长期施用化肥对红壤性水稻土中微生物生物量、活性及群落结构的影响.pdf

土壤(S o i l s)。2 0 0 7，3 9(5)：7 7 2 7 7 6长期施用化肥对红壤性水稻土中微生物生物量、活性及群落结构的影响乔洁12，毕利东2，张卫建1 沈仁芳2，张斌“，胡锌，划艳丽。2(1 南京农业大学资源与环境学院，南京2 1 0 0 9 5：2 中国科学院南京土壤研究所南京2 1 0 0 0 8摘要：利用化肥陡期定位试验研究了施肥对土壤微生物生物壁、活性及其群落结构的影响。结果表明：与不施肥相比t 长期施用化肥不仅增加了土壤微生物生物量，而且导致了土壤微生物群落结构的分异。其中，有机无机配施处理和2 倍N P K配施处理显著提高了土壤有机质音量、生N 含最、土壤微生物生物量和土壤微生物活性。N P K 均衡施肥赴理对土壤有机质、土壤微生物生物量厦其活性的影响小于非均衡施肥的处理(N P、N K，N、P、K)适当增施K 肥有利于提高土壤微生物中真菌的比例。关键词：水稻土；微生物生物量：微生物活性；微生物群落；长期试验中图分类号：s 15 43；$1 5 74土壤微生物是生态系统的重要组成部分，不仅直接参与土壤C、N 等元素的循环过程和土壤矿物质的矿化过程，还对土壤结构，尤其是土壤团聚体的形成及其稳定性起着决定性的作用。不同类群的微生物在土壤中的作用不尽相同，真菌是土壤中主要的微生物之一，在生态系统功能中起到很重要的作用。土壤真菌能够固结、矿化土壤养分，在分解有机质的同时在土壤颗粒间形成菌丝桥，促进土壤团聚体的形成 2-4 1，有效地提高土壤结构和土壤团聚体稳定性1 5。6】，同时，真菌产生的多糖体也具有增加矿物质和保持水分的能力口I。麦角固醇是太多数子囊菌类、担子菌类等真菌细胞膜中的重要组成成分，可作为土壤微生物群落中真菌生物量的标记物口】。红壤水稻土广泛分布于我国南方，由于矿物释放的养分十分有限，植物生长所需的养分主要靠肥料投入。长期施用不同化肥不仅可咀改变土壤理化性质，提高土壤团聚体稳定性I”，亦使土壤微生物群落结构、数量和活性发生变化“，影响土壤肥力和土壤生产力。目前国内外有关土壤微生物对长期施用不同化肥的响应方面的研究主要集中在旱地，就水田土壤微生物方面的报告还较少。本文的研究目标是研究长期施用化肥对红壤性水稻土中土壤微生物生物量、活性及其群落结构的影响，以为土壤生产力的评价与培育提供理论依据，也为区域性农田土壤肥料管理提供技术参考。1 材料与方法1 1 试验区概况红壤水稻土肥料长期定位试验设在江西省红壤研宄所内(1 1 6 2 6 E，2 8 0 3 77 N)，海拔2 6m 亚热带季风气候，年平均气温1 7 7，月平均最高气温2 9 0，月平均最低气温5 0o C，年均降雨量1 4 0 0i l l m。试验始于1 9 8 1 年早稻，共设9 个处理：不施肥(c K)、有机无机配施(N P K O M)、双倍氮磷钾(2 N P K)、氯磷钾(N P K)、氛磷(N P)、氮钾(N K)，氮(N)、磷(P)、钾(K)，重复3 次。肥料用量及施肥方式分别为：水稻单季施用N9 0k g h n：，P 2 0 54 5k g S u n 2，K 2 07 5k 曲m 2，二级量加倍，有机肥2 2 5t _ h l n 2(早稻施新鲜紫云英，晚稻施猪粪)。有机肥和钙镁磷肥作基肥施用，尿素和氯化钾在水稻返青后和分焚盛期分两次追肥。12 样品的采集与处理供试土样于2 0 0 5 年7 月早稻收割后采集，土样采自0 一i 0c m 的耕层土壤，用自封袋密封带回实验室挑去植物残根和石块，过2 m m 筛，4 口c 冰箱保存，供分析用。供试土壤的理化性质见表1。基金项目：国家。9 7 3”计划(2 0 0 5 C B I2 1 1 0 7)和国家自然科学錾金(4 0 3 7 1 0 5 9，3 0 5 7 1 0 9 4)资助。通讯作者(b z h a n g i s 哪扯c m作者筒舟；乔洁(1 9 8 D 一)女吉#自山 硕士研兜生，主要机事土壤生物物理及其恢复生态学研宄B m a m 扣钿 商嚣酬 万方数据第5 期乔洁等：长期施用化肥对红壤性水稻土中微生物生物量、括性及群落结构的影响7 7 3表1 供试土壤理化性质T a b l eIP h y s i c a la n d c h e m i c a lp r o p e r t i e so f l h e t e s l e ds o i l处理体积质量孔隙度p H(H 2 0)有机C全NC NC Kl0 85 44 91 6 9 22 1 11 3813 测定方法土壤体积质量(容重)：环刀法测定：土壤孔隙度：通过土壤体积质量换算：土壤口H 值：电位计法测定；土壤有机质：高温外热重铬酸钾氧化容量法测定；士壤全N：半微量开氏法测定1。