菊芋中抗氧化成分的在线鉴定和构效关系分析.pdf

张志毅，白若熙，宗爱珍，等.菊芋中抗氧化成分的在线鉴定和构效关系分析 J.食品工业科技，2023，44（18）：307312.doi:10.13386/j.issn1002-0306.2022080031ZHANG Zhiyi,BAI Ruoxi,ZONG Aizhen,et al.Online Identification and Constitutive Relationship Analysis of AntioxidantComponents in Jerusalem ArtichokeJ.Science and Technology of Food Industry,2023,44(18):307312.(in Chinese with Englishabstract).doi:10.13386/j.issn1002-0306.2022080031 分析检测 菊芋中抗氧化成分的在线鉴定和菊芋中抗氧化成分的在线鉴定和构效关系分析构效关系分析张志毅1，白若熙1，宗爱珍2，张敏敏3，郑振佳1，张斌1,*（1.山东农业大学食品科学与工程学院，山东省高校食品加工技术与质量控制重点实验室，山东泰安 271018；2.山东省农业科学院农产品加工与营养研究所，山东济南 250012；3.齐鲁工业大学（山东省科学院）山东省分析测试中心，山东济南 250014）摘要：本研究以高效液相色谱-飞行时间质谱联用结合清除 1,1-二苯基-2-三硝基苯肼（DPPH）的在线检测技术，建立快速筛选菊芋中咖啡酰奎宁酸类成分的方法，并对其抗氧化活性进行评价。以乙腈-水（0.1%甲酸）为流动相进行梯度洗脱，经 C18柱分离后，待测样品进入 PEEK 盘管与 DPPH 自由基溶液混合反应后进入紫外检测器，采用 280 和 517 nm 检测，并通过 517 nm 产生的负峰实现咖啡酰奎宁酸类成分的在线筛选。结果表明，在负离子模式下根据精确分子量结合标准品对照，筛选出菊芋中的5 种抗氧化成分：绿原酸、咖啡酸、3,4-O-二咖啡酰奎宁酸、3,5-O-二咖啡酰奎宁酸、4,5-O-二咖啡酰奎宁酸。各组分对 DPPH 自由基、ABTS+自由基、超氧阴离子自由基清除率分别在 54.63%95.43%、8.32%69.63%、27.37%51.40%范围内，并均与浓度呈正相关。本研究快速鉴定了菊芋中咖啡酰奎宁酸类成分并探究其抗氧化活性，为菊芋中咖啡酰奎宁酸类化合物的开发利用提供了科学依据。关键词：菊芋，咖啡酰奎宁酸，抗氧化活性，飞行时间质谱，在线鉴定本文网刊:中图分类号：R284.1；O657.63 文献标识码：A 文章编号：10020306（2023）18030706DOI:10.13386/j.issn1002-0306.2022080031OnlineIdentificationandConstitutiveRelationshipAnalysisofAntioxidantComponentsinJerusalemArtichokeZHANGZhiyi1，BAIRuoxi1，ZONGAizhen2，ZHANGMinmin3，ZHENGZhenjia1，ZHANGBin1,*（1.College of Food Science and Engineering,Shandong Agricultural University,Key Laboratory of Food ProcessingTechnology and Quality Control in Shandong Province,Taian 271018,China；2.Institute of Agro-Foods Sciences and Technology,Shandong Academy of Agricultural Sciences,Jinan 250012,China；3.Shandong Analysis and Test Center,Qilu University of Technology(Shandong Academy of Sciences),Jinan 