实验一小白鼠和家兔的捉持与给药方法.docx

实验一 小白鼠和家兔的捉持与给药方法
1、 小白鼠和家兔的捉持与给药方法
[目的] 学习小白鼠的捉持和各种给药法。
[材料] 小白鼠3-4只 鼠笼 天平 注射器 灌胃针头 生理盐水 小鼠尾静脉注射用固定筒
[方法] 1.1、捉持法 以右手提鼠尾，将小鼠放于粗糙面上，将鼠尾轻轻向后拉，以左手的拇指及其食指捏双耳及头部皮肤，无名指、小指及掌心夹其背部皮肤及其尾部，便可将小鼠固定。
1.2、灌胃 左手持小鼠，使腹部朝上，颈部拉直，右手拿灌胃器子口交插入口腔，从舌面紧沿上颚进入食道。若遇阻力，应退出后再插。
1.3、皮下注射 一人抓小白鼠头部皮肤，右手拉鼠尾，另一人左手捏背部皮肤，右手持注射器刺入背部皮肤。
1.4、腹腔注射 左手抓小白鼠，右手持注射器。取30º将针头从下腹部刺入腹腔。
1.5、尾静脉注射 将小白鼠置于固定筒内或倒置的大漏斗下，使鼠尾露出在外。用酒精棉球擦鼠尾，使血管扩张。左手拉住尾尖，选一条扩张最明显的尾静脉将针头刺入血管，推药。若有阻力，且局部变白，则需从新刺入血管。
2、家兔的捉持与给药方法
[目的] 学习家兔的捉持和各种给药法。
[材料] 家兔1-2只 兔开口器 注射器 导尿管 生理盐水 磅秤 兔固定箱
[方法] 1.1、捉持法 一手抓家兔颈背部皮肤，将兔提起。另一手托起臀部，使兔成坐位姿势。
1.2 灌胃 需由两人合作进行。一人取坐位，用两腿夹持兔身，左手握家兔双耳，右手抓住两前肢。另一人将木制开口器横插家兔口内，压住舌头，并固定之。取8号导尿管从开口器中小口插入食道。插管时易误入气管。区别之法主要在于谨慎观察插管后动物的反应。插入器官是可引起剧烈挣扎和呼吸困难。也可将导尿管的外段进入水中，如有气泡吹出，表示插在气管内，此时应该把管重插。于判明导尿管确实插在食道内以后，取注射器接在导尿管上，将药液推入。再推注少量空气，是导尿管中不致有药液残留，慢慢抽出导尿管，取出开口器。家兔灌胃给药时的药液量一般为5~20ml\kg.试以生理盐水进行练习。
1.3 皮下、肌内及腹腔注射 给药方法基本上同小白鼠，为针头可稍大（选用6号或7号针头），给药量可稍多（皮下与肌内0.5~1.0ml\kg，腹腔1.0~5.0 ml\kg）
1.4 静脉注射 将家兔置固定箱内，把去耳壳外缘的毛，选择一条比较明显的耳缘静脉，用酒精棉球涂擦皮肤，使血管显露。用左手拇指和中指捏住兔的耳尖部，食指垫在兔耳注射处的下面，右手持注射器（选用6号针头），从近耳尖处将针头刺入血管。如见到针头确在血管内，即以左手使针头和兔耳固定，将药液推入，如推注时有阻力，局部发生肿胀，表明针头不在血管内，应立即拔针，重新穿刺。家兔的静脉注射量一般药液为0.2~2.0 ml\kg，等渗药液可达10 ml\kg。试以生理盐水进行练习。

实验二 药物的镇痛作用（小鼠扭体罚法）

[目的] 了解用腹腔注射刺激性物质，引起扭体反应，来筛选镇痛药的方法
[材料] 小白鼠3只 天平 注射器 小鼠笼 1%盐酸吗啡溶液 4%阿司匹林混悬液 1%酒石酸锑钾溶液 生理盐水
[方法] 取小白鼠3只，编号，称记体重。甲鼠皮下注射盐酸吗啡0.15mg\10g（0.1%溶液
0.15ml\10g）， 乙鼠灌胃阿司匹林6mg\10g（4%混悬液0.15ml\10g），丙鼠灌胃生理
盐水0.15mg\10g。半小 时后，隔数分别腹腔注射酒石酸锑钾1 ml\10g（1%溶液
0.1ml\10g），观察十五分钟内各鼠有无扭体反应出现。扭体反应的表现为腹部收缩，
躯体扭曲、后肢伸展及蠕行等。汇集全实验室的结果，评价两药的镇痛作用。

