与总蛋白、总多糖、总黄酮含量的相关性分析为进一步明确3种桑螺不同溶剂萃取物中总蛋白、总多糖、总黄酮含量与抗氧化的关系,采用Spear-man相关性分析讨论抗氧化能力与所含活性成分的关Table 8 Correlation analysis of antioxidant capacity and content of total protein,total polysaccharides,total flavonoids and total盐制团螺盐制长螺盐制黑螺注：*P0.05表示差异显著；*P0.01表示差异极显著。Note:*P 0.05 Indicate was significant diffierences;*P 0.01 Indicate was very significant diffierences.3结论本试验对3种盐制桑螺的总多糖、总黄酮、总蛋白含量进行了对比分析，结果显示，3种盐制桑螺不同溶剂萃取物的总多糖含量在3.34mg/g24.73mg/g之间，含量最高的为盐制长螺水提物组，最低为盐制黑螺正已烷萃取物组。总黄酮含量在36.6 0 mg/g281.42mg/g之间，含量最高的为盐制团螺乙酸乙酯萃取物组，最低为盐制黑螺正已烷萃取物组。总蛋白特产研究表7 盐制黑螺不同溶剂萃取物清除DPPH自由基和ABTS自由基IC50值(XS,n=3)Hierodula patellifera(Serville)occidentalis IC5o(x+s,n=3)Salt-processing Hierodula patellifera(Serville)IC5oDPPH 自由基DPPHfreeradicals0.370.01b0.750.08b1.220.11b4.670.63a3.681.64a0.700.06b0.670.04b系。由表8 可知，3种药物的总黄酮与 DPPH、A BT S自由基清除能力均有明显的相关性（P0.05、P 0.01）。总蛋白、总多糖与DPPH自由基、ABTS自由基清除能力相关性不显著。表8 抗氧化能力与总蛋白、总多糖、总黄酮含量的相关性分析polyphenols指标Indicators2023年第45卷第4期单位mg/g盐制团螺IC50ABTS 自由基ABTS freeradicals0.530.01d1.340.10c0.990.02cd7.010.54a5.930.16b0.960.04cd0.800.05cd相关性RelevanceDPPH 自由基DPPHfreeradicals总蛋白0.543总多糖0.543总黄酮0.886*总蛋白0.714总多糖0.543总黄酮0.886*总蛋白0.486总多糖0.543总黄酮0.886*含量在9 6.12 mg/g446.06mg/g之间，含量最高的为盐制长螺水提物组，最低为盐制黑螺正已烷萃取物组。抗氧化作用也是桑螺重要的生物活性之一。本研究结果表明，正丁醇可以较好的萃取3种桑螺中的活性物质，是抗氧化成分的最优萃取溶剂。通过比较3种盐制桑螺清除DPPH、A BT S 自由基体外IC50值，结果表明，3种盐制桑螺的正丁醇提取物清除DPPH、A BT S 能力均最强，综合比较，对于DPPH、ABTS 自由基ABTS freeradicals0.7870.6580.938*0.7280.4190.894*0.4290.4860.943*第4期ABTS清除能力，盐制团螺优于盐制长螺，盐制黑螺清除能力最弱。这可能的是由于其不同提取物化学成分的含量差异、不同成分之间的协同或拮抗作用所决定。相关性分析是指对两个或多个具备相关性的变量元素进行分析，从而衡量两个变量因素的相关密切程度。本文通过相关性分析初步判断3种桑螺提取物的抗氧化能力与总黄酮含量呈显著相关性。推测黄酮类成分是桑螺中发挥抗氧化活性的基础。本研究为3种桑螺不同溶剂提取物的开发利用提供数据基础及理论依据。3种桑螺不同提取溶剂的活性产物及抗氧化活性存在差异，可以根据所需活性成分的不同，选取对应极性溶剂进行提取，促进资源高效合理利用。参考文献1国家药典委员会.中华人民共和国药典：一部 S.北京：中国医药科技出版社，2 0 2 0:313.2裴帅龙,谢明,许亮,等.桑螺的本草考证研究 J.中医药学报,2 0 2 1,49(7):8 9-9 3.3张保国，张大禄.动物药 M北京：中国医药科技出版社2003.4葛德燕,陈祥盛.桑螺药用历史与研究进展 .山地农业生物学报,2 0 0 6(5):455-46 0.5龚千峰中药炮制学 M北京：中国中医药出版社，2 0 16:301-302.6贾坤静，艾雪，贾天柱，等.桑螺炮制前后蛋白质和多糖及脂类成分比较 J.亚太传统医药，2 0 15,11(2 3)：15-17.7姜丽,李翔,贾天柱.柱前衍生和柱后衍生法检测生制桑螺中氨基酸