250014,China）Abstract：In this study,a new method based on the HPLC online scavenging diphenyl-1-picrylhydrazyl(DPPH)radicalactivity and Q-TOF/MS for the rapid screening and identification of caffeoylquinic acids in Jerusalem artichoke,and itsantioxidant activity was evaluated.The mobile phase was acetonitrile-0.1%formic acid aqueous solution(gradient elution),and the samples were separated by C18 column.The samples were mixed with DPPH radical solution in PEEK tube andthen entered UV detector,the detection wavelength were 280 and 517 nm,and the online screening of caffeoylquinic acidcomponents was realized by the negative peak generated at 517 nm.Results showed that,under the negative ion mode,according to the precise molecular weight combined with the standards,five antioxidant compounds were screened from the 收稿日期：20220803 基金项目：国家重点研发计划项目（2019YFD1002704）；山东省重大科技创新工程项目（2021CXGC010508）。作者简介：张志毅（1999），男，硕士研究生，研究方向：果蔬加工，E-mail：。*通信作者：张斌（1991），男，博士，讲师，研究方向：果蔬加工，E-mail：。第 44 卷 第 18 期食品工业科技Vol.44 No.182023 年 9 月Science and Technology of Food IndustrySep.2023 Jerusalem artichoke,including chlorogenic acid,caffeic acid,3,4-O-dicaffeoylquinic acid,3,5-O-dicaffeoylquinic acid,4,5-O-dicaffeoylquinic acid.The free radical scavenging rate of each component to DPPH,ABTS+and superoxide anion was inthe range of 54.63%95.43%,8.32%69.63%,27.37%51.40%,and were positively correlated with the concentration.Inthis study,the caffeoylquinic acids in Jerusalem artichoke were rapidly identified and their antioxidant activities wereexplored,which provided a scientific basis for the development and utilization of caffeoylquinic acids in Jerusalemartichoke.Keywords：Jerusalem artichoke；caffeoylquinic acids；antioxidant activity；quadruple time-of-flight mass spectrometer(Q-TOF-MS)；online identification 菊芋（Helianthus tuberosus L.）