超高效液相色谱串联质谱法同时测定水、土壤及粪便中25种抗生素.pdf

DOI:10.11895/j.issn.0253鄄3820.140546超高效液相色谱/串联质谱法同时测定水、土壤及粪便中 25 种抗生素郭欣妍摇 王 娜*1摇 郝利君2摇 智 勇3摇 许 静1摇 王昝畅1摇 单正军11(环境保护部南京环境科学研究所,南京 210042)2(中国药科大学理学院分析化学教研室,南京 211198)摇 摇3(南京信息工程大学,南京 210044)摘摇 要摇 本研究通过超声提取鄄固相萃取,建立了利用超高效液相色谱/串联质谱同时分析粪便、土壤和水体中 25 种兽药抗生素的方法,考察了串联 SAX 小柱对土壤样品和粪便样品的净化效果,以及正己烷提取对粪便样品提取液脱脂的净化效果。实验结果表明:本方法对 25 种兽药抗生素加标回收率为 50.0%121.9%,相对标准偏差为 1.1%14.7%(n=9);土壤和粪便的方法检出限为 0.0002 0.0560 滋g/kg,水体的方法检出限为 0.002 0.28 ng/L;串联 SAX 强阴离子交换柱后,土壤样品的基质效应降低为 75%160%之间,粪便样品降低为 55%120%之间;粪便样品经正己烷脱脂后,基质效降为 55%120%之间。已将本方法应用于养殖场周边环境介质的检测。关键词摇 抗生素;喹诺酮类;磺胺类;四环素类;大环内酯类;液相色谱鄄串联质谱摇 2014鄄06鄄27 收稿;2014鄄09鄄16 接受本文系环保公益性行业科研专项(Nos.201109038,201309031)资助项目*E鄄mail:wangna nies.org1摇 引摇 言兽药抗生素除了被广泛用于预防和治疗动物疾病1,还有一大部分在畜禽养殖业中以亚治疗剂量添加于动物饲料中2,3,起到刺激动物生长和促进增产的作用。兽药抗生素在动物体内不能完全代谢降解,随畜禽粪便和尿液排出的比例很高4,这些含兽药抗生素的畜禽粪便可通过有机肥料的施用进入农田土壤,并有可能通过渗透、径流、淋溶等方式迁移到地表水和地下水中,而水体中的兽药抗生素也有可能被沉积物吸附5,6。已有不少文献报道了粪便、土壤、水体和沉积物等环境介质中检测到高浓度的兽药抗生素7,8。近年来,国内外对抗生素的研究日趋重视,关于环境中抗生素残留检测的研究很多7,8。但由于环境介质成分的复杂性会对抗生素的分析带来不可预知的干扰,严重影响分析方法的准确性,开发一种能有效降低复杂环境介质的基质效应干扰,并且同时检测不同环境介质中多类抗生素残留的分析方法尤为重要。马丽丽等9报道了一种土壤中同时检测磺胺类、四环素类、氟喹诺酮类 18 种抗生素的方法,葛峰等10报道了固相萃取鄄超高效液相色谱鄄串联质谱法同时测定有机肥中四大类 18 种抗生素残留的方法,但上述方法均忽略了复杂基质对检测的影响,缺少对复杂基质的净化研究。本研究通过超声提取鄄固相萃取,建立了 25 种目标抗生素的高灵敏检测方法,实现了对 25 种抗生素在土壤、粪便和水体介质中残留的同时分析,并且验证了 SAX 小柱对粪便(土壤)样品提取液的净化效果和正己烷对粪便样品提取液脱脂的净化效果,提供了能降低粪便(土壤)样品基质效应行之有效的方法。2摇 实验部分2.1摇 仪器与试剂ACQUITYTM超高效液相色谱仪鄄Quattro Premier XE 质谱仪,配 MassLynx V.4.1 软件 Waters Acqu鄄ity;UPLC BEH C18色谱柱(100 mm 伊 2.1 mm,1.7 滋m)。以上仪器购自美国 Waters 公司。真空冷冻干燥机(美国 Virtis 公司);高速冷冻离心机(德国 Sigma 公司);Milli鄄Q 超纯水器(美国 Millipore 公司);AG鄄285 电子天平(瑞士 Mettler 公司);MG鄄2200 氮吹仪(日本 EYELA 公司);12 通道固相萃取装置(美第 43 卷2015 年 1 月摇 摇 摇 摇 摇摇 摇 摇 摇 摇 摇 摇分析化学(FENXI HUAXUE)摇 研究报告Chinese Journal of Analytical Chemistry摇 摇 摇 摇 摇摇 摇 摇 摇 摇 摇 摇第 1 期13 20国 Waters 公司);Waters Oasis HLB 固相萃取柱(200 mg,6 mL,美国 Waters 公司);强阴离子 SAX 交换柱(200 mg,6 mL,安谱公司)。