核磁共振实验室操作规程.doc

核磁共振实验室操作规程
1. 打开空压机电源（电源开关向上推）；
2. 打开空压机的排气口；
3. 取下磁体样品腔上端的盖子
4. 将样品管插入转子中，然后用定深量筒控制样品管的高度。这个步骤不能缺少，如果样品管插入的太长，有可能会损坏探头。
二、 常规样品的测试
1.双击桌面上的图标，进入topspin2.1主界面，调出最近做过的一张谱图。
2. 在命令行中输入“new” 回车，跳出一窗口，建立一个新的实验， 输入name、Solvent、Experiment等实验参数。其中1H选proton，13C选C13CPD，点击OK。
3.“ej”回车，打开气流，放入样品管；”ij”回车，关闭气流，样品管落入磁体底部。
4.“lock solvent（选用的溶剂）”回车，进行锁场，待锁场完场后，进行探头匹配调谐和自动匀场。
7.“ased”回车，调出采样参数，根据具体的样品设置NS、DS、D1等。
8.“getprosol”回车，调脉冲参数。所有参数不用改动，尤其PL1不能修改。
9.“rga”回车，自动增益，“zg”回车，开始采样。带采样完毕后，按进行傅立叶变换和自动相位校正
13. 实验完毕后，脱锁、停止旋转，输入“ej”命令，把样品管吹出，取出样品管；“ij”关掉气流。
14、对样品数据处理，然后打印图谱
填写实验记录
三、注意事项
1. 实验前空压机必须打开，保证气流流畅；
2. 打开气流前，查看样品腔的上盖是否取下；
3. 不要带具有磁性的物质靠近磁体；
4. 本台电脑数据转移使用光盘，不允许使用其它工具如U盘等

常见问题
1.购买核磁管和氘代溶剂？
答：核磁管和常用的溶剂可以在校试剂库购买。
也可向试剂代理公司购买，例如：青岛腾龙、百灵威、创美、 柏卡、腾达远等公司，联系方式网上搜索即可。
2.核磁管如何清洗？
答：
a.用原先的溶剂（非氘代）清洗；
b.不知道原先的溶剂时，则用二氯甲烷、丙酮清洗；
c.如果仍洗不掉，在适当的溶剂中用超声波振荡，或者用棉棒擦洗（可能会损坏核磁管）；
d.如果必要的话，用混酸（HNO3/H2SO4，不可用铬酸）溶解；
e.上述一步或多步完成后，再用蒸馏水、丙酮反复洗三次，空气中干燥或低温烘干。
3.样品需要避光怎么办？
答：可用锡箔纸包裹核磁样品管，并在登记本上注明样品需要避光，我实验室的自动进样器设置有避光装置，可尽量减少样品检测时被光照。
4. 难以溶解的样品怎么办？
答：
a. 更换其他溶剂，或使用混合溶剂；
b. 根据溶剂的沸点，适当提高温度；
c. 用固体核磁谱仪检测。

NMR数据处理方法（VNMR6.1C）

一、调用图谱
点击主菜单 main menu—file—(set directory—parent-change—load—wft)。此时如果能看到你需要打开的文件，则选择该文件(注意: 每次只能选定一个文件, 选定两个以上不能调用)，然后点菜单中的load，显示屏上方输入wft↙, 如果此时看不到你需要打开的文件，则set directory—parent—change来改变路径，直到进入正确的路径，然后点return，选择你需要打开的文件，点击菜单中的load，输入wft↙，此时已经能够看到图谱了。

