微孔滤膜过滤除菌.doc

一.原理
微孔滤膜过滤器是由上下二个分别具有出口和入口连接装置的塑料盒组成，出口处可连接针头，入口处可连接针筒，使用时将滤膜装入两塑料盖盒之间，旋紧盖盒，当溶液从针筒注入滤器时，此滤器将各种微生物阻留在微孔滤膜上面，从而达到除菌的目的。
二.器材
1.培养基：2%的葡萄糖溶液，肉汤蛋白胨平板
2.仪器或其他用具：注射器，微孔滤膜过滤器，0.22um滤膜，无菌试管，镊子，玻璃刮棒
三.步骤
1.组装，灭菌
将0.22um孔径的滤膜装入清洗干净的塑料滤器中，旋紧压平，包装灭菌后待用（0.1Mpa,121.5℃灭菌20min）
2.连接
将灭菌滤器的入口在无菌条件下，以无菌操作方式连接于装有待滤溶液（2%的葡萄糖溶液）是注射器上，将针头与出口处连接并插入带橡皮塞的无菌试管中。
3.压滤
将注射器中的待滤溶液加压缓缓挤入过滤到无菌试管中，滤毕，将针头拔出。
压滤时，用力要适当，不可太猛太快，以免细菌被挤压通过滤膜。
4.无菌检查
无菌操作吸取除菌滤液0.1ml于肉汤蛋白胨平板上，涂布均匀，置于37℃温室中培养24h，检查是否有菌生长。
5.清洗
弃去塑料滤器上的微孔滤膜，将塑料滤器清洗干净，并换上一张新的微孔滤膜，组装包扎，再经灭菌后再用。
整个过程应在无菌条件下严格无菌操作，以防污染。过滤时应避免各连接处出现渗透现象。