为多年生菊科向日葵属宿根生草本植物，又名姜不辣、洋姜、鬼子姜等1，我国各地均有种植2。菊芋中含有菊糖（菊粉）、酚酸类和萜类物质等多种生物活性成分35，具有抗氧化67、抗炎8、抗癌9、预防治疗“三高”1012以及改善肠道微生态等作用1314。咖啡酰奎宁酸类化合物是菊芋中主要酚酸，具有较强的抗氧化能力1516，其酚羟基与自由基容易发生反应，可以快速清除羟基自由基以及过氧自由基17，抑制脂质过氧化反应18，提高谷胱甘肽过氧化物酶和过氧化氢酶的活性19。菊芋中咖啡酰奎宁酸类化合物的相关报道多集中在菊芋茎叶中，菊粉的相关报道多集中在菊芋块茎，而块茎中的咖啡酰奎宁酸类化合物鲜有报道。菊芋中酚酸目前多采用高效液相色谱、液相色谱-质谱法进行定量和定性分析，定向筛选并鉴定具有抗氧化活性成分的研究较少2021。基于 DPPH 筛选模型的高效液相色谱-飞行时间质谱联用（highperformance liquid chromatography-quadrupole time-of-flight mass spectrometry，HPLC-Q-TOF-MS）的方法可以在线筛选鉴别自由基清除剂，通过抗氧化成分与 DPPH 反应在 517 nm 处形成的负峰，筛选出菊芋中咖啡酰奎宁酸类化合物，通过飞行时间质谱获得物质的精确分子量进行定性，从而实现样品中成分的准确、快速鉴定22。郑振佳等23通过 HPLC-DAD-Q-TOF-MS 在牛蒡中筛选出绿原酸、咖啡酸、1,5-O-二咖啡酰奎宁酸等 19 种咖啡酰奎宁酸类化合物及其衍生物。Hu 等24通过 DPPH-HPLC-ESI-MS 在线筛选出十大功劳叶乙酸乙酯相中绿原酸、槲皮素-3-O-D-吡喃葡萄糖苷和异鼠李素-3-O-D-吡喃葡萄糖苷 3 种化合物。该方法选择性强，灵敏度与分辨率高于传统方法，分析结果更精准。本研究以菊芋为研究对象，通过高分辨质谱结合在线清除 DPPH 自由基模型筛选鉴别菊芋中咖啡酰奎宁酸类成分，并评价此类成分单体的抗氧化活性，为菊芋的成分分析、功能研究和产品开发提供参考。1材料与方法 1.1材料与仪器菊芋干片购于河北晋州；DPPH美国 Sigma公司；甲醇（分析纯）、乙酸乙酯（分析纯）、石油醚（分析纯）、乙腈（色谱纯）、甲酸（色谱纯）天津凯通化学试剂有限公司；纯净水娃哈哈集团有限公司；硫酸亚铁化学纯，博山化学试剂厂；水杨酸分析纯，上海源叶生物科技有限公司；ABTS超纯，上海麦克林生化科技有限公司；过硫酸钾分析纯，国药集团化学试剂有限公司；Tris-HCl 缓冲液、邻苯三酚北京索莱宝科技有限公司；咖啡酸、绿原酸、3,5-O-二咖啡酰奎宁酸、3,4-O-二咖啡酰奎宁酸、4,5-O-二咖啡酰奎宁酸标准品上海源叶生物科技有限公司。SECURA224-ICN 电子天平北京赛多利斯仪器有限公司；Rigol L-3000 泵北京普源精电科技有限公司；Thermo Fisher UltiMate 3000 高效液相色谱仪美国赛默飞世尔公司；Waters ACQUITY UPLCH-CLASS 超高效液相色谱仪美国沃特世公司；Bruker impact 高分辨飞行时间质谱仪德国布鲁克科技有限公司；SPECTRAMAX M5 多功能酶标仪美谷分子仪器（上海）有限公司。1.2实验方法 1.2.1 供试品溶液及 DPPH 自由基溶液制备将菊芋粉碎后过 60 目筛，称取 1.0 g 样品，加入 10 mL95%乙醇回流提取 30 min，过滤后取上清液，旋转蒸发去除乙醇。参考袁晓艳等4的方法，依次用 3 倍体积的石油醚和乙酸乙酯萃取后浓缩。取少许乙酸乙酯相吹干，甲醇复溶，过 0.22 m 有机滤膜，备用。精密称定 DPPH 标准品，用 80%乙腈配制成浓度为6105 mol/L 的 DPPH 自由基溶液备用，于 4 下储存备用。1.2.2 抗氧化成分在线筛选和鉴别参考张敏敏等25试验方法，采用 Thermo Fisher U 3000 双元三液相色谱系统进行目标组分的筛选和鉴别，柱后流出液与L-3000 泵中流出的 DPPH 自由基溶液在反应池中反应后，在 517 nm 波长下进行检测，通过紫外检测器在 517 nm 波长处形成负峰并通过质谱进行分析。