逆针“命门”和“腰俞”激活大鼠远细胞的形态机制.pdf

acupointsAnimal Husbandry&VeterinaryMedicine,2023,55(6):59-68.LIANG C H,BAI X B,YANG M,et al.Morphological mechanism of rat telocytes activated bypuncture stimulation at the“Mingmenand“Yaoshu”yelectroac梁春花，白雪兵，杨敏，等。逆针“命门”和“腰俞”激活大鼠远细胞的形态机制J畜牧与兽医，2 0 2 3，55（6）：59-6 8.5920233年第6 期第55卷畜牧与兽医逆针“命门”和“腰俞”涝激活大鼠远细胞的形态机制梁春花，白雪兵，杨敏，黄海翔，史永红，张迎鑫，张臻玮，梅璐，陈秋生1*（1.南京农业大学动物医学院，江苏南京2 10 0 9 5；2.中国农业科学院上海兽医研究所，中国上海200241)摘要：为了观测经穴及其对应脏腑（肾脏和膀胱）远细胞（telocytes，T Cs）相关结构的超微变化，以逆针未病（健康）大鼠督脉的“命门”和“腰俞”穴为对象，分析经穴联系脏腑的通讯结构（即信息交流结构），在细胞水平上探究电针刺激远细胞的形态机制，从而验证“远细胞可能是经络实质细胞”的观点。采用HE染色法观察大鼠督脉“命门”和“腰俞”穴的形态结构特征；免疫荧光双标法和透射电镜法观察督脉经穴TCs及其通讯结构的形态特征；进一步利用透射电镜法分析未病逆针组和正常组督脉经穴及其对应脏腑TCs及其相关结构的超微变化。结果显示：大鼠督脉经穴包含丰富的血管、神经和胶原纤维等结构以及毛囊、毛球和皮脂腺等皮肤衍生物。在督脉经穴及其对应脏腑中分布着极细长且呈串珠样突起的TCs，其具有细胞连接和胞外囊泡（extracellularvesicles，EVs）（包括外泌体）等通讯结构。TCs长突起（telopodes，T p s）的膨大部包含发达的线粒体和内质网。TCs之间及TCs与其他各结构之间借助细胞连接形成TCs网，Tps周围的EVs（包括外泌体）沿TCs网进行经穴和脏腑之间的信息交流。尤为重要的是，与正常组相比，未病逆针组大鼠经穴TCs总长度明显增加（P0.05），T p s 周围EVs的数量明显增多（P0.05）；与此对应，肾脏和膀胱TCs总长度也明显增加（P0.05），T p s 周围EVs的数量也明显增多（P0.05），膨大部所含线粒体和内质网更加发达。结论：本研究从微细形态学角度阐释中医经穴脏腑的相关性，并利用未病逆针模型验证了TCs可能是经络实质细胞的新观点。关键词：督脉经穴；未病逆针；远细胞；通讯结构；脏腑；大鼠中图分类号：S852.16文献标志码：A文章编号：0 52 9-5130(2 0 2 3)0 6-0 0 59-10Morphological mechanism of rat telocytes activated by electroacupuncturestimulation at the“Mingmen and“Yaoshu acupointsLIANG Chunhua,BAI Xuebing,YANG Min,HUANG Haixiang,SHI Yonghong”,ZHANG Yingxin,ZHANG Zhenwei,MEI Lu,CHEN Qiusheng*(1.College of Veterinary Medicine,Nanjing Agricultural University,Nanjing 210095,China;2.Chinese Academy of Agricultural Sciences,Shanghai Veterinary Research Institute,Shanghai 200241,China)Abstract:This study was to observe the ultrastructural differences of telocytes(TCs)related structures of the Governor Vessel(GV)acu-points and their corresponding Zang-fu organs(including kidney and bladder),andto analyze the communication