珠江口典型水产养殖区抗生素的污染特征.pdf

生态环境学报 2013,22(2):304-310 http:/ Ecology and Environmental Sciences E-mail: 基金项目：中国科学院知识创新工程项目(KZCX2-YW-Q07)；国家自然科学基金项目(41076069；40776086)；908 专项(GD908-JC-06)作者简介：梁惜梅(1985 年生)，女，博士研究生，研究方向为海洋环境污染与生态保护。E-mail: *通信作者：黄小平，男，研究员，博士生导师，研究方向为海洋环境与污染生态学。E-mail: 收稿日期：2012-12-25 珠江口典型水产养殖区抗生素的污染特征 梁惜梅1,2，施震1,2，黄小平1*1.中国科学院南海海洋研究所热带海洋环境国家重点实验室，广东 广州 510301；2.中国科学院大学，北京 100049 摘要：抗生素作为防治细菌性疾病的药物和生长促进剂被大量应用于水产养殖业中，然而抗生素在养殖环境中的残留可能会诱导耐药性细菌的产生、对非靶生物产生毒害和对水产品消费者造成健康威胁等。近年来，国内外关于抗生素污染特征的研究主要集中在河流、河口湾和污水处理厂等水环境中，而对水产养殖区抗生素污染的研究较少。利用固相萃取、高效液相色谱/串联质谱法调查了 3 种磺胺类、3 种喹诺酮类、1 种四环素类和 2 种大环内酯类抗生素在珠江口典型水产养殖区水和沉积物中的含量水平，揭示其在典型水产养殖环境中的污染现状与分布特征，以期为我国水产养殖区抗生素的环境风险评价提供科学依据。结果表明，在所有样品中磺胺类抗生素均未检出，其他 3 类抗生素残留浓度和检出率大小顺序为喹诺酮类抗生素四环素类抗生素大环内酯类抗生素。在水和沉积物中分别检出 2 类 3 种(诺氟沙星、氧氟沙星和四环素)和 3 类 5 种(诺氟沙星、氧氟沙星、恩诺沙星、四环素和脱水红霉素)抗生素残留，平均质量浓度分别在 7.6359.00 ngL-1和 0.9785.25 ngg-1之间。沉积物中抗生素检出率和种类均比水中的高，表明沉积物既是抗生素的储存库又是水中抗生素潜在的污染源。相同养殖模式下，养殖时间越长，抗生素的总量越高，显示出抗生素的累积效应。珠江口水产养殖区废水的排放可能是周围水环境中抗生素污染的重要来源之一。关键词：抗生素；污染；水；沉积物；水产养殖区；珠江口 中图分类号：X55 文献标志码：A 文章编号：1674-5906（2013）02-0304-07 引用格式：梁惜梅，施震，黄小平.珠江口典型水产养殖区抗生素的污染特征J.生态环境学报,2013,22(2):304-310.LIANG Ximei,SHI Zhen,HUANG Xiaoping.Occurrence of antibiotics in typical aquaculture of the Pearl River Estuary J.Ecology and Environmental Sciences,2013,22(2):304-310.抗生素(Antibiotics)是生物(包括微生物、植物和动物等)在其生命活动过程中所产生的(或由其他方法获得的)，能在低微浓度下有选择地抑制或影响它种生物功能的有机物质1-2。随着水产养殖业的发展，抗生素在促生长、预防和治疗感染性疾病方面被广泛使用，为动物的快速、健康生长做出了重要的贡献3。但是，抗生素在水产养殖业的广泛使用，也不可避免地造成了水环境中抗生素的残留，并可能会引发多种危害，例如对细菌产生选择压力诱导抗生素抗性基因、对非靶生物产生毒害、对水产品消费者造成健康威胁等4-7。因此，对水产养殖环境中抗生素污染的研究具有非常重要的意义。然而，近年来国内外关于抗生素污染特征的研究主要集中在河流、河口湾和污水处理厂等水环境中8-11，对水产养殖区中抗生素污染的研究虽略见报道12-13，但大多集中于特定种类抗生素检测方法的建立和残留浓度的检测，而对不同养殖模式或养殖时间条件下抗生素残留浓度和种类的比较研究还较为少见14。