1、,单击此处编辑母版标题样式,单击此处编辑母版文本样式,第二级,第三级,第四级,第五级,*,本资料仅供参考,不能作为科学依据。谢谢。本资料仅供参考,不能作为科学依据。感谢您,单击此处编辑母版标题样式,单击此处编辑母版文本样式,第二级,第三级,第四级,第五级,*,本资料仅供参考,不能作为科学依据。谢谢。本资料仅供参考,不能作为科学依据。感谢您,单击此处编辑母版标题样式,单击此处编辑母版文本样式,第二级,第三级,第四级,第五级,*,本资料仅供参考,不能作为科学依据。谢谢。本资料仅供参考,不能作为科学依据。感谢您,单击此处编辑母版标题样式,单击此处编辑母版文本样式,第二级,第三级,第四级,第五级,*,
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3、培养和核移植技术,第1页,植物细胞工程惯用技术伎俩有哪些?,那么动物细胞惯用技术伎俩呢?,植物组织培养,植物体细胞杂交,问题探讨,第2页,动物细胞工程技术伎俩,动物细胞培养、动物细胞核移植、,动物细胞融合、生产单克隆抗体等,动物细胞工程技术基础,动物细胞培养,第3页,从动物机体中取出相关组织,将它分散成单个细胞,然后,放在适宜培养基中,让这些,细胞生长和增殖,。,原理:,动物细胞培养,细胞增殖,第4页,动物细胞培养过程,(见书本),第5页,动物胚胎或幼龄动物组织、器官,(取材),细胞悬液,10,代细胞,50,代细胞,传代培养,无限传代,单个细胞,加培养液,(分解细胞间蛋白),原代培养,胰蛋白酶
4、或胶原蛋白酶,剪碎,过程:,细胞株,细胞系,动物组织细胞间隙中含有一定量蛋白质,遗传物质未改变,遗传物质已改变,第6页,细胞株和细胞系区分:,1,、遗传物质,2,、培养代数,第7页,原代培养:,传代培养:,原代培养与传代培养区分,分装之前,,10,代以前,分装后继续培养,,10,代以后,第8页,1,、无菌、无毒环境,动物细胞培养条件,添加一定量抗生素,定时更换培养液,培养液和培养器具无菌处理,第9页,第10页,动物细胞培养条件,1,、无菌、无毒环境,2,、营养,补充合成培养基中缺乏物质,葡萄糖,、氨基酸、无机盐、微量元素、促生长因子、,动物血清、血浆等,培养基不一样是,动物细胞培养和植物组织培
5、养最主要区分,第11页,动物细胞培养条件,1,、无菌、无毒环境,2,、营养,3,、温度和,PH,36.5,+,0.5,度,PH,为,7.2-7.4,第12页,动物细胞培养条件,1,、无菌、无毒环境,2,、营养,3,、温度和,PH,4,、气体环境:,O2,和,CO2,(,95%,空气和,5%CO2,),第13页,2,、为何选取动物胚胎或幼龄个体器官或组织做动物细胞培养材料?,1,、较植物组培培养基有何独特之处?,独特之处有:,1,、液体培养基,2,、成份中有动物血清等,这些组织或器官上细胞生命力旺盛,分裂能力强,第14页,3,、为何培养前要将组织细胞分散成单个细胞?,预防细胞间接触抑制现象,使细
6、胞与培养液更充分接触,第15页,4,、动物细胞培养能否像绿色植物组织培养那样最终培养成新个体?,不能,动物细胞培养只能使细胞数目增多,而不能发育成个体,5,、胰蛋白酶能将细胞消化掉吗?,能,第16页,6,、动物细胞培养过程中尤其要注意什么?,注意时间控制,7,、能够用胃蛋白酶代替胰蛋白酶吗?为何,?,不能,因为二者最适,PH,不一样,而正常组织细胞生存环境与胰蛋白酶最适,PH,较靠近,第17页,动物细胞培养,植物组织培养,植物细胞全能性,细胞株、细胞系,植物体或组织,取得细胞,或细胞分泌蛋白,快速繁殖、培育无病毒植株等,葡萄糖、动物血清,蔗糖、植物激素,液体培养基,固体培养基,细胞增殖,培养结
