验课教学大纲格式及样本.doc

《动物生理学》实验教学大纲
（动物医学、动物科学专业）
1．课程属性：必修
2．实验属性：非独立设课
3．学时学分：总学时70，其中理论40学时、实验30学时 学分：4
4．实验应开学期：2007秋季
5．先修课程：家畜解剖学与组织胚胎学、物理学、动物学、生物化学、有机化学
一、课程的性质与任务
《动物生理学》既是一门理论性很强的基础科学，又是一门实验性科学。动物生理学实验是动物类专业的专业基础课，对动物医学和动物科学专业更是主要实践环节之一。本课程的主要先修课是动物学、家畜解剖学与组织胚胎学、物理学、生物化学，后续课为兽医病理学、兽医药理学、家畜繁殖学等。
该课程不仅能强化理论课的教学，还具有独自的教育作用。培养学生实际操作能力、分析问题、解决问题和实验报告写作能力，养成实事求是、严谨求实的工作态度和规范操作、分工协作的工作作风。
二、实验目的与基本要求
动物生理学是一门实验学科，实验在课程学习和知识掌握中具有重要作用。通过本课程学习，学生应获得以下知识和能力：
　　1、掌握基本生理指标测量方法
　　2、掌握生理实验技能和生理手术基本操作技能
　　3、了解电生理基本操作技能
　　4、能独立分析实验结果、写出规范的实验报告
　　5、知道生理实验设计的一般原则和方法，并作初步尝试
三、实验考核方式及办法
考核方式：考查，实验报告占20%、期中成绩占10%、平时成绩占10%。
四、实验项目一览表
《动物生理学》实验项目一览表
序 实验项目 实验 实验 适用 学
号 名称 类型 要求 专业 时
1 仪器使用与手术操作技术 验证性 必做 农科类 2
2 减压神经放电 验证性 必做 农科类 3
3 呼吸运动的调节 验证性 必做 农科类 3
4 血细胞计数、血红蛋白的测定 验证性 必做 农科类 3
5 红细胞脆性的测定、沉降率的测定、 验证性 必做 农科类 3
红细胞凝集现象
6 脊髓反射、反射弧分析、蛙血管 验证性 必做 农科类 3
内血液流动观察、蛙心起搏点的观察
7 坐骨神经-腓肠肌标本的制备、阈刺激、 验证性 必做 农科类 3
阈上刺激与最大刺激、骨骼肌单收缩的
分析与复合收缩、期外收缩与代偿收缩
8 心电图的描记、动脉血压间接法测量 验证性 必做 农科类 2
9 离体肠段运动的描记 验证性 必做 农科类 3
10 循环、呼吸、泌尿综合实验 综合性 必做 农科类 5
11 不同抗心肌损伤注射液对蟾蜍 综合性 选做 农科类 10
实验性急性心肌损伤的影响（动医）
12 雌激素对雌性动物的效应（动科） 验证性 选做 农科类 5
13 雄激素对鸡冠发育的作用（动科） 验证性 选做 农科类 5
五、实验项目的具体内容
实验一 仪器使用与手术操作技术
1．本次实验的目的和要求
掌握BL-420生物机能实验系统的工作原理、使用方法和注意事项。实验方法是生理学的主要研究手段，其中包括对实验动物施行外科手术，提供急性或慢性实验动物模型，以观察和探讨某种生命活动规律。
2．实验内容或原理
简要介绍BL-420生物机能实验系统的工作原理、生理手术的组织原则及实施程序，旨在提供进行生理手术所需的基本知识。
3．需用的仪器或试剂等
刀、剪、镊子、针、线、止血器械、辅助器具、各种消毒药、麻醉药、急救药及术后护理。
4．实验步骤
生理手术一般由三部分内容组成，即术前准备、手术实施和术后动物护理。
