高效液相验证方案.doc

编号：EV-

高效液相色谱仪
验证方案

验证方案起草人： 日期：
验证方案批准人： 日期：

南京东沛国际贸易集团有限公司

目录

1. 引言
2. 安装验证
3. 操作验证
3.1 试验项目及限度
3.2 实验方法
3.2.1流量控制阀
3.2.2GM-150混合器
3.2.3柱温箱
3.2.4UV检测器准确度
3.2.5UV检测器基线噪音
4. 性能验证
5. 责任
6. 时间安排

仪器名称：实验室用高效液相色谱仪
生产厂家及型号：Waters in USA，1525泵、1500series柱温箱、2487检测器
设备登记号：HY-017
1. 引言
为确保仪器在使用中符合原设计的要求，并达到原拟订的目的，产生可信赖的量测结果，对仪器进行安装验证（IQ）、操作验证（OQ）、及性能验证（PQ）。
当仪器首次安装调试、经过一定周期（一年）或者变更位置时进行该验证。
2. 安装验证
2.1参加人员：
2.2检查清单：
表1：检查清单
名称
数量
存放处
负责人签收
定购清单
1份
QC-114室

产品授权书
3份
QC-114室

PCI BusLAC/E
1张
QC-114室

1525泵
1台
QC-114室

7725i进样器
1个
QC-114室

1500series柱温箱
1个
QC-114室

2487检测器
1台
QC-114室

配件
1盒
QC-114室

2.3维修服务
联系人：
单位：
地址：
电话：
传真：
2.4结论：所有物品应与检查清单相符，实验室水、电、气设计安装合理，实验室通风系统运行良好则符合仪器安装要求。
3 操作验证
确认仪器在操作极限内能正常运转，由装机工程师及操作者共同完成。每过一个周期要对该项进行例行验证。若仪器有移动、维修、更换主组件或增加新配件时必须对仪器部分OQ非例行性验证。
3.1试验项目与限度（表2）
表2：试验项目与限度
设备名称
组件
实验项目
限度
泵A/B
流量控制阀
流量稳定性
±1.0%
GM-150混合器
梯度准确性
±0.5%
柱温箱
温度控制器
温度准确性
1.0℃
温度精密性
0.5℃
UV检测器
单色器
波长准确性
±1.0nm

基线噪音
优于±0.35×105AU

3.2试验方法
3.2.1流量控制阀
①方法：泵流量设为1ml/min,将5ml的容量瓶接在泵出口处，在溶剂流入容量瓶的同时计时，至5ml标线时停止计时，计下测量时间。间隔约10min再测量一次。重复测三次以上， 求平均值 ()
计算出时间测量最小值及最d大值与平均值的相对偏差SRMAX、SRMIN。

表3：流量稳定性
流量ml·min-1
1次
2次
3次
4次
SRMAX
SRMIN
限度
A泵：1ml/min

±1.0%
B泵：1ml/min

±1.0%

结论：A、B两泵分别测定，两泵流量稳定性均应低于±1.0%，符合要求。
3.2.2 GM-150混合器：
方法：设定流动相A和B比例为1：1，流速为1.0ml/ min。取两个10ml量筒，分别装入流动相A、B，开始运行，同时计时。5ml时记录消耗流动相A、B体积，重复三次。
表4：梯度准确性
流动相
一次体积ml
二次体积ml
三次体积ml
平均值
允许偏差
实际偏差
A

B

②结论：实际偏差在限度以内则符合要求。
3.2.3柱温箱
方法：温度计为37℃，将一经校正的温度计放入柱温箱，每30min读取温度计及标准面板显示温度一次，共读5次。
表5：柱温箱检查
项 目
30min
60min
90min
120min
150min
180min
温度计示数

工作站示数

结论：温度计示数偏差应小于1℃，符合规定。工作面板示数波动应小于0.5℃。精密度符合要求。
3.2.4 UV检测器波长准确性
①方法：已知苯在233.9nm、238.9nm、243.3nm、248.5nm、254.5nm、260.6nm有特征吸收，故配置100mg/ml苯的乙醇溶液运行“Sample scan”程序。
表6：波长准确性
规定
实测
误差
规定
实测
误差

②结论：波长误差均应小于3nm，符合规定。
3.2.5 UV检测器基线噪音：
① 方法：双波长基线噪音测定：以水和甲醇先后冲洗系统0.5h，然后由流动相的检测器入口处充氮气20min左右，停止后，设λA=254nm、λB=280nm, 2.0 sec.time constant(TC). 记录工作站面板示数。
表7：基线噪音记录
时间
5min
10 min
15 min
20 min
25 min
30 min
35 min
40 min
AU值

②结论：40min内读数变化应在±2.5×10-5之间，则符合规定。
4．性能验证
①方法：柱子首次使用前应执行柱效验证，用下述方法进行柱效测试，当柱子柱效降低或超长时间使用时也应进行柱效测试。执行柱效测试包括以下4项内容：
1.平衡色谱柱。2.准备二氢苊标准品溶液。3.进样运行。4.检验柱效
②操作步骤：
1〉 配置流动相：乙腈：水（60：40），设检测波长254nm，柱温37℃，流速线速上升（0－1.0ml/min），达到此条件后平衡20min。
2〉 称取0.05g二氢苊溶于100ml乙腈中，即可。
手动进样10ul，设运行时间10min，记录数据，依下式计算，

结论：N应大于9000，则符合规定。
5. 责任：
验证小组负责验证方案的制定、批准及实施；
品管部经理负责高效液相色谱仪验证过程；
验证小组负责审核测试结果、评价及结论，负责验证报告的会签与批准，负责制定高效液相色谱仪验证的周期。
6．时间安排：