7、果,培养目标,培养基特有成份,培养基性质,原理,第18页,(,1,)生产蛋白质生物制品:,病毒疫苗、干扰素、单克隆抗体等。,(,2,),培养健康细胞用于烧伤病人皮肤移植,(,3,)用于检测有毒物质,(,4,)用于生理、病理、药理等方面研究,动物细胞培养应用,第19页,怎样使动物细胞全能性表示出来,?,利用动物细胞核移植技术,第20页,动物核移植:,将动物一个细胞,细胞核,,移入一个已经去掉细胞核,卵母细胞,中,使其重组并发育成一个新胚胎,这个新胚胎,最终发育为动物个体,。分为,胚胎细胞核移植,和,体细胞核移植,(难度高),用核移植方法得到动物。,克隆动物:,记一记,第21页,动物体细胞核移植技
8、术,黑面绵羊去核卵母细胞,白面绵羊乳腺细胞核,重组细胞,动物细胞培养,(或早期胚胎培养),早期胚胎,胚胎移植,另一头绵羊子宫,妊娠、出生,克隆羊多利,细胞核移植,第22页,1,、卵母细胞为减数第二次分裂中期次级卵母细胞,2,、原因?,细胞比较大,易操作,细胞质中含有使体细胞核全能性表示出来物质,3,、克隆过程利用技术伎俩?,动物体细胞核移植、动物细胞培养和胚胎移植,4,、多利大部分性状与谁一样?,白面绵羊,5,、结论?,高度分化体细胞核含有全能性,第23页,克隆动物研究意义,1.,克隆动物作为生物反应器,生产医用蛋白,2.,改良动物品种,3,.,作为异种移植供体,4,.,保护濒危动物,体细胞核
9、移植技术存在问题,1,.,许多克隆动物表现出遗传和生理缺点,,如体型过大,异常肥胖,发育困难,免疫失调等。,2,.,成功率非常低,3,、克隆动物食品安全性问题。,第24页,1,、在动物细胞培养过程中遗传物质发生改变细胞(),A,细胞系,B,细胞株,C,原代细胞,D,传代细胞,2,、动物细胞工程技术基础是(),A.,动物细胞融合,B.,单克隆抗体,C.,胚胎移植,D.,动物细胞培养,A,D,3.,动物细胞培养与植物细胞培养主要区分在于,A.,培养基不一样,B.,动物细胞培养不需要在无菌条件下进行,C.,动物细胞能够传代培养,而植物细胞不能,D.,动物细胞能够大量培养,而植物细胞只能培养成植株。,
10、A,教学反馈,第25页,4,、普通说来,动物细胞体外培养需要满足以下条件(),无毒环境 无菌环境 培养基需要加入血清 温度与动物体温相同 需要,O,2,,不需要,CO,2,CO,2,能调整培养液,PH,A,、,B,、,C,、,D,、,D,第26页,5,、动物细胞培养特点 (),细胞贴壁 有丝分裂 细胞分化 接触抑制 减数分裂 原代培养普通传,1,10,代,A,、,B,、,C,、,D,、,A,第27页,7.,动物细胞培养与植物细胞培养主要区分在于,-,(),A.,培养基不一样;,B.,动物细胞培养不需要在无菌条件下进行;,C.,动物细胞能够传代培养,而植物细胞不能;,D.,动物细胞能够大量培养,
11、而植物细胞只能培养成植株。,A,第28页,8.,关于动物细胞培养相关叙述,正确是,(),A.,细胞癌变发生于原代培养向传代培养过渡过程中,B.,动物细胞培养液中通常含有葡萄糖、氨基酸、,无机盐、生长素和动物血清等,C.,动物细胞培养目标只是取得大量细胞分泌蛋白,D.,动物细胞培养前和培养过程中都要用胰蛋白酶处理,D,第29页,9.,以下哪项不属于体细胞核移植技术应用(),A.,加速家畜遗传改良进程,促进优良畜群繁育,B.,保护濒危物种,C.,取得组织器官异体移植供体,D.,大量产生紫杉醇,D,第30页,10,、下列图是动物细胞培养基本过程示意图。请据此回答:,1,)容器,A,中放置是动物器官或
