围绝经期PFD患者阴道脱落细胞成熟度、E2和25⁃（OH）⁃D与LGR7 mRNA的关系.pdf

围 绝 经 期 PFD 患 者 阴 道 脱 落 细 胞 成 熟 度、E2和25（OH）D与LGR7 mRNA的关系王小燕勾明月李云芳摘要 目的探究围绝经期盆底功能障碍性疾病（PFD）患者阴道脱落细胞成熟度、雌激素（E2）和 25 羟基维生素 D 25（OH）D 与阴道壁松弛素受体（LGR7）信使核糖核酸（mRNA）的关系。方法选取 2020 年 9 月至 2022 年 9 月于廊坊市人民医院就诊的围绝经期 PFD 患者 42 例，围绝经期健康女性 38名，计算阴道脱落细胞成熟指数，检测血清 E2、25（OH）D 水平以及阴道壁组织 LGR7 mRNA 相对表达量，分析 LGR7 mRNA 与其余指标的相关性。结果观察组绝经率、盆底肌静息肌电值、合并阴道炎率、LGR7 mRNA 表达水平高于对照组，盆底肌最大收缩力、持续收缩力、阴道脱落细胞成熟度、E2和25（OH）D 水平低于对照组，差异均有统计学意义（P0.05）；阴道脱落细胞成熟度、E2和 25（OH）D 均与盆底肌力呈正相关（P0.05），LGR7 mRNA 与盆底肌力，阴道脱落细胞成熟度、E2和 25（OH）D 与LGR7 mRNA 呈负相关（P0.05）；阴道脱落细胞成熟度、E2、25（OH）D、LGR7 mRNA 的曲线下面积分别为 0.918、0.919、0.898、0.858（P0.05）；阴道脱落细胞成熟度58.95%、E265.76 pmol/L、25（OH）D0.58 为围绝经期 PFD 的危险因素（P0.05）。结论围绝经期 PFD 患者阴道脱落细胞成熟度、E2和 25（OH）D 与 LGR7 mRNA 呈负相关，上述指标均对 PFD 的诊断具有一定参考价值。关键词 盆底功能障碍性疾病；围绝经期；阴道脱落细胞成熟度；雌激素；25 羟基维生素 D；松弛素受体Relationship of vaginal exfoliated cell maturity，E2and 25（OH）D with LGR7 mRNA inpatients with perimenopausal PFDWANG Xiaoyan，GOU Mingyue，LI Yunfang（Department of Gynecology，Langfang Peoples Hospital，Langfang，Hebei，China，065000）ABSTRACT ObjectiveTo explore the relationship of maturity of vaginal exfoliated cell，estrogen（E2）and 25hydroxyvitamin D25（OH）Dwith vaginal wall relaxin receptor（LGR7）messenger ribonucleicacid（mRNA）in patients with perimenopausal pelvic floor dysfunction（PFD）.Methods42 patients with perimenopausal PFD who came to Langfang Peoples Hospital for treatment and 38 perimenopausal healthy womenwere selected between September 2020 and September 2022.The maturity index of vaginal exfoliated cell wascalculated，and the levels of serum E2and 25（OH）D and relative expression level of LGR7 mRNA in vaginalwall tissue were detected，and the correlation between LGR7 mRNA and other indicators was analyzed.ResultsThe menopause rate，resting electromyography value of pelvic floor muscle，vaginitis rate and expression level of LGR7 mRNA in the observation group were higher than those in the control group while the maximum contractile force and continuous contractile force of pelvic floor muscle，maturity of vaginal exfoliatedcell and levels of E2and 25（OH）D were lower than those in the control group（P0.05）.The maturity of vaginal exfoliated cell，E2and 25（OH）D were positively correlated with pelvic floor muscle