溃疡性结肠炎与NLRP3_CARD8基因多态性的相关性分析.pdf

第 卷第 期 年 月健 康 研 究.收稿日期:基金项目:金华市科技局资助项目()作者简介:杨青华()女浙江磐安人本科主治医师健康理论与机制研究:./.杨青华郭茂东.溃疡性结肠炎与/基因多态性的相关性分析.健康研究():.溃疡性结肠炎与/基因多态性的相关性分析杨青华郭茂东(.磐安县人民医院 消化内科浙江 磐安.金华市中心医院 消化科浙江 金华)摘要:目的 探讨 样受体蛋白()/炎症小体组分基因胱天蛋白酶募集域蛋白()基因多态性对溃疡性结肠炎()患者易感性的影响 方法分别从 例溃疡性结肠炎患者(组)和 例非溃疡结肠炎患者(对照组)的外周血液样本中提取 采用聚合酶链式反应()进行扩增探针法荧光定量 检测 和 不同点位的基因型应用 自带软件对读取基因分型 组患者均接受硫唑嘌呤()治疗分析 和 基因多态性与治疗后结肠炎性反应的相关性 结果 基因 位点包含、种基因型 组的 基因型和 等位基因频率(、)低于对照组(、)、及 等位基因型频率(、)高于对照组(、)基因 位点包含、种基因型 组 基因型和 等位基因频率(、)较对照组(、)降低、及 等位基因频率(、)较对照组(、)升高差异均有统计学意义()组患者接受 治疗后缓解率为 基因型、基因型患者的肠壁炎性反应缓解率分别高于其他基因型者差异均有统计学意义()结论 基因、基因在肠壁炎性反应的缓解率中发挥作用/基因多态性均对溃疡性结肠炎患者易感性有一定的影响关键词:溃疡性结肠炎基因多态性相关性分析中图分类号:.文献标志码:文章编号:()/(.):()/()().()().().().()()()().()().()().().()本研究已获得磐安县人民医院医学伦理委员会批准同意 诊断标准 溃疡性结肠炎诊断缺乏金标准入组患者参考炎症性肠病诊断与治疗的共识意见(年北京)中溃疡性结肠炎的相关诊断建议进行综合分析包括临床表现:青壮年期发病持续或反复发作的腹泻、黏膜脓血便伴腹痛、里急后重和不同程度的全身症状病程在 周以上内镜检查:结肠镜下溃疡性结肠炎病变从直肠开始呈连续性、弥漫性分布 轻度炎症可见红斑、黏膜充血和血管纹理消失中度可见血管形态消失出血黏附在黏膜表面、糜烂常伴有粗糙呈颗粒状的外观及黏膜脆性增加重度可见黏膜自发性出血及溃疡组织学活检:活动期固有膜内弥漫性、急性/慢性炎性细胞浸润隐窝结构改变黏膜糜烂缓解期黏膜糜烂或溃疡愈合固有膜内中性粒细胞浸润减少或消失慢性炎性细胞浸润减少隐窝结构改变可保留对照组非溃疡性结肠炎诊断标准:参照中药(新药)治疗慢性非特异性溃疡性结肠炎的临床研究指导原则中相关诊断标准即伴有以脐周为主的反复慢性腹痛、粪便有时溏薄有时干结或带有黏健 康 研 究 年液结肠镜检查下可见黏膜水肿充血黏膜血管纹路紊乱、模糊甚至消失病变部位:直肠、左半直肠 研究对象选取标准 纳入标准:各组患者情况符合上述相应诊断建议同意接受 治疗愿意配合后续随访工作知情同意 排除标准:合并严重心、肾、肝功能不全的患者确诊为淋巴瘤或癌症的患者合并活动性肺结核及活动性病毒性肝炎的患者 基因位点检测及分型 提取采集入组患者 空腹外周肘静脉血作为检测标本根据 提取试剂盒说明书进行全基因组 提取稀释至 /后保存于 环境中备用 试剂盒购自上海莱枫生物科技有限公司 扩增根据美国 数据库检索结果采用引物设计软件 设计引物引物序列:正向为 反向为 引物序列:正向为 反向为 严格根据引物说明书要求对引物进行稀释得到引物工作溶液后将其置于 恒温冰箱中保存备用 于 反应前提前取出引物置于 水浴中复温融化 基因分型 采用探针法荧光定量 检测样本两个不同位点的基因型每个位点分别进行 反应并应用 自带软件对读取的基因分型 治疗方法 组患者均采用 联合泼尼松龙治疗 使用剂量为每天 /泼尼松龙使用剂量为每天 /临床症状控制后逐渐减少糖皮质激素用量至停药治疗时间为 个月 观察指标 和 不同位点的基因型和等位基因频率分布 