DB50_T 1536-2023呼吸袋法生猪发酵饲料生产技术规程.docx

ICS 65.120CCS B 46DB50重庆市地方标准DB50/T 1536-2023呼吸袋法生猪发酵饲料生产技术规程2023 - 12 - 05 发布2024 - 03 - 05 实施重庆市市场监督管理局发 布DB50/T 1536-2023前言本文件按照 GB/T 1.12020 标准化工作导则 第 1 部分：标准化文件的结构和起草规则的规定起草。请注意本文件的某些内容可能涉及专利。本文件的发布机构不承担识别专利的责任。 本文件由重庆市农业农村委员会提出、归口并组织实施。本文件起草单位：重庆三峡职业学院、重庆市畜牧技术推广总站、西南大学、乐山市农业科学研 究院、重庆市潼南区新胜镇农业服务中心、宜宾市南溪区国科中农生物科技有限公司。本文件主要起草人：何航、刘震坤、张传师、陈开伟、朱燕、陈鲜鑫、陈亚强、付贵花、罗永莉、 章杰、周勤飞、陈红跃、何道领、杨强。I呼吸袋法生猪发酵饲料生产技术规程1 范围本文件规定了呼吸袋法生猪发酵饲料生产的原料选择、生产环境、主要设备、工艺流程等要求。 本文件适用于呼吸袋法生产生猪发酵饲料。2 规范性引用文件下列文件中的内容通过文中的规范性引用而构成本文件必不可少的条款。其中，注日期的引用文件， 仅该日期对应的版本适用于本文件；不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本文件。GB 4789.15 食品安全国家标准 食品微生物学检验 霉菌和酵母计数GB 5749 生活饮用水卫生标准GB 13078 饲料卫生标准GB/T 14699 饲 料 采 样NY/T 1444 微生物饲料添加剂技术通则DB50/T 1147 猪用液态发酵饲料生产技术规程3 术语和定义下列术语和定义适用于本文件。3.1发酵饲料 fermented feed以一种或多种饲料原料为发酵底物，添加饲料添加剂品种目录允许使用的微生物菌种，通过发 酵所得到的饲料。3.2呼吸袋 breathing bag带有单向排气阀的塑料袋。4 原料选择4.1 饲料原料卫生指标应符合 GB 13078 的要求。4.2 发酵菌种应为饲料添加剂品种目录中允许使用的菌种，宜选用乳酸菌、芽孢杆菌、酵母菌等为主的单一或复合微生物制剂。4.3 可选用酶制剂、酸化剂等添加剂。4.4 微生物添加剂卫生指标应符合 NY/T 1444 的要求。1DB50/T 1536-20235 生产环境5.1 生产区的饲料原料库、配料接种室、发酵车间和成品库相对独立。5.2 发酵车间应保温隔热，清洁干燥，定期消毒。5.3 饲料原料库和成品库应通风、干燥，避免受潮或阳光直射。6 主要设备饲料粉碎机、饲料混合机、热水供应装置、菌种活化装置、热封口机、打包机等设备。7 工艺流程7.1 生产流程呼吸袋法生猪发酵饲料生产流程见图 1。原料预处理配料接种及水分调节装袋发酵发酵终点判断存储图 1 生产流程图7.2 原料预处理7.2.1 常规饲料原料的粉碎粒度宜控制在 1.5 mm 以下。7.2.2 地源性饲料原料可根据其特性进行筛分、粉碎、酶解或加热等处理。7.3 配料应按照饲料配方的要求，将饲料原料依次投入饲料混合机中，充分混匀。7.4 接种及水分调节7.4.1 发酵菌液制备粉状发酵剂宜加葡萄糖、红糖或糖蜜等营养物质在活化装置中活化后使用。7.4.2 接种按要求将发酵菌液加入到混合机中，与饲料原料充分混匀。7.4.3 水分调节宜使用 30 40 的水调节含水量至 30% 60%。水质应符合 GB 5749 的要求。7.5 装袋混合接种后的饲料应立即装入呼吸袋，用热封口机封口，再放入普通饲料编织袋。7.6 发酵2DB50/T 1536-20237.6.1 温度发酵车间温度宜控制在 20 37 。7.6.2 时间应不少于 24 h。