乙腈、甲醇,甲酸(色谱纯,德国 Merck 公司);实验用水为经 Milli鄄Q 净化系统(0.22 滋m 孔径过滤膜)过滤的去离子水;磷酸盐缓冲液(pH=3):将27.2 g KH2PO4与1.35 mL H3PO4用去离子水定容至1 L。标准品:诺氟沙星(Norfloxacin,99.5%),环丙沙星(Ciprofloxacin,95.0%),恩诺沙星(Enrofloxacin,98.0%),氧氟沙星(Ofloxacin,99.0%),氟罗沙星(Fleroxacin,99.0%),沙拉沙星(Sarafloxacin,99.0%),磺胺嘧啶(Sulfadiazine,98.0%),磺胺甲嘧啶(Sulfamerazine,99.0%),磺胺二甲嘧啶(Sulfa鄄methazine,99.0%),磺胺间二甲氧嘧啶(Sulfadimethoxine,98.0%),磺胺甲恶唑(Sulfamethoxazole,99.5%),磺胺噻唑(Sulfathiazole,99.5%),磺胺氯哒嗪(Sulfachloropyridazine,100.0%),四环素(Tetra鄄cycline,98.0%),土霉素(Oxytetracycline,95.6%),金霉素(Chlortetracycline,92.0%),强力霉素(doxy鄄cycline,98.5%),红霉素(Erythromycin,95.30%),罗红霉素(Roxithromycin,98.20%),泰乐菌素(Tylosin,91.70%),交沙霉素(Josamycin,99.0%),克林霉素(Clindamycin,93.4%),林可霉素(Linco鄄mycin,99.0%),万古霉素(Vancomycin,91.20%)头孢唑林钠(Cefazolin Sodium,96.5%),均购于德国Dr.Ehrenstorfer 公司。内标:环丙沙星鄄d8(Ciprofloxacin鄄d8,98.0%),磺胺二甲嘧啶鄄d6(Sulfamethazine鄄d6,98.0%),四环素鄄d6(Tetracycline鄄d6,95.0%),红霉素鄄d4(Erythromycin鄄d4,99.0%),均购自美国多伦多研究化学品公司。上述标准品均用甲醇配制成 1000 mg/L 标准储备液,其中磺胺嘧啶及喹诺酮类的 6 种药物因在甲醇中溶解度较小,使用1%氨水鄄甲醇配制,-40 益储存。配制上述25 种抗生素的10 mg/L 混合标准液。2.2摇 提取和净化方法水样:准确量取经 0.45 滋m 玻璃纤维滤膜过滤的水样 500 mL,加入 10 滋L 内标(10 mg/L 的磺胺二甲嘧啶鄄d6、四环素鄄d6、环丙沙星鄄d8 和 1.0 mg/L 去水红霉素鄄d4)以及0.4 g EDTA,并立即在4 益储存。在提取之前,用甲酸调节至 pH 2.0 3.0。预先依次用 6 mL 甲醇、6 mL 超纯水、6 mL 磷酸盐缓冲液(pH=3)对 HLB 固相萃取柱淋洗活化。控制流速约为 3 5 mL/min,将提取液上柱。过柱完成后,用6 mL 超纯水冲洗 HLB 柱。抽真空 30 min,以去除柱中残留水分,然后将 HLB 柱在 N2保护下干燥10 min。最后以2 mL 甲醇洗脱3 次,收集洗脱液,并在室温下用 N2吹至近干,用乙腈鄄0.2%甲酸(1颐9,V/V)混合液定容至 1mL,涡旋振荡 2 3 min,18000 r/min 离心 10 min,取上清液待分析。土壤样品:土壤采自农田表层(0 20 cm)新鲜水稻土土样,剔除其中的小石块以及植物残体,将土壤样品置于-40 益冷冻一周后,使用冷冻干燥仪进行干燥。研磨干燥土样,过250 滋m 孔径尼龙筛,置于-40 益存放。准确称取 10 g依0.01 g 经研磨的土壤样品于 50 mL 离心管中,加入 10 滋L 内标物质,并加入 0.4 g EDTA 以及混合提取液 30 mL(磷酸盐缓冲液(pH=3)鄄乙腈,1颐 1,V/V),涡旋 2 min,超声提取20 min,4 益下 8000 r/min 离心 8min,收集上层提取液。反复提取 2 次后,合并提取液并混匀。用旋转蒸发仪旋蒸(220 Pa,50 益)提取液,直至剩余 30 mL 以下,用蒸馏水稀释到 200 mL,用甲酸调至pH 2.8 3.0,将稀释液过 0.45 滋m 孔径玻璃纤维微孔滤膜,以去除大颗粒杂质。