土壤微生物生物量C、N：采用氯仿熏蒸浸提法(F E)测定。具体步骤为取新鲜土样，去除植物根系，过2m m 孔筛，分别在氯仿熏蒸前后用K 2 S 0 4 溶液浸提土壤，提取液中的有机C 用费尔思法测定【1 2 1，提取液中的N 采用半微量开氏法测定。微生物生物量C、N 的换算系数分别为0 3 8、0 4 5 t“】。土壤C 0 2 释放量：室内密闭培养法。称取5 0 9 新鲜土壤于5 0 0m l 培养瓶中，并将土壤均匀地平铺于瓶底部，然后将盛有5m l0 2m o l LN a O H 溶液的吸收瓶放到培养瓶中，将培养瓶盖上瓶盖，密封。在2 8 培养箱内培养2 4 h 后，将培养瓶中的吸收瓶取出，加入2 m o I L B a C h 溶液2 m 1 加酚酞指示剂1 滴，用0 0 5m o l L 标准H C I(用硼砂标定其浓度)滴定至红色消失即可。同时做空白对照I l”。土壤真菌中麦角固醇含量：根据土壤有机质含量称取l 一3g 鲜土，加入2 0 m l K O H 醇溶液(甲醇：乙醇=1：3)，漩涡振荡，然后在水浴锅中7 5 0 c 皂化1 h，冷却至室温，再加入5m l 积蒸水，离心，上清液转入分液漏斗中，加2 5m l 环己烷，萃取、分液，将上层环己烷转移至浓缩瓶中，用旋转蒸发仪4 0 条件下蒸千，用甲醇洗浓缩瓶并定容于1m l 容量瓶中待测【1 3-1 5 1。用高效液相色谱仪测定。色谱条件为色谱柱C L C O D S(1 5 0X6 r a m)，流动相甲醇(1 0 0)、流速1 5m l m i n、检测器为紫外检测器、检测波长2 8 3n m。采用外标法按峰面积进行定量。14 统计分析数据处理采用M i c r o s o f tE x c e l2 0 0 0 进行：不同处理之问进行方差分析(A N O V A)及其差异水平通过最小显著差数法(L S D)检验，所有数学统计均通过S P S S1 1 0 进行：作图采用O r i g i nP r 0 7 5 进行。2 结果与分析2 1 土壤微生物生物量C、N土壤微生物生物量是土壤有机质中最活跃和最易变化的部分。图1 显示了不同处理下土壤微生物生物量C、N 差异。土壤微生物生物量C 变化范围是1 0 8 9 51 5 8 5 6m g k g。除N P K 处理外，其余各施肥处理土壤微生物生物量C 含量均显著高于C K。其中N P K O M处理最高，比C K 高4 6。土壤微生物生物量N 变化范围是6 3 3 1 2 5 2m 眺g，N P K O M 和2 N P K 处理显著高于C K，尤其是2 N P K 处理比C K 高9 7 以上。其余N、P、K 单旋处理间及其与C K 之间不存在显著性差异，这与K a n a z a w a 等q、L y n c h 和P a n t i n g ”、G o y a l 等和张彦东等 1 9 1 的研究结果一致。施肥后植物生长加快，根系生物量及根系分泌物增加，可能促进土壤微生物生长，从而普遍提高了土壤微生物生物量 2 02 1】。有机无机肥配合施用下，不仅通过促进作物生长而显著增加土壤有机物投入，而且有机肥的施入直接带入了大量活的微生物和有机物质(表1)，为土壤微生物提供了充足的能量和养分。长期施用不同的化肥不仅影响微生物总量，而且对微生物群落结构也有一定的直接或间接影响m l。从而导致土壤微生物生物量C、N 对化肥施用的响应趋势不一致。不同施肥处理对土壤微生物生物量C、N 占土壤有机c、全N 的比例的影响效果不同(表2)。2 N P K配施处理土壤微生物生物量C、N 占土壤有机C、全N的比例分别比C K 高5 4 和7 5 3。可见，红壤地区适当增施化肥有利于提高土壤微生物总量。N P K 均衡9OO7735375725O36ii，2，989999945444444m吣m一撇眦忡眦。，。万方数据土壤第3 9 卷l品il刊囤1 长期施用不同化肥下土壤微生物生物量c，N(平均值+s B)F 塘lS o i l m i c r o b i a l b i o m a s sc a r b o q la n d n i t r o g e n i n d i f f e r e n t t r e a t m e n t s表2 长期施用不同化肥下土壤微生物生物量C。N 在有机C 全N 中的比侧()T a b l e 2R a t i o s o f s o i l m i c r o b i a lb i o m a s se,a t S o o t la n d n i i r o g c l l t os o i lo r g a n i cc a r b o na n d t o t a l n i t r o g e n i n d i f f e r e n t n 哪m 明B施肥处理土壤微生物生物量c、N 含量及其在土壤有机C、全N 中的比例均低于非均衡旋肥处理(N P、N K、N、P、酗，这与李秀英等口研究结果类似。