沙门氏菌检测.doc

食品安全国家标准
食品微生物学检验 沙门氏菌检验
National food safety standard
Food microbiological examination: Salmonella

食品安全国家标准
食品微生物学检验 沙门氏菌检验
1 范围
本标准规定了食品中沙门氏菌（Salmonella）的检验方法。
本标准适用于食品中沙门氏菌的检验。
2 设备和材料
除微生物实验室常规灭菌及培养设备外，其他设备和材料如下：
2.1 冰箱：2 ℃～5 ℃。
2.2 恒温培养箱：36 ℃±1 ℃，42 ℃±1 ℃。
2.3 均质器。
2.4 振荡器。
2.5 电子天平：感量0.1 g。
2.6 无菌锥形瓶:容量500 mL，250 mL。
2.7 无菌吸管：1 mL（具0.01 mL 刻度）、10 mL（具0.1 mL 刻度）或微量移液器及吸头。
2.8 无菌培养皿：直径90 mm。
2.9 无菌试管：3 mm×50 mm、10 mm×75 mm。
2.10 无菌毛细管。
2.11 pH 计或pH 比色管或精密pH 试纸。
2.12 全自动微生物生化鉴定系统。
3 培养基和试剂
3.1 缓冲蛋白胨水（BPW）： 见附录A 中A.1。
3.2 四硫磺酸钠煌绿（TTB）增菌液：见附录A 中A.2。
3.3 亚硒酸盐胱氨酸（SC）增菌液：见附录A 中A.3。
3.4 亚硫酸铋（BS）琼脂：见附录A 中A.4。
3.5 HE 琼脂：见附录A 中A.5。
3.6 木糖赖氨酸脱氧胆盐（XLD）琼脂：见附录A 中A.6。
3.7 沙门氏菌属显色培养基。
3.8 三糖铁（TSI）琼脂：见附录A 中A.7。
3.9 蛋白胨水、靛基质试剂：见附录A 中A.8。
3.10 尿素琼脂（pH 7.2）：见附录A 中A.9。
3.11 氰化钾 （KCN） 培养基：见附录A 中A.10。
3.12 赖氨酸脱羧酶试验培养基：见附录A 中A.11。
3.13 糖发酵管：见附录A 中A.12。
3.14 邻硝基酚β-D 半乳糖苷（ONPG）培养基：见附录A 中A.13。
3.15 半固体琼脂：见附录A 中A.14。
3.16 丙二酸钠培养基：见附录A 中A.15。
3.17 沙门氏菌O 和H 诊断血清。
3.18 生化鉴定试剂盒。
4 检验程序
沙门氏菌检验程序见图1。
图1 沙门氏菌检验程序
5 操作步骤
5.1 前增菌
称取25 g（mL）样品放入盛有225 mL BPW 的无菌均质杯中，以8 000 r/min～10 000 r/min 均质
1 min～2 min，或置于盛有225 mL BPW 的无菌均质袋中，用拍击式均质器拍打1 min～2 min。若样
品为液态，不需要均质，振荡混匀。如需测定pH 值，用1 mol/mL 无菌NaOH 或HCl 调pH 至6.8±0.2。
检样
36 ℃±1 ℃，8 h～18 h
TSI，赖氨酸，NA， 靛基质， 尿素 (pH 7.2)，KCN
挑取可疑菌落
BS XLD（或HE、显色培养基）
1 mL+TTB 10 mL 1 mL+SC 10 mL
25 g（mL）样品+225 mLBPW
H2S+ 靛基质-
尿素-KCN-
赖氨酸 +
H2S+ 靛基质+
尿素- KCN-
赖氨酸+
H2S-靛基质-尿
素-KCN-
赖氨酸+/-
反应结果与左
侧描述不符
生化鉴定试剂盒或全
自动微生物生化鉴定
系统+
42 ℃±1 ℃，18 h～24 h 36 ℃±1 ℃，18 h～24 h