急性胰腺炎患儿血清中ATG7的表达及疾病进展的相关性研究.pdf

现代消化及介入诊疗 年 第 卷 第 期 牞 牞 论 著急性胰腺炎患儿血清中 的表达及疾病进展的相关性研究荣会蓉，周金成，夏思，杨凡【摘要】目的探讨急性胰腺炎（）患儿血清中自噬相关基因 （）的表达水平，并分析其与疾病相关进展的研究。方法选取 年 月 年 月在本院就诊的 例 患儿，另选取同期健康体检的儿童 例作为对照组。采用酶联免疫吸附（）检测试剂盒测定血清 水平；试剂盒检测血清淀粉酶（）、血清脂肪酶（）、降钙素原（）检测试剂盒、反应蛋白（）、血尿素氮（）水平，对 患儿进行急性生理学与慢性健康状况评分系统（）评分。采用 法分析 患儿血清 表达与生化指标及疾病严重程度评分相关性；受试者工作特征曲线（）曲线分析 对 疾病进展的预测价值。结果 组血清 （）、（）、（）、（）、（）、水平（）和 评分升高相比于对照组（）、（）、（）、（）、（）、（）显著升高（）。例 患者中，发生呼吸衰竭 例（），肾功能衰竭 例（），循环衰竭 例（），肝功能衰竭 例（），凝血功能衰竭 例（），中枢神经衰竭 例（）。组血清 、水平及 评分相比于 组、组显著升高（）。血清 与 、及 评分呈正相关。结果显示，血清 和 评分预测 发生的曲线下面积（）分别为 、，灵敏度为 、，特异性为 、。结论 患儿血清 的表达升高，与 疾病进展密切相关，有望作为评估 疾病进展的生物标志物。【关键词】急性胰腺炎；儿童；自噬相关基因 ；重症急性胰腺炎中图分类号：；文献标志码：作者单位：长江大学附属仙桃市第一人民医院儿科；湖北省仙桃市仙桃职业学院；长江大学附属仙桃市第一人民医院内科通信作者：杨凡，：基金项目：湖北省卫生健康委科研项目（），；，；，【】（）（），；（），（），（），（）（），（），；（），（），（），（），（），（），（现代消化及介入诊疗 年 第 卷 第 期 牞 牞 ），（），（），（），（），（）（），（），（），（），（），（），（），（），（），【】；急性胰腺炎（，）是发生于胰腺的一种严重炎性疾病，表现为突然发作和严重的腹痛，伴随严重的局部和全身并发症，具有较高的发病率和死亡率 。在儿童与成人中一样常见，多见于 岁以上儿童，发病率为 ，其严重程度在所有年龄段的儿童中相似，总体病死率低于 。儿童 在发病率、病因、临床表现和预后与成人存在显著差异，儿童的并发症风险和死亡率与成人相比相对较低 。相比于成人中环境风险因素占主导地位，儿童的风险因素包括遗传、环境和自身免疫风险 。无论是成人还是儿童，均可引起患者严重的全身炎症并损害器官功能，存在潜在致死性 。准确及时的诊断儿童 ，对预防疾病进展至关重要，但目前对于儿童 的早期诊断和治疗存在不足，缺乏有效预测和定量的指标 。自噬是细胞中高度保守的分解代谢途径，主要包括自噬的诱导、自噬小体的形成、自噬溶酶体的形成以及内容物的降解四个步骤，参与细胞内各种生理过程，可以消除受损细胞或细胞器、降解蛋白质和脂质等，并为细胞代谢提供能量 。自噬功能障碍与 、癌症、衰老和自身免疫性疾病有关，且在 中会加速胰腺炎过程中的炎症反应 。已有研究发现，自噬抑制剂能减轻 引起的器官损伤，降低炎症水平，对 预后有较好的改善作用 。自噬相关基因 （，）是一种重要的自噬效应酶，与其他 蛋白协同作用调节免疫、细胞死亡和蛋白质分泌，并独立调节细胞周期和细胞凋亡，在人类癌症、神经退行性疾病、传染病、免疫调节中发挥重要作用 。已有研究发现抑制 表达可抑制自噬，加强细胞凋亡和炎症反应，进一步促进胰腺炎的发展 。然而 与 患儿的疾病进展相关性缺乏系统性研究与分析。因此，本研究通过探讨 患儿血清 表达水平与疾病进展的相关性，以期为临床 患儿疾病进展评估提供新的生物学指标。资料与方法 一般资料选择 年 月 年 月在本院就诊的 例 患儿，年龄 岁，其中男 例，女 例，平均年龄（）岁。另选取同期健康体检的儿童 例作为对照组，男 例，女 例，平均年龄（）岁。两组性别、年龄无显著差异（），具有可比性。