本研究以珠江口不同养殖模式或养殖时间的典型水产养殖区作为研究对象，调查了 3 种磺胺类、3 种喹诺酮类、1 种四环素类和2 种大环内酯类抗生素在养殖区水和沉积物中含量水平，揭示其在典型水产养殖环境中的污染现状与分布特征，评价其潜在危害，旨在为我国水产养殖区抗生素使用和残留的环境风险评价提供科学依据。1 材料与方法 1.1 主要仪器与试剂 Agilent 1100 高效液相色谱仪(美国 Agilent 公司)、API 4000 质谱联用仪(美国 Aplied Biosystems公司)；十二孔固相萃取装置(美国 Supelco 公司)；HSC-12A 氮吹仪(天津恒奥科技有限公司)；超声波清洗器(美国 Branson 公司)；旋转蒸发仪(瑞士BCHI 公司)；Advantage 2.0 冷冻干燥机(美国 VirTis 公司)；pH 计(美国 Orion 公司)。磺胺嘧啶(SDZ)、磺胺二甲基嘧啶(SMZ)、磺胺甲基异噁唑(SMX)、诺氟沙星(NOR)、氧氟沙星(OFL)、恩诺沙星(ENR)、四环素(TC)、红霉素(ETM)梁惜梅等：珠江口典型水产养殖区抗生素的污染特征 305 和罗红霉素(RTM)标准品(美国 Sigma 公司)；回收率指示物13C3-咖啡因(美国剑桥同位素实验室)；Oasis HLB 固相萃取小柱(500 mg/6mL，美国 Waters公司)；SAX 阴离子交换小柱(200 mg/6mL，德国CNW 公司)；色谱纯甲醇、乙腈(德国 Merck 公司)；乙二酸四乙胺二钠盐(Na2EDTA)、氢氧化钠、柠檬酸、柠檬酸钠和甲酸(分析纯，广州化学试剂厂)；0.7 m 玻璃纤维滤膜(GF/F，英国 Whatman 公司)；0.22 m 针头式过滤器(有机，天津市津腾实验设备公司)。分别准确称取 10 mg 标准品，磺胺类、四环素类和大环内酯类抗生素用甲醇溶解并定容于 100 mL 棕色容量瓶中，而喹诺酮类抗生素用含 0.5%(V/V)氢氧化钠溶液(1 molL-1)的甲醇预溶并定容，均配成 100 mgL-1的单标储备液。所有的标准品储备液置于-20 中避光保存。红霉素在 pH 小于 7 的条件下不稳定，会发生分子内脱水环合反应，因此，人和动物口服后易被胃酸破坏生成脱水红霉素。环境中检测到的红霉素多以脱水的形式存在15。脱水红霉素标准液(ETM-H2O)按照 Xu 等16方法由红霉素储备液制备获得。1.2 样品的采集 选定的水产养殖区位于珠江口西岸（如图 1 所示），于 2012 年 3 月采集了该养殖区内 2 个四大家鱼(青 鱼(Mylopharyngodon piceus)、草 鱼(Ctenopharyngodon idellus)、鲢鱼(Hypophthalmichehys molitrix)、鳙鱼(Aristichthys nobilis)养殖塘(F1与F2)、2个南美白对虾(Penaeus vannmei)养殖塘(S1 与 S2)和 1 个南美白对虾与青蟹(Scylla serrata)混养塘(S3)的表层水和沉积物样本(图 1)。其中 F1、F2、S1 和 S2 的养殖时间分别为 1 个月、4 个月、4 个月(已收获)和 3 个月，水中盐度分别为 1.8、2.3、2.0和 2.1，其塘龄均约为 5 年；S3 为全年养殖，水中盐度为 8.7，塘龄为 7 年。每个采样点均使用采水器在养殖塘的四角及中央采集表层(0.5 m)水样各 5 L，现场充分混匀后装于 5 L 样品瓶中；同时采集沉积物样品，充分混匀后取 200 g 左右装入样品袋中。此外，采集养殖区内离地面深度约为 25 m 的地下水样品作为空白对照(G)(图 1)。所有样品采集后随即放于 4冰盒中保存。1.3 样品处理 水样采集后 24 h 内经 0.7 m 玻璃纤维滤膜过滤。对已过滤水样中抗生素的提取参照 Gulkowska等15和 Xu 等16方法。取 1 L 已过滤水样加入 10 mL 50 gL-1 Na2EDTA，用甲酸(5 molL-1)调 pH 至 3.0，加入 100 ng 回收率指示物13C3-咖啡因，充分混匀，然后用 Oasis HLB 小柱进行固相萃取富集。