门脉高压性胃粘膜损害出血的细胞动力学.pdf

，6 6 2 2 6 6 第 四军 压大 学 学报(J F 0 u r t h Mi l i t M e d Ua i r)l 9 9 7 I 1 8(3)门脉高压性胃粘膜损害出血的细胞动力学 武永忠 何泽生 吴全生 马庆大(第四军医大学唐都医脘普通外科西安 7 1 0 o 3 8)，_一 一 摘l目的：探讨 肝硬变门欲高压性 膏粘嚷损害出血的机制方 法：应用放射 自显影技术观寨肝硬变门脉 高压(L C-P HT)大 鼠在饥饿 1 2 3 6 h后 的 胃牯膜上皮细胞标 记指弦(L 1)变化及其 与 粘膜 出血 的关系精 暴：L C P HT 鼠平均 L I 低于对 照 0 0 5)出血灶局部 L I 低于周 围相 对正常 粘膜(P0 0 5)随饥 饿持续时问延长 u 呈 降低趋势，而 出血 率及严 重程 度呈增 加趋势，尤以严重程度增 加为著 当出血为 0 3 缀时 与 L I 呈显著 负 相 关(r 一 一0 7 0 8，P 0 0 5)精论；大鼠 胃粘膜损害 及出血的发生与牯膜 上皮细胞增殖 活性有 关，L C P HT 鼠牯 膜上皮细胞 增殖 活性 明显降低，可 能是其 暑发 严重损 害及出的重要原周 美-词!脉 高 压三 苎 苎皇 兰 兰 竺!放 射 自 王 影走 置 门拜，a 北 ，中 圈 号 R 6 5 7 3 艮 7 2 手 心 7 3 Cy t o k i n e t i c s t u d i e s o n h e mo r r h a g i c l e s i o n s o f g a s t r i c mu c o s a i n r a t s wi t h l i v e r c i r r h o s i s a n d p o r t a l h y p e r t e n s i 0 n Wu Yo n g z h o n g，H e Ze s h e n g，W u d i n s h e n g，M a g fiu D e p a r t me n t o f Ge n e r a l S u r g e r yTa n g d u Ho s p i t a l，F o u r t h M i l i t a r y M e d i c a l Un i v e r s i t y Xra n 7 1 0 0 3 8 A b s t r a c t 0 b J e c t t v e l I n o r d e r t o d l c o v e r t h e me c h a n i s m o f g a s t r i c mu c o s a l h e mo r r h a g e i n p o r t a l h y p e r t e n s i o n Me t l d s：Th e t e c h ni q u e s o f a u t o r a d i o g r a p h y We r e e mp l o y e d t o r e s e a r c h t h e c T c o k i n e t i c s o f g a s t r i c mu-c 0 3 a i n r a t s wi t h 1 i v e r c i r r h o s i s a n d p o r l a l h y p e r t e n s i o n(LC P HT)1 2 3 6 h a f t e r s t a r v a t i o n Re s u l t s：(1)H-r dR l a b e l l ing i n d e x(LI)o f g a s t r i cn e D s a i n I，c PHT r a t s Wa S l o we r t h a n t h a t in c o n t r o l s(尸 0 0 5)U i n h e mo r r hg i c p o s i t io n wa ft a l s o l o we r t h a n t h a t i n n e a r p o s i ti o n f P 0 0 5)(2)Wi t h t h e e x t e n s i o n o f s t a r v e d d u r a t i o n t i me，t h e r a t e a n d s e v e r l t y o f h e mo r r h a g i c l e s i o n s i n L C P HT r a t s Wa S i n c r e a s e d mo r e