纳入标准：所有患儿符合以下 诊断标准 中的 项：出现与 相符的腹痛；血清淀粉酶和 或脂肪酶值正常上限的 倍；影像学表现符合 ；年龄 岁；临床资料完整。排除标准：年龄 岁；恶性肿瘤及慢性胰腺炎者；伴有血液疾病者；临床资料不完整。根据 管理及临床分类标准 ：轻度急性胰腺炎（，）例，以无器官衰竭和局部或全身并发症为特征；中重度急性胰腺炎（，）例，以短暂性器官衰竭（）为特征，或伴有局部或全身并发症；重症急性胰腺炎（，）例，以持续性器官衰竭（）为特征。方法 样本采集所有患儿静脉采血 ，组入院即采集，对照组清晨空腹采集。样本采集后，离心 分离出上清，放 超低温冰箱待测。指标检测血清样本采用酶联免疫吸附（，）检测试剂盒（上海联迈生物公司）测定血清 水平，血清淀粉酶（，）、血清脂肪酶（，）、降钙素原（，）检测试剂盒（上海酶联生物公司），反应蛋白（，）试剂盒（北京百奥莱博科技公司），血尿素氮（，）试剂盒（上海通蔚公司），采用全自动生化分析仪（美国贝克曼库尔特公司）检测各指标水平。急性生理学与慢性健康状况评分系统（）评分包括：年龄指标、慢性并发症和急性生理学：入院 内的体温、心率、呼吸频率、平均动脉血压、全血白细胞值、红细胞比容值、动脉血 值、氧分压、血清钾钠、肌酐及昏迷指数共 项。统计学分析用 软件分析数据，计数资料以 （）表示，采用检验。计量资料以 检验，符合正态分布，以平均值 标准差（珋 ）表示，组间比较采用独立样本 检验，多组间比较采用单因素方差分析，组间差异进一步采用 检验法；采用 法分析 患儿血清 表达与生化指标及疾病严重程度评分相关性；采用受试者工作特征曲线（，）曲线分析 对 疾病进展的预测价值。为差异有统 现代消化及介入诊疗 年 第 卷 第 期 牞 牞 计学意义。结果 对照组和 组血清 水平及各指标比较与对照组相比，组血清 、水平显著升高（），评分为（）分，见表 。不同病情程度 组血清 水平及各指标比较 例 患者中，根据序贯器官衰竭评估情况，发生呼吸衰竭 例（），肾功能衰竭 例（），循环衰竭 例（），肝功能衰竭 例（），凝血功能衰竭例（），中枢神经衰竭 例（）。其中呼吸衰竭是的发生率最高。组血清 、水平及 评分相比于 组、组显著升高（）；组相较于 组血清指标 、水平及 评分有升高趋势，但不存在显著差异（），见表 。表 组、对照组血清 水平比较（珋 ）指标 （）（）（）（）（）（）对照组 组 值 值 表 不同病情程度 组血清 水平及各指标比较（珋 ）指标 （）（）（）（）（）（）组 组 组 值 值 注：与 组比较，；与 组比较，患儿血清 水平与生化指标及疾病严重程度评分相关性 法分析结果显示，血清 水平与 、水平及 评分呈正相关，见表 。表 患儿血清 水平与生化指标及疾病严重程度评分相关性（珋 ）相关性 值值 评分 水平和 评分对 疾病进展的预测价值以血清 水平和 评分为检验变量，以 患儿严重程度为状态变量（和 ，）绘制 曲线。结果显示，血清 水平预测 发生的曲线下面积（）为 ，临界值为 ，灵敏度为 ，特异性为 ；评分预测 发生 为 ，临界值为 ，灵敏度为 ，特异性为 ，见图 。图 和 评分对预测 的 曲线 讨论 胰腺组织中多种胰蛋白酶激活后引起胰腺组织消化、水肿、出血、坏死，严重时会造成远端器官功能障碍 。儿童急性胰腺炎的病因、临床表现和病程往往与成人不同，临床特征表现为急性腹痛、恶心、呕吐、胰淀粉酶升高，其病因多为胆结石、药物、感染、外伤或解剖异常 。据报道，儿童 的发病率在过去 年中正在稳步上升，且儿童处于生长发育期，如不及时治疗，对患儿的身心健康和生命安全造成严重影响 。目前对儿童 的诊断主要参照成人 诊断标准和指南进行临床评估和诊疗，然而儿童与成人存在差异，其病现代消化及介入诊疗 年 第 卷 第 期 牞 牞 因、诊断及预后也有不同，因此寻找有效的儿童 生物标志物，对评估 疾病严重程度具有重要意义 。