上样前，HLB 柱依次用 6 mL 甲醇和 6 mL 超纯水进行活化平衡；然后水样以小于 10 mLmin-1的速度过 HLB柱；上样后，用 10 mL 超纯水淋洗 HLB 柱，然后 图 1 珠江口水产养殖区采样站位图 Fig.1 Sketch map showing sampling locations in aquaculture area of the Pearl River Estuary 306 生态环境学报 第22卷第2期（2013年2月）在负压下抽干 10 min；最后用 6 mL 甲醇洗脱，洗脱液收集于 10 mL 具塞离心管中。沉积物样品经冷冻干燥机干燥 24 h 后，用玛瑙研钵研磨并过 60 目筛。沉积物中抗生素的提取参照 Zhou 等17方法进行。准确称取 2 g 沉积物置于30 mL 玻璃离心管中，加入 100 ng 回收率指示物13C3-咖啡因，涡旋混匀 1 min，4 避光放置过夜后，分别加入 10 mL 乙腈和 0.2 M 柠檬酸缓冲液(pH=3)，涡旋混匀 1 min，超声波提取 15 min，然后 1370 gmin-1 离心 10 min，上清液转移至圆底烧瓶中并 4 避光保存，残留物重复提取 3 次并将上清液合并至圆底烧瓶中。所提取的上清液 55 旋转蒸发至体积不变以去除有机溶剂后，加入 0.2 g Na2EDTA，并用超纯水定容至 200 mL，充分混匀，过 SAX-HLB 萃取系统。上样前，用 SAX-HLB 串联柱依次用 10 mL 甲醇和 10 mL 超纯水活化平衡；然后稀释样品以小于 5 mLmin-1的速度过柱；上样后，取下 SAX 柱，并用 10 mL 超纯水淋洗 HLB 柱，在负压下抽干 10 min；最后用 12 mL 甲醇洗脱，洗脱液收集于 15 mL 具塞离心管中。所有的洗脱液在室温下氮吹近干，以体积比为6040 的甲醇-水定容至 1 mL，经 0.22 m 针头式过滤器过滤于进样瓶中待测。1.4 色谱-质谱条件 色谱柱为 ZORBAX C18(2.1 mm150 mm;5 m)；流动相为乙腈(A)和 0.2%(V/V)甲酸溶液(B)，柱温 25，流速 0.3 mLmin-1；进样量 5 L。梯度洗脱顺序：0 min，12%A；2 min，50%A；10 min，70%A；10 min，12%A；20 min，12%A。质谱离子源为电喷雾电离(ES I+)；检测方式为多反应监测模式；辅助加热气温度 500；电离电压 5.5 kV。每种抗生素的质谱检测参数见表 1。1.5 方法回收率及质量控制 以养殖区水和沉积物为基质进行加标回收实验，加标水平分别为 50 ngL-1和 50 ngg-1(n=4)。养殖区水中抗生素的回收率在 73.05110.48%之间，沉积物中的回收率在 57.8188.90%之间(表 2)。水中抗生素的检出限为 1.5810.15 ngL-1,沉积物的的检出限为 0.383.12 ngg-1(表 2)。化合物采用外标法定量。配制一系列质量浓度范围 0.11000 ngL-1的混合标准溶液进行测定，得到质量浓度-峰面积标准工作曲线，相关系数均大于 0.992。采用目标化合物的母离子和特征子离子为监测离子对(MRM)，并结合不同的保留时间对目标化合物进行定性。并在所有的实验中加入回收率指示物，对实验过程进行监控。回收率指示物13C3-咖啡因在水样品中的平均回收率为 95.90%，在沉积物样品中为76.26%。