structures of the correlationbetween the acupoints and the Zang-fu organs,so as to explore the morphological mechanism of TCs activated by electroacupuncture(EA)at the cellular level.Therefore,the viewpoint that TCs may be the meridian essence cells was substantiated by preventive acupuncture(PA)at“Mingmen(GV 4)and“Yaoshu(GV 2)acupoints of the GV in healthy rats.The morphological and structural features of“Mingmen(GV 4)and“Yaoshu(GV 2)acupoints of the GV in rats were observed through HE staining.Morphological features of TCs and their com-munication structures in the GV acupoints of the rats were revealed by double-labeling immunofluorescence and transmission electron micros-copy(TEM).Furthermore,TEM analysis was performed of the ultramorphological differences of TCs and their related structures of the GVacupoints and their corresponding Zang-fu organs(including kidney and bladder)of the normal group(NG),and the preventive acupunc-ture was conducted for the disease prevention group(PG).The results showed that the GV acupoints in the rats were rich in abundant bloodvessels,nerves,collagen fibers,as well as skin derivatives,such as hair follicles,hair bulbs and sebaceous glands.Remarkably,TCs had收稿日期：2 0 2 2-12-2 9；修回日期：2 0 2 3-0 3-0 9基金项目：国家自然科学基金项目（318 7 2 433）；中央高校基本科研业务费项目（KYZ202102）第一作者：梁春花，女，博士研究生*通信作者：陈秋生，教授，博士生导师，研究方向为经络实质细胞研究，E-mail：c h e n q s h 30 5 n j a u.e d u.c n。160.No.6Vol.552023Animal Husbandry&Veterinary Medicineextremely elongated and underwent moniliform processes in the GV acupoints and the Zang-fu organs.They had such communication struc-tures as cellular connections and extracellular vesicles(EVs)(including exosomes).The podoms of telopodes(Tps)had developed mito-chondria and endoplasmic reticulum.The TCs network was formed by TCs interconnecting with each other and with other structures.Commu-nication between the acupoints