strength，and theLGR7 mRNA was negatively correlated with pelvic floor muscle strength and the maturity of vaginal exfoliated 1112分子诊断与治疗杂志2023年7月第15卷第7期J Mol Diagn Ther,July 2023,Vol.15No.7cell，E2and 25（OH）D were also negatively correlated with LGR7 mRNA（P0.05）.The areas under thecurves of vaginal exfoliated cell maturity，E2，25（OH）D and LGR7 mRNA were 0.918，0.919，0.898 and0.858 respectively（P0.05）.The maturity of vaginal exfoliated cell 58.95%，E265.76 pmol/L，25（OH）D 0.58 were the risk factors of perimenopausal PFD（P45 岁，绝经时间12 个月；经盆底功能筛查，且符合盆腔器官脱垂、压力性尿失禁等 PFD 诊断标准患者7；患者签署知情同意书。排除标准：合并心、肝、肾功能不全患者；合并恶性肿瘤或其他脏器严重疾病患者；合并精神系统疾病患者；临床资料不全患者。将符合纳入、排除标准的 42 例围绝经期 PFD 患者设为观察组，另纳入同期健康体检围绝经期女性 38 名作为对照组。本研究经医院伦理委员会批准。1.2方法1.2.1资料收集收集并比较两组患者年龄、身体质量指数（Body Mass Index，BMI）、月经情况、盆底肌力指标、分娩情况、合并阴道炎、合并基础疾病等临床资料。1.2.2阴道脱落细胞成熟度采用无菌棉拭子收集两组患者阴道侧壁上 1/3处粘膜样本，涂抹于干净玻片，并用 95%乙醇固定，采用巴氏染色，显微镜下计数表层细胞百分比。1.2.3性激素和 25（OH）D 水平检测收集两组空腹静脉血 3 mL，静置 2 h 后，3 000rpm 离心 20 min 收集血清（离心半径 13.5 cm），检测 E2水平和 25（OH）D 水平。1.2.4实 时 荧 光 定 量 PCR 检 测 阴 道 壁 LGR7mRNA 水平收集两组阴道壁粘膜组织，大小约为 1055mm3，提取组织总 RNA（天根），经紫外分光光度计检测 RNA 浓度、纯度后逆转录为 cDNA，采用试剂盒（Takara）配置 PCR 体系，在 PCR 仪上进行扩增，以 GAPDH 为 内 参 计 算 LGR7 mRNA 相对 表 达 水平，LGR7 引物序列：F5 TCAAACTCAAGTCTCTCAGCCT3；R5 GCGAACATGTGGTGCATACC3。1.3统计学方法采用 SPSS 24.0 软件进行统计学分析，计量资料以（xs）表示，组间比较用独立样本 t 检验，计数资料以 n（%）表示，采用c2检验或 Fisher精确概率计算，Pearson 相关系数分析阴道脱落细胞成熟度、性激素和 25 羟基维生素 D 水平变化及与阴道壁LGR7 mRNA 水平的相关性，ROC 曲线分析上述指标对 PFD 的诊断价值，并采用二元 Logistic 方程多因素分析，以P0.05），观察组绝经率、盆底肌静息肌电值、合并阴道炎率均高于对照组，盆底肌最大收缩力、持续收缩力低于对照组，差异有统计学意义（P0.05）。见表 1。2.2两组阴道脱落细胞成熟度、E2和 25（OH）D、阴道壁 LGR7 mRNA 水平比较观察组阴道脱落细胞成熟度、E2和 25（OH）D水平低于对照组，LGR7 mRNA 表达水平高于对照组，差异有统计学意义（P0.05）。见表 2。2.3阴道脱落细胞成熟度、E2和 25（OH）D、阴道壁LGR7 mRNA水平与盆底肌力指标的相关性分析Pearson 相关性分析结果显示，阴道脱落细胞成熟度、E2和 25（OH）D 水平均与盆底肌力呈正相关（P0.05），阴道壁 LGR7 mRNA 水平与盆底肌力呈负相关（P0.05）。见表 3。2.4阴道脱落细胞成熟度、E2和 25（OH）D 水平与阴道壁 LGR7 mRNA 的相关性分析Pearson 相关性分析结果显示，阴道脱落细胞成熟度、E2和 25（OH）D 水平均与阴道壁 LGR7mRNA 表达水平呈负相关（P0.05）。见表 4。2.5阴道脱落细胞成熟度、E2和 25（OH）D 水平及阴道壁 LGR7 mRNA 水平对围绝经期 PFD 的预测价值ROC 曲线分析结果显示，阴道脱落细胞成熟度、E2和 25（OH）D、LGR7 mRNA 的曲线下面积分别为 0.918（95%CI，0.8600.977）、0.919（95%CI，0.8590.979）、0.898（95%CI，0.8320.965）、0.858（95%CI，0.77800.937）（P0.05）。见图 1。2.6围绝经期 PFD 的多因素分析Logistic 回归分析结果显示，阴道脱落细胞成熟度58.95%、E265.76 pmol/L、25（OH）D0.58 均为围绝经期 PFD 的危险因素（P0.05）。见表 5。