7.6.3 终点判断发酵终点的判断应满足以下条件：a） 外观色泽一致；b） 具有发酵酸香味，无刺激异味；c） pH 在 3.6 6.0；d） 有效活菌数1107 CFU/g，乳酸菌、酵母菌的检测方法按照 DB50/T 1147、GB 4789.15 的规定执行，芽孢杆菌的检测方法按照附录 A 的规定执行。7.7 存储制备好的发酵饲料，应转移成品库存储，做好相应记录。3DB50/T 1536-2023附 录 A（规范性） 芽孢杆菌计数A.1 设备和材料设备和材料包括：1) 分析天平：感量 0.1 g，0.1 mg；2) 振荡器；3) 粉碎机；4) 非旋风磨；5) 恒温水浴锅；6) 恒温培养箱；7) pH 计（精确到 0.1 个单位）或精密 pH 试纸；8) 灭菌三角烧瓶：500 mL、250 mL；9) 无菌吸管：1 mL（具 0.01 mL 刻度）、10 mL（具 0.1 mL 刻度）或微量移液器及吸头；10)灭菌试管：18 mm 180 mm、15 mm 150 mm；11) 灭菌玻璃珠；12) 灭菌玻璃或塑料培养皿；13) 玻璃涂布棒。A.2 培养基和试剂试剂为分析纯，实验用水为蒸馏水或去离子水。1) 0.85% 灭菌生理盐水；2) 营养琼脂（NA）培养基：蛋白胨 10 g，牛肉膏 3 g，氯化钠 5 g，琼脂 15 g 20 g，蒸馏水 1 000 mL。加热溶解，pH 7.20.2，121 高压灭菌 20 min。A.3 检样制备按照 GB/T 14699 的要求采样，采样工具应无菌。样品应尽快检测。A.4 操作步骤A.4.1 试样稀释A.4.1.1 在无菌条件下取样 25 g，放入装有 225 mL0.85% 灭菌生理盐水的三角瓶中，置振荡器上振荡 30 min，加入 0.85% 灭菌生理盐水制成 1：10 的稀释液。A.4.1.2 吸取 1 mL 的 1:10 稀释液，按照十倍系列递增稀释法得到不同稀释度的稀释液。A.4.2 接种和培养4DB50/T 1536-2023选择 2 个 3 个适宜的稀释度，80 水浴 10 min，每个稀释度吸取 0.1 mL 稀释液接种到 2个营养琼脂平板。室温放置 15 min。将平板倒置于培养箱中，36 培养 48 h。A.4.3 芽孢杆菌计数A.4.3.1 记录稀释倍数和相应的菌落数量。菌落计数以菌落形成单位（colony-forming units，CFU）表示。A.4.3.2 选取单菌落数在 30 CFU 300 CFU 之间的平板计数。A.5 结果与报告A.5.1 芽孢杆菌总数计算方法A.5.1.1 若只有 1 个稀释度平板上的菌落数在适宜计数范围内，计算 2 个平板菌落数的平均值，再将平均值乘以相应稀释倍数，作为每 g（mL）样品中菌落总数结果。A.5.1.2 若有 2 个连续稀释度的平板菌落数在适宜计数范围内时，按下列公式计算：.(A.1)式中：N样品中菌落数；C平板菌落数之和；n1第一稀释度（低稀释倍数）平板数； n2第二稀释度（高稀释倍数）平板数； d稀释因子（第一稀释度）。A.5.1.3 若所有稀释度的平板上菌落数均大于 300 CFU，则对稀释度最高的平板进行计数，结果按平均菌落数乘以最高稀释倍数计算。A.5.1.4 若所有稀释度的平板菌落数均小于 30 CFU，则应按稀释度最低的平均菌落数乘以稀释倍数计算。A.5.1.5 若所有稀释度（包括液体样品原液）平板均无菌落生长，则以小于 1 乘以最低稀释倍数计算。A.5.1.6 若所有稀释度的平板菌落数均不在 30 CFU 300 CFU 之间，其中一部分小于 30 CFU 或大于 300 CFU 时，则以最接近 30 CFU 或 300 CFU 的平均菌落数乘以稀释倍数计算。A.5.2 芽孢杆菌总数报告A.5.2.1 菌落数小于 100 CFU 时，按“四舍五入”原则修约，以整数报告。A.5.2.2 菌落数大于或等于 100 CFU 时，第 3 位数字采用“四舍五入”原则修约后，取前 2 位数字，后面用 0 代替位数；也可用 10 的指数形式来表示，按“四舍五入”原则修约后，采用两位有效数字。A.5.2.3 称重取样以 CFU/g 为单位报告，体积取样以 CFU/mL 为单位报告。5