and the Zang-fu organs(including kidney and bladder)was conducted by the EVs(including exosomes)around the Tps migrating along the TCs network.In particular,compared with the NG,the total lengths of TCs and the numbers of EVsaround the Tps in the GV acupoints of the rats were obviously increased in the PG(P0.05).Meanwhile,the total lengths of TCs and thenumbers of EVs around the Tps in the kidney and bladder of the rats were also obviously increased in the PG(P0.05).More developed mi-tochondria and endoplasmic reticulum were contained in the podoms of the PG.Furthermore,the extracellular matrix components were morecomplicated and varied in the PG.In a micromorphological perspective,this research might explain the viewpoint of traditional Chinese medi-cine on the correlation between acupoints and Zang-fu organs.And,the viewpoint that TCs may be the meridian essence cells was confirmedby the PA for the disease prevention model.Keywords:governor vessel acupoints;preventive acupuncture for disease prevention;telocytes;communication structures;Zang-fu or-gans;rat经络学说是中医学理论的核心，对针灸实践具有指导意义；相反，针灸实践也是验证经络存在的有效手段。黄帝内经记载，经络“内属腑脏，外络肢节”，其是机体运行气血、联络脏腑和沟通表里的通道，可形成一个遍布周身内外的网络系统，而穴位是脏腑气血输注于体表的部位，众多的针灸基础研究和临床实践表明，经穴和脏腑之间存在一定的联系 1-2 。经穴与脏腑沟通的途径即为经络 3，但经络的物质基础长期未能得到科学的阐明。明代，高武在针灸聚英指出：“无病而先针灸日逆。逆，未至而迎之也。”逆针灸是依据黄帝内经“治未病”原则，形成的一种具有针灸特色的扶助正气的有效手段，具有防病保健的作用，是指在机体健康无病、疾病发生之前或疾病轻浅之时，预先运用各种针灸手段刺激特定的经穴，以激发经络之气，使机体的抵抗力和耐受力增强，从而达到防病保健的效果 4。健康无病的状态为中医“未病”之一，逆针灸是中医治未病的重要手段。有科学证实，逆针灸能调节激素，抵抗自由基的损害，并通过神经内分泌免疫网络系统对炎性细胞因子等进行调节 5。然而，逆针灸经穴是否会对其对应的脏腑产生一定的形态学影响有待进一步明确。远细胞（telocytes，T Cs）为Popescu等 6】于2010年首次报道的一种新发间质细胞，由一个较小的胞体和数量不等的突起（telopodes，T p s）构成。Tps极长且细，由细段和膨大部交错形成串珠状结构 7 。目前已在多种动物的不同器官中发现TCs的分布 8-9 。TCs可参与结构支持、机械感传、血管生成、免疫调节及构成干细胞生态位等 10-。新近的研究报道，TCs符合经络实质细胞的形态学特点，具备经络的各种特质，可在细胞水平阐释不同的经络现象 18.12 。TCs结构与经络密切相关，但TCs作为经络实质细胞的观点尚需中医实践的进一步验证。中医的“肾”包含现代医学的泌尿、生殖和内分泌等系统的主要器官（包括肾脏和膀胱）。