QA-T-003TN检测方法.doc

Heinz(China)
文件主题：全氮和蛋白质含量的测定方法
实施日期：
文件编号：QA-T-003
文件分类：质量保证文件
文件版本：02
编写： 审核： 批准：
被替代版本：01
发放范围
QA
1 目的
规范检验方法，确保检测的准确性。
2 适用范围
本方法适用于亨氏(中国)调味食品有限公司的产品和原材料的全氮/蛋白质含量的测定。
3 使用的仪器、试剂
3.1 仪器：FOSS 2020型消化炉、FOSS 2200型自动蒸馏仪、BRAND数显滴定仪。
3.2 试剂：浓H2SO4（95%—98%）、催化剂（CuSO4、K2SO4）、40%的NaOH水溶液 、甲基红指示剂(C=0.1%的乙醇溶液)、溴甲酚绿指示剂(C=0.1%的乙醇溶液)、4%的硼酸水溶液(内含0.7%的甲基红指示剂及1%的溴甲酚绿指示剂)。
4 操作步骤
4.1样品取样量的确定，如表1,其它未在表中列出来的样品，根据其全氮含量来确定其取样量，保证其全氮含量为7mg—28mg(根据步骤5中计算公式，初步判定取样量)，其中需要称重取样的均需精确到0.0001g。
表1:
样品名称
取样量
酱油产品、半成品、酸水解植物蛋白液、头油、二油、浓缩豉油

1ml
三油、四油
2ml
黄豆
0.13g—0.50g
面粉
0.36g—1.00g
4.2 准确称取（或量取）样品置于干燥的FOSS消化管中，加入一片CuSO4-K2SO4混合催化剂和10ml浓H2SO4。
4.3将加入样品及试剂的消化管插入已预热的消化炉中，并按消化炉的操作方法连接仪器，样品开始消化。
4.4 继续消化直到全部样品变为绿色澄清液，按样品的类型不同，所需消化的时间不一样，样品的类型及消化所需最少时间参考表2(如果消化炉未预热就放入消化管进行消化，要相应的加上消化炉预热的时间约40min），其它未在表中列出来的样品，根据其全氮含量来确定其消化时间。在消化过程中一定要保证消化时间足够，否则会导致消化不完全而使结果偏低。含糖量高的样品消化过程中要多观察，如果发现消化过程中发泡过多，蒸馏起来的酸雾不能将粘在消化管壁的碳化物冲下去时，用手摇动消化管，使粘在消化管壁的碳化物冲下去，避免消化不完全。
表2:
样品名称
消化时间
酱油生抽产品（包括成品、半成品）、酸水解植物蛋白液、头油、二油、浓缩豉油、三油、四油

0.5h—1h
酱油老抽产品（包括成品、半成品）
1.5h
黄豆、面粉等原材料
1.5h
4.5 将消化完成的样品消化管从消化炉中取出，放冷后进行蒸馏。
4.6 选择合适的蒸馏程序（见《FOSS自动定氮仪作业指导书》），按蒸馏仪的使用方法进行操作。
4.7蒸馏步骤完成后，然后放低接收液三角瓶，使冷凝管口离开液面约1cm，用蒸馏水冲洗蒸馏物输出管，取下三角瓶。
4.8 滴定，将三角瓶内接收液用0.1000mol/l HCl标准溶液滴定至紫红色。
4.9 取与处理样品相同量的混合催化剂、浓硫酸按同一方法做试剂空白试验。
5 计算

式中： V1——样品滴定时耗用HCl标准溶液体积，ml；
V2——空白滴定时耗用HCl标准溶液体积，ml；
N——0.1000mol/l HCl 标准溶液当量浓度，mol/l；
0.014——氮的毫克当量；
V——样品的体积（或重量），ml（或g）；
蛋白质含量（%）= F×TN
蛋白含量（%）= F×TN/（1-水分%）
式中：F——氮换算的蛋白质的系数，黄豆为5.71，面粉为5.70，小麦为5.83。
6 引用标准
6.1 GB18186-2000
6.2 GB5009.5-85
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