t h a n t h a t i n c o n t r o l s a n d LI i n LC PHT r a t s Wa B d e r e a s v d mo r e t h a n t h a t i n c o n t r o l s 0 0 1)(3)Th e r e Wa s 日 r e l a t i o n s h i p b e t we e n LI a n d S e v e r i t y o f h e mo r r h a g i c l e s i o n s L1 c o r r e l a t e d n e g a t i v e l y wi t h t h e s e v e r i t y f r o m O 3 d e gae e(r 一 一0 7 0 8，尸 O 0 5)，Co D c l u l o n：Th e z e s q l t s s u g g e s t t h a t t h e l o we r l e v e l o f g a s t r i c mu c o 舯 LI LC PHT r a t s mi g h t r e n d e r t h e g a s t r i c mu o s B mo r e s u s c e p t i b l e t o i n j u r i o u s a g e n t s a n d h e mo r r h a g i a，ge y w o r d s l i v e r c i r r h o s p o r t a l h y pe r t e n s i o n g a s t r i c mu c o s a h e mo r r h a g i c l e s i o n s a u t o r a d i o g r a p h y ra ts -上消化道出血是肝硬变 门脉高压(L C P HT)患 者 的 主要 致 死 性 并发 症，出血原 因 除 曲张 静 脉 破 裂 外，胃粘 膜 损 害 被 认 为 是 又 一 个 重 要 原 因_ 1 3 为 探讨 其 发病 机制，我 们 采 用 体外。H T d R单 标 记微 观放 射 自显 影 技术 观 察 了 L C P HT 大鼠 胃粘膜上皮细胞增殖动力 学改变及其 与胃牯 膜 损害 出血 的关系 1 材料 和方 法 1 1 L C-P HT 模 型 制 备 8 5只 雄 性 S D 大 武永毫，男，3 2岁主请医师，磺 士 鼠(本校实验 动物研究中心提供)，体重(1 6 6，6 4 3 1 2 0)g，分 为 L C-p HT 组(6 0只)和 对照 组(2 5 只)用 3 建代乙酰胺(t h i o a c e t a mi d e，T AA，化 学 纯，购 自中 国医药 公 司北 京采 供 站)，按 每 1 0 0 g体重腹部皮下注射 5mg制备 L C P HT模型，对 照腹 部皮下 模 拟注 射蒸 馏水L C P HT 又 分为 L C P H TI(注药 4 5 d)和 L C P HT I(注药 6 5 d)两 组 I 2胃粘膜 出血诱导度观察分别于注药后 4 5 d 和 6 5 d，用 饥 饿 诱 导 法 制 备 大 鼠 胃粘 膜 出 血 模 型I s 玻璃水柱测压法测门静脉压力(P VP)，并换 算 为 k P a表 示 移 出全 胃，观 察 出血 灶形 态 大 小 维普资讯 http:/ 第 四 军 医大 学 学 报(J F0 u r t h Mi l i t M e d Un i v)1 9 9 7 l 1 8(3 及 数 目切 取 胃粘 膜 约 1 c m1 c m 贴封 于 载玻 片 置光 镜下(5 X1 0)观 察粘 膜 血 管形态 及其 与 出血 灶 形 态 的 关 系 另 切 取 出 血 局 部 和 周 围 相 对 正 常 粘 膜 处 以及 无 出 血 鼠的 胃窦 和 胃体 处 包 括 胃壁 全 层 的组 织 块 各 约 0 5 c m 0 5 c m，行。H T d R 单 标 记 1 3 放 射 自昱 彰 制 备 _ 6 取 材 后 放 于 RP MI 一 1 6 4 0(S i g ma)培 养 液 中，加 入。