这可能是因为长期的N P K 配合施用，土壤养分均衡，植物生长迅速，微生物周转快，使得土壤微生物生物量c、N易矿化，为作物提供c 素和N 素 2 4-拍1。但N P 配施处理土壤微生物生物量C 在土壤有机c 中的比例高于其他施用化肥的处理，这表明P 可能是该地区土壤微生物的关键作用因子，长期补充N、P 增加了土壤有机质含量，提高了土壤微生物生物量及其活性【悟”，2：I。22 土壤C 0 2 释放量土壤C 0 2 释放量是衡量土壤微生物活性的总指标。由图2 可以看出，除N P K 和N K 处理与C K 没有差异外，其余各施肥处理土壤C 0 2 释放量均显著高于C K。N P K O M 处理土壤c 0 2 释放量最高，比C K 高8 0 以上。N P 配施处理土壤c 0 2 释放量高于其他施用化肥的处理，各化肥单施处理间土壤C 0 2 释放量没有显著差异，但单施P 肥的处理略高于单施N 肥、K 肥的处理。土壤微生物生物量c 的含量与土壤C 0 2 释放量显著相关(r=0 5 0 3*)。有机无机肥料配合施用下，有机肥直接给微生物提供了丰富、易利用的养分元素，微生物活性高。而一般土壤中有机质腐殖化程度较高，能被微生物直接利用的c 源含量较低，微生物活性较低2 8 1，D i e k【2 9 1 的研究也发现类似的趋势。N P K 配施处专ill 皇莹z。处理图2 长期施用不同化肥下土壤c 0 2 释放量(平均值+S E)F i g 2S o i lr e s p i r a t i 佃r a t c i n f l u e n c e db yd i f f e r e mo h*m；c 1 名n i l i z a t i o n理微生物活性低于其他各施肥处理，可能是因为N P K配施处理有机C 含量低导致的。23 土壤微生物群落结构由于微生物种群对不同化肥的响应差异，长期施用不同的化肥，不仅土壤微生物总量会有所变化，而且也会引起微生物群落结构的变化 3 0-”】。由图3 和图4 可以看出，各处理麦角固醇-c 含量为0 3 0 6 I l g 艚。南阁冒。陵闷闷闽蛐。两闷圈；。南燃闷图；。两煳劁湖随；。肉劁图o：。点黼闷黼黼湖妞；。网湖湖网瞄；。网斟删刚魁0。，Lm啪啪鲫印蚰抽。奄芒邑z蜘霹删霉刊捂替叫-。期嘲翮黝囫。j窃黝黝黝囡。n励嘲黝黝囡：k豳黝黝黝囫；。渤黝嘲嘲黝瞄；n囫翊黝豳；囫黝翻黝组0；，豳黝黝黝黝幽幽：0；。阂黝黝黝幽0。L娜咖枷蛐咖啪枷枷姗o如0(P_)，B)|州描棼N8群州 万方数据第5 期乔洁等：长期施用化肥对红壤性水稻土中微生物生物量、活性及群落结构的影响7 7 52 N P K 处理麦角周醇c 含量显著高于C K，但其他处理与C K 没有差异(P 00 5)。除N P K O M 和N P 配施处理外，其他处理麦角固醇f 与土壤微生物生物量C 的比值(图4)均高于C K。其中2 N P K、N K 配施处理最高，K、N P K 处理次之。这些结果表明：长期施用不同的化肥，不仅为真菌提供了生活所必需的营养元素和丰富的食源，促进了真菌的繁殖，而且改变了红壤性水稻土中微生物群落结构。N P K O M 和N P 配施处理可能更有利于真菌以外的其他微生物的繁殖。适当增施K 肥，可能有利于真菌比例的提高。土壤真菌在土壤生态系统功能中起到很重要的作用它通过促进土壤团聚体的形成而显著地提高土壤质量，如真菌中泡囊状菌根起到稳定大团聚体的作用，因为它有助于贯穿土壤基质，延展植物根系口”。差V柚抽U钴囿蔫蕞岩ll 皇董2。tH处理图4 长期施用不同化肥下麦角固醇t 与微生物生物量C 的比值F i g4R a t i o o f s o i l e r g a s k r o l-C t r a 6 0 n*s o i l m i e t o b l“M o m a s sc a r b o n i n d l f f e m m t r e a t m e n t s3 结论对于供试的红壤性水稻土，有机无机配施处理提高了土壤微生物生物量C、N 含量，土壤微生物活性及其土壤微生物生物量C 在有机C 中的比例，但对土壤真菌影响不显著，有可能降低土壤真菌在土壤微生物中的比例。与N P K 配施处理相比，2 N P K 配施处理显著增加了土壤微生物生物量和真菌生物量(分别增加了1 4 6 和9 7 8)，这说明适当增加施肥有利于土壤微生物的繁殖，能够增加土壤真菌在土壤微生物中的比例，进而可能有利于改善土壤结构、增加土壤肥力、提高作物产量。N 肥、P 肥和K 肥均有利于土壤微生物的繁殖，但K 肥似乎对土壤真菌生物量的影响更大。