二、图谱的处理
1、 相位校正及相关处理 图谱调出后, 输入aph进行相位自动校正（也可以点击菜单中的phase手动调整相位）→ 输入vsadj自动调整峰高到满屏的最大峰高（也可以手动调整峰高）→点击或输入dscale显示标尺→点击full显示完整谱图，dg显示参数。
2、 定标 输入ds，显示图谱, 把光标移到TMS附近 → 输入nl → 点击ref→ 输入0。 也可定溶剂峰的化学位移值如: D2O: 4.75(H谱); 碳谱: CDCl3: 77(C谱)。
3、 窗函数的应用 对于氢谱，输入lb=1，或者lb=’n’，对于碳谱，输入lb=1或者2，然后输入wf t↙, 目的使谱图的S/N加大，但是它是以牺牲分辨率为代价的。
4、 基线调平 对所有的峰进行积分，然后输入bc即可。
5、 查看图谱的精细结构 点击box，选定要查看的部分，点expand进行放大，点full显示整个图谱。
6、 积分 点击part intergral进行积分 → 输入cz对积分清零 →点击Lvl/Tlt对基线进行调平，点击reset进行分段积分→鼠标左键在所需积分峰的左右两边点击即可, 积分完毕后再输入dc调平，输入vp=12，抬高谱图的高度, 输入dpir以便显示分段积分值。
7、 化学位移的显示 图谱调出经1-2-3后, 点击th调节阈值（门槛）的高度（门槛(显示黄线)以上化学位移值可以显示出来），输入dpf显示th以上各峰的化学位移值。
8、 局部放大图谱的处理 图谱调出经过步骤1-2-3后, 点击box选定所要放大的范围，输入inset回车→选定位置，左键定位，右键调整大小,中键调整高度→s1(或者s2,s3等)保存当前图谱,r1(或者r2,r3等)调出相应的图谱,其它步骤和处理同正常的一维谱图。
9、DEPT的处理 调出谱图后, 输入wft进行处理，处理过程同前，处理完毕后输入dssa同时显示DEPT的四组图谱。也可以自动处理，自动处理过程如下：点击菜单中的main menu—analyze—DEPT—full analysis（这个菜单不仅包括分析，还包括打印全套dept图谱）。
10、二维图谱的处理 调出谱图后, 输入wft、wti进行窗函数处理、wft1da进行变换、wti再进行窗函数处理、wft2da进行二维谱图的变换、对于H—H 二维可以进行对称化处理, 用foldt命令处理即可, 如再要显示二维谱图可用dconi命令, dconi相当于一位谱图的处理命令ds。(具体处理过程从略)

三、打印图谱
1、一维图谱的打印 输入vp=12，这样就可以在谱图下方留出空间打印积分值。 输入pl pltext(谱图的文本文件名) pscale(谱图的标尺) pir(谱图的积分) ppf(谱图的化学位移) page(打印标志)进行打印，其中pscale为打印标尺，pir打印积分，ppf打印化学位移值， pltext打印文本参数，除了这个命令之外还可以自己编辑宏命令进行打印，本工作站编辑了一个名为zjzh的宏命令，它的内容是：vp＝12 pl pltext pscale pir vp=vp+90 ppf(‘top’) vp=vp-90 page。因此，在打印时，输入zjzh即可; zjzh4打印不需积分的谱图，如: 碳谱。zjzh5打印为积分竖着显示。
2、局部放大图的打印
(1)处理完一维谱图后(过程同前), 输入s1保存此图谱, 输入pl pscale pir pltext ppf 回车打印当前处理的图谱(注意此时打印机并没有执行打印命令, 其中pir, pltext, ppf为可选项)。
(2)然后按照前面的方法(见二、7)处理局部放大图, 处理完毕后输入s2保存当前局部放大图, 然后输入pl pscale pir pltext ppf打印当前局部放大图(注意此时打印机并也没有执行打印命令, 其中pir, pltext, ppf为可选项)。
(3)如果要继续添加其它局部放大图, 输入r1调出用s1保存过的图谱, 然后重复步骤(2)。
(4)处理完局部放大图之后, 输入page执行打印命令。
3、DEPT的打印 用dssa显示图谱后，输入pl(‘all’) pscale pltext page 进行打印。 也可以输入pldept进行打印。 4、二维图谱的打印
同核二维的打印命令为plcosy(25,1.3,1)，其中1表示氢谱所在的工作区，25表示打印圈数，1.3表示相邻两圈之间的间隔。 异核二维的打印命令为plhxcor(25,1.3,1,2) 其中1、2分别表示氢谱和碳谱所在的工作区。

四、 数据传输及数据保存
在pc机上打开LeapFTP软件，依次点击FTP服务器—我的服务器—核磁（由管理员首先设置好），此时就可以访问工作站上的数据。 也可以在ftp输入器右侧输入IP地址：129.200.0.1， 用户名：xxx ，密码：xxx，端口：21（默认值），然后回车即可连接到工作站。 在地址栏的下方分为四个区域，左上角为本地路径，即将要存放数据的地方；右上角为远程路径，即工作站上存放数据的地方；左下角为传输队列，即正在传输的数据；右下角为连接状态，表示当前的连接状况。传输数据方法如下：在软件的右上角通过改变路径找到自己的文件，然后在软件的左上角选择本地路径（可以是你自己的u盘），然后把右上角的文件拖到左上角，这样就实现了数据传输。然后把本机上的数据拷贝到自己的u盘上。