通过获取的精确分子量结合 DPPH 自由基清除的液相色谱图实现菊芋中目标化合物的在线筛选与鉴定。1.2.2.1 液相色谱工作条件Waters X-Bridge C18（250 mm4.6 mm，5 m）色谱柱；流动相为乙腈（A）-水（0.1%甲酸），梯度洗脱：09 min（13%A），910 min（13%20%A），1023 min（20%A），2328 min（20%30%A），2833 min（30%40%A）；柱温：25；流速：1 mL/min；进样量：3 L；检测波长：280、320 nm。1.2.2.2 DPPH 溶液反应工作条件反应器为 PEEK盘管（10 m0.25 mm）；流动相为 DPPH 自由基溶液，308 食品工业科技2023 年 9 月流速 0.5 mL/min，检测波长 517 nm。1.2.2.3 质谱工作条件参考张敏敏等22的方法，电喷雾离子源，分别采用电喷雾正离子及负离子模式；喷雾压力 310 kPa；毛细管电压 5000 V；干燥气温度200；干燥气流速 8 L/min；锥孔电压 60 V；裂解电压 120 V；检测范围为 m/z 501500。1.2.3 咖啡酰奎宁酸类化合物抗氧化活性评价 1.2.3.1 DPPH 自由基清除实验参考徐小博等26的方法并稍作修改，分别取 1 mL 不同质量浓度的咖啡酰奎宁酸类化合物标准品溶液（0、10、20、30、40、50 g/mL）于试管中，加入等体积的 1 mmol/L的 DPPH-乙醇溶液，混匀，室温避光反应 30 min，用酶标仪于 517 nm 下测定吸光值 A1。以不同质量浓度的抗坏血酸作为阳性对照，测定其 DPPH 自由基的清除能力。按以下公式计算 DPPH 自由基的清除率。清除率(%)=(1A1A2A0)100式中：A1：反应后样品溶液的吸光值；A2：样品溶液自身的吸光值；A0：空白对照的吸光值。1.2.3.2 ABTS+自由基清除实验参考徐小博等26的方法并稍作修改，称取 0.1943 g ABTS 和 0.0323 g过硫酸钾，分别用 15 mL 蒸馏水溶解，混合并定容至 50 mL，在室温下放置 1216 h 得到 ABTS+溶液。将 ABTS+溶液用无水乙醇稀释至吸光值为0.700.02（734 nm）备用。分别取 0.2 mL 不同质量浓度的咖啡酰奎宁酸类化合物标准品溶液（0、10、20、30、40、50 g/mL）于试管中，加入 1.8 mL ABTS+溶液，混匀，室温避光反应 6 min，用酶标仪于 734 nm下测定吸光值 A1。以不同质量浓度的抗坏血酸作为阳性对照，测定其 ABTS+自由基的清除能力。参考“1.2.3.1”公式计算 ABTS+自由基的清除率。1.2.3.3 超氧阴离子自由基清除实验参考刘英等27的方法并稍作修改，分别取 1 mL 不同质量浓度的咖啡酰奎宁酸类化合物标准品溶液（0、20、40、60、80、100 g/mL）于试管中，加入 4.5 mL 的 Tris-HCl 缓冲液（50 mmol/L，pH8.2），混匀，25 水浴反应 20 min，随后加入 0.4 mL 的 1 mmol/L 的邻苯三酚溶液，25 反应 6 min，立即加入 1 mL 0.12 mol/L 的盐酸终止反应，用酶标仪于 320 nm 下测定吸光值 A1。以不同质量浓度的抗坏血酸作为阳性对照，测定其超氧阴离子自由基的清除能力。参考“1.2.3.1”公式计算超氧阴离子自由基的清除率。1.3数据处理抗氧化活性评价实验重复三次，采用 Origin2017 软件绘图。2结果与分析 2.1菊芋咖啡酰奎宁酸类化合物的提取与液相分析条件优化样品经 95%乙醇回流提取后，成分较复杂，影响质谱分析的效果，因此需要对样品进行前处理。根据参考文献，咖啡酰奎宁酸主要存在于乙酸乙酯相中，先用石油醚脱除脂类成分，然后用乙酸乙酯进行萃取23。咖啡酰奎宁酸类化合物的最大吸收波长在280 和 320 nm 附近，在两个波长下同时具有较高紫外吸收的组分可能为该类化合物，从图 1 菊芋乙酸乙酯相液相色谱图发现，菊芋中含量较多的组分在280 和 320 nm 均有较高的吸收峰，推测可能为咖啡酰奎宁酸类化合物。