本研究根据“经穴脏腑相关”和“逆针灸治未病”理论，以“督脉者，起于少腹”，“贯脊属肾”，“人循络肾”的中医观点为依托，通过HE、免疫荧光和透射电镜方法观察大鼠督脉经穴的结构特征，并比较未病逆针组和正常组督脉经穴及其对应脏腑（肾脏和膀胱）TCs及其相关结构的超微形态变化，探究逆针激活TCs的细胞机制，为揭示经穴脏腑联系的相关实质细胞提供一定的形态依据，1材料与方法1.1实验动物20只健康清洁级雄性SD大鼠（6 周龄，18 0 200g），购自南京青龙山动物养殖基地【生产许可证号：SCXK（浙）2 0 19-0 0 0 2，于南京农业大学实验动物中心（清洁级）分笼饲养，室内温度（2 0 2），相对湿度（5510)%，12 h/12h明暗周期，自由采食和饮水。适应性饲养3d后将大鼠随机分为正常组（10 只）和未病逆针组（10 只）。所有程序均根据实验动物的护理和使用指南进行，并得到了南京农业大学动物医学院实验动物伦理委员会的许可。所有与动物相关的协议均获得江苏省科技厅SYXK(SU)2021-0086的批准。1.2电针处理及取材大鼠适应性饲养3d后对未病逆针组进行电针干预。参照实验动物针灸穴位资料选取相应的穴位，大鼠“命门”穴位于背正中线第2 和第3腰椎棘突间，“腰俞”穴位于背正中线最后荐椎与第1尾椎之间 13。首先固定大鼠，皮肤常规消毒，用一次性无菌针灸针分别刺人大鼠督脉“命门”和“腰俞”穴，2个穴位的针柄分别连接电针仪的输出端，疏密波脉冲电流，频率2 Hz，时间10 min，输出强度在刚开2023年61畜牧与兽医第6 期第55卷始时以背部肌肉出现轻微抽动为度 14。每天固定时间操作，连续7 d。正常组的大鼠均不做电针干预。试验结束后，迅速采集2 组大鼠穴位皮肤、肾脏和膀胱样品，一部分置于4%多聚甲醛溶液室温保存用于光镜观察，一部分置于2.5%戊二醛溶液4保存用于电镜观察。1.3主要试剂与仪器免抗CD34多克隆抗体（BA 3414，武汉博士德生物工程有限公司）；鼠抗Vimentin单克隆抗体（BM 0 135，武汉博士德生物工程有限公司）；兔抗TSG101单克隆抗体（BM4821，武汉博士德生物工程有限公司）；鼠抗Connexin 43单克隆抗体（sc-271837,Santa Cruz Biotechnology);CoraLite 488-con-jugated山羊抗兔IgG（H+L）（SA 0 0 0 13-2，美国proteintech公司）；CoraLite 594-conjugated山羊抗鼠IgG（H+L）（SA 0 0 0 13-3，美国proteintech公司）；DAPI染色液（AR1176，武汉博士德生物工程有限公司）；抗荧光淬灭封片液（上海碧云天生物技术有限公司）；10%水合氯醛（北京雷根生物技术有限公司）；HE染色液（上海源叶生物科技有限公司）；多聚甲醛、戊二醛、酒精、二甲苯、中性树胶、饿酸、丙酮、环氧树脂（Epon812）、醋酸铀、柠檬酸铅等其他试剂均为国产分析纯。石蜡切片机（RM2245，德国Leica公司），隔水式电热恒温培养箱（GHP-9080，上海一恒科学仪器有限公司），数显电热恒温水浴锅（上海力辰邦西仪器科技有限公司），0.2 5mm13mm华佗牌毫针（苏州医疗用品厂有限公司），SDZ-型电针治疗仪（苏州医疗用品厂有限公司），OlympusDP73光学显微镜（日本Olympus公司），日立透射电镜H-7650（日本Hitachi公司）1.4HE染色将样品在4%多聚甲醛中固定48 h后，石蜡包埋，用切片机切成7 m薄片，切片用HE染色，并在Olympus光学显微镜下分析。1.5免疫荧光染色石蜡切片常规脱蜡至水，枸橡酸钠缓冲液进行热抗原修复，5%BSA阻断非特异性抗体的结合，样品分别与一抗（兔抗CD34多克隆抗体1：10 0 稀释，鼠抗Vimentin单克隆抗体1：10 0 稀释，鼠抗Connexin43单克隆抗体1：10 0 稀释，兔抗TSG101单克隆抗体1：10 0 稀释）在4孵育过夜。用1.2mol/LPBS（p H=7.4）冲洗，滴加荧光二抗（Cor-aLite 488-conjugated山羊抗兔IgG（H+L）1：10 0 稀释，CoraLite 594-conjugated 山羊抗鼠IgG（H+L）1：10 0 稀释），37 烘箱孵育1h，D A PI 染色液复染核，滴加抗荧光淬灭剂封片，荧光图像用OlympusDP73观察并拍照。