表 1 抗生素和回收率指示物的质谱分析参数 Table 1 MS/MS parameters for antibiotics and surrogate standard 抗生素 母离子子离子 去簇电压/V 碰撞能/eV磺胺嘧啶 251.2 251.2 156.2 108.2 60 60 23 36 磺胺二甲基嘧啶 279.2 279.2 186.2 156.2 65 65 25 27 磺胺甲基异噁唑 254.2 254.2 156.2 108.2 62 62 23 37 诺氟沙星 320.2 320.2 302.3 233.3 70 60 31 36 氧氟沙星 362.4 362.4 318.3 261.3 90 90 27 39 恩诺沙星 360.3 360.3 316.4 245.4 50 50 29 39 四环素 445.2 445.2 410.2 427.4 54 54 27 22 脱水红霉 716.5 716.5 559.0 158.6 60 60 26 43 罗红霉素 837.6 837.6 680.2 158.7 70 70 31 47 13C3-咖啡因 198.2 198.2 140.3 112.3 75 75 28 32 表 2 抗生素的加标回收率和检出限 Table 2 Recoveries and limits of quantification of antibiotics in this study 化合物 回收率标准偏差/%检出限 水 沉积物(水)/(ngL-1)w(沉积物)/(ngg-1)磺胺嘧啶 76.22 9.94 86.11 11.03 1.96 0.45 磺胺二甲基嘧啶 82.27 2.61 82.53 6.01 1.58 0.38 磺胺甲基异噁唑 73.05 1.80 88.27 8.68 2.01 1.07 诺氟沙星 110.48 11.01 59.18 3.95 5.63 3.12 氧氟沙星 87.41 6.56 57.81 2.72 5.54 0.99 恩诺沙星 91.29 5.53 61.07 1.90 5.10 1.25 四环素 86.94 4.42 81.50 3.63 4.89 0.74 脱水红霉 84.88 10.40 88.90 7.73 10.15 0.62 罗红霉素 87.16 9.92 71.92 5.39 9.35 2.63 梁惜梅等：珠江口典型水产养殖区抗生素的污染特征 307 2 结果与讨论 2.1 抗生素在珠江口典型水产养殖区中的含量水平及其影响 空白对照 G 中没检测到抗生素的存在。表 3 显示了 9 种抗生素在珠江口典型水产养殖区水和沉积物中的含量水平。结果显示，在所有样品中，共检测到 5 种抗生素，其中在沉积物样品中诺氟沙星、氧氟沙星、恩诺沙星和四环素的检出率较高，大于80%，平均质量分数在 1.7985.25 ngg-1之间；水中诺氟沙星和氧氟沙星的检出率较高，大于 60%，平均质量浓度分别为 59.00 ngL-1和 7.63 ngL-1。而磺胺嘧啶、磺胺二甲基嘧啶、磺胺甲基异噁唑和罗红霉素在所有样品中均未检出。该结果表明在珠江口水产养殖环境中不同抗生素的检出率和含量水平之间存在差异，这可能与这些抗生素在该地区的使用习惯及其环境行为有关18。喹诺酮类抗生素是近年来研究最多、用量较大的一类合成抗菌药19。有研究表明，喹诺酮类抗生素在河流、水产养殖区、污水处理厂等水环境中均有较高的检出率和含量，说明该类药物的使用范围广且使用量大，并能在环境中大量残留9,11,13,16。本研究在养殖区水和沉积物中均检测到喹诺酮类抗生素的存在，且与其他抗生素比较，其含量水平较高，反映了该类药物在珠江口水产养殖过程中具有较高的使用量。四环素属于天然的四环素类药物，被广泛应用于动物疾病的防治，并常作为动物促生长剂使用20。本研究中，四环素的检出率和含量水平均较高，仅次于诺氟沙星，说明该药物是珠江口水产养殖过程中常用的药物之一。大环内酯类和磺胺类抗生素也是预防动物疾病中常用的抗生素19。目前，在河流、河口和废水处理厂等水环境中常检测到这两类抗生素的存在8-9,11,17。然而，本研究只发现脱水红霉素存在于沉积物中，其他抗生素均未检出。罗红霉素主要为人用药物，一般极少应用于水产养殖业，因此该药物在珠江口水产养殖区中未检出。而其他药物均为人用和兽用药物，其检出率低或未检出，则很大程度上反映了这些药物在该地区水产养殖过程中使用率较低甚至极少使用。与其他水产养殖区比较，珠江口典型水产养殖区水中受到抗生素中等水平的污染，而沉积物中受到较高水平的污染(表 4)。