参考文献：【IJ俞慎李勇王俊华。车玉萍，潘映华李振高，土壤微生物生物量作为红壤质量生物指标的探讨土壤学报，1 9 9 9，3“3 1：3 8 7 3 9 4【2 1C 锄b a r c l e l l aC A,E lJ i o t iE EP a r t i e u l a l c j lo r g a n i cn u L t t c r 扯m ag r a s s l a n de u h i v a t l o ns e q u e n c eS o i l 2 0 0 1。1 5(帅9 9 1 0 2【3】冯固，张玉风，李晓林丛枝菌根真菌的外生菌丝对土壤水稳性团聚体形成的影响水土保持学报，2 0 0 1，I5 一)：9 9-1 0 2【4】4O u g g e n k g e rGE l l i o t t 耵，F r a ys D，S i xLP a u s f i KM i c r o b i a le o n t r i b u t i o 略t o t h e a g g r e g a t i o no f a c u l t i v a t e d g r a s s l a n ds o i l m e n d e dw i t hs t a r c hS o i l B l o lB i o e h e m。1 9 9 9，3 1：4 0 7-4 1 9【5】5B 蝌妊N L e i f E l n f i o f 砷唧u h m y e o r r h i z a l f t m g i o n s o i ls c r I】曲辩删蹭口q；d 2s t a b i l i t y o f v e r t i s o lP l a n ta n d S o i l。2 0 0 0，2 1 8：3 1 8 3 6 1 i s d a l lJ M,O a d e$J MT h ee-f f e e t o f c r o p r o t a t i o n O l la g g l C g a t i o n i nar e d-b r o we a r t h A u 虬JS o i l R 器1 9 8 0,1 8：4 2 3-4”【7 1 7骶e A W,G 硼I W D,S l 啤r l t h g G P u 钟o f e r g o s t e m l,d i a m i n o p i m e l i c”a n dg I e o n l c n to f i k t o m a n i t o rc h a n g e s i n m i c r o b i a lp o p u l a t i o r ES o i l B i o lB i c c h e m 1 9 8 7 1 9：6 0 76 1 2【8】李江涛，张斌，彭新华，赖涛施肥对红壤性水稻土颗粒有机物形成厦团聚体稳定性的影响土壤学报，2 0 0 4，4“砷：9 1 2-9 1 7【9 1A b b o t tL K,M u r p h yD V S o i lB i o l o g i o lF e r t i l i t y N c t h e r l a n d s：K l u w e r A e a d e m i e P u b l i s h c r s，2 0 0 3【1 0】李忠佩焦坤林心雄，程励励施肥条件下瘠薄红壤的生物化学性状变化土壤2 0 0 8，3 5 H)：3 0 43 1 0 1 1】鲁如坤主精土壤农业化学分析方法f l g g：中国农业科技出版杜2 0 0 I 刁杜丽婿，文启孝，张晓华应用费尔思法测定氯化钠盐土或底土中的有机碳土壤，1 9 8 2,“)1 4 9-1 5 7 1 3 1M o a e nkE r l 蛐dBE s t i m a t i o no fc o n v e r s i o nf a e t o mf o r 劬g a lb i 啡a d e t e r m i n a t i o ni nc 0”p o nu s i n g。9 0 s k】a n dP L F A1 8：2 a 1 6，9S o i l B i o lB i o e h e m 2 0 0 4,3 6：5 7-6 5 1 4 lM o n t g o m e o ，M o m a lC M,Y 0 帅gJ c，S e i f e r tK AD a e 皿i n i-r a t i o no fs o i lm m I“a gs a i l”g o s t e m la n a l y S o i lB i o 更vu哪霹刊髯刊挺骅趟捌如甲钴咀 万方数据!兰圭苎：蔓!