实验三 药物的抗电惊厥作用及氯丙嗪对大鼠激怒反应的影响

[目的] 观察氯丙嗪的安定作用
[方法] 应用机械刺激法
[药品] 1%氯丙嗪溶液10ml 大组共用 NS 10ml
[器材] 大白鼠笼2个 台秤1个 止血钳4把 1ml注射器2支 棉手套2双
[动物] 雄性大白鼠300克以上4只
[方法] 1.取异笼喂养大的白鼠4只，称重后配对，分A、B两对，配对大鼠体重应相等，然后分别将两对大鼠放入鼠笼中，以止血钳夹两只大白鼠的尾部（距尾尖1\3处）反复几次，以疼痛刺激引起大鼠的激怒状态（两鼠竖立，对峙两前只互打，怒叫），一般此状态可持续1h.
2.组大鼠腹腔注射1%氯丙嗪0.2ml\100g体重，给予同剂量NS的作对照。
3.给药15分钟后再以上述方法刺激两鼠尾部，观察两对大白鼠给药前后反应有何不同？

实验四 敌百虫急性LD50的测定

[目的]项）通过实验了解测定药物LD50 的方法、步骤和计算过程
[材料] 小白鼠30~50只（体重17~25g，雌雄均可，应注明性别） 注射器及针头 小鼠丝笼 2%敌百虫溶液 苦味酸溶液
[方法] 1、探索剂量范围 取小白鼠8-10只，以两只为一组，分成4-5组，选择组距较大的一系列剂量，分别按组腹腔注射敌百虫溶液，观察出现的症状，并记录死亡数，找出引起0%及100%死亡率剂量的所在范围，（参考剂量：最小300mg\kg，最大1000 mg\kg）。
2.进行正式实验 在预出实验所获得的0%和100%致死量的范围内，选用几个剂量（一般用3~5个剂量，按等比级数增减，相邻剂量之间呈1：0.8或1：0.7之比），尽可能使半数组的死亡率都在50%以上，另半数组的死亡率都在50%以下。各组动物的只数应相等或相差无几，每组10只左右，动物的体重和性别要分层随机分配。完成动物分组和剂量计算后按组腹腔注射给药。最好先从中剂量组开始，以便能从最初几组动物接受药物后的反应来判断两端的剂量是否合适，否则可随时进行调整。
3．统计实验结果 给药后经一定时间，清点各组的死亡小鼠数。用简化机率单位法及寇氏法计算敌百虫的LD50，包括可信限
与可信限率（计算方法详见本书第八章第九节半数效量法

实验五 硫酸链霉素的急性中毒及解救

[目的] 观察硫酸链霉素的急性中毒症状，了解其解救方法
[材料] 家兔2只 人工呼吸机 剪刀 注射器 棉球 25%硫酸链霉素溶液 10%葡萄糖酸钙溶液 0.05%甲基硫酸新斯的明溶液
[方法] 射及四取家兔2只，编号，称体重，观察动物的呼吸情况，翻正反肢肌张力。甲兔耳静脉注射硫酸链霉素0.4g\kg（25%溶液1.6ml\kg），观察其反应。当出现呼吸麻痹时，将与人工呼吸机的出气口相连的橡皮导管插入家兔的一侧鼻孔，连续给予人工呼吸，观察其能否恢复。
乙兔耳静脉注射硫酸链霉素0.4g\kg（25%溶液1.6ml\kg），呼吸麻痹后同样通过鼻导管给予人工呼吸，并静脉注射葡萄糖酸钙250mg\kg（10%溶液2.5ml\kg）及甲基硫酸新斯的明0.15mg\kg（0.05%溶液0.3ml\kg），观察其能否恢复。

实验六 胰岛素的过量反应及解救

[目的] 观察胰岛素过量引起的低血糖反应及葡萄糖的抢救效果
[材料] 小白鼠2只 注射器 玻皿 5u\m胰岛素溶液 25%葡萄糖溶液
[方法] 将恒温器调节于37~38℃。取预先停食12小时的小白鼠2只，称重。给每鼠腹腔注射胰岛素1.0u\10g，将其放置于恒温器内，盖以玻皿（勿完全密闭），观察小白鼠的活动变化。当其发生惊厥时，迅速取出一鼠，将预先准备好的25%葡萄糖溶液0.5ml注入腹腔内。另一鼠不做处理作为对照。比较两鼠的最后结果。

实验七 利尿药和脱水药对家兔尿量的影响

[目的] 了解急性利尿实验方法，观察高渗葡萄糖注射液和速尿对不麻醉兔的利尿作用
[材料] 家兔（雄性，2kg以上）2只 兔手术台 10号导尿管 量筒 烧杯 兔灌胃器 注射器 1%速尿（或2%利尿酸钠）溶液 50%葡萄糖注射液 生理盐水 液体石蜡
[方法] 取雄兔2只，称重，分别用胃管灌入温水40ml\kg。30min后，背位固定于手术台上。将10号导尿管尖端用液体石蜡润滑后自尿道轻而慢的插入，导尿管通过膀胱括约肌进入膀胱后，即有尿液滴出，再插入1~2cm（共插入约8~12cm），用胶布将导尿管与兔体固定。将最初5min内滴出的尿液弃去不计。滴速稳定后，再导尿管下接一量筒，收集20min内滴出的尿液，计其ml数，作为给药前的对照值。然后分别给两兔给药，并量计给药后20min内的尿量：
甲兔静脉注射50%葡萄糖注射液5ml\kg
乙兔静脉注射速尿4mg\jg（1%溶液0.4ml\kg）或利尿酸钠6mg\kg（2%溶液0.3ml\kg）
比较两兔给药前后排除尿量的变化