12、组织。它普通取自,_,。,(,2,)容器,A,中动物器官或组织首先要进行处理是,,然后用,酶处理,这是为了使细胞分散开来,这么做目标是,。,动物胚胎或幼龄动物,剪碎,胰蛋白,使细胞与培养液充分接触,便于培养,第31页,(,3,)培养首先在,B,瓶中进行,瓶中培养基成份有,_,等。在此瓶中培养一段时间后,有许多细胞衰老死亡,这是培养到第,代,到这时培养称为,_,。,(,4,)为了把,B,瓶中细胞分装到,C,瓶中,用,处理,然后配置成,,再分装。,动物血清,10,原代培养,胰蛋白酶,细胞悬液,第32页,再见,第33页,;,;,prz93nsr,还有一些呢,就对哥哥和弟弟说:“咱们不做新了,我去煮点
13、儿稀粥,顺便把中午吃剩下饺子热一热。杂烩菜锅子里也还有一些剩菜呢,也热一热吧。预计差不多够吃了!”耿正说:“不够也没相关系,晚上咱们还要吃月饼瓜果啊!”耿直也说:“是啊,月儿爷爷他老人家不愿意出来接收供奉,但咱得吃!我很在意这八月十五月饼呢!”“唉,你这个小馋猫啊!”耿英说着,就去煮粥做饭去了。耿正到院子里简单地收拾清扫一番,又把李老乡夫妇一早送来新鲜瓜果洗洁净了,和月饼一起摆放在厅房桌子上。耿直则已经在东边卧房内点起一盏油灯。把油灯小心地放在小炕桌上后,他就开始认真地研读哥哥新买那本,论语,了。在晚饭桌上,兄妹三个把中午剩饭菜全部吃完,又喝了一些现煮大米粥。耿英说:“煮粥空档,我已经醒了一小
14、团儿面团,咱明儿个早上得把那些剩馅儿包了。天儿热,放不得呢!”耿正说:“明儿个早上你叫我起来和你一起包吧!”耿直说:“还有我,我也会包呢!”耿英说:“不用你俩早起了,没有多少活儿。我起早点儿先捅开火烧上水,不等水开,也就包完了!”兄妹三人一边说着话,一边就已经把厨房里锅碗盘碟什么都收拾妥当了。然后,耿英吹灭了油灯,大家一起摸黑返回厅房。在这个看不到圆月八月十五夜里,耿正兄妹三人在昏暗中看着摆放在厅房桌子上那些做工精美且散发着香甜美味儿南方月饼和各色南方鲜瓜鲜果,在由衷地感激亲人般李老乡夫妇同时,他们思绪不由地又要退回到离家之后第一个八月十五夜了,不等思绪闸门完全打开,耿正就轻手轻脚地点亮了厅房
15、桌子上那盏尤其明亮大油灯。耿直马上回东边卧房里拿出,论语,,顺手将哥哥正在研读,史记,也拿了出来;耿英则回西边卧房里拿出了正在研读,周礼,。在这个黑漆漆八月十五夜里,兄妹三人各捧着一本书一起坐在那盏明亮油灯下。他们在努力关上那道深切思念远在故乡亲人和再也见不到了面爹爹苦痛之门同时,轻轻地打开了另一扇明亮心灵之窗。这一扇心灵之窗激励着他们以满腔热情不懈进取和努力拼搏!经过这扇明亮窗口,他们翘望到了伟大中华民族之远古文明和灿烂文化,并由此而憧憬着爹爹那个美好梦想,他们忘记了时间,也忘记了手里拿着月饼或瓜果,一直忘情地研读到很晚,很晚,56,第八十六回 捕捉商机巧盈利,|,(儿时期盼过大年,如今变成号角声;灵活经营善调研,捕捉商机巧盈利。)光阴荏苒日月交替。不知不觉之间,金秋结束寒冬也即将过去,新一年已经在向信心百倍高高兴兴经营“兴盛丝绸行”老乡四人招手了!对于耿正兄妹三个来说,尽管那一个又一个春节,早已经,第34页,