记录 和 不同位点的基因型统计各基因型的分布频率 疗效 治疗结束后评估疗效分为缓解、有效和无效 缓解:便血等临床症状消失大便次数减少糖皮质激素停用或减量结肠镜检查黏膜正常有效:便血等临床症状基本消失大便次数减少糖皮质激素减量结肠镜检查黏膜轻度炎症 无效:便血等临床症状未见好转大便次数增多糖皮质激素用量不变结肠镜或病理检查病灶加重或未改变 统计学方法 应用 统计分析软件各基因型的分布频率及疗效用()表示组间比较采用检验 表示差异具有统计学意义 结果 基因型及分布频率 基因位点 包含、种基因型 组的各基因型分布频率见表 与对照组比较 组的 基因型和 等位基因频率降低、及 等位基因型频率增加差异有统计学意义()表 两组 基因型和等位基因的分布频率()()组别 基因型等位基因 组()()()()()()对照组()()()()()基 因 型 和 等 位 基 因 分 布 频 率 基因 位点包括、种基因型各基因型分布频率见表 组 基因型和 等位基因频率较对照组降低、及 等位基因频率升高差异有统计学意义()见表 第 期 杨青华等:溃疡性结肠炎与/基因多态性的相关性分析表 两组 位点基因型和等位基因频率分布()()组别基因型等位基因 组()()()()()()对照组()()()()()()治疗前后不同基因型患者的溃疡性结肠炎疗效 组患者接受 治疗后共有 例患者得到缓解缓解率为 观察不同基因型患者的疗效结果显示:基因型患者的缓解率()高 于、基 因 型 患 者(、)基因型者的缓解率()高于、基因型患者(、)差异均有统计学意义()讨论 作为一种抗代谢型免疫抑制剂对缓解溃疡性结肠炎和维持治疗效果有一定的作用 但 的相关不良反应(如白细胞减少和胃肠道反应等)则可能会诱发感染进而对患者的生命安全造成威胁导致患者治疗中断、基因多态性可能与类风湿性关节炎、缺血性心脏病及型和型糖尿病等多种存在长期炎症反应的疾病相关其机制可能为 的小等位基因可形成终止密码使得表达 蛋白功能缺失继而使得 过量分泌而 的“功能获得性”小等位基因可促使 转化为成熟的 引发炎症反应本研究结果显示:与对照组比较 组 基因位点 的 基因型和 等位基因频率降低、及 等位基因型频率增加基因 位点的 基因型和 等位基因频率降低、及 等位基因频率升高 说明、基因多态性在溃疡性结肠炎的发病过程中发挥重要功能可能影响溃疡性结肠炎的易感性 分析原因可能与 多态性影响 炎性组分的表达从而参与调解溃疡性结肠炎患者的免疫及炎症反应 基因 位点 基因、基因 位点 基因很可能属于溃疡性结肠炎的易患因素后期可进一步研究其在溃疡性结肠炎发病机制中的作用 本研究结果还显示 基因型患者的肠壁炎性反应缓解率明显高于、基因 基因型肠壁炎性反应缓解率较、基因型升高可见 基因、基因可影响患者的肠壁炎性反应缓解率综上所述/基因多态性均对溃疡性结肠炎患者易感性有一定的影响且有望成为辅助临床预测溃疡性结肠炎患者预后疗效的参考指标参考文献:甄建华黄光瑞.溃疡性结肠炎病因和发病机制的现代医学研究进展.世界华人消化杂志():.尹平郭朋璐宋君宇.美沙拉嗪联合参苓白术散治疗溃疡性结肠炎的效果观察.河北医药():.徐小芳梁赵良曾睿智等.基因多态性与广西壮族、汉族人群炎症性肠病的关系.实用医学杂志():.夏鑫.利用 方法识别克罗恩病和溃疡性结肠炎的关联变异位点.郑州:郑州大学.吴开春梁洁冉志华等.炎症性肠病诊断与治疗的共识意见(年北京).中国实用内科杂志():.林林秦晓宁阮洪训等.白介素 基因多态性与结肠癌相关性的研究.重庆医科大学学报():.王瑞丽李佳朋赵立波.基因多态性与巯嘌呤类药物耐受性及其所致白细胞减少的研究进展.中国现代应用药学():.王家丰闫守泉江连英等.基于二代测序的 基因 发掘及其与溃疡性结肠炎风险关联分析.广东医学():.古尔巴奴尔艾买提解杨阳沈树红.基因多态性与巯嘌呤药物耐受性关系的研究进展.中国现代医学杂志():.(责任编辑 杨艳宏)健 康 研 究 年