土壤提取液用 SAX鄄HLB 串联固相萃取柱净化与富集,过柱完成后,去除 SAX 柱,其余处理过程与水样方法相同粪便样品:粪便样品置于-40 益冷冻一周,使用冷冻干燥仪进行干燥。研磨干燥粪便样,过250 滋m孔径尼龙筛,置于-40 益 存放。准确称取5 g依0.01 g 经研磨的粪便样品于50 mL 离心管中,加入10 滋L内标物质。提取、浓缩、稀释过程与土壤样品相同。稀释液用100 mL 正己烷萃取2 次,脱去粪便中的脂肪。余下处理过程与土壤样品相同。2.3摇 LC鄄MS/MS 测定MS 检测条件:电喷雾离子源(ESI),离子源温度为 120 益,脱溶剂温度为 380 益,脱溶剂气和锥孔气为氮气,脱溶剂气流速为 500 L/h,锥孔气流速为 50 L/h,碰撞气为高纯氩气,采用多反应监测模式(MRM)检测。ESI鄄MS/MS 选择性反应正离子检测,进样 5 滋L,检测离子和各子离子碰撞能量见表 1。HPLC 测定条件:柱温:35 益,流动相:乙腈(A)和 0.2%(V/V)甲酸(B),流速 0.3 mL/min;测定时采 用的流动相梯度为:0 7min,10%40%A;7 9min,40%60%A;9 9.01min,60%10%A;41 摇 摇分 析 化 学第 43 卷表 1 目标抗生素和 4 种内标主要的 MRM 参数Table 1摇 MRM parameters for of antibiotics tested and four kinds of internal standard抗生素Antibiotics母离子Parent ion(m/z)子离子Product ion(m/z)停留时间Residence time(s)锥孔电压Cone voltage(V)碰撞能Collision energy(eV)诺氟沙星 Norfloxacin(NFX)320.2276.1*/233.10.033018/30环丙沙星 Ciprofloxacin(CFX)332.2288.1*/245.10.033517/25恩诺沙星 Enrofloxacin(EFX)360.2316.2*/245.20.034020/27氧氟沙星 Ofloxacin(OFX)362.1318.2*/261.10.033018/30氟罗沙星 Fleroxacin(FL)370.0326.3*/269.20.033030/18沙拉沙星 Sarafloxacin(SAR)386.0299.3*/342.30.034025/20磺胺嘧啶 Sulfadiazine(SDZ)251.1156.4*/91.90.032815/25磺胺甲嘧啶 Sulfamerazine(SMR)265.0155.8*/171.70.033018/15磺胺二甲嘧啶 Sulfamethazine(SMZ)279.2188.2*/124.20.033030/18磺胺二甲氧嘧啶 Sulfadimethoxine(SDM)311.1155.8*/107.90.033220/25磺胺甲恶唑 Sulfamethoxazole(SMX)254.192.2*/156.00.032530/15磺胺噻唑 Sulfathiazole(STZ)255.9155.8*/107.80.032523/13磺胺氯哒嗪 Sulfachloropyridazine(SCP)285.0155.9*/107.90.033030/15四环素 Tetracycline(TC)445.0409.9*/427.00.033318/18土霉素 Oxytetracycline(OTC)461.0425.9*/442.90.033520/17金霉素 Chlortetracycline(CTC)478.9443.8*/153.80.033520/30强力霉素 Doxycycline(DC)445.1428.2*/154.10.033020/30去水红霉素 Erythromycin鄄H2O(ERY鄄H2O)716.0158.2*/576.30.033830/20罗红霉素 Roxithromycin(RTM)837.5158.2*/680.20.034037/20泰乐菌素 Tylosin(TYL)916.2174.2*/101.10.035545/37交沙霉素 Josamycin(JOS)828.6174.2*/109.10.035540/33克林霉素 Clindamycin(CLIN)425.3126.1*/377.20.034030/20林可霉素 