第一节工具酶的发现和基因工程的诞生.docx

第一节 工具酶的发现和基因工程的诞生（学案）
一、学习目标：
①说出基因工程的含义并指出基因工程的主要内容
②说出限制性核酸内切酶的含义及作用特点
③说出DNA连接酶的作用
④简述质粒的含义及其在基因工程中的作用
二、学习过程：
引入：棉铃虫损害棉花的花蕾，使棉花减产，而传统用农药杀灭棉铃虫的方法不仅污染环境且效果逐年下降，因此我们是否能寻求新的方法使棉花自身抵抗棉铃虫？

1、转基因棉花的培育流程
获得 基因 形成 导入 表达
2、三大工具的特点及作用
（1）载体：
作用：将外源基因（目的基因）送入受体细胞
种类：最常用的载体 ，其他载体

本质：
（2）限制性核酸内切酶
作用：能够 和 DNA分子内一小段特殊 的酶
部位：
结果：
已知限制性内切酶Ⅰ的识别序列和切点是—A↓AGCTT—，限制性内切酶Ⅱ的识别序列和切点是—G↓GATCC—,请画出切割后的粘性末端

(3)DNA连接酶
作用：具有 的两个DNA 连接起来
部位：
活动：模拟重组DNA的构建
任务一：已知EcoRI的识别序列和切点是-G↓AATTC-,将多个目的基因1与多个质粒经酶切后混合并加入DNA连接酶，可能得到哪些不同的结果（最多考虑切割片段的两两连接）？

任务二：已知EcoRI和HindⅢ的识别序列和切点分别是-G↓AATTC-和-A↓AGCTT-,将多个目的基因2与多个质粒经酶切后混合并加入DNA连接酶，可能得到哪些不同的结果（最多考虑切割片段的两两连接）？

三、思维拓展：
1、已知BamHI和BglⅡ的识别序列和切点分别是-G↓GATCC-和 -A↓GATCT-,在质粒上有BamHI的一个切点，在目的基因的两侧各有1个BglⅡ的切点。请问能否将目的基因与质粒连接在一起？为什么？

2、下图表示四种限制性核酸内切酶BamHⅠ， EcoRI，HindⅢ以及BglⅡ的识别序列和切割位点。为防止酶切后含目的基因的DNA片段自身连接呈环状，下列不能同时切割的目的基因的两种酶是

图1 图2
A. EcoRI和HindⅢ B. EcoRI和BglⅡ
C. BamHⅠ和HindⅢ D. BamHⅠ和BglⅡ