（1）术前准备包括人员、器具和实验动物准备。
（2）手术实施前工作、手术的实施和手术结束的工作。
（3）术后动物护理术和护理。
5．教学方式
课堂讲授为主的教学方法，同时配合录象教学。
6．考核要求
弄清本实验的目的与要求；根据本次实验的具体任务，弄清实验原理、认识实验装置；认真进行每一个实验操作。
7．实验报告要求
实验报告应包括下列各项：
（1）报告的题目
（2）报告人及共同测定人员的姓名
（3）实验任务
（4）实验原理
（5）实验设备说明
（6）实验数据记录（包括原始数据记录表格和整理后的数据记录表格）
（7）数据整理与说明
（8）实验结果，要根据实验任务明确提出本次实验的结论。
（9）分析讨论，要对实验结果作出分析，对实验中发现的问题应进行讨论，对实验方法和实验设备有何改进建议也可写入此栏。
（10）回答思考题
实验二 减压神经放电
1．本次实验的目的和要求
观察减压神经传入冲动的发放特征以及动脉血压变动与减压神经传入冲动发放的相互关系，从而加深对减压反射的认识。
2．实验内容或原理
绝大多数动物的减压神经传入中枢的冲动对动脉血压的升降有监控作用。动脉血压升高时其传入冲动增加，冲动到达心血管中枢后，使迷走中枢紧张性加强，由迷走神经传至心脏的冲动增多。同时，使心交感中枢和交感缩血管中枢紧张性减弱，由心交感神经传至心脏，缩血管神经传至血管平滑肌的冲动减少。于是心搏减慢，血管舒张，外周阻力减小，使动脉血压保持在较低的水平。反之亦然。
3．需用的仪器或试剂等
BL-420生物机能实验系统、20%氨基甲酸乙酯溶液、手术台、动脉套管。
4．实验步骤
（1）连接好张力感受器，开机进入BL-420生物机能实验系统，重要参数设置如下：通道模式-1通道生物电模式、2通道血压；采集频率-10kHz；扫描速度-80ms/div；灵敏度-50uv；时间常数-0.001；滤波常数-3kHz；50Hz陷波-开。
（2）按1g/kg的20%氨基甲酸乙酯溶液耳缘静脉注射麻醉后，仰卧固定于手术台上。颈部剪毛，沿颈部正中切开皮肤，分离软组织露出气管，于气管一侧找出减压神经。
（3）用玻璃分针仔细分离神经，并去净神经上附着的结缔组织，于其下穿线备用。分离另一侧颈总动脉，插入动脉套管，描记血压。在手术过程中应随时以温热生理盐水润湿神经。
（4）观察计算机荧光屏上减压神经冲动呈群集性放电波形，其节律与血压、心率是否相应，监听器也随着这种节律变动发出极似火车开动时的声音。
（5）从耳静脉注射肾上腺素0.1-0.2mg，观察放电波形的变化。幅度和密度有否增加？同时观察血压和心率的变化。
（6）待血压恢复正常后，从耳静脉注入0.01%乙酰胆碱0.5ml，立即出现血压下降、心率
减慢。观察放电波形的幅度有否降低？密度是否变疏？
5．教学方式
以实验为主，课堂讲授为辅的教学方法，同时配合录象教学。
6．考核要求
学会动脉套管技术。
7．实验报告要求
从耳静脉注入0.01%乙酰胆碱0.5ml，立即出现血压下降、心率减慢。观察放电波形的幅度有否降低？密度是否减疏？为什么？（课后思考题）
实验三 坐骨神经-腓肠肌标本的制备、阈刺激、阈下刺激与最大刺激、骨骼肌单收缩的分析与复合收缩、期外收缩与代偿收缩
1、坐骨神经-腓肠肌标本的制备
1．本次实验的目的和要求
学习破坏蟾蜍脑和脊髓的方法.