项目年龄（岁）BMI（kg/m2）月经情况绝经月经规律月经不规律分娩情况阴道分娩剖宫产未分娩盆底肌力指标静息肌电值（ms）最大收缩力（N）持续收缩力（N）合并阴道炎合并高血压病合并糖尿病合并高脂血症观察组（n=42）51.843.7522.581.0918（42.86）a10（22.81）14（33.33）23（54.76）11（26.19）8（19.05）27.326.1346.547.9332.068.5614（33.33）7（16.67）6（14.29）9（21.43）对照组（n=38）50.834.5222.971.519（23.68）19（50.00）10（26.32）25（65.79）7（18.42）6（15.79）13.023.2583.6811.5076.5210.482（5.26）5（13.51）6（15.79）4（10.53）t/c2值1.0911.3346.32751.06112.83516.94920.8619.8250.1520.0351.742P 值0.2780.1860.0430.5880.0010.0010.0010.0020.6970.8510.187表 1两组一般资料比较（xs），n（%）Table 1Comparison of general data between the two groups（xs），n（%）注：与对照组比较，aP0.05。组别观察组对照组t 值c2值n4238阴道脱落细胞成熟度（%）48.4711.5069.998.079.5920.001E2（pmol/L）52.0212.3679.7315.188.9880.00125（OH）D（g/L）26.127.1337.716.257.6960.001LGR7mRNA0.640.070.540.066.8250.001表 2两组阴道脱落细胞成熟度、E2和 25（OH）D、阴道壁LGR7 mRNA 水平比较（xs）Table 2Comparison of vaginal exfoliated cell maturity，E2and 25（OH）D and vaginal wall LGR7 mRNA levelbetween the two groups（xs）项目静息肌电值最大收缩力持续收缩力阴道脱落细胞成熟度r 值0.7280.8340.701P 值0.0010.0010.001E2r 值0.6240.6830.715P 值0.0010.0010.00125（OH）Dr 值0.7690.6810.694P 值0.0010.0010.001LGR7 mRNAr 值0.6580.6290.541P 值0.0010.0010.001表 3阴道脱落细胞成熟度、E2和 25（OH）D、阴道壁LGR7 mRNA 水平与盆底肌力指标的相关性分析Table 3Correlation of vaginal exfoliated cell maturity，E2，25（OH）D and vaginal wall LGR7 mRNA level with pelvicfloor muscle strength indicators项目阴道脱落细胞成熟度E225（OH）DLGR7 mRNAr 值-0.745-0.634-0.590P 值0.0010.0010.001表 4阴道脱落细胞成熟度、E2和 25（OH）D 水平与阴道壁 LGR7 mRNA 的相关性分析Table 4Correlation of vaginal exfoliated cell maturity，E2and 25（OH）D with vaginal wall LGR7 mRNA 1114分子诊断与治疗杂志2023年7月第15卷第7期J Mol Diagn Ther,July 2023,Vol.15No.700.20.40.60.81.01特异性1.00.80.60.40.2敏感度阴道脱落细胞成熟度雌激素维生素 D参考线1.00.80.60.40.2敏感度00.20.40.60.81.01特异性LGR7 mRNA图 1ROC 曲线分析图Figure 1ROC curve analysis因素阴道脱落细胞成熟度58.95%E265.76 pmol/L25（OH）D0.58b值2.6832.7933.6281.503SE 值1.1120.8651.3590.728Waldc2值5.81510.4277.1264.262OR 值14.62616.33437.6374.49595%CI1.653129.4442.99889.0052.623540.0501.07918.725P 值0.0160.0010.0080.040表 5围绝经期 PFD 的多因素分析Table 5Multivariate analysis of perimenopausal PFD3讨论围绝经期妇女发生PFD受到多种因素影响。本研究中发生PFD的围绝经期妇女绝经率和合并阴道炎率均高于未发生 PFD 妇女，与李建华等8研究大致相同。既往研究表明，肥胖是女性发生压力性尿失禁的危险因素9，本研究并未观察到两组患者BMI 存在显著差异，考虑是由于样本量较小造成。盆底肌肉的主要功能是承托尿道、膀胱、子宫、阴道、直肠等腹部脏器，防止脱垂，肌肉和胶原蛋白对盆底肌肉的支持作用是不可或缺的。随着年龄增加，围绝经期妇女雌激素缺乏以及肌肉、组织老化严重影响着盆底功能10。