缝隙连接蛋白43（Cx43）可特异性的标记缝隙连接，缝隙连接是介导细胞间通讯的跨膜通道，将Cx43与CD34（标记TCs）进行免疫荧光双标，可用于探究缝隙连接与TCs的形态关系 15TSG101是胞外囊泡（EVs）的特异性标记蛋白，将TSG101与Vimentin（标记TCs）进行免疫荧光双标，以检测EVs与TCs的分布关系。1.6透射电镜检测将组织样品修剪成1mm小块，于2.5%戊二醛溶液中4固定48 h。PBS缓冲液冲洗，1%饿酸37固定1h，样品冲洗后，上行梯度酒精脱水，用丙酮进行置换，环氧树脂包埋。制备超薄切片（50 n m），用醋酸铀和柠檬酸铅进行双重染色，日立H-7650透射电镜下观察超微结构变化。运用AdobePhotoshop软件对透射电镜图像进行伪彩色处理1.7统计分析运用ImageJ1.8.0软件对TCs总长度和EVs的数量等进行统计测量，试验结果用“平均值标准差”表示，通过GraphPadPrism8.0.2软件绘制柱状图并进行分析。采用t检验进行差异性比较，P0.05表示差异有统计学意义。2结果与分析2.1大鼠督脉“命门”和“腰俞”的组织结构、TCs及其通讯结构的形态特征通过HE染色观察发现，督脉的“命门”和“腰俞”内含丰富的血管、神经和胶原纤维等结构以及毛囊、毛球和皮脂腺等皮肤衍生物。皮下筋膜内有丰富的血管和神经，可见血管通过肌间隙与皮下脂肪层相连（图1)。观察发现，大鼠督脉经穴内含CD34/Vimentin双阳性细胞，尤其在皮下筋膜处双阳性细胞更丰富和集中。该细胞具有较小的胞体和细长弯曲的延伸突起（图2）。进一步发现，在大鼠督脉经穴内Cx43/CD34和TSG101/Vimentin均呈双阳性表达（图2）。62Animal Husbandry&Veterinary MedicineNo.6Vol.552023ab20mm50Mm50Mm100um20umE.表皮；D.真皮；SF.皮下脂肪层；M.皮肌；F.皮下筋膜；Hf.毛囊；Hb.毛球；Sg.皮脂腺；Cf.胶原纤维；At.脂肪组织；N.神经；指示血管a、b、c.“命门”穴；d、e、f.“腰俞”穴图1大鼠督脉“命门”和“腰俞”的结构特征（HE染色）通过透射电镜进一步鉴定，大鼠督脉经穴内含有细长的TCs，这些细胞具有细段和膨大部交错形成串珠样的Tps，膨大部富含线粒体和内质网。常见Tps围绕于血管和神经周围。进一步证实督脉经穴TCs具有细胞连接（同型和异型细胞连接）和EVs（包括外泌体）等通讯结构。TCs之间形成同型细胞连接，TCs与胞外胶原纤维形成异型细胞连接，Tps与胶原纤维束紧贴。EVs（包括外泌体）分布于TCs及Tps表面或周围。偶尔可观察到游离的TCs及其Tps在间质内呈间断的状态（图3)2.2大鼠督脉经穴TCs及其周围EVs的超微形态分析超微形态观察发现，未病逆针组和正常组大鼠督脉经穴TCs均具有细胞连接和EVs（包括外泌体）等通讯结构，Tps之间形成同型细胞连接，Tps与胶原纤维之间形成异型细胞连接。与正常组相比，未病逆针组大鼠督脉经穴TCs总长度明显增加（P0.05），T p s 周围EVs的数量明显增多（P0.05）。值得关注的是，未病逆针组督脉经穴Tps周围EVs距离Tps相对较近且集中，EVs有的贴在Tps表面，有的分布于Tps周围，细胞连接更加紧密。而正常组督脉经穴Tps周围EVs则距离Tps相对较远且分散，EVs多分散于Tps周围（图4)。2.3大鼠肾脏和膀胱筋膜TCs及其周围EVs的超微形态分析超微形态观察发现，与正常组相比，未病逆针组大鼠肾脏筋膜TCs的总长度明显增加（P0.05），Tps周围EVs的数量明显增多（P0.05），膨大部所含内质网和线粒体更加发达。值得关注的是，未病逆针组肾脏筋膜Tps周围EVs距离Tps相对较近且集中，EVs有的贴在Tps表面，有的分布于Tps周围，TCs及Tps周围的胶原纤维之间含有较多EVs及其他成分。而正常组肾脏筋膜Tps周围EVs则距离Tps相对较远且分散，EVs多分散于Tps周围，TCs周围的胶原纤维之间所含物质较少且清亮（图5）。20233年63畜牧与兽医第6 期第55卷AVimentinCD34DAPIMergeade20202920gh20m20p202020pmImBCx43CD34DAPIMergeaCde50550g55VimentinTSGI01DAPIMergeCaCdDe10P1gh1010指示TCs/CD34/Cx43双阳性细胞；弯箭头指示EVsA、B、C.