1、单击此处编辑母版标题样式,单击此处编辑母版文本样式,第二级,第三级,第四级,第五级,*,单击此处编辑母版标题样式,单击此处编辑母版文本样式,第二级,第三级,第四级,第五级,*,单击此处编辑母版标题样式,单击此处编辑母版文本样式,第二级,第三级,第四级,第五级,*,培养液中酵母菌种群数量的变化,探究:,1,基 础 回 扣,1,、酵母菌,酵母菌是单细胞真核生物。,生长周期短,增殖速度快,,还可以用酵母菌作为实验材料研究,(探究酵母菌的呼吸方式,判断细胞的死活探究膜的透性),2,2,、种群数量的变化,种群数量的变化包括增长、波动、稳定、下降等,“,S,”,型曲线有一个,K,值,即环境容纳量。,种群数
2、量的增长也受到许多环境因素(如温度、培养液的,pH,、培养液的养分种类和浓度、代谢产物等)的影响。,3,探究过程,1,提出问题:,2,作出假设:,3,设计实验:,4,进行实验:,5,分析结果和,表达交流:,6,得出结论:,培养液中酵母菌种群的数量是怎样随时间变化的?,酵母菌在开始一段时间呈,“,J,”,型增长,随着时间的推移,由于资源和空间有限,呈,“,S,”,型增长。,连续培养,5,天,每天用显微镜和血球计数板计数出酵母菌种群密度,各小组汇报实验结果,结合前,4,天的结果,画出酵母种群增长的,曲线图,并进行分析。,酵母菌在开始一段时间呈,“,J,”,型增长,但随着时间的推移,由于资源和空间有
3、限,将呈,“,S,”,型增长,并最终将全部死亡。,4,3,设计实验:,将,10mL,无菌马铃薯培养液或肉汤培养液加入试管中;,将酵母菌接种入试管中的培养液中混合均匀;,将试管在,28,条件下连续培养,5d,;,每天取样计数酵母菌数量;,分析结果,得出结论。,是否设置对照组和多组重复实验?,如何取样计数,?,记录表怎样设计,?,计数时有哪些注意事项,?,5,计数室,计数室(中间大方格)的长和宽各为,1mm,,深度为,0.1mm,,其体积为,_mm,3,,合,_mL,。,1mm,0.1,110,-4,血球计数板,:,一种专门计数较大单细胞微生物的仪器,6,计数室,计数室分为,25,中格,(,双线边
4、,),每一中格又分为,16,小格,计数室是由,_,个小格组成,2516=400,7,如何计数?,五点取样法,样方法,每,mL,培养液中酵母菌数量,=,=,A,(,平均每个中格酵母细胞数,),2510,4,稀释倍数,A1,A2,A5,A3,A4,8,第,1,天,9,第,4,天,第,6,天,10,第,7,天,死亡,11,酵母菌数量变化记录表,12,计数时有哪些注意事项?,从试管中吸出培养液进行计数之前,要将试管,轻轻震荡几次,;,如果酵母菌浓度过大,应先,稀释,。,对于压在中格界线上的酵母菌,一般只取,相邻两边及夹角,计数;,对于已经出芽的酵母菌,,芽体达到母细胞大小一半,时,即可作为两个菌体计算
5、;,已死亡的酵母菌不计数,。,每个样品一般计数三次,取其,平均值,。,13,培养液中酵母菌种群数量的变化,14,15,死亡,16,在计数前,还应有哪些步骤?需注意些什么?,培养液配制,灭菌,接种,培养,无菌操作,培养条件,17,试管编号,培养液,/mL,无菌水,/mL,酵母菌母液,/mL,温度(),A,10,0.1,28,B,10,0.1,5,C,10,0.1,28,针对,“,培养液中酵母菌种群数量的动态变化,”,,有人提出了新的问题,某同学按下表完成了有关实验。,18,温度、营养物质对酵母菌生长的影响,19,试管编号,培养液,/mL,无菌水,/mL,酵母菌母液,/mL,温度(),A,10,0