堂B i o e h e m，2 0 0 0，3 2；1 2 0 7-1 2 1 7【I S】E,a s hN S，5 t a h lP n,P a t h i nT B，K a r i e nO LAs i m p l i f i e dm e t h o df o re x t r a c t i o no fe r g o s t e r o lf r o ms o i lS o i lB i o lB i o c h e m，1 9 9 6 2 8：4 6 8-4 7 11 1 6 lx 肭a 制as A g a k a w as，l?a k a iYE f f t：d 姐毓i u 瑚a n dm a 1】r ea p p l i c a t i o no f fm i c r o b i a l b e nf i i e m a s s,a n de a z y m ea c t i v i t i e si nv o l c a n i ca s hs o i l s I M i c m b i a tn u m b e r sa n db i o b o mS o i lS c i e n c ea n dP L a n t N a t r i t i o n，1 9 8 8，3 4：4 2 9-4 3 9【l 刀L y r i c hJ M，P 龃t i n gM E f f 氍r so fs e a s o n,c u l t i v a t i o na n dn i t r o g 虮f e r t i l i 黯ro nt h es i z eo ft h es o i lm i c r o b i a lb i o m a s sJ o u r n a lo ft h eS a t e n o f F o o da n d A g r i c u l t u r e 1 9 8 2，3 8：2 4 9 2 8 2【1 8】G o 州SM i s h r aM M,H o o d aI S，S i ng I lR O r g a a t cm a a e r-m i c r o b m lb i o m“sr e l a f i s h i p si nf i e l de x p e r i m e n t su n d e rt r o p i c a lc o n d i t i s：E f f e c t so f i n o r g a n i c l l j z do r g a n i ca m e n d m e n e；S o i lB i o lB i o e h a m，1 9 9 2，2 4：1 0 8 1 1 0 8 4【1 9】张彦东，孙志虎，沈有信施肥耐金沙江干热河谷退化草地土壤微生物的影响水土保持学报，2 0 0 5，l 烈习：8 89 1口明G o y a lS，C h a n d e r k M n n d m M C K a 9 0 0 r K KI n f l o e n c e o f i r g a n i cf e r t i l i z e r sa n do r g a n i c o d m e n t so ns o i lo r g a n i cm a t t Ha n ds o i lm i c r o b i a l p r o p e r t i e su n d e r t r o p i c a lc o n d i t i o n sB i o lF e r d lS o i l s 1 9 9 9，2 9：1 9 6 _ 2 呻 2 1】i m e kM，H o p k i m D W,K a l r i kLP i c e kt k o“I，S t a a T r f i 呲KB i o l o g i c a la n dc h e m i c a lp r o p a r t i c s o f a r a b l e s o i l sa f f e c t e db y l o n g-t e 皿o r g a n i ca n d i n o r g a n i c f e r t i l i z。a p p l i c a t i o n sB a t F e r t i lS o i l s 1 9 9 9 2 9：3 0 0 3 0 8 2 2】孔维栋。朱永官，傅怕杰，陈保冬，童依平农业土壤微生物基因与群落多样性研究进展生态学报。2 0 0 4 2 4 0 2)：2 8 9 4-2 9 0 01 2 3 李秀英，赵秉强车幕花，李燕婷，孙瑞莲，朱曾生，徐品王丽醢，李小平张夫道不同施肥制度对土壤微生物的景；响及其与土壤肥力的关系中国农业科学，2 0 0 5，3 剐s)：1 5 9 1 1 8 9 9【2 4 P 洲l m nD S。