熟悉并掌握蟾蜍坐骨神经-腓肠肌标本的制备
2．实验内容或原理
蛙类一些基本生命活动和生理功能与恒温动物相似，其离体组织器官所需的生活条件比较简单，并且易于控制和掌握，因此在生理试验中常用蛙类离体组织器官作为试验标本。蛙类坐骨神经-腓肠肌标本是研究神经冲动和肌肉收缩机能等生理试验最常用的试验材料，制备此标本是生理试验的一项基本但又非常重要的操作技术。
3．需用的仪器或试剂等
蟾蜍，两栖类手术器械，蛙板，蛙钉，培养皿，滴管，铜锌弓，烧杯，任氏液，纱布，医用缝合线，玻璃分针，眼科剪等。
4．实验步骤
（1）毁髓；（2）剪去躯干上部及内脏；（3）剥皮；（4）分离两腿；（5）分离坐骨神经；（6）标本检验：左手用镊子轻轻提起结扎神经线，右手用经任氏液沾湿的锌铜弓短暂轻触坐骨神经，如腓肠肌发生迅速的收缩反应，则表明机能完好。将标本置于任氏液中，稳定其兴奋性15-20min，即可进行实验。
5．教学方式
以实验为主，课堂讲授为辅的教学方法，同时配合录象教学。
6．考核要求
掌握蟾蜍坐骨神经-腓肠肌标本的制备方法。
7．实验报告要求
维持离体两栖类动物标本正常生理活性必须满足哪些基本条件？（课后思考题）

2、阈刺激 阈上刺激与最大刺激
1．本次实验的目的和要求
学习神经-肌肉实验的电刺激方法和记录肌肉收缩的方法；观察刺激强度与肌肉收缩之间的关系；掌握阈刺激、阈上刺激、最大（最适）刺激等概念。
2．实验内容或原理
对于单根神经纤维或肌纤维来说，对刺激的反应具有“全或无”的特性。神经-肌肉标本是由许多兴奋性不同的神经纤维组成，在保持足够的刺激时间（脉冲宽波）不变时，刺激强度过小，不能引起任何反应；随着刺激强度增加到某一定值，可引起少数兴奋性较高的运动单位兴奋，引起少数肌纤维收缩，表现出较小的张力变化。该刺激强度为阈强度，具有阈强度的刺激称阈刺激。此后随着刺激强度的继续增加，会有较多的运动单位兴奋，肌肉收缩幅度、产生的张力也不断增加，此时的刺激均称为阈上刺激。但当刺激强度增大到某一临界值时，所有的运动单位都被兴奋，引起肌肉最大幅度的收缩，产生的张力也最大，此后再增加刺激强度，也不会再引起反应的继续增加。可引起神经、肌肉最大反应的最小刺激强度为最适刺激强度，该刺激叫最大刺激或最适刺激。
3．需用的仪器或试剂等
蟾蜍或蛙、任氏液、肌槽、张力换能器刺激器、BL-420计算机生物信号采集处理系统、普通剪刀、手术剪、眼科镊（或尖头无齿镊）、金属探针（解剖针）、玻璃分针、蛙板（或玻璃板）、蛙钉、细线、培养皿、滴管、双凹夹.
4．实验步骤
（1）坐骨神经-腓肠肌标本的制备（略）
（2）仪器及标本的连接
使用计算机生物信号采集处理系统进行实验，则将张力换能器的输出插头插入该系统的一个信号输入通道插座（如CH1）；电极的插头插入该系统的刺激输出插孔。打开计算机，启动生物信号采集处理系统，进入“刺激强度对骨骼肌收缩的影响”实验菜单。
使用单脉冲刺激方式，波宽调至并固定在1ms，刺激强度从零开始逐渐增大；首先找到能引起肌肉收缩的最小强度，该强度即阈强度。描记速度要求每刺激一次神经，都应在记录纸或屏幕上记录（或显示）一次收缩曲线（应为一短线）。
将刺激强度逐渐增大，观察肌肉收缩幅度是否随着增加，记下的收缩曲线幅度是否也随之升高。
继续增大刺激强度，直至连续3-4个肌肉收缩曲线的幅度不再随刺激增高为止，读出刚刚引起最大收缩的刺激强度，即为最适刺激强度。
标记“刺激强度与肌肉收缩张力之间的关系”曲线，剪辑、粘贴（或打印）。