6、.1,28,B,10,0.1,5,C,10,0.1,28,20,以计数酵母菌为例,(1),用血球计数板计数酵母菌悬液的酵母菌个数,.(2),样品稀释的目的是便于酵母菌悬液的计数,以每小方格内含有,4-5,个酵母细胞为宜,一般稀释,10,倍即可,.(3),将血球计数板用擦镜纸擦净,在中央的计数室上加盖专用的厚玻片,.(4),将稀释后的酵母菌悬液,用吸管吸取一滴置于盖玻片的边缘,使菌液缓缓渗入,多余的菌液用吸水纸吸取,捎待片刻,使酵母菌全部沉降到血球计数室内,.,血球计数板的使用,21,22,(5),计数时,如果使用,16,格,25,格规格的计数室,要按对角线位,取左上,右上,左下,右下,4,个中
7、格,(,即,100,个小格,),的酵母菌数,.,如果规格为,25,格,16,格的计数板,除了取其,4,个对角方位外,还需再数中央的一个中格,(,即,80,个小方格,),的酵母菌数,.(6),当遇到位于大格线上的酵母菌,一般只计数大方格的上方和左方线上的酵母细胞,(7),对每个样品计数三次,取其平均值,按下列公式计算每,1ml,菌液中所含的酵母菌个数,.,23,3.,计算公式,(1)16,格,25,格的血球计数板计算公式,:,酵母细胞数,/ml=,100,小格内酵母细胞个数,/10040010,4,稀释倍数,(2)25,格,x16,格的血球计数板计算公式,:,酵母细胞数,/ml=,80,小格内酵
8、母细胞个数,/8040010,4,稀释倍数,24,怎样进行酵母菌的计数?,对一支试管中的培养液,(,可定为,10ml),中的酵母菌逐个计数是非常困难的,可以采用抽样检测的方法:先将盖玻片放在计数室上,用吸管吸取培养液,滴于盖玻片边缘,让培养液自行渗入,多余培养液用滤纸吸去,稍待片刻,待酵母菌细胞全部沉降到计数室底部,将计数板放在载物台的中央,计数一个小方格内的酵母菌数量,再以此为根据,估算计算中的酵母菌总数,盖玻片下,培养液厚度为,0.1mm,,可算出,10ml,培养液中酵母菌总数的公式:,2.510,4,x(x,为小方格内酵母菌数,),25,从试管中吸出培养液进行计数之前,建议你将试管轻轻振
9、荡几次。这是为什么?,本探究需要设置对照吗?如果需要请讨论对照组应怎样设计和操作;如果不需要,请说明理由。,需要做重复实验吗?,目的是使培养液中的酵母菌均匀分布,以保证估算的准确性,减少误差,。,不需要,本实验旨在探究培养液中酵母菌在一定条件下的种群数量变化,只要分组实验,获得平均数值即可。,不用重复,只要分组实验获得平均值即可。,26,5,、,怎样记录结果?记录表怎样设计?,如果一个小方格内酵母菌过多,难以计数,应采取怎样的措施?,第,1,天,第,2,天,第,3,天,第,4,天,第,5,天,第,6,天,第,7,天,第,1,组,第,2,组,第,3,组,-,第,n,组,平均值,摇匀试管取,1mL
10、,酵母菌培养液稀释,n,倍后,再用血球计数板计数,,所得数值,乘以,n2.510,4,,即为,10mL,酵母菌液中酵母菌个数。,只计数相邻两边及其顶角的酵母菌数。,7,对于压在小方格界线上的酵母菌,应当怎样计数?,27,设计实验:,A,组为实验组,装培养液,10 mL,,酵母菌母液,0.1mL,环境温度,28,。,B,组装培养液,10 mL,,酵母菌母液,0.1mL,环境温度,5,,与,A,组形成温度条件对照。,C,组不装培养液,只装无菌水,10mL,酵母菌母液,0.1mL,环境温度,28,,与,A,组形成营养条件对照。,28,计数,计数:首先取样,每 天取样时间大体一致,并要遵守无菌操作规范。,每次取样前要试管振荡摇匀,,正确地使用,1mL,刻度吸管将,lmL,酵母菌培养液移入,1,支干净的试管里,然后,用滴管吸取,1,滴培养液滴在已盖在血球计数板网格上的盖玻片的边缘,待培养液自行渗入并充满网格后,,再放在显微镜下进行细胞计数,后立即将数据填到记录表格中。如 记数时发现,细胞数较多,不易分辨,吸取的样液应当稀释。,参考,1,:一次实验数据记录表,参考,2,:出,A,、,B,、,C,各个处理的曲线图,29,30,