B r o o k e sP c C h r i s t e n s e nB TM m e n to fs o i lm i c r o b i a l m I m p r o v l d 船a l le a r l y i n d i c a t i o no f c h a n g e s n t o t a l 跗no r g a n i c m a w r d u es t r a w i n c o r p o r a t i o nS o i l B i o lB i o c h e m，1 9 8 7 1 9：1 5 9 一1 6 4 2 习王兴任李洁茹，苏德纯，曹一平。毛选如北京石灰性潮土长期轮作的磷肥合理运筹中国农业大学学报，1 9 9 4 4(5)：4 34 9【2 6】束建国，王晶，林杉用连续流动分析仪程度土壤微生物态氟的方法研宄植物营养与肥科学报1 9 9 9,5 0)：2 8 2-2 8 7【2 7】K a r l e n D L，R o e k M J，G a r d n e rJ c(黄毅编泽)备用地保护项目对土壤质量的影响水土保持科技情报，2 0 0 0(2 1：I _ 31 2 8】A i d e+i 1L。D e m o l i n 8 E B S,自t h ER a p i d m e t h o d o f d e t e r m i n i n g f 融o nl i m i t i n gb a c t e r i a lF o w l hi ns o i lA p p lE n e m aM i e b，2 0 0 1 6 7：I8 3 0-t 8 3 81 2 9 D i c kR P _ Ar e v i e w：l o n g-t e r r ae f f e c t so f a g r i c u l t u r a ls y s t e m so l ls o i lb i o e h e m i 阻la n dm i c r o b i a lp a r a r a e t e r sA g r i c u l t u r eE c o s y s t e m sa n dE n v i m n m e n t,1 9 9 2，4 0：2 5 3 6口卅l o v e l lR D，J a w i sS C,B a r d g e nR DS o i lm i c r o b i a lb i o m a s sa n da c t i v i t yi no n g-t e 肿g r a s s l a n d：E f f e c t so f m a n a g e m e n lc h a s e sS o i lB i o lB i o e h e m 1 9 9 5 2 7；9 6 9-9 7 5【3 1】H a t c hD 8，L o v e IR D,A a l l lR S,d e r v i sR S，O w e aP MN i t r o g e nm h a e m l i z a t i o n“m i c t o b i a tg t i v i t yi np e n a n c ep a s m ma m e n d e dw i t hm e o g e nf e r t i l i z e fo fd u n gB i o lF c t h lS o i l s，2 0 0 0,3 0：2 8 8+2 9 3E f f e c t so f L o n g-T e r mC h e m i c a lF e r t i l i z a t i o no nS 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丛枝菌根真菌的外生菌丝对土壤水稳性团聚体形成的影响期刊论文-水土保持学报2001(04)4.Guggenberger G.Elliott ET.Frey SD.Six J,Paustian K Microbial contributions to the aggregation ofa cultivated grassland soil amended with starch 19995.Birgitte N.Leif P Influence of arbuscular mycorrhizal fungion soil structure and aggregatestability of vertisol 20006.Tisdall JM.Oades JM The effect of crop rotation on aggregation in a red-brow earth 19807.West