时间(min)02.5 5.0 7.5 10.0 12.5 15.0 17.5 20.0 22.5 25.0 27.5信号强度(104 V)1251007550250280 nm时间(min)02.5 5.0 7.5 10.0 12.5 15.0 17.5 20.0 22.5 25.0 27.5信号强度(104 V)250200150100500320 nm图 1 菊芋样品液相色谱图Fig.1 HPLC of Jerusalem artichoke 2.2抗氧化成分在线筛选在 280 和 517 nm 条件下进行色谱分析和在线抗氧化筛选，结果见图 2。从图中可以看出色谱峰的分离程度和峰形较好，且响应值强度适中，可以满足抗氧化成分的在线筛选。通过“2.4”结合对照品共鉴定出该样品中含量较高且具有抗氧化作用的活性成分有 5 种。时间(min)280 nm517 nm强度(mV)30020010019时间(min)04.08.012.016.020.024.028.004.08.012.016.020.024.028.0强度(mV)12.5012.525.038.712345图 2 菊芋提取物（280 nm）与在线清除自由基（517 nm）HPLC 图Fig.2 HPLC of Jerusalem artichoke extract(280 nm)andonline radical scavenging(517 nm)2.3MS 条件优化结果分别考察了正、负离子模式下样品的总离子流第 44 卷 第 18 期张志毅，等：菊芋中抗氧化成分的在线鉴定和构效关系分析 309 图，结果见图 3。通过对比发现样品在负离子模式下响应值优于正离子模式，杂质较少，因此选取负离子模式为质谱检测条件。时间(min)051015202530信号强度(105)86420正离子模式时间(min)05102354115202530信号强度(107)1.51.00.50负离子模式图 3 正离子模式及负离子模式下总离子流图Fig.3 Total ion current diagram in positive and negativeion mode 2.4菊芋中咖啡酰奎宁酸类化合物的鉴别在负离子模式下进行质谱扫描，通过精确分子量信息与相关文献比对初步推断 5 种抗氧化活性成分中有 1 种单咖啡酰奎宁酸、3 种二咖啡酰奎宁酸以及咖啡酸。对负离子模式下测得的碎片峰信息与咖啡酰奎宁酸类化合物在负离子模式下的相对分子质量进行对比，抗氧化成分分析结果见表 1。化合物 1 保留时间为 6.1 min，在负离子模式下 m/z 为353.0874，参考相关文献可以推断化合物 1 为单咖啡酰奎宁酸，其中绿原酸存在范围较广，可能性最大，推测化合物 1 为绿原酸23。化合物 2 保留时间为 9.6 min，在负离子模式下 m/z 为 179.0254，参考相关文献可以推断为咖啡酸23。化合物 3、4、5 保留时间依次为 18.0、19.2、22.7 min，在负离子模式下 m/z 依次为 515.1168、515.1188、515.1182，二咖啡酰奎宁酸的理论质谱信号为 515.1195M-H，通过参考相关文献分析，推断 3 种化合物均为二咖啡酰奎宁酸23。与实验室购置的标准品进行对照后，确认峰 15 依次为绿原酸、咖啡酸、3,4-O-二咖啡酰奎宁酸、3,5-O-二咖啡酰奎宁酸、4,5-O-二咖啡酰奎宁酸。2.5体外抗氧化实验结果 2.5.1 DPPH 自由基清除能力如图 4 所示，5 种咖啡酰奎宁酸类化合物均有很强的 DPPH 自由基清除能力。在 050 g/mL 范围内，DPPH 自由基清除率与化合物浓度呈剂量效应关系。当浓度为 10 g/mL和 20 g/mL 时，咖啡酸对 DPPH 自由基的清除率大于其他组分，当浓度为 50 g/mL 时，各化合物对DPPH 自由基的清除率均在 94%以上，其中咖啡酸的清除效果最好，为 95.43%。