热板法镇痛试验.doc

授课纲要
热板法镇痛实验
Analgesic experiments with hot plate method

一、实验目的
1. 掌握镇痛药的实验法;
2. 观察麻醉性镇痛药哌替啶（dolantin 杜冷丁）与非麻醉性镇痛药罗通定（rotundine）的镇痛效应。

二、实验原理
疼痛(pain) 伤害性刺激所引起的情绪反应、行为反应以及生理功能障碍，是许多疾病的症状，是机体受到不良刺激或损害的一种信号和反应。

锐痛和钝痛。

疼痛模型
1.热刺激模型
2.机械刺激模型
3.电刺激模型
2.3.4 化学刺激模型

热刺激、机械刺激及电刺激致痛模型均适用于筛选麻醉性镇痛药－与锐痛接近
化学刺激致痛模型（扭体法）适用于筛选解热镇痛药－与钝痛接近。

热板法的特点：
1.仪器装置简单，反应灵敏，指标明确。
2.对组织损伤小，可反复利用动物。
3.痛反应潜伏期长，利于比较药物镇痛作用的强弱、快慢、持续时间。
4.主要用于筛选麻醉性镇痛药，并不适用于筛选解热镇痛药，后者可使用化学性致痛模型进行评价。

镇痛药(analgesics)的定义和分类
1.麻醉性镇痛药-依赖性和成瘾。
2.非麻醉性镇痛药-包括中枢性和周围性两类，如NSAIDs。

哌替啶（dolantin 杜冷丁）
1.合成品，吗啡代用品,较吗啡的成瘾性轻;
2.作用于中枢神经系统的阿片受体而发挥作用;
3.镇痛效力约比吗啡弱(1/10~1／8) ，持续时间也比吗啡短（ 0.5hr-2.5hr）。

罗通定（rotundine）
1.结构为四氢巴马汀;
2.镇痛作用比dolantin弱，无成瘾性。
3.阻断脑内DA受体，增加与痛觉有关的特定脑区脑啡肽原和内啡肽原的mRNA表达，促进脑啡肽和内啡肽的释放®镇痛作用。

三、实验材料和方法
1. 实验材料 雌性小鼠；超级恒温器；2.5g/L dolantin，2.5g/L rotundine sulfate，生理盐水（NS） 。
2. 实验方法 将小鼠置于一定温度的热板上，热刺激小鼠足部产生痛反应，即舔足反应。以小鼠出现舔足的时间作用为痛反应指标，判断药物是否具有镇痛作用。

实验步骤
1. 预选动物：将小鼠置于热板仪内，温度55±0.5℃，测定小鼠的痛阈值，测2次，间隔5min，以小鼠舔后足作为观察指标。预选30s内出现痛反应的小鼠。
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2. 分组及给药：取预选合格的小鼠，随机分为三组。
A组－i.p. dolantin 25mg/kg (2.5g/L, 0.1ml/10g)
B组－i.p. rotundine 25mg/kg (2.5g/L, 0.1ml/10g)
C组－ i.p.生理盐水（0.1ml/10g）
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3. 痛阈测定: 给药后15、 30 、 60min测定，若小鼠60s内无痛反应，立即取出，按60s计算。

4．痛阈计算：实验完毕，计算各给药组的用药前后各次的小鼠热痛反应时间(痛阈值)的平均值，计算痛阈提高百分率。

图1 杜冷丁、罗通定、生理盐水对小鼠痛阈值的影响

四、实验注意事项
1. 用雌性小鼠，痛阈反应时间超过60s应立即取出以免烫伤足部;
2. 室温以15℃左右为宜，过低反应迟钝，过高则敏感。

五、思考题：
1. 比较镇痛药和解热镇痛药的镇痛作用，作用机制和临床应用。