H Td R(比放 射 性 6 6 6 X1 0”B q n mo l，中 国原 子 能科 学 研 究 院)使 其 浓 度 为 3 7 X1 0 B q ml，p H 7 2 7 4，3 7 恒 温 水 浴 搅 拌 孵 育 6 0 rai n后，c a r n o y 液 固 定 2 O mi n，常 规 石 蜡 切 片，暗 室 中 涂 L 一 4液 体 核 乳 胶(中 国原 子 能 研 究 院)，室 温 下 避 光 凉 干，置 暗盒 内曝 光 两 周(4)显 影 定 影 处 理 后 常 规 HE 染 色光 镜 下 阅 片 行 组 织 学 观察、形 态 测 量 及 标 记 细胞 计 数，按 下式 计 算 胃粘 膜 上 皮 细 胞 标 记 指 数(LI)u=X 1 0 0 甭 面百甄 表 1 肝 功能指标及 P V P检 结果 Ta b 1 Th e r e s u l t s o f h e p a t i c f u n c t i o n s a n d PVP 1 4统 计 学 处理出血 率 用 检 验，其 他指 标 行 t 检验 LI 与 出血严 重 程 度 间作相 关 分析 2 结 果 2 1 L C P HT 模型 厦 胃粘膜 出血性 损 害模 型 的复 制 结果L C P HT 鼠于 注药 后 4 5 d和 6 5 d，见 肝 脏 明 显 肿 胀，表 面 有 大 小 不 等 细 结 节，门 脉 主 干 增粗，胃周 血 管 迂 曲扩张，以 L C P HTl鼠更 明 显并 有 胃肠 道 淤 血水 肿 和 腹 水 形 成 组 织 学检 查 有肝 细 胞 灶 性 坏 死 及 假 小 叶 形 成 胃粘 膜 出血 以 胃体 部 为 主，L C P HT 鼠 出血 率 及 严 重 程 度 大 于 对 照(9 1 1 8 s 4 3 7 5 ，P 0 0 1，及 2 2 8 5 土 0 1 9 9 s 0 8 2 5 土0 2 0 2 ，P0 0 1)，组 织学 上 有粘 膜 表 层 缺 损，粘 膜 下 水 肿，固有 膜 无 明显 炎 细胞 浸润 P VP及 肝 功 检测 结 果 符 合 实 验 性 L C P HT 特征(Ta b 1)尸 0 o s。尸 口 0 1 c o n t r o 1 2 2 胃粘膜血管厦 出血灶形态观察结果大 鼠胃 粘膜血管呈 区域性分布，形成蜘蛛样构型并被此 连接成同L c P HT 鼠 胃粘膜血管 迂曲，有明显 淤血，其最大分支直 径大于对照E(4 o 0 6 土3 0 3)m s(2 9 4 土2 9 4)L m，PO O 5 根据出血灶 大小 与 受 损 血 管构 型 个 数 间的对 应 关 系 及 胃肠 内 有无 积 血，将大 鼠 胃粘 膜 出血 严 重 程度 分为 0 4 级 2 3 胃粘 膜 上皮 细胞 LI测 定 结果LC PHT 尤 其 L C P HT一鼠胃粘 膜 平均 标 记指 数(me a n LI)，出血 灶局 部粘 膜 L I 均 低 于相 应 对 照水 平，有 出血 鼠 L I 低于 无 出血 鼠(Ta b 2，3)表 2 有 出血鼠与无血 鼠标记 指教 Ta b 2 L a b e l l i n g i n d e x i n b l e e d i n g a n d n o n b l e e d i n g r a t s ()P m 05，P m 0 1们 n o n bl e e g 维普资讯 http:/ 2 6 8 第四军医大学学报(J F o u r t h Mi l i t Me d Un i v)l 9 9 7 I 1 8(3 表 3 L C P HT鼠 胃牯腱细胞标记指救 1 3 L a b e l l i n g i n d e x o f g a s t r i c mu c a i n L C P HT T a t s ()P0 0 5，P仉0 1 5 c o n t r o 1 L I：L 丑 b e l l _哪i n d e x 2 4 L I水平与饥饿持续时间的关 系 随饥饿持 续 时 间延 长，I J I 呈 降低 趋 势，L C P HT 鼠于 2 4 h 后有 回升趋 势，但 至 3 6 h仍 未 达对 照水 平，L I的 回升趋势 主要 见 于 L C P HT I(F i g 1)图 1 饥饿持续时间对标记指数的影响 Fi g 1 Th e e f e c t s o f s t a r v e d d u r a t i o n dl n e o n l a be l ng i n-d e x 2 5 L I 与出血严重程度间的相关分析L l 和 出 血严 重 程度 问 有相 关性(F i g 2)；在 出血 严重 程 度 相 同时，L C P HT 和 对 照 鼠的 L l 水 平 非 常 接 近，随严重程度增加，u 呈下降趋势当出血严重程 度在 O 3级时，与 L I 呈显著负相关(对照：r=一 0 8 2 4，P 0 0 1 L C P HT：r；一 0 7 0 8，P 0 0 5)3讨 论 胃牯膜上皮细胞增殖动力学是影响 