DB 3705_T 12-2023小黑麦耐盐性鉴定技术规程.docx

ICS65.020.20CCSB 05DB3705 东营市地方标准DB 3705/T 122023小黑麦耐盐性鉴定技术规程Technical code of practice for identification of salt tolerance in triticale2023 - 10 - 26 发布2023 - 11 - 26 实施东营市市场监督管理局发 布目次前言II1 范围12 规范性引用文件13 术语和定义14 鉴定准备14.1 培养容器的选择14.2 种子选择与处理14.3 盐溶液的制备15 萌发期处理25.1 播种25.2 培养25.3 性状调查25.4 测定值计算26 苗期处理36.1 播种36.2 培养36.3 性状调查46.4 测量值计算47 耐盐性鉴定47.1 种子萌发期耐盐性鉴定47.2 苗期耐盐性鉴定5附录 A（规范性） AMurashige & Skoog 营养液组分含量表6前言本文件按照GB/T 1.12020标准化工作导则 第1部分：标准化文件的结构和起草规则的规定起草。 请注意本文件的某些内容可能涉及专利。本文件的发布机构不承担识别专利的责任。本文件由东营市农业农村局提出、归口并组织实施。 本文件起草单位：黄河三角洲农业高新技术产业示范区盐碱地综合利用服务中心、中国农业科学院烟草研究所、山东盐碱地现代农业有限责任公司、国家盐碱地综合利用技术创新中心、山东师范大学、青岛农业大学、东营市市场监管事务服务中心。 本文件主要起草人：徐宗昌、王萌、孟晨、李义强、陈敏、杨辉、鲁雪莉、张成省、王宝山、冯晓菲、郑睿超、李影、韩国梁、肖静、唐璐璐、王晓林、崔帅、李玉玲、孙孟海。小黑麦耐盐性鉴定技术规程1 范围本文件描述了小黑麦萌发期和苗期耐盐性鉴定的鉴定前准备、萌发期和苗期处理、测定值计算、规定了耐盐性的分级标准等。 本文件适用于小黑麦种质资源萌发期和苗期耐盐性鉴定。 2 规范性引用文件下列文件中的内容通过文中的规范性引用而构成本文件必不可少的条款。其中，注日期的引用文件， 仅该日期对应的版本适用于本文件；不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本文件。 GB/T 3543.4 农作物种子检验规程 发芽试验GB 5749-2022 生活饮用水卫生标准 GB 6142-2008 禾本科草种子质量分级 3 术语和定义下列术语和定义适用于本文件。 耐盐性 salt tolerance植物在盐胁迫下其生长发育和产量形成对盐害的耐受能力。 4 鉴定准备4.1 培养容器的选择使用长、宽、深为18.0 cm14.0 cm6.0 cm规格的塑料盘作为培养床，介质使用粒径为1.0 mm 2.0 mm的蛭石。 4.2 种子选择与处理4.2.1 种子选择种子质量应符合GB 6142-2008中一级要求。每份待测样品选取种子600粒，置于干燥器中。 4.2.2 种子处理播种前使用符合GB 5749-2022中表1和表3规定的自来水冲洗小黑麦种子3 min，洗掉种子表面附着的灰尘和病原菌。 4.3 盐溶液的制备首先配制1/20 MS（Murashige & Skoog，pH=5.8,配方见附录A）液体培养基溶液做为对照溶液，搅拌待充分溶解； 配制0.9%（w/v）的NaCl溶液：9 g NaCl（分析纯，纯度大于等于99.5%）定容到1000 mL 1/20 MS 培养基中（pH=5.8），搅拌待充分溶解； 配制1.2%（w/v）的NaCl溶液：12 g NaCl（分析纯，纯度大于等于99.5%）定容到1000 mL 1/20 MS 培养基中（pH=5.8），搅拌待充分溶解。 5 萌发期处理5.1 播种使用对照溶液和0.9%的NaCl溶液将其完全浸透备用。然后用镊子将预处理的种子插于培养床中，播深1.5 cm。处理和对照均设3次重复，每个重复30粒种子。 5.2 培养将小黑麦苗盘置于光照培养箱中培养，昼/夜温度为28/25,相对湿度80%，光源为白光，光照强度750 lx1250 lx，每天光照时数16 h（光）/8 h（暗）。 5.3 性状调查5.4 测定值计算5.4.1 发芽率（G）计算按式（1）计算。 （1） 式中： G发芽率，单位为百分号（%）； N8第8 d发芽种子数，单位为粒； Ns供检种子数，单位为粒。 5.4.2 发芽指数（GI）计算按式（2）计算。 （2） 式中： GI发芽指数； Gt发芽指数，处理后第 t天的绝对发芽数，单位为粒； Dt相应的发芽天数，从培养的第2 d开始统计，至第8 d，单位为天（d）。 5.4.3 相对发芽率（RG）计算按式（3）计算培养第2 d开始，统计当天正常发芽的种子数（胚根突破种皮2 mm3 mm）。 种子萌发统计到第8 d， 并测量第8 d胚根长(种子下部到根顶端的长度)。 式中： （3）RG相对发芽率； Gt盐处理发芽率，单位为百分号（%）； Gck对照发芽率，单位为百分号（%）。 5.4.4 相对发芽势（RGF）计算按式（4）计算。 （4）式中： RGF相对发芽势； GFt盐处理发芽势； GFck对照发芽势。 5.4.5 相对发芽指数（RGI）按式（5）计算。 （5）式中： RGI相对发芽指数； GIt 盐处理发芽指数； GIck对照发芽指数。 5.4.6 相对胚根长（RRL）按式（6）计算。 （6）式中： RRL相对胚根长； RLt盐处理胚根长，单位为厘米（cm）； RLck对照胚根长,单位为厘米（cm）。 6 苗期处理6.1 播种使用对照溶液将其完全浸透备用。然后用镊子将4.2中的种子插于蛭石中，播深1.5 cm。处理和对照均设3次重复，每个重复30粒种子。 6.2 培养将苗盘放至5.2中的培养箱内，每3 d每个培养床补充对照溶液100 mL。萌发至14 d（二叶一心期） 时，处理组浇500 mL 1.2% NaCl溶液，对照组浇500 mL对照溶液浇透，1 h后倒掉多余的对照和处理溶液。 6.3 性状调查处理后第7 d测定根长（种子下部到根顶端的长度）、苗高（种子基部到幼苗顶端的长度），称量地上干生物量（蛭石表面以上幼苗所有部分的干重）。 6.4 测量值计算6.4.1 相对苗高（RMSL）计算按式（7）计算。 （7）式中： RMSL相对苗高； MSLt盐处理苗高，单位为厘米（cm）； MSLck对照苗高，单位为厘米（cm）。 6.4.2 相对根长（RMRL）计算按式（8）计算。 （8）式中： RMRL相对根长； MRLt盐处理根长，单位为厘米（cm）； MRLck对照根长，单位为厘米（cm）。 6.4.3 相对地上干重（RSDW）计算按式（9）计算。 （9）式中： RSDW相对地上干重； SDWt盐处理地上干重，单位为克（g）； SDWck对照地上干重，单位为克（g）。 7 耐盐性鉴定7.1 种子萌发期耐盐性鉴定耐盐指数按式（10）进行计算。 （10） 式中： STIg萌发期耐盐指数； RG相对发芽率； RGF相对发芽势； RGI相对发芽指数； RRL相对胚根长。 根据萌发期耐盐指数对小黑麦种质进行耐盐性分级，见表1。 表1 小黑麦萌发期耐盐性鉴定标准耐盐级别，级萌发期耐盐指数（STIg）耐盐性10.80STIg高耐盐20.60STIg0.80中耐盐30.40STIg0.60低耐盐40.20STIg0.40敏感5STIg0.20高敏感耐盐指数按式（11）进行计算。 （11） 式中： STIs苗期耐盐指数； RMSL相对苗高； RMRL相对根长； RSDW相对地上干重。 根据苗期耐盐指数对小黑麦种质进行耐盐性分级，见表2。 表 2 小黑麦苗期耐盐性鉴定标准 7.2 苗期耐盐性鉴定耐盐级别，级苗期耐盐指数（STIS）耐盐性分级10.80STIS高耐盐20.60STIS 0.80中耐盐30.40STIS 0.60低耐盐40.20STIS 0.40敏感5STIS 0.20高敏感A 附 录 A（规范性）AMurashige & Skoog 营养液组分含量表组分工作浓度（mg/L）Potassium Nitrate/硝酸钾1900Ammonium Nitrate/硝酸铵1650Potassium Phosphate Monobasic/磷酸二氢钾170Magnesium Sulfate/硫酸镁370Calcium Chloride/氯化钙440Potassium Iodide/碘化钾0.83Boric Acid/硼酸6.2Manganese Sulfate/硫酸锰22.30Zinc Sulfate/硫酸锌8.6Sodium Molybdate/钼酸钠0.25Cupric Sulfate/硫酸铜0.025Cobalt Chloride.6H2O/氯化钴0.025Na2EDTA/乙二胺四乙酸二钠37.3Ferrous Sulfate/硫酸亚铁27.8Myo-Inositol/肌醇100Glycin/甘氨酸2Thiamine.HCl/盐酸硫胺素0.1Pyridoxine.HCl/盐酸吡哆醇0.5Nicotinic Acid/烟酸0.5 A