分别为督脉经穴CD34/Vimentin、CD 34/Cx 43和TSC101/Vimentin的双阳性表达；ae.“命门”穴；fj.“腰俞”穴图2大鼠督脉经穴TCs及其通讯结构的免疫荧光双标鉴定64Vol.55Animal Husbandry&Veterinary Medicine2023No.6dPdCfPdCfPdPdCfePdCfPd2mghPdPdBIPdPerTp1PdCfBv.血管；Per.周细胞；N.神经；Pd.膨大部；Cf.胶原纤维；指示线粒体；指示内质网；指示TCs；指示Tp；弯曲箭头或伪彩指示EVs；短箭头指示多囊泡体；黑色虚线圈指示Tp1和Tp2之间形成的同型细胞连接；指示Tps与胶原纤维之间形成的异型细胞连接ad、g i.督脉经穴TCs及通讯结构的超微形态特征；e、f、j 1.神经和血管周围TCs及其通讯结构的超微形态特征图3大鼠督脉经穴TCs及其通讯结构的超微形态特征.65.20233年第6 期第55卷畜牧与兽医Aaia1ia2a3Cfa1PdCfTp1联票亚CfCfa2Tp2a32m2um2mbPdb162b3PdCfTp1CfCfCfCfPdCfPdPdCfb2;b3CfPd2um22umCB80401604020500正常未病逆针正常未病逆针组别组别Cf.胶原纤维；弯曲箭头或伪彩指示EVs；短箭头指示多囊泡体；指示Tp；指示膨大部；黑色虚线圈指示Tpl和Tp2之间形成的同型细胞连接；指示Tp与胶原纤维之间形成的异型细胞连接；*表示差异显著（P0.05），下同A.2组督脉经穴TCs及其通讯结构的TME图像组别；B、C.分别为2 组督脉经穴TCs总长度和Tps周围EVs数量比较图4大鼠督脉经穴TCs及其通讯结构的超微形态分析斤(n=3)超微形态观察发现，未病逆针组和正常组大鼠膀胱筋膜TCs均具有细胞连接和EVs（包括外泌体）等通讯结构。与正常组相比，未病逆针组大鼠膀胱筋膜TCs的总长度明显增加（P0.05），T p s 周围EVs的数量明显增多（P0.05），膨大部所含内质网更加发达。值得关注的是，未病逆针组膀胱筋膜Tps周围EVs距离Tps相对较近且集中，EVs有的贴在Tps表面，有的分布于Tps周围。而正常组膀胱筋膜Tps周围EVs则距离Tps相对较远且分散，EVs多分散于Tps 周围同（图6）。3讨论素问骨空论中明确指出了督脉与肾有直接的联系，督脉经穴具有升阳益气和温阳补肾之效 16-17 。与此同时，中医理论认为督脉的“命门”主肾，难经三十九难指出命门与肾相通，二者虽分而实有交通之道，不同方法刺激“命门”可起到补肾助阳、固本培元的作用 1-19 。中医临床上，针灸督脉的“命门”常用于防治肾脏疾病，且“命门”通过调节命门之火以温煦肾阳，从而可达到治未病的效果 2 0 。以上资料表明，督脉经穴与肾（包括西医的肾脏和膀胱）存在一定的联系结构，但其联系的物质基础是什么，现代医学一直未有定论。本试验通过逆针健康大鼠督脉的2 个经穴后，发现经穴处和对应脏腑（肾和膀胱）的TCs同时发生了变化，即TCs总长度增加，EVs（细胞通讯结构）增多，细胞连接加强（联系作用），线粒体（能量细胞器）和内质网（活性蛋白合成与分泌细胞器）更发达。而这些指标都是与信息交流、细胞连接、能量和蛋白合成的结构相对应，也可能是中医的“气血”物质基础 2 1。因此，逆针能够同时激活经穴与对应脏腑的TCs，达到治未病的目的。有研究显示，经穴与脏腑:66No.6Vol.55Animal Husbandry&Veterinary Medicine2023沟通的途径即为经络 3。故在细胞水平上，TCs可能是经穴与脏腑的联系实质，这与新近报道的经络实质相一致 8 ACfia1ia2a3a1CfPd联票工CfPdPdCCf2um2um2um2umbb1b263b3b2CCfCfCfb1CfCfCfum2m2um2pmB801C60*506040204010T20500正常未病逆针正常未病逆针组别组别Cf.胶原纤维；Pd.膨大部；指示线粒体；指示内质网；指示TC；指示Tp；弯曲箭头指示EVsA.2组肾脏筋膜TCs及其通讯结构的TME图像；B、C.分别为2 组肾脏筋膜TCs总长度和Tps周围EVs数量比较图5大鼠肾脏筋膜TCs及其通讯结构的超微形态分析斤(n=3)素问四气调神大论描述“是故圣人不治已病治未病，不治已乱治未乱”，其是对治未病最早的记载，明确提出了中医“未病先防”的观念；未病包括疾病未生、疾病未发、疾病未传和疾病未复四个层次的含义 2 2 。