实验八 传出神经药物对离体兔肠的作用

[目的] 学习离体平滑肌器官的实验方法，观察拟胆碱药和抗胆碱药对离体兔肠的作用
[材料] 家兔一只 麦(Magnus)氏浴槽 恒温水浴 L形通气管 温度计 充气球胆 记纹鼓 铁支架 描记杠杆 弹簧夹 螺旋夹 双凹夹 粗剪刀 手术剪 眼科镊 下口瓶(500mi) 量筒 注射器 烧杯 培养皿 缝针 棉线 胶泥 台(Tyrode)氏液 10-5氯化乙酰胆碱溶液 0.1%硫酸阿托品溶液 1%硫酸阿托品溶液 1%氯化钡溶液
[方法] 1.取制肠段标本 取空腹家兔一只，左手执髂上部，右手握木棰，猛击枕骨部致死。迅速开腹，自幽门下6处剪取回肠，剪成长约2的小段，放入盛有台氏液的培养皿内备用。
2.装于麦氏浴槽 再肠段两端用缝针各穿一线，将肠段的一端系在通气管的小钩上。将通气管连同肠段放入38±0.5℃台氏液的麦氏浴槽内（台氏液量约30ml），以双凹夹将通气管的另一端固定在铁支架上，使充满空气的球胆和通气管相连，微微开启球胆橡皮管上的螺旋夹，使球胆内的空气以2个气泡\s的速度从通气管尖端的小孔逸出，供给肠肌以氧气。
3.平衡描记杠杆 用胶泥将系于肠段另一端的棉线固定在描记杠杆上。描记杠杆的笔尖端应有足够长度，使肠段收缩在描图上放大4~5倍。再在描记杠杆的笔尖端添加小团胶泥，使浴槽中的肠段承受0.5~1.0g的拉力。开动记纹鼓，记录一段正常收缩曲线，然后依次用药。
（1）.加10-5氯化乙酰胆碱0.1ml，结果如何？当肠段收缩明显时，立即加入：
（2）0.1%硫酸阿托品溶0.1ml，观察对肠段收缩的影响。描笔下降到基线时再加入：
（3）10-5氯化乙酰胆碱溶液，剂量同（1），结果又如何？如作用不明显，接着追加：
（4）10-5氯化乙酰胆碱溶液1ml，此时肠段有无收缩？观察3min后更换浴槽中的台氏液3次，待肠段又有轻微收缩后在加入：
（5）1%氯化钡溶液0.5ml，肠段有何反应？作用达稳定状态后立即加入：
（6）0.1%硫酸阿托品溶液，剂量同（2），结果如何？如未能使肠段松弛，再追加：
（7）1%硫酸阿托品溶液1.0ml，结果又如何？

实验九 强心甙对离体蛙心的作用（八木氏法）
[目的] 学习八木氏蛙心灌流法，观察强心甙对离体蛙心收缩强度、频率、节律和心输出量的影响。
[材料] 蛙或蟾蜍（70g以上）2只 手术器械 蛙板 探针 八木氏蛙心插管 蛙心夹 描记杠杆 铁支架 双凹夹 长柄木夹 记纹鼓 小烧杯 滴管 棉线 任氏液 低钙任氏液（其中Cacl2含量为一般任氏液的1\4） 5%洋地黄溶液（或0.1%毒毛旋花子甙G溶液） 安瓿浓度：0.025g\ml
[方法] 1.取蛙或蟾蜍1只，用探针毁脑及脊髓，背位置于蛙板上。剪开胸部皮肤，剪去胸部肌肉及胸骨，剪破心包膜，暴露心脏。
2.用线结扎右主动脉，于左主动脉下穿一线，打一松结，备结扎动静脉插管之用。再于左右主动脉下穿一线，把心脏向上翻转后，将该线打一松结，备结扎静脉插管之用。于下腔静脉处剪一V形口，插入充有任氏液的静脉插管，连同近旁的其他血管一起结扎固定，冲洗心脏内血液。然后在左主动脉上剪一V形口，插入动脉插管并结扎。用剪刀剪断动、静脉，使心脏离体。先使含血任氏液从动脉插管流出，用滴管在静脉插管中添加任氏液。当从动脉插管流出的液体接近无色时，使静脉插管承接动脉插管的流出液。动脉插管的液柱高度约为5cm，静脉插管的液柱高度约为2.5cm
3.用带有长线的蛙心夹夹住心尖，将长线系在描记杠杆上，再杠杆上加适量胶泥，调节心脏负荷，将心脏的搏动记录在记纹鼓上。
4.记录一段正常心搏曲线后，依次换加下列药液。
（1）换入低钙任氏液。
（2）当心脏收缩明显减弱时，向静脉插管内加入5%洋地黄溶液0.1~0.2ml（或0.1%毒毛旋花子甙G溶液0.2ml）。或针剂0.45ml。
比较给药前后心脏收缩的强度、频率以及从动脉插管搏出液体的流速（滴\min）