胃牯膜抗 损害髂力及修复缺损能力的重要 因素，u 的变化 反映 了胃粘膜上皮细胞群 体增 殖活性的 变化0 在本研究条件下，L C P HT 鼠胃粘膜平均 L l 水平 明 显 低 于 对 照 鼠，L C P HT-I组 更 明 显，提 示 L C P HT 模 型 鼠 胃粘 膜 上皮 细 胞 增 殖活 性 受到 了 明 显 抑 制，并 随病 程 进 展 而 加 重在有 出血 鼠其 L I 明显低于无 出血鼠，且出血灶局部与周围相对 正常粘膜相 比也 明显降低提示 u 水平降低与胃 粘膜出血的发生有 密切关系饥饿持续时间代表 了饥饿作 为损害 因素的作用强度随饥饿持续时 间延长，出血率尤其严重程度呈增加趋势而 L I 水 平呈下降趋势表明在同一强度损害因素作用下，L C-P HT大 鼠由于 胃粘膜细胞增殖活性受到 明显 抑制而 更容 易发生 严重 出血 性损害，另外 发现 L C P HT大 鼠的 L I 水平在饥饿 2 4 h后 出现 回升 趋势，但至 3 6 h仍未达对照水平，这种 回升趋势 主要 见 于 L C P HT l鼠，与损 害发 生后 的惨复 反 应有关进一步相关分析表明，当损害程度为 O 3 级 时，L C P HT 鼠 L I与损害程度 间呈明显 负相 关，而损害为 3 4级时两者之问具有正相关关系 但未选显著水 平提示在饥饿 因素影 响下，随 胃 粘膜出血性损害程度逐渐增加，L I 会有不同的变 化 趋 势 Gr a d e 围 2 标记指 致和出严 重性相 关曲线 F i g 2 e r e l a t i o n b e t we e n l a b e ll i n g i n d e x a n d h e mo r r h a g i c s e v e r i t y 根 据本 研 究结 果，我 们 认 为：胃粘 膜 损 害 及 出血 的发生 与 胃粘 膜上皮 细 胞群 体增殖 活性 有关 在损 害因素作用下，当损害程度为 0 3级时，L l 的 变化 及 实 际水平 在 很 大 程度 上反 映 了 胃粘 膜 对 抗损害从而避免损害发生的防御保 护能力随损 维普资讯 http:/ B 7 第 四军 医大学 学报(J F o u r t h Mi i t Me d Un i v)l 9 9 7 I 1 8(3)害程度的增加和时间延长，L I 的变化则可能反映 了损 害 发生 后 胃粘 膜 修复 缺 损 的能 力因而 胃粘 膜上皮细胞 L I 的实际水平可能综合反映 了胃粘膜 抗 损 害及修 复缺 损能力 的水平 及功 能储 备的 消长 L C P HT模 型 鼠 胃粘 膜上 皮 细 胞群 体 增 殖 活性 受 抑 制，可能是 其 易发严 重损 害 及 出血 的重 要原 因 这对 肝 硬变 人群 胃粘 膜 损害 性 瘸变 及 出血舶 研 究 有参考价值S a t f e h等 1 认为，L C P HT性 胃粘膜 损 害依然是酸依赖的，根据我们的结果推测 L C P HT 胃粘膜 损 害及 出血 的发 生机 制 之 一，可能 是 由于 门脉 系 统 充血 性 循 环 状态，引 起 胃粘 膜 淤血 和 有效 血 流量 减 少，进 而 影 响 了 胃粘 膜 上 皮细 胞 群体增殖括性，使 胃粘膜抗 损害及修复缺损的能 力下降发生酸 依赖性损害的结果另外肝硬变时 某些激素尤其脑肠 肽类激素水 平的变化，对胃膜 上皮 细胞 增殖 活性也 可 能会 有 直接 或 间接 的影响，从 而影 响 胃牯 膜 损 害及 出 血 的 发生 这 有 待进 一 步研 究 参考文献 I S a r h U，T a r n a ws k i A，Ha j d u c z e k A 4 Th e p o r t a l h y p e r-眼睑肉芽肿的手术治疗 汪风 妓(第 四军医大学西京医院门谚部西安 7 1 0 0 3 3)，一 J-关 t 嗣 肉 芽 肿 眼 皓 手 术 方 法 口 矗 f a 金I 彳一 中 中圈号R 7 7 7 v77、，口 1、暖睦炎性 肉芽肿多发生于 儿童，治疗不及 时或手木方 法 不 当，可影 响 眼 睑功 能我 科 自 1 9 9 5年 3月 l 9 9 5年 n 月止，手术治疗肉芽肿 4 7 倒，效 果较满意 1 床 瓷科本 组 I 7恻。4 7眼，年 龄 1岁 6个 月】2 岁，发生部位上睑 2 l 铡，下睑 2 6 例，其 中舍并结膜 息内 4 倒，霰粒肿 5例，发病时问 l 3月 2 9倒，3 1 0月 1 4侧，1年 以 上 4例 2手术方法撮据不 同部位 白 勺 鼠 睑 冉芽 肿，分别取 结腆 切 口和 皮 肤 切 口 2 1 皮肤切 口常 规皮 肤消毒，局部侵镧麻醉后，有结痴 者先 击除结痴，在 肿物表 面做平行于 睑缘 的切 口切 口长 度 稿小 于肿 物直 径，鼻!