围绝经期雌激素水平降低与发生更年期泌尿生殖系统综合征相关，亦有研究在绝经期盆腔器官脱垂患者中观察到雌激素受体表达水平降低11。本研究发现，围绝经期 PFD 患者阴道脱落细胞成熟度、血清E2水平低于未发生PFD的围绝经期妇女，且两者与盆底肌力呈正相关，二者对PFD 均具有一定预测价值。分析原因，雌激素促进阴道粘膜增生，围绝经期女性卵巢功能逐渐衰退，E2分泌减少，出现阴道粘膜增生减缓和盆底功能障碍，故雌激素水平在 PFD 中发挥重要作用。本研究结果表明阴道脱落细胞成熟度、血清 E2水平可能对围绝经期妇女PFD诊断具有一定参考价值。维生素 D 水平与肌肉力量、神经肌肉功能和姿势稳定性显著相关，中老年妇女更加容易缺乏维生素 D，而 25（OH）D 是人体内维生素 D 的主要存在形式。Ghanbari 等12研究发现患有 PFD 的女性血清维生素 D 水平低于健康女性。本研究中围绝经期 PFD 患者血清 25（OH）D 水平低于未发生 PFD 的围绝经期妇女，且与盆底肌力呈正相关，其曲线下面积为 0.898，cutoff 值为 28.19 g/L。Legan 等13认为 25（OH）D50 nmol/L 的绝经妇女患盆腔器官脱垂的风险更高，表明 25（OH）D可作为围绝经期妇女 PFD 诊疗的参考指标。笔者认为，25（OH）D 广泛存在于肌肉和内脏平滑肌中，影响肌肉力量，围绝经期 PFD 妇女 25（OH）D 合成减少，通过与维生素 D 受体结合对肌肉产生促进收缩的作用降低，因而盆底肌力降低，发生PFD。松弛素能促进胶原代谢，因而对骨盆韧带具有软化作用，既往研究表明，盆腔器官脱垂患者松弛素水平升高14。松弛素通过与其受体 LGR7 结合发挥作用，郑颖等15发现妊娠期压力性尿失禁患者血清松弛素水平以及阴道壁 LGR7 表达水平均升高。本研究观察到，围绝经期 PFD 患者阴道壁 LGR7 mRNA 相对表达水平高于未发生 PFD 的围绝经期妇女，与盆底肌力呈负相关，曲线下面积为 0.858，cutoff 值 为 0.58，且 阴 道 脱 落 细 胞 成熟 度、E2和 25（OH）D 水平均与阴道壁 LGR7mRNA 表达水平呈负相关，Logistic 分析结果显示阴道脱落细胞成熟度58.95%、E265.76 pmol/L、25（OH）D0.58 均是围绝经期盆底功能障碍的危险因素。分析原因，LGR7 能够促进胶原降解，阴道壁 LGR7 mRNA 表达水平上调会导致阴道壁软化，对膀胱、子宫等盆腔器官的支撑作用减弱，因而出现 PFD。综上所述，围绝经期 PFD 患者阴道脱落细胞成熟度、E2和 25（OH）D 与 LGR7 mRNA 呈负相关，上述均对盆底功能障碍的诊断具有一定参考价值。参考文献1Dumoulin C，Pazzoto CL，Mercier J.Keeping the pelvicfloor healthy J.Climacteric，2019，22（3）：257262.（下转第 1120 页）1115分子诊断与治疗杂志2023年7月第15卷第7期J Mol Diagn Ther,July 2023,Vol.15No.7性药物指导，或者将降尿酸药物与生活方式指导相结合，从生活习惯、饮食习惯和运动锻炼多方面着手，控制致病的危险因素，结合心理、生理与社会管理，从而控制代谢水平13。综上所述，应用多元化管理模式能够帮助改善糖脂代谢及 UA、Hcy 水平，提高疾病认知水平，有利于病情的控制效果，值得临床推广应用。参考文献1李政玲，李秀婷.连续护理对痛风与高尿酸血症患者自我管理能力及生活质量影响J.现代中西医结合杂志，2018，27（17）：19311933.2陶爱平，高振奇，陈东芳，等.社区健康管理联合非布司他片治疗社区高尿酸血症疗效观察 J.贵州医药，2020，44（8）：12351237.3陈美荷，朱冬红.高尿酸血症患者采用非布司他片联合饮食运动干预的效果分析 J.中国药物与临床，2019，19（23）：42294231.4中华医学会，中华医学会杂志社，中华医学会全科医学分会，等.痛风及高尿酸血症基层诊疗指南（2019 年）J.中华全科医师杂志，2020，19（4）：293303.5中华医学会内分泌学分会.高尿酸血症和痛风治疗的中国专家共识 J.中华内分泌代谢杂志，2013，29（11）：913920.6李会仿，朱雪梅，马晓波，等.高尿酸血症及痛风患者饮食控制知信行量表的编制及验证 J.护理学杂志，2018，33（3）：3135.7Yang Y，Piao W，Huang K，et al.Dietary Pattern Associatedwith the Risk of Hyperuricemia in Chinese Elderly：Resultfrom China Nutrition and Health Surveillance 20152017 J.Nutrients，2022，17；14（4）：844.8曹利娟，陈仕鹏，谢瑞杰，等.临床药师干预对痛风患者疾病认知水平，用药情况和治疗效果的影响 J.广西医学，2021，43（16）：19451948.9Sun ZR，Liu HR，Hu D，et al.Ellagic Acid 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