作为治未病的重要方法之一，逆针灸主要通过激发正气、协调阴阳平衡以达到养生保健、防病于未然的目的 2 3。素问刺法论描述“正气存内，邪不可干”，其中指出保持机体正气充盛是维持内环境稳定、预防保健的核心 4。本研究根据“逆针灸治未病”的理论，对“未病”中疾病未生（即健康状态）进行探究，选取健康大鼠督脉的“命门”为主穴，配以“腰俞”为辅穴进行电针干预。“腰俞”可起到加强效果，可能改变了其微环境，以确保逆针“命门”对肾的效果。与正常组相比，未病逆针组大鼠督脉经穴、肾脏和膀胱筋膜TCs及Tps周围EVs的数量均明显增多，TCs总长度明显增加，细胞连接更加紧密，线粒体和内质网更加发达。以上结果表明，逆针健康大鼠督脉可能使经穴和对应脏腑（肾脏和膀胱）TCs更加活跃，Tps周围EVs信息交流增多，EVs（包括外泌体）等沿TCs网络迁移进行经穴和脏腑（肾脏和膀胱）之间长距离信息通讯，细胞连接加强，线粒体产生能量增多，内质网的蛋白质合成（分泌）加快，有助于TCs及Tps周围EVs的信息通讯。暗示TCs及其细胞连接、Tps周围EVs（包括外泌体）、线粒体和内质网等可能是督脉经穴和对应脏腑（肾和膀胱）之间信息交流的关键成分。现代研究表明，逆针灸可最大限度地激发机体自身调和阴阳的潜力，使机体气机活跃、信息交流增强，以达到维持内环境稳定、防病保健之效 4。本研究通过逆针健康大鼠督脉可对经穴和相应脏腑（肾脏和膀胱）的TCs及其通讯结构产生一定的影响，这可能是“逆针灸治未病”的细胞学基础。672023年畜牧与兽医第55卷第6 期Aa1a2ia3a3联工PdPdPda22um2m2m2umb163b2PdPdPdPdb1b22um2umJum2mB801C3060/55404322000正常未病逆针正常未病逆针组别组别Cf.胶原纤维；Pd.膨大部；指示内质网；指示Tp；弯曲箭头或伪彩指示EVs；短箭头指示多囊泡体；黑色虚线圈指示Tpl和Tp2之间形成的同型细胞连接A.2组膀胱筋膜TCs及其通讯结构的TME图像；B、C.分别为2 组膀胱筋膜TCs总长度和Tps周围EVs数量比较图6大鼠膀胱筋膜TCs及其通讯结构的超微形态分析（n=3)综上所述，TCs具备联系经穴和脏腑的结构基础，可在组织水平上阐释中医“经穴脏腑相关”的理论。根据“逆针灸治未病”理论，通过未病逆针模型验证了TCs可能是经络实质关键细胞的观点。参考文献：1郭扬，马亮，刘沛东，等督脉穴位皮肤微循环灌注量的特点及艾灸命门穴对其影响的研究J.世界中医药，2 0 2 2，17(14):2026-2029.2张树剑，荣培晶.结构经络向功能经络的范式转变一一兼论“脑摄经络”假说J.针刺研究，2 0 2 2，47（12）：1113-1117.3张倩，周美启.经脉脏腑相关特点比较J.中国针灸，2020,40(10):1093-1096.4李晓泓，翟景慧，周登芳，等谈“未病”、“治未病”与“逆针灸”J中国中医基础医学杂志，2 0 0 5，11（6）：40 4-406.5ZHU S P,HE Y W,CHEN H,et al.Effects of preventive acupunc-ture and moxibustion on fat accumulation,blood lipid,and uterusE2 of menopause rats J.Evid Based Complement Alternat Med,2014,2014:621975.6POPESCU L M,FAUSSONE-PELLEGRINI M S.Telocytes-a caseof serendipity:the winding way from interstitial cells of cajal(ICC),via Interstitial cajal-like cells(ICLC)to telocytes J.JCell Mol 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版）研制的研究成果，该课题旨在建立新的期刊评价系统，探索面向全球的更为科学、全面、合理的期刊影响力评价方法，为世界学术评价融人更多中国观点，中国智慧，推动世界范围内科技期刊的公平评价、同质等效使用。科技期刊世界影响力指数（WJCI）报告从世界各