诺氟沙星、恩诺沙星和四环素在其他养殖区沉积物中的含量很低或大表 4 不同水产养殖区中抗生素含量水平的比较 Table 4 Comparison of antibiotics concentrations in different aquaculture environment 样品 采样点 化合物 诺氟沙星 氧氟沙星 恩诺沙星 四环素 脱水红霉素(水)/(ngL-1)珠江口水产养殖区 29.7978.29 n.d.9.16 n.d.n.d.40.92 n.d.渤海湾养鱼塘11 265 276 n.a.n.d.272 九龙江入海口养殖区14 3.54 14.8 n.a.n.d.n.d.珠江三角洲淡水养殖区13 n.d.n.a.n.d.n.a.n.a.大亚湾海水养殖区13 n.d.n.a.n.d.n.a.n.a.w(沉积物)/(ngg-1)珠江口水产养殖区 50.24153.06 n.d.2.08 n.d.25.62 9.9824.11 n.d.1.08 天津地区淡水养殖区21 n.d.21.20 n.d.20.63 n.d.n.d.n.a.珠江三角洲淡水养殖区13 5.0313.28 n.a.n.d.7.12 n.a.n.a.大亚湾海水养殖区 13 1.888.80 n.a.n.d.n.a.n.a.n.d.为未检出；n.a.为未分析 表 3 珠江口典型水产养殖区中抗生素含量水平 Table 3 Summaries of antibiotics in typical aquaculture environment of the Pearl River Estuary 化合物 水 沉积物 检出率/%质量浓度/(ngL-1)(平均值)/(ngL-1)检出率/%质量分数/(ngg-1)w(平均值)/(ngg-1)磺胺嘧啶 0 n.d.n.d.0 n.d.n.d.磺胺二甲基嘧啶 0 n.d.n.d.0 n.d.n.d.磺胺甲基异噁唑 0 n.d.n.d.0 n.d.n.d.诺氟沙星 100 29.7978.29 59.00 100 50.24153.06 85.25 氧氟沙星 60 n.d.9.16 7.63 80 n.d.2.08 1.79 恩诺沙星 0 n.d.n.d.80 n.d.25.62 10.05 四环素 40 n.d.40.92 40.84 100 9.9824.11 15.52 脱水红霉 0 n.d.n.d.40 n.d.1.08 0.97 罗红霉素 0 n.d.n.d.0 n.d.n.d.n.d.为未检出 308 生态环境学报 第22卷第2期（2013年2月）多未检出，而在本研究检测到的含量水平却较高，为其他养殖区的 3 倍以上，有的甚至达几十倍，说明珠江口水产养殖区沉积物已经受到较大程度的污染，必须引起特别关注。抗生素的大量残留可能会对珠江口水产养殖区带来一系列负面的影响，例如诱导细菌产生耐药性甚至多重耐药性、破坏微生态平衡、对水生生物产生的毒性效应等。Tendencia等22研究表明与未使用过抗生素的池塘比较，使用过抗生素的虾塘中抗多重药物的弧菌普遍存在。李子杰3研究表明抗生素在抑制或杀灭病原菌的同时，可能会抑制水生动物体内外有益的微生物，导致微生态环境恶化而引起新的疾病。聂湘平等23研究发现诺氟沙星对蛋白核小球藻的 96 h EC50(半抑制浓度)为 30.78 mgL-1，属于低毒，但诺氟沙星对蛋白核小球藻谷胱甘肽硫转移酶(GST)和过氧化氢酶(CAT)具有显著影响。Zhang 等18研究也表明水环境中残留的依诺沙星、环丙沙星和磺胺甲基异噁唑分别对费氏弧菌、铜绿微囊藻和聚球藻具有高的生态风险。此外，珠江口水产养殖区抗生素的残留除了对自身养殖环境的健康发展带来不良的影响外，也可能会对周围水环境带来负面的影响。姜蕾等24研究表明水产养殖废水是水环境潜在的抗生素污染源。Zou 等11研究也表明渤海湾周围水产养殖废水的排放是渤海湾沿岸水中抗生素污染的重要来源之一。在水产养殖过程中，养殖区中残留的抗生素会随着养殖水的直接或间接排放进入到周围水环境中，并造成一定程度的污染25。因此，珠江口水产养殖区废水的排放应该得到有效的处理和控制。2.2 抗生素在珠江口典型水产养殖区中的分布特征 珠江口典型水产养殖区中抗生素的分布特征如图 2 所示。