植物组织培养试题第4章.doc

第4章 《胚胎培养及离体授粉》复习题及参考答案
一、填空：
★1、胚胎培养包括幼胚培养、成熟胚培养、胚乳培养、胚珠培养以及子房培养。
2、离体胚的培养分为二种类型： 成熟胚 培养和 幼胚 培养。
★3、胚珠培养分二类： 受精胚珠 的培养和 未受精胚珠 的培养。受精胚珠培养目的一是打破种子的休眠； 二是挽救胚的发育，以获得杂交种。未受精胚珠培养的目的是获得 单倍体植株 。
4、子房培养分 授粉子房 培养和 未授粉子房 的培养。前者培养的目的是挽救杂种胚，后者培养的目的是获得单倍体植株。
5、离体授粉的类型有离体柱头授粉、离体子房授粉、离体胚珠授粉。
★6、离体胚培养方法：成熟胚和幼胚培养
7、胚珠培养的培养基：Nitsch或N5,B5,MS，子房培养的培养基：N6,MS
二、名词解释：
★1、胚胎培养（embryo culture）： 指对植物的胚、子房、胚珠和胚乳进行离体培养，使其发育成完整植物的技术。包括幼胚培养、成熟胚培养、胚乳培养、胚珠培养以及子房培养。
★2、胚培养（embryo culture）：采用人工的方法将胚从种子、子房或胚珠中分离出来，再放在无菌的条件下，让其进一步生长发育，以至形成幼苗的过程。
★3、胚乳培养（endosperm culture）：是指将胚乳从母体上分离出来，放在无菌的人工环境条件下，让其进一步生长发育，以至形成幼苗的过程。
4、胚珠培养（ovule culture）：是指将胚珠从母体上分离出来，在无菌的人工环境条件下培养，使其生长发育形成幼苗的过程。
5、子房培养（ovary culture）：是指将子房从母体上分离出来，在无菌的人工环境条件下培养，使其生长发育形成幼苗的过程。
6、植物离体授粉：指将未授粉的胚珠或子房从母体上分离下来，进行无菌培养，并以一定的方式授以无菌花粉，使之在试管内实现受精的技术。
三、问答题：
★1、胚培养的作用有哪些？
1)在远缘杂交育种中的应用:克服杂种胚不能正常发育
2)克服珠心胚的干扰,提高育种效率
3)缩短育种周期
4)测定休眠种子的萌发率
5)理论研究中的应用
2、简述离体授粉的程序。（课件上没有）
（1）确定开花、花药开裂及授粉时间
（2）去雄后将花蕾套袋隔离
（3）制备无菌子房或胚珠
（4）制备无菌花粉
（5）胚珠或子房的试管内授粉
★3、胚胎培养的操作步骤。
l 取子房
l 常规表面消毒
l 解剖镜下，取胚珠、去珠被、取出完整幼胚。
l 固体培养
★4、幼胚的发育方式：
1）胚性发育：继续进行正常的胚胎发育
2）早熟发育：迅速萌发成幼苗
3）产生愈伤组织：再分化形成多个胚状体或芽原基 。
★5、胚胎培养的意义
①、克服远缘杂种的不育性
②、使胚胎发育不完全的植株获得后代
③、缩短育种年限，提高育种效率
★6、胚乳培养过程
n 胚乳外植体制备:种子消毒---取出胚乳
n 培养:White或MS诱导培养基---加入2，4-D或NAA0.5～2.0mg/L，BA 0.1～1.0mg／L—— 25-27℃--暗或弱光
n 发育:约6～lOd胚乳开始膨大，再诱导形成愈伤组织----转到分化培养基上培养，分化培养基可加入0.5～3.0mg／L的BA及少量的NAA。待愈伤组织长出芽后，切下不定芽，插入生根培养基中，光下培养10～15d，切口处可长出白色的不定根。
★7、检查胚乳植株的染色体数目的方法
l 取根尖、幼叶或愈伤组织
l 0.2%-0.5%秋水仙素碱溶液在25℃浸泡4-8hr
l 流水冲洗5-10min
l 卡诺氏液或FAA液固定
l 1mol盐酸，60 ℃水浴8-10min
l 染色、压片、镜检、计数
★8、胚珠培养的基本过程
1）、首先从花中取出子房进行表面消毒，
2）、然后在无菌的条件下进行解剖，取出胚珠，放在培养基上进行培养，
将胚珠培养成植株的关键是选择胚的发育时期，实验证明发育到球形胚期的胚珠较易培养成功，另外为了培养成功，可取用带胎座甚至带部分子房的胚珠进行培养。
★9、子房培养的培养过程
l 1、制备外植体：在开花前后适宜时期取子房或幼花，消毒
l 2、子房培养：固体或液体培养均可
★10、子房的发育的发育途径。
p 性细胞（卵细胞、助细胞、极核、反足细胞）----胚状体或愈伤组织----单倍体植株；
p 体细胞（珠被、子房壁）---胚状体或愈伤组织----二倍体植株；
★11、胚珠的发育途径。
1）、 受精胚珠：一是形成种子；二是形成愈伤组织
2）、 未受精胚珠：形成单倍体植株。