类风湿关节炎相关自身抗体谱检测比对.pdf

中 华 临 床 免 疫 和 变 态 反 应 杂 志 基础研究基金项目：国家“十一五”科技支撑计划课题（，）；风湿免疫病诊疗关键技术临床推广及转化应用研究，卫生公益性行业科研专项（）；通信作者 电话：，电子信箱：类风湿关节炎相关自身抗体谱检测比对白伊娜，宋宁，胡朝军，李萍，李丽君，邓垂文，史艳萍，郑文洁，赵岩，曾小峰，张奉春，李永哲（中国医学科学院 北京协和医学院 北京协和医院风湿免疫科 风湿免疫病学教育部重点实验室，北京 ）摘要：目的了解类风湿关节炎相关自身抗体谱在我国的检测水平及各种自身抗体检测的准确率。方法由北京协和医院风湿免疫科向参与比对的实验室寄发比对品，各实验室在规定时间内将实验方法及检测结果回报。比对项目包括抗环瓜氨酸肽抗体、类风湿因子、抗角蛋白抗体、抗核周因子抗体。比对品发放和结果分析采用随机双盲法，由北京协和医院对各家医院检验结果进行分析并将结果反馈给各实验室。结果抗环瓜氨酸肽抗体、类风湿因子、抗角蛋白抗体、抗核周因子抗体正确率的平均值分别为 、及 。结论目前全国大部分实验室开展了类风湿关节炎相关自身抗体谱的检测，其中抗环瓜氨酸肽抗体和类风湿因子的检测正确率高，而抗角蛋白抗体、抗核周因子抗体的检测水平有待提高。关键词：类风湿关节炎；抗环瓜氨酸肽抗体；类风湿因子；抗角蛋白抗体；抗核周因子抗体中图分类号：；文献标志码：文章编号：（），（，）（），（），（），（）（），：；，（）：万方数据中 华 临 床 免 疫 和 变 态 反 应 杂 志 ，类风湿关节炎（，）是一种以对称性、多关节为主要表现的慢性、全身性自身免疫病。发病隐匿，致残率高，早期诊断及早期治疗对于预防骨和软骨的破坏、保护关节功能尤为重要。年 美 国 风 湿 病 学 会（，）制定了 的分类标准，该标准规定类风湿因子（，）为血清学标志物。由于此标准对 的早期诊断价值有限，随着免疫学检验技术的发展，年 与欧洲抗风湿病 联 盟（，）共同制定了 分类的新标准，将抗环瓜氨酸肽（，）抗体列为新的血清学标志物 。由此可见，相关自身抗体谱的检测及自身抗体检测的准确性对于 的早期诊断非常重要。目前，我国还没有 相关自身抗体室间质评，本文的研究结果有助于了解国内 相关自身抗体的检测现状。年，由北京协和医院风湿免疫科牵头组织了 余家医院共同参与了实验室室间自身抗体检测比对 工 作。其 中 包 括 余 家 系 统 性 红 斑 狼 疮（，）“十一五”支撑项目临床干预及注册研究?中国系统性红斑狼疮研究协作组（，）医院实验室，另外的 余家实验室包括中华风湿病学会委员单位、省级?三甲医院，参与项目单位覆盖了全国 个省市自治区。自身抗体检测实验室包括检验科实验室、风湿科实验室、中心实验室、独立实验室及企业实验室等。材料和方法比对样本抗 抗体、抗角蛋白抗体（，）、抗核周因子抗体（，）比对品各 支，均为人血清制备，由北京协和医院风湿免疫科实验室提供。比对品发放由北京协和医院向参与医院实验室寄发比对品，各参比实验室在规定时间内检测，并将结果回报。检测方法各参比实验室可采用间接免疫荧光法（，）、酶联免疫吸附法（，）、免疫渗滤层析试验（胶体金）、免疫比浊法、乳胶凝集试验（，）进行检测。实验方法各参比实验室可根据各自现行检测方法自行选择上述 种检测方法对前述种自身抗体进行定性检测，所选 种自身抗体根据各实验室开展的常规项目检测。数据分析根据回报结果，分别统计自身抗体检测的正确率及各种检测方法的正确率。结果分析采用随机双盲法，由北京协和医院对各家医院检验结果进行分析并将结果反馈给各实验室。结果项目开展情况 相关自身抗体谱参比实验室检验项目构成分别为检测抗 抗体的有 家，检测 的有 家，检测 的有 家，检测 的有 家。相关自身抗体谱检测项目组合结果：单独检测抗 抗体为 ，抗 抗体 的组合为 ，抗 抗体 （或 ）的组合为 ，的组合为 ，单独检测 （或 ）为 。相关自身抗体谱检测方法选择参比实验室检测 相关自身抗体谱采用方法统计如 下：抗 抗 体 的 检 测 方 法 主 要 为 （），为胶体金法检测。的检测方法主要分为 种，的单位用免疫比浊法检测，为 检测，为 。和 的检测方法均为 。检测结果正确率抗 抗体的准确率最高，阳性或阴性预测值 支比对品的准确率平均为 。的 支比对品准确率平均为 。及 的平均检测准确率分别为 及 （表 ）。