F1 与 F2 具有相同的养殖模式(四大家鱼养殖塘)，塘龄均约为 5 年，养殖时间分别为 1个月和4个月(在此过程中均未换水)，由图2可知，F2 水和沉积物中抗生素的总含量均比 F1 的高，说明抗生素的含量在水产养殖过程中会随着养殖时间的延长而增加，具有累积效应。在南美白对虾养殖塘中，S1 已于 2012 年 1 月全部收获南美白对虾(养殖期为 4 个月)和排空养殖水体，并于 2012 年 2月底注入 1/3 的地下水(水深约 0.5 m)，但与 S2(养殖期为 3 个月)比较，其沉积物中仍含有较高含量的抗生素，这可能是养殖过程中抗生素在沉积物中累积所致，同时也说明即使进行养殖水体的排空，吸附在沉积物中的抗生素的含量仍处于较稳定的状态，不会随着水的排放而大量减少；S1 水中含有较低含量的诺氟沙星，但其水源 G 中没检测到抗生素的存在，说明 S1 水中的诺氟沙星来源于沉积物，抗生素在水和沉积物间的迁移转化是一个动态平衡的过程，也表明沉积物是抗生素污染物的储存库，同时也是水中抗生素潜在的污染源8,17。与其他抗生素比较，诺氟沙星含量最高(图 2)，且水溶性较强F1F2S1S2S3020406080100120140160(ng.L-1)(抗生素)/采样点 脱水红霉素 四环 氧氟 诺氟素诺沙星沙星沙星恩水 F1F2S1S2S3020406080100120140160180200(ng.g-1)(抗生素)/w采样点沉积物 F1F2S1S2S3020406080100/%采样点水比分抗生素含量的百 F1F2S1S2S3020406080100/%采样点比分抗生素含量的百沉积物 图 2 珠江口典型水产养殖区中抗生素的分布特征 Fig.2 Distribution of detected antibiotics in typical aquaculture environment of the Pearl River Estuary 梁惜梅等：珠江口典型水产养殖区抗生素的污染特征 309(17800 mgL-1)17，因此其从沉积物向水迁移的变化现象更为显著。S3 为青蟹与南美白对虾混养塘（以青蟹为主），样品中只检测到诺氟沙星和四环素，很大程度上反映了这 2 种药物是该塘主要使用的药物。与四大家鱼和南美白对虾养殖塘比较，S3 沉积物中抗生素的总含量最高，这可能与养殖时间有关，该塘全年养殖，且塘龄最长(7 年)，导致抗生素在沉积物中大量累积；而水中的含量较低，可能与该塘的换水频率有关，青蟹对水质的要求较高，其换水的频率因此也较高，换水时对水中抗生素的含量具有一定的稀释作用，导致水中的含量低，说明了不同养殖模式的池塘抗生素污染的种类和浓度均存在差异(图 2)。本研究结果与之前的研究报道一致。王敏等14研究表明养殖方式或养殖生物不同的养殖塘水中抗生素的种类和质量浓度都不相同。3 结论（1）在珠江口典型水产养殖区中共检出 3 类 5种抗生素残留，磺胺类抗生素在所有样品中未检出，其他类抗生素的残留浓度和检出率大小顺序为喹诺酮类抗生素四环素类抗生素大环内酯类抗生素。（2）水产养殖区沉积物中抗生素的残留较水中的稳定，且其检出率和种类均比水中的高，显示沉积物既是抗生素的储存库又是水中抗生素潜在的污染源。（3）具有相同模式的养殖塘养殖时间越长抗生素的残留量越大；而具有不同养殖模式的养殖塘抗生素污染的种类和浓度均存在差异。（4）珠江口水产养殖区抗生素的污染对养殖环境和周围水环境产生负面的影响。珠江口水产养殖区废水的排放可能会成为周围水环境抗生素污染的重要来源之一。参考文献：1 顾觉奋.抗生素M.上海:上海科学技术出版社,2001:1-2.2 周宁波,李玉杰.药物分析M.北京:化学工业出版社,2010:166-167.3 李子杰.抗生素在水产养殖区中的应用的利弊及对策J.