自噬是一种质量控制过程，通过溶酶体驱动的降解来回收细胞质材料并保存能量，以应对一系列细胞外和细胞内压力，包括营养剥夺、激素治疗、病原感染、错误折叠的蛋白质和受损的细胞器 。自噬在包括肠上皮功能障碍、宿主防御、细胞稳态、细胞分化和细胞内病原体清除在内的多种生命过程中起关键作用，自噬的破坏可导致胰腺炎的发作，而自噬功能障碍是胰腺炎中各种紊乱通路的汇聚因素 。期间胰腺腺泡的两个早期特征，即细胞质空泡的积累和胰蛋白酶原的过早激活，已有研究发现这两种 的病理反应都可归因于自噬受损 。自噬与自噬相关蛋白密切相关，胰腺 缺陷的小鼠表现出自噬通量降低，导致 发生，进而发展为慢性胰腺炎，增加了细胞凋亡、炎症和纤维化，造成动物过早死亡 。等 发现抑制 过表达，导致自噬途径受损，促进钙调蛋白依赖性蛋白激酶（，）激活的坏死来加剧 。本结果显示，组患儿相比于对照组血清 水平显著升高，且在 组、组、组水平依次升高，与上述结果相似，表明 在 患儿中疾病进展中起重要作用。作为自噬蛋白与囊泡进展和自噬体形成有关，在 胰腺细胞自噬中发挥重要作用，水平升高可能抑制自噬从而导致腺泡细胞的炎症和凋亡，进而加重 进展 。研究发现生化指标 与 联合诊断在 早期诊断中具有较高准确性 。、作为急性反应物，在血液中的水平会在数小时内因炎症和感染而升高，其水平高低可作 疾病严重程度和预后的工具 。本研究中，相比于对照组，组患儿血清 、显著升高，且在不同疾病进展 患儿中逐步升高，表明 组患儿出现血清指标和临床评分异常，其异常变化与 疾病进展有关。且 患儿血清 水平与 、水平呈正相关，表明血清 水平异常可能促进 炎症的发生。研究发现 中胰腺细胞受损与炎症相关，炎症因子大量释放引起炎性细胞浸润和胰腺细胞坏死，而 自噬为一种异常自噬，进一步加重炎症水平，致使 病情加重 。评分是一种能够预测 严重程度的有效预后评分系统，可在一定程度上反映 的严重程度，而 是 评分等多项评分系统的重要指标 。曲线研究表明，血清 预测 发生的曲线下面积（）为 ，灵敏度为 ，特异性为 ，表明 疾病严重程度增加，进一步发展为 的可能性大。而 评分预测 发生 为 ，灵敏度为 ，特异性为 ，预测 发生的价值略高于 评分，且检测更便捷，有望作为评估 患儿疾病进展的指标。综上所述，患儿血清 水平升高，与 患儿疾病进展关系密切，有望作为 患儿疾病进展预测的生物标志物，从而指导临床医生对患儿病情做出有效评估。本研究的局限在于病例数量有限，且仅在临床水平上检测了 患儿血清 水平，未能跟踪随访患儿的临床结局等，有待进一步研究。参考文献 孙海丽，沈爱武，陈肯急性复发性胰腺炎患者的病因分析及内镜治疗探讨 实用临床医药杂志，（）：王姣，钟雪梅儿童复发性急性胰腺炎和慢性胰腺炎的研究进展 中国医刊，（）：，：，（）：郑启鹏，詹江华儿童急性胰腺炎治疗的研究进展 中华小儿外科杂志，（）：李梦迪，郑启鹏，葛亮，等 、及 评分在儿童急性胰腺炎中的预测效能 中华小儿外科杂志，（）：周佳，莫梦军，刘苏来，等自噬在急性胰腺炎中的研究新进展 中国普通外科杂志，（）：，（），（）：，（）：，：，（）：中华医学会消化病学分会胰腺疾病学组，中华胰腺病杂志编委会，中华消化杂志 编委会中国急性胰腺炎诊治指南（年，沈阳）临床肝胆病杂志，（）：，：，（）：黄焕波，林晓源，陈永新奥美拉唑注射液联合肠内营养支持治疗急性胰腺炎患儿的临床疗效 中国妇幼保健，（）：，（）：李燕妮，李骁，耿冲，等儿童急性胰腺炎的病因及临床特征分析 中华妇幼临床医学杂志（电子版），（）：张森，厉冰，段永福，等儿童和成人急性胰腺炎临床特征的差异性调查：一项单中心研究 中国现代普通外科进展，（）：，（）：，（）：（下转第 页）现代消化及介入诊疗 年 第 卷 第 期 牞 牞 ，（）：，：，（）：，：，（）：，（），（）：，：，（）：，：，（）：边大鹏，董锦沛，牛海霞，等鼻胆管造影对经内镜逆行胰胆管造影取石术后结石残留的诊断价值及结石残留相关因素分析 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