5．教学方式
以实验为主，课堂讲授为辅的教学方法，同时配合录象教学。
6．考核要求
学习神经-肌肉实验的电刺激方法和记录肌肉收缩的方法；观察刺激强度与肌肉收缩之间的关系；掌握阈刺激、阈上刺激、最大（最适）刺激等概念。
7．实验报告要求
掌握仪器及标本的连接方法。
3、骨骼肌单收缩的分析与复合收缩
1．本次实验的目的和要求
了解肌肉收缩过程的时相变化
观察刺激频率对骨骼肌收缩形式的影响
2．实验内容或原理
肌肉兴奋的外在表现是收缩。当其受到一个阈上强度的刺激时，爆发一次动作电位，迅速发生一次收缩反应，叫单收缩。单收缩曲线分为潜伏期，收缩期，舒张期三个时期。当相继受到两个以上同等强度的阈上刺激时，因频率不同，下一次刺激可能落在前一刺激所引起的单收缩的不同时期内，引起：
（1）几个分离的单收缩：频率低于单收缩频率，间隔大于单收缩时间。
（2）收缩的总和：强直收缩
a)不完全强直收缩：后一收缩发生在前一收缩的舒张期。
b)完全强直收缩：后一收缩发生在前一收缩的收缩期内，各自的收缩不能分开，肌肉维持稳定的收缩状态。
3．需用的仪器或试剂等
蟾蜍坐骨神经标本、肌槽、BL-420生物信号采集处理系统、张力换能器、屏蔽盒等。
4．实验步骤
（1）制备坐骨神经标本
（2）试验装置与仪器连接
将股骨标本固定在肌槽上，结扎肌腱的棉线与换能器相连，神经置于刺激电极上，用任氏液保持标本润湿，电极与主机刺激输出相连，传感器与放大器相连，放大器相应通道与主机相连。
打开换能器、主机、计算机。在计算机桌面上找到“实验→肌肉神经”，双击打开相关实验参数。
（3）观察并记录单收缩相关特征
给予神经一个单刺激后,记录刺激时间、潜伏期、收缩期、舒张期。将刺激强度增大，找出引起肌肉收缩的最小刺激强度（阈值），然后给予阈上刺激直至最大刺激，保存单收缩曲线，观察此范围内，收缩力随刺激强度的增加而增加。
（4）骨骼肌收缩的总和与强直收缩。
（5）改变刺激频率，观察骨骼肌收缩曲线。
5．教学方式
以实验为主，课堂讲授为辅的教学方法，同时配合录象教学。
6．考核要求
观察刺激频率对骨骼肌收缩形式的影响
7．实验报告要求
叙述产生强直收缩的基本条件？（课后思考题）
 4、期外收缩与代偿收缩
1．本次实验的目的和要求
了解心肌的某些特性并掌握蛙心收缩的记录方法。
2．实验内容或原理
心肌的绝对不应期长，几乎占据整个收缩期和舒张早期，在此其间给予任何强大的刺激均不能产生动作电位。在心肌的相对不应期给予单个阈上刺激，可引起一次额外收缩，其后便产生一个较长的代偿间歇。另外，心肌还具有“全或无”的特征，在其它因素恒定的条件下，心肌对不同强度的阈上刺激均发生同样大小的收缩反应。
3．需用的仪器或试剂等
蟾蜍或蛙。BL-420系统、张力换能器、刺激电极、铁支架、双凹夹、蛙心夹、蛀板、蛙针、手术器械、丝线、小烧杯、滴管、直别针、纱布、任氏液。
4．实验步骤
1.实验准备
用蛙针破坏蟾蜍的脑与脊髓，将其仰卧固定于蛙板上。剪开胸腔，暴露心脏，用眼科剪剪开心包膜。将连有丝线的蛙心夹在心室舒张时夹住心尖，丝线另一端连张力换能器，松紧适度。换能器接BL-420系统。刺激电极可直接与心室肌接触或由刺激器输出端引出二根导线、一根和蛙心夹连接，另一根与心脏周围组织接触。
2．观察项目
(1)描记正常心搏活动曲线：观察曲线与心室收缩、舒张的关系及频率。
(2)在心室收缩期给予中等强度的单个刺激，观察能否引起心脏活动的改变?