贵州畜牧兽医,2008,32(2):23-24.4 KERRY J,COYNE R,GILROY D,et al.Spatial distribution of oxytetracycline and elevated frequencies of oxytetracycline resistance in sediments beneath a marine salmon farm following oxytetracycline therapy J.Aquaculture,1996,145(1/4):31-39.5 KIM S R,NONAKA L,SUZUKI S.Occurrence of tetracycline resistance genes tet(M)and tet(S)in bacteria from marine aquaculture sites J.FEMS Microbiology Letters,2004,237(1):147-156.6 HEMANDO M D,MEZCUA M,FEMANDEZ-ALBA A R,et al.Environmental risk assessment of pharmaceutical residues in wastewater effluents,surface waters and sedimentsJ.Talanta,2006,69(2):334-342.7 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Abstract:Antibiotics have widely been used to treat infectious diseases and promote the growth of animals in the aquaculture.However,antibiotic residues in the aquaculture environments may co-select antibiotic resistant bacteria,and potentially exert adverse effects on the non-target organisms and humans.In recent years,many efforts have been made to investigate the occurrences of antibiotics in the rivers,estuaries,and wastewater treatment plants.Nevertheless,limited studies were conducted on antibiotic residues in the aquaculture environments.Aiming to provide baseline data for assessing environmental risks of antibiotics in the aquaculture environment,the occurrence and distributions of commonly used antibiotics,including three sulfonamides,three quinolones,one tetracyclines and two macrolides,in the water and sediments of aquacultural ponds in the Pearl River Estuary were determined using a solid-phase extraction-high performance liquid chromatography-tandem mass spectrometry method.Sulfonamides were not found in the investigated aquaculture ponds.The levels and detection frequencies of detectable antibiotics decreased in the followin