Lincomycin(LCM)407.3359.3*/126.10.034030/20万古霉素 Vancomycin(VAN)725.4144.2*/100.10.033015/18头孢唑啉钠 Cefazolin sodium(CFZ)455.0156.0*/323.10.032220/18环丙沙星鄄d8 Ciprofloxacin鄄d8(CFX鄄d8)340.2296.2*/249.20.034020/30磺胺二甲嘧啶鄄d6Sulfamethazine鄄d6(SMZ鄄d6)285.7187.0*/124.00.033020/30四环素鄄d6 Tetracycline鄄d6(TC鄄d6)450.2416.6*/433.30.033020/15去水红霉素鄄d4Erythromycin鄄H2O鄄d4(ERY鄄H2O鄄d4)720.1162.4*/516.90.033030/20*:定量分子(Quantitative ion)。9.01 12 min,10%A。25 种抗生素标准品及 4 种内标的典型色谱如图 1 所示。2.4摇 分析方法的质量控制本实验采用全程空白、平行样和内标对分析过程进行质量控制,确保结果的可靠性。处理数据时,采用了标准添加法对各待测化合物在土壤(粪便、天然水体)基质中存在的不可忽略的基质效应进行了校正。在环境分析中,标准添加法是校正 LC鄄ESI鄄MS/MS 法基质效应影响的可行措施。本实验中将2.3 项下处理的土壤(粪便、水样)提取液平均分成两份。其中一份直接进样分析,记录待测样品和内标的峰面积;另一份根据第一份的检出情况,精密加入各化合物标准混合工作液适量,然后进样分析,记录待测样品和内标的峰面积。依据标准添加法校正公式计算样品浓度 C=SRx/(Rs-Rx),其中 C 为校正后的浓度;S 为标准添加量;Rx为标准液添加前测得待测样品与内标峰面积比值;Rs为标准液添加后测得待测样品与内标峰面积比值。3摇 结果与讨论3.1摇 红霉素的降解与去水红霉素标准品的制备空白加标和基质加标实验均发现红霉素的回收率低于 10%,说明本方法不适合红霉素的检测,这与文献11,12报道的结果接近。同时监测红霉素和去水红霉素,可得到红霉素溶解于乙腈鄄0.2%甲酸溶液(1颐9,V/V)中时,会有明显的降解现象。张秀蓝等11在全扫描条件下分析了酸性溶液中红霉素的51第 1 期郭欣妍等:超高效液相色谱/串联质谱法同时测定水、土壤及粪便中 25 种抗生素摇 摇图1摇 目标抗生素(A)喹诺酮类(B)磺胺类(C)四环素类、万古霉素、头孢唑啉钠(D)大环内酯类的典型色谱Fig.1摇 Typical chromatograms of antibiotics tested(A)quinolones;(B)sulfonamides;(C)tetracyclines,vancomy鄄cin,cefazolin sodium and(D)macrolides1.NFX;2.OFX;3.FL;4.CFX;5.CFX鄄D;6.EFX;7.SAR;8.SDZ;9.STZ;10.SMR;11.SMZ;12.SMZ鄄D6;13.SCP;14.SMX;15.SDM;16.VAN;17.OTC;18.TC;19.TC鄄D6;20.CFZ;21.CTC;22.DC;23.LCM;24.CLIN;25.TLS;26.ERY鄄H2O;27.ERY鄄H2O鄄D4;28.RTM;29.JOS.降解产物,进一步证实了红霉素在酸性条件下发生分子内脱水环合生成脱水红霉素。由于本研究测定体系中(提取鄄固相萃取鄄浓缩鄄定容),pH 值基本维持在 2 3 之间,红霉素在此pH 值区间以脱水红霉素的形式稳定存在。因此在测定实际环境样品过程中,需通过检测脱水红霉素来实现对红霉素的监测。去水红霉素标准品在市场中难以获取,本研究用下述方法制备去水红霉素标准品:以 30%甲醇 配制 100 mg/L 红霉素,用 3 mol/L H2SO4调节至 pH 3,在室温下连续搅动 3 h,以使红霉素能完全转变为去水红霉素13,并用质谱监测红霉素的剩余量,以确证该反应进行完全。同理,以此法制备去水红霉素内标标准品。3.2摇 样品的净化由于在 ESI 模式下 UPLC鄄MS/MS 色谱系统共洗脱化合物之间存在电离竞争,基体效应(离子抑制和离子增强)是不可避免的。基质效应(ME)可表示为同一添加浓度的被分析物在基质中的信号与分析物在溶液中的信号比值,公式如下14:ME(%)=Cm/Cs伊100其中,Cm和Cs表示被分析物在基质中和在溶液中的溶度。