万方数据类风湿关节炎相关自身抗体谱检测比对 表 抗 抗体检测结果正确率 样本号样本结果有效回报结果结果正常可疑异常正确率 自身抗体 异常 自身抗体 异常 自身抗体 异常 自身抗体 异常 自身抗体 正常 ：环瓜氨酸肽；：类风湿关节炎表 检测结果正确率 样本号样本结果有效回报结果结果正常可疑异常正确率 自身抗体 异常 自身抗体 异常 自身抗体 异常 自身抗体 异常 自身抗体 正常 ：类风湿因子；：类风湿关节炎表 检测结果正确率 样本号样本结果有效回报结果结果正常可疑异常正确率 自身抗体 正常 自身抗体 正常 自身抗体 异常 自身抗体 异常 自身抗体 正常 ：抗角蛋白抗体；：类风湿关节炎表 检测结果正确率 样本号样本结果有效回报结果结果正常可疑异常正确率 自身抗体 异常 自身抗体 异常 自身抗体 异常 自身抗体 异常 自身抗体 正常 ：抗核周因子抗体；：类风湿关节炎万方数据中 华 临 床 免 疫 和 变 态 反 应 杂 志 ，方法学评价在 相关自身抗体谱参比实验室中，抗 抗体和 不同检测方法的正确率见表 、。讨论 年，首次描述了一种能促进亚凝集剂量兔抗体致敏的绵羊红细胞发生凝集反应的因子，几年后 发现该现象与抗 球蛋白抗体有关 。因该抗 球蛋白抗体多发现在 患者的血清中而命名为“类风湿因子”。随着进一步的研究发现，是诊断 的重要血清学标志，其阳性率可高达 ，但 还可见于其他疾病及健康人群。高效价的 是 的危险因子，可提示疾病活动。年，和 发现了一种抗人颊黏膜上皮细胞质内透明角质颗粒的抗体 。年，等 报道了抗鼠食管上皮的角质层抗体对 诊断的特异性。年，等 通过结合包含瓜氨酸的抗原决定簇发现了抗 抗体对于 的诊断具有特异性，并首次采用 进行抗 抗体表 抗 抗体不同检测法的正确率 样本号酶联免疫吸附法免疫渗滤层析试验 自身抗体 自身抗体 自身抗体 自身抗体 自身抗体 ：环瓜氨酸肽；：类风湿关节炎表 不同检测方法的正确率 样本号酶联免疫吸附法免疫比浊法乳胶凝集试验 自身抗体 自身抗体 自身抗体 自身抗体 自身抗体 ：类风湿因子；：类风湿关节炎检测用于辅助诊断 。及 在诊断 时特异性高，可达 ，但敏感性差，只能达到 。近年来研究发现，及 的靶抗原为丝集蛋白，该抗原位点用于合成 ，所以也有学者认为抗 抗体是以上两种自身抗体共同靶抗原位点，可以替代 及 ，。相关自身抗体的发现使 早期诊断及早期治疗变成现实。的早期临床表现往往仅为关节滑膜炎，而关节滑膜炎只有少部分会发展为 。因此，早期诊断不能只依靠临床表现。然而，在 典型症状发作的前几年，患者体内就已经产生了自身抗体。研究发现，抗 抗体可以出现在疾病发作的几年甚至十几年前 。相关自身抗体是 早期诊断的关键指标，一旦诊断可迅速进行早期治疗，以便更好地预防骨关节的侵袭破坏。由此，检测 相关自身抗体的准确性直接影响了 患者的诊断、治疗及预后。本次比对结果分析显示，抗 抗体的准确率最高，无论是阳性或阴性预测值的准确率都高于 。抗 抗体一代抗原为直线性瓜氨酸钛。年，等 成功合成了含有二硫键的 ，从而克服了一代抗原易被聚苯乙烯吸收及结构不稳定的缺点，提高了该抗体检测的敏感性与特异性。也成为目前抗 抗体最常用的检测方法。随着近十年来的不断发展，试剂盒的质量不断完善提高，逐渐采用酶标仪判读检测结果，减少了人为因素的影响。本次比对抗 抗体各医院的检测结果准确。是 相关自身抗体中最早且最广泛应用于临床检测的实验项目，在我国 检测在 相关自身抗体中也是开展最早，因此 检测的技术和试剂质量都已经很成熟。本次比对发现回报结果较少，对此现象进行的调查发现，由于本次比对品血清量相对较少且运输过程中出现损耗，一些医院采用上机检测需要血清量大所以未能完成检测。本次比对结果中 的准确率较高，支比对品准确率均高于 。本次比对结果分析中发现，及 的准确率相对较低，其中用于 检测中的 个比对品的检测准确率仅为 。分析原因，这两种抗体的检测方法均为 ，检测结果需要通过人眼在荧光显微镜下进行观察判断。荧光显微镜的荧光强弱有所差万方数据类风湿关节炎相关自身抗体谱检测比对 异，各实验室无法统一；另外，由于结果为人为操作，增加了主观因素，存在水平差异，这些都影响了 及 检测的准确性。各医院均应根据自身原因发现检测中的问题，及时进行自诊。本次比对的参与医院级别主要为三级医院，所占比例为 ，二级医院仅有 家。为促进自身免疫病规范化诊疗技术在全国推广普及，全面掌握 相关自身抗体的检测水平，更深入了解我国自身抗体检测现状，今后比对工作的开展需要进一步完善和改进，邀请更多医院尤其是二级医院参加。参考文献 ，?：，：，：，：，；，：，：，：，：，：，：，：，：？，：，？，：，：，：（收稿）万方数据