(3)期前收缩和代偿间歇：在心室舒张期，给予中等强度的单个刺激，观察心脏期前收缩和伴随其后的代偿间歇。
(4)心肌“全或无”反应：用丝线在静脉窦与心房之间作一结扎，心脏停止跳动。然后给予阈下及不同强度的阈上刺激，观察蛙心收缩强度的变化。两次刺激间隔时间不少于15秒。
5．教学方式
以实验为主，课堂讲授为辅的教学方法，同时配合录象教学。
6．考核要求
观察心脏期前收缩和伴随其后的代偿间歇。
7．实验报告要求
心肌的绝对不应期长有何生理意义? （课后思考题）
实验四 血细胞计数、血红蛋白的测定
1、血细胞计数
1．本次实验的目的和要求
了解血细胞计数的原理并掌握红细胞、白细胞的计数方法，红细胞计数结果结合血红蛋白值还可以计算出红细胞平均血红蛋白量(MCH)可作为生理机能检查和临床诊断的指标。
2．实验内容或原理
用相应的稀释液将血液稀释若干倍(另有抗凝、固定、着色作用)，置于计数室中，在显微镜下计数一定容积内的血细胞数。稀释血液有血细胞吸管法和试管法，本实验采用后者。
3．需用的仪器或试剂等
鸡或家兔。血细胞计数板、专用盖玻片、吸血管、显微镜、手揿计数机、血细胞稀释液、拭镜纸。
4．实验步骤
(1)熟悉计数室
血细胞计数板系一长方形厚玻片，常用的改良牛氏计数板在中央横沟的两边各有一计数室，两计数室结构完全相同。计数室较两边的盖玻片支柱低0.1mm。因此，放上盖玻片时，计数板与其间距即计数室空间的高为0.1mm。在低倍显微镜下可见计数室被双线划分成９个边长为１mm的大方格。四角的大方格又各分为１６个中方格，这是用来计数白细胞的。中央大方格被划分为２５个中方格，每一中方格又划分成１６个小方格,称２５×１６，也有的计数板为１６×２５，小方格面积一致)。中央大方格的四角及中心５个中方格(１６×２５/则为四角上的中方格)为红细胞或血小板计数范围。
(2)红细胞计数
先用试管稀释法制备禽类血细胞悬液：将禽类红细胞稀释液Ⅰ、Ⅱ分别置水浴锅中预热到４１～４２℃，取Ⅰ液１mL于试管中，用吸血管加入新鲜鸡血(或肝素抗凝血)２０霯，再加入Ⅱ液１mL混匀，置该水浴锅中保温５０s左右，置室温，即为待检的血细胞悬液。可用于充液计数。取干洁的计数板，置于水平的显微镜载物台上，盖上盖玻片，使两侧各空出少许。摇匀血细胞悬液，用滴管吸取，将滴管尖轻轻置于盖玻片边缘外，让滴出的血细胞悬液凭毛细管作用吸入计数室内，刚好充满计数室为宜。静置２min后计数，先用低倍镜观察，不均匀则抛弃。计数时用虹彩、集光器、反光镜等调节入射光角度和强度，认清计数室位置。采用“由上至下，由左至右，顺序如弓”的顺序，对压边线细胞采取“数上不数下，数左不数右”的原则。依次计数并记录５个中方格中分别有多少个红细胞。
(3)计算
如发现各中方格红细胞数目相差20个以上或各大格的白细胞数目相差8个以上，表明血细胞分布不均匀，必须把稀释液摇匀后重新计数。
红细胞的计数方法是，将所得的红细胞数乘以10.000（如稀释100倍则乘以5000），既为要求的每一立方毫米血液中的红细胞数。
白细胞计数方法是，将数得的白细胞数乘以50或25，既得一立方毫米血液中白细胞的总数。
(4)仪器洗涤
计数板、盖玻片和测定管用清水冲洗，再用绸布或细布沾干。
5．教学方式
以实验为主，课堂讲授为辅的教学方法，同时配合录象教学。
6．考核要求
学会清洗玻璃器皿，会配制所需溶液，熟悉显微镜的使用和血液化验技术。
7．实验报告要求
计算结果，报告中简要说明计算过程。
2、血红蛋白的测定
1．本次实验的目的和要求
了解和练习沙利氏比色法测定血红蛋白含量。
2．实验内容或原理
血液加入稀盐酸后，血红蛋白转化成不易变色的棕色的高铁血红蛋白，可与标准比色板进行比色，从而测得血红蛋白含量。
3．需用的仪器或试剂等
人或动物。沙利氏血红蛋白计、酒精棉球、０.１mol/L盐酸、蒸馏水等。
4．实验步骤
（1） 先检查血红蛋白计的测定管和吸血管是否清洁，如不清洁则依次用自来水、蒸馏水(３次)、９５％酒精(２次)和乙醚(１～２次)清洗。
（2）将０.１mol