浓度(g/mL)1020304050DPPH自由基清除率(%)1008060咖啡酸绿原酸3,5-O-二咖啡酰奎宁酸3,4-O-二咖啡酰奎宁酸4,5-O-二咖啡酰奎宁酸VC图 4 咖啡酰奎宁酸类化合物对 DPPH 自由基的清除能力Fig.4 Scavenging ability of caffeoylquinic acids on DPPH freeradicals 2.5.2 ABTS+自由基清除能力如图 5 所示，5 种咖啡酰奎宁酸类化合物对 ABTS+自由基均有较强的清除能力。当化合物浓度为 050 g/mL 时，与 ABTS+自由基清除率呈正相关，当浓度为 10 g/mL 时，5 种化合物对 ABTS+的清除能力均大于阳性对照组VC。其中咖啡酸 ABTS+自由基清除活性在各浓度下均优于其他组分，当浓度为 50 g/mL 时，VC、咖啡酸、3,4-O-二咖啡酰奎宁酸、4,5-O-二咖啡酰奎宁酸、3,5-O-二咖啡酰奎宁酸、绿原酸的 ABTS+自由基 表 1 菊芋乙酸乙酯相提取物的 HPLC-Q-TOF-MS 分析结果Table 1 HPLC-Q-TOF-MS analysis results of ethyl acetatephase extract of Jerusalem artichoke序号保留时间（min）选择离子实验值m/z分子式化合物鉴定结果16.1M-H353.0874C16H18O9绿原酸29.6M-H179.0254C9H8O4咖啡酸318.0M-H515.1168C25H24O123,4-O-二咖啡酰奎宁酸419.2M-H515.1188C25H24O123,5-O-二咖啡酰奎宁酸522.7M-H515.1182C25H24O124,5-O-二咖啡酰奎宁酸 浓度(g/mL)1020304050ABTS+自由基清除率(%)806040020咖啡酸绿原酸3,5-O-二咖啡酰奎宁酸3,4-O-二咖啡酰奎宁酸4,5-O-二咖啡酰奎宁酸VC图 5 咖啡酰奎宁酸类化合物对 ABTS+自由基的清除能力Fig.5 The scavenging ability of caffeoylquinic acids on ABTS+free radicals 310 食品工业科技2023 年 9 月清除率分别为 71.97%、69.63%、54.17%、51.91%、49.61%、41.43%。2.5.3 超氧阴离子自由基清除能力如图 6 所示，5 种咖啡酰奎宁酸类化合物对超氧阴离子自由基均有一定的清除能力。在 0100 g/mL 范围内，化合物浓度与超氧阴离子自由基清除率呈正相关，当浓度为 50 g/mL 时，VC、绿原酸、咖啡酸、3,5-O-二咖啡酰奎宁酸、3,4-O-二咖啡酰奎宁酸、4,5-O-二咖啡酰奎宁酸的超氧阴离子自由基清除率分别为 84.21%、51.40%、51.12%、49.15%、47.18%、46.77%。浓度(g/mL)2040608010010080604020咖啡酸绿原酸3,5-O-二咖啡酰奎宁酸3,4-O-二咖啡酰奎宁酸4,5-O-二咖啡酰奎宁酸VCO2自由基清除率(%)图 6 咖啡酰奎宁酸类化合物对超氧阴离子自由基的清除能力Fig.6 Scavenging ability of caffeoylquinic acids on superoxideanion free radicals 2.5.4 体外抗氧化活性分析采用雷达图对 5 种咖啡酰奎宁酸类化合物的抗氧化活性进行分析。当浓度为 40 g/mL 时，5 种咖啡酰奎宁酸类化合物的抗氧化能力如图 7 所示，绿原酸、咖啡酸、3,5-O-二咖啡酰奎宁酸、3,4-O-二咖啡酰奎宁酸、4,5-O-二咖啡酰奎宁酸的 DPPH 清除率与 VC十分接近，均在 95%附近。以上筛选出的化合物富含丰富的酚羟基，保证了提供质子的能力，从而达到清除 DPPH 自由基的效果28；此外还表现出较好的 ABTS+自由基清除效果，其中，咖啡酸清除率与 VC相当，除咖啡酸外，其他 4 种化合物清除率均略低于 VC；以上 5 种化合物超氧阴离子清除率均低于 VC，这与刘英等27的研究结果类似。多酚类化合物的抗氧化活性主要取决于其 B 环上的邻二羟基，抗氧化活性的强弱与酚羟基和自由基反应可否形成稳定的半醌式自由基结构有关29。