后 用舌 j 匙将 肉芽组 织 彻底刮 除后，将 纱布置 于伤 口处压 迫止 血 1 0 rai n 一般不需肇针 2 2 蛄膜 面切 口矗粒肿 伴有 肉芽 组织增 生者应做 结膜 切 口，木前 结 膜囊内滴 0 5 地 卡因表面 麻醉，常规 消毒 后，用 睦扳腺夹央 住病 变郁 在肿物 中央，以尖锐 刀尖与 睑馨垂 直 作适 度 的瞳结 膜 切 12 1，切 口长 度略 小 于肿 糟直 径，以艟 鲫鹿 刮脒肿物 为宜如 患者同一 部位韵 皮 肤和结 膜都 有 雨芽组织存 在时，仍采取结膜 面切 12 1 尽可 瞌从 结 风靛，女，4 1岁，主臂护师 2 69 t e n s i v e g a s l r ie r n c o s a：Hit o l o gi c u t r a s t r u c t ur a l，a n d t u n c t io n a 1 a r J y s i s a f t e r a s p i r i n i n d u c e d d a ge S u r g e r y，1 9 8 8；1 0 4(1)：7 8 8 5 2 Al bi l l o s A，Lu L s AC ol o mt o e t a t S m e n c e 0f mor p h o l o g i c M a n d h e m d mk c h a n g e s of ga s t r i c mi c r o v c s s l s in p or t a l h y p e r t e n s o nGa s t r o e n t e r l o gy，1 9 9 2I 1 0 2(6)：2 0 6 62 0 7 0 31 w a oT，Tj o n a g a A，S u mi n oM 廿 a t P o r t a l h y p e r t e D s i o n g a S-t r o Imt h y p a t ien t s wi t h c i r r h o s i s Ga s t r o e n t e r ol o gy，1 9 9 2 E 1 0 2 (6)：2 0 6 0 2 0 6 5 4章有柱，诹 t链。刘涛“囊代 己酰胺诱发犬鼠肝硬化 门睬 高压 的研究中华实验 外科杂志，1 9 8 8 F 5(1)：1 3-1 4 5孟永患，何泽生 吴叠生 f 脒高压大 置胃粘馥 出血性攒害 模型倒备第四军医大学学|量，1 9 9 7，l 8(1)：4 1 6 W i l l e m GAu t o r a d l o g r a p h J c s t u di e s o 1 c e l l po pu l n t i o n k i n e t；c，-d o g g a s t ric a n de t a l mu s a L a b I n c e s t，1 9 7 0j 2 3(3)：63 5 6 3 8 7曩晋，才文彦，严仲璃“4 应蠢性赍痔 的胃牯雎钼臆动力母 研究中华医学杂志，1 9 9 1#7 1(1 1)：6 3 0 6 3 2 (收藕 1 9 9 5 1 0 2 6 蕾回 l 9 9 6 1 2 2 7)编辑王小仲 支+卿争 ，奄 媵 面向皮肤方 向一次彻底剐鲦净 3 结果 和讨 论本组 4 7倒，不 留瓣癀 l 6 倒(3 4 )瘴瘿 不 明显 3 0倒(6 3 )其 中 2 倒 由于皮肤外 肉芽组织范围较 大，小刮匙从结 腱面 向外伸 出刮 除有 限，半 月后 又从 皮肤 面切 口刮除遗 留的肉芽组织，但切 口比第 1欢 要小，其 余 均一 期禽台，效果 满意 仅 有 1倒 术后有 明显意 痕，治 禽 享达 1 0 0 选好取 脸炎性冉芽肿 的手 术时机较 为重 要，我们 认为 在发病后 1 2月 内为宜对发病不足 2 0 d者 可滴抗菌素 眼蒗及理疗，亦有 白行吸收的可能 睑板腺囊肿 同时又有 冉芽肿 形成或病变 巳穿破皮 肤表 面的患者，传 统的方法 是分妖 手术我们 采取直接 结膜 切 口，若 内牙肿较大 时，同时作 结膜与皮 肤切 日，衡 底刮 除 干净减 少 了患者 两次 手术 的痛苦，又 墙短病 程，避兜 了遗 留皮肤面疤痕 术前克 分麻醉，术后充分 压迫止 血，以免因木 中疼痛 躁动 和彤戚 小血肿 而影响手术效 果对有 疤痕体质 病史的 患者，特别慎 重 以药物和理疗为主(收稿 1 9 9 6 0 9 1 0 售目 1 9 9 7 0 3 2 5)羞辑黄良田 维普资讯 http:/