当基质效应在80%120%之间表明基质效应可忽略,当基质效应在50%80%和120%150%之间则表明有轻微的不可忽略基质效应17。3.2.1摇 SAX 强阴离子交换柱对粪便样品和土壤样品的净化摇 土壤腐殖质多由分解的植物和动物遗体和肥料组成,约占土壤成分 1 10%,典型的菜园土的含量通常在 5%以上,腐殖质一般带负电,极容易从土壤转移到提取液中,干扰目标抗生素的测定。猪粪的质地较细,成分较复杂,含蛋白质、脂肪类、有机酸、纤维素、半纤维素以及无机盐等。按照 2.3 节的提取方法提取样品,必然会不可避免地提取出一些影响目标抗生素离子化的成分。SAX 强阴离子交换柱被放置在 HLB 固相萃取柱顶部,能有效地吸附土壤提取液中带负电的腐殖质分子以及去除粪便提取液中的带负电的杂质分子,降低其基质效应。图 2 为串联 SAX 小柱对土壤样品与粪便样品的基质效应降低效果图,串联 SAX 强阴离子交换柱后,土壤基质和粪便基质对目标抗生素离子增强或抑制的效应明显减弱,土壤样品的基质效应由 55%180%转化为 75%160%,粪便样品的基质效应由 20%165%转化为 55%120%。3.3.2摇 正己烷萃取脱脂摇 正己烷脱脂步骤一般用于肉类等脂肪含量高的样品的的前处理过程15,干61 摇 摇分 析 化 学第 43 卷摇 图 2摇 串联 SAX 小柱对土壤样品(A)和粪便样品(B)基质效应的影响(n=5)Fig.2摇 Comparison of matrix effects of soil(A)and manure(B)after SAX SPE Cartridge(SAX)(n=5)燥粪便约含有 10%15%脂肪。粪便中的脂肪溶于提取液的有机相,并在随后浓缩去除有机相的步骤中,以半固体大分子的形态转移到水相中。脂肪大分子会增加稀释液的粘稠度,在低温下还会析出,堵塞固相萃取小柱,严重影响分析过程的流畅性,脂肪大分子的存在也会增加基质对目标抗生素离子增强或抑制的效应。因此,在处理粪便样品时需要在稀释液上样前,增加正己烷萃取脱脂步骤,以降低粪便样品的基质效应。由图 3 对比可知,粪便样品的基质效应 25%190%转变为 55%120%。为保证增加正己烷萃取脱脂步骤不会降低实验的回收率,以江苏农科院猪粪空白为基底,进行加标回收实验,结果如图 3,正己烷萃取脱脂对喹诺酮类、四环素类、万古霉素和头孢唑林钠的回收率基本没有影响,并且能提高磺胺类和大环内酯类的回收率。图 3摇 正己烷脱脂对比粪便样品基质效应(A)和回收率(B)的影响(n=5)Fig.3摇 Effect of hexane on manure matrix effect(A)and recovery(B)(n=5)3.3摇 方法学确证3.3.1摇 标准工作曲线与检出限摇 采用无检出抗生素的土壤空白、粪便空白和水体空白,按 2.3 节所述方法处理后,加入混合标准溶液,配制成目标抗生素浓度为 0.0002 5.000 mg/L 的系列基质加标标准溶液,进行 UPLC鄄MS/MS 测定。以抗生素标样的 3 倍信噪比(S/N=3)所对应的标样浓度计算方法检测限(表 2),目标抗生素的相关系数在 0.990 0.998 之间。3.3.2摇 方法的回收率摇 吸取适量混合标准工作液到土壤空白、粪便空白和水体空白,配成含 25 种目标71第 1 期郭欣妍等:超高效液相色谱/串联质谱法同时测定水、土壤及粪便中 25 种抗生素摇 摇抗生素浓度范围在 0.1 300 滋g/kg(0.002 6.0 滋g/L)之间的高中低 3 个浓度的待测样品,每个浓度水平 5 份,按 2.3 节处理方法处理后,进行 UPLC鄄MS/MS 测定,记录各化合物及内标色谱峰面积。计算各待测化合物在空白水样的方法回收率(表 2),RSD 在 1.1%14.7%之间。表 2摇 目标抗生素检测限和回收率实验数据Table 2摇 Quantification limits and recovery of antibiotics tested(n=5)抗生素Antibiotics土壤 Soil检测限Detectionlimit(滋g/kg)平均回收率Average ofrecovery(%)粪便 Manure检测限Detectionlimit(滋g/kg)平均回收率Averagerecovery(%)水体 Water检测限Detectionlimit(滋g/kg)平均回收率Averagerecovery(%)NFX0.00252.60.00562.50.02107.9CFX0.00355.60.00765.40.0286.4EFX0.00351.30.00855.10.0375.6OFX0.00456.40.00561.90.0288.7FL0.00559.20.00593.40.0283.5SAR0.00352.60.00651.30.0378.4SDZ0.00276.60.00550.00.0366.1SMR0.00370.10.00856.70.0371.7SMZ0.00365.20.00852.30.0472.5SDM0.00477.40.00450.20.0452.0SMX0.00573.30.00554.60.0473.1STZ0.00377.50.00654.10.0669.6SCP0.00270.60.00550.40.0559.9TC0.00371.40.00758.70.03121.9OTC0.00581.50.00758.40.04118.0CTC0.00473.50.00553.90.0492.0DC0.00372.30.00561.90.0376.2ERY鄄H2O0.000373.30.000450.80.00277.1RTM0.000268.10.000654.00.00355.7TYL0.000358.70.000655.50.00356.2JOS0.000354.70.000569.80.00356.8CLIN0.000486.40.000655.40.00475.7LCM0.000356.30.000756.30.00550.4VAN0.05664.70.02365.90.1255.2CFZ0.04368.30.0273.20.2870.73.4摇 实际样品检测2014 年 3 月在南京市六合区养猪场采集的样品主要有水样、土壤、猪粪。粪便样品分别为养殖场饲养的母猪、育肥猪、仔猪排放。采集的 3 份水样为从猪场排出的废水,水样釆集方法是使用采水器取深度 0.5 m 处的水。土样采自该养殖场周边菜地 0 20 cm 的表层土壤,在直径 50 cm 左右的范围内取样约 1 kg。采用本方法对粪便、土壤和水样进行分析,结果见表 3。由表 3 可知:(1)该养猪场粪便样品中检出的抗生素主要为四环素类抗生素和大环内酯类抗生素,检出的抗生素种类较为丰富,并且育肥猪、仔猪和母猪的粪便中检出的抗生素品种不尽相同,这可能与喂养的商品化精饲料不同有关;(2)在猪场排出的废水中检出了喹诺酮类、磺胺类、大环内酯类等多类抗生素。猪场排出的废水存放在室外,长期暴露在阳光中,废水中的抗生素在微生物、光照等条件作用下发生水解,因此废水中抗生素的暴露浓度均低于粪便;(3)猪场菜地检出喹诺酮类和大环内酯类抗生素。喹诺酮类和大环内酯类抗生素在土壤中降解较慢,吸附性强16,17,这两类抗生素能较长时间稳定地残留在土壤基质。81 摇 摇分 析 化 学第 43 卷表 3摇 养猪场不同介质中的目标抗生素的暴露水平(单位:滋g/kg 或 滋g/L)Table 3摇 Exposure levels of target antibiotic on different media in pig farm(unit:滋g/kg or 滋g/L)样品 SampleSCPOTCDCRTMTYLJOS母猪粪便 Sowmanure鄄1NDND0.746ND6.345NDSow manure鄄2NDND0.881ND7.161ND仔猪粪便 Pigletmanure鄄1NDNDND0.030.1350.015manure鄄2NDNDND0.0350.0870.004育肥猪粪便 Finishing pigmanure鄄15.947.6511.4ND0.159NDmanure鄄24.925.3310.12ND0.204NDSampleEFXERY鄄H2ORTM土壤 Soilsoil鄄10.0050.1470.179soil鄄20.0020.1030.119soil鄄30.0070.0260.032soil鄄40.006NDNDsoil鄄50.004NDNDSampleCFXEFXOFXSDZSMZSMXRTMTYLLCM废水 Wastewater鄄10.0010.0040.0040.0030.1470.0960.0990.3920.0002Wastewater鄄2ND0.0010.0070.0010.068ND0.031.0350.0003Wastewater鄄30.0010.047ND0.0010.0650.0550.0281.3480.0002ND:低于检测限(lower than the detectable level)。References1摇 WANG Na,SHAN Zheng鄄Jun,GE Feng,SHI Li鄄Li,JIAO Shao鄄Jun.The Administration and Technique of EnvironmentalMonitoring,2010,5:14-18王 娜,单正军,葛 峰,石利利,焦少俊.环境监测管理与技术,2010,5:14-182摇 CEC.1998a.Council regulation 2788/98.Official Journal of the European Communities Legislation,L347,323摇 CEC.1998b.Council Regulation 2821/98.Official Journal of the European Communities Legislation,L351,44摇 Aust M O,Godlinski F,Travis G R,Hao X,Hao X,McAllister T A,Leinweber P,Thiele鄄Bruhn S.Environmental Pollu鄄tion,2008,156:1243-12515摇 Burkhardt M,Stamm C,Waul C,Heinz S,Stephan M.Journal of Environmental Quality,2005,34:1363-13716摇 Kay P,Blackwell,P A,Boxall A B A.Chemosphere,2005,59:951-9597摇 Tong L,Li P,Wang Y X,Zhu K.Chemosphere,2009,74:1090-10978摇 LI Yan鄄Xia,LI Wei,ZHANG Xue鄄Lian,YANG Ming.Chinese 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of SAX cartridges for soil and manure samples extract and the procedure that manure samplesdefatted with hexane was also verified.The results showed that the average recoveries of the 25 targetantibiotics were 50.0%-121.9%,the relative standard deviations(RSD)were 1.1%-14.71%(n=9),and the limits of detection(LOD)ranged from 0.0002-0.0560 滋g/kg for soil and manure and ranged from0.002-0.28 ng/L for water;After adding SAX cartridges,the matrix effects of manure samples reduced to55%-120%,and soil samples to 75%-160%;after defatting by hexane extraction,the matrix effects ofmanure sample reduced to 55%-120%.This method has been employed to detect the veterinary antibiotics inenvironmental samples of livestock farm.Keywords摇Antibiotics;Quinolones;Sulfonamides;Tetracyclines;Macrolides;Liquid chromatography鄄tandem mass spectrometry(Received 27 June 2014;accepted 16 September 2014)This work was