总体来看，咖啡酰奎宁酸类化合物具有很高的自由基清除能力，咖啡酸对 DPPH 自由基、ABTS+自由基、超氧阴离子自由基 3 种自由基的清除效果最好，其次是 3,4-O-二咖啡酰奎宁酸、4,5-O-二咖啡酰奎宁酸，而 3,5-O-二咖啡酰奎宁酸对 3 种自由基的清除率略低，这可能是因为 C4 位置被咖啡酰基酯化的奎宁酸比在 C3 或 C5 位置上显示出更高的抗自由基活性，该结果与 Tamayose 等15的报道相类似；此外，Li 等30的研究指出，对于二咖啡酰奎宁酸类化合物来说，含有相邻的两个咖啡酰基团（3,4-O-二咖啡酰奎宁酸、4,5-O-二咖啡酰奎宁酸）相比含有相互远离的两个咖啡酰基团（3,5-O-二咖啡酰奎宁酸）能表现出更好的抗氧化活性，这可能是因为分子间拥挤的程度会增加分子的能量，从而提高氧化还原电位，相反的，两个相互远离的分子之间能量较低，其抗氧化电位也随之降低。DPPH自由基ABTS+自由基10080604020咖啡酸绿原酸3,5-O-二咖啡酰奎宁酸3,4-O-二咖啡酰奎宁酸4,5-O-二咖啡酰奎宁酸VCO2自由基图 7 咖啡酰奎宁酸类化合物的抗氧化活性Fig.7 Antioxidative activity of caffeoylquinic acids 3结论本研究建立了在线鉴定菊芋中咖啡酰奎宁酸类化合物的方法，确定了菊芋乙酸乙酯相中 5 种抗氧化活性成分，结合质谱数据、参考文献并采用标准品对照后，确认菊芋中含有绿原酸、咖啡酸、3,4-O-二咖啡酰奎宁酸、3,5-O-二咖啡酰奎宁酸、4,5-O-二咖啡酰奎宁酸 5 种咖啡酰奎宁酸类化合物。抗氧化实验表明 5 种咖啡酰奎宁酸类化合物有良好的清除DPPH 自由基、ABTS+自由基、超氧阴离子自由基的能力，其中咖啡酸的效果最好，分别为 95.43%、69.63%、51.12%，其余 4 种组分的清除效果略低于咖啡酸，这可能与咖啡酰基酯化位点的差异及酚羟基数目有关。本方法具有快速、准确、筛选效率高等优点，为建立快速、在线的菊芋中咖啡酰奎宁酸化合物的检测方法提供技术支撑，同时为咖啡酰奎宁酸类化合物的开发利用及抗氧化产品研发提供理论支撑。参考文献 1 李玲玉,孙晓晶,郭富金,等.菊芋的化学成分、生物活性及其利用研究进展J.食品研究与开发，2019，40（16）：213218.LIL Y,SUN X J,GUO F J,et al.Study on the chemical and bioactivecompounds and applications of Helianthus tuberosus L.J.FoodResearch and Development，2019，40（16）：213218.2 胡素琴,蔡飞鹏,王建梅,等.菊芋的种植和开发利用J.生物质化学工程，2012，46（1）：5154.HU S Q,CAI F P,WANG JM,et al.The planting and utilization of Jerusalem artichokeJ.Biomass Chemical Engineering，2012，46（1）：5154.3 王友法,曾斯杰,宋小平,等.菊糖提取工艺及其应用研究进展J.中国调味品，2019，44（6）：193197.WANG Y F,ZENGS J,SONG X P,et al.Research progress of lnulin extraction technol-ogy and its applicationJ.China Condiment，2019，44（6）：193197.4 袁晓艳,封冬梅,陈晓兰.菊芋叶中多酚类成分的提取分离及结构鉴定J.江西农业学报，2017，29（4）：8184.YUAN X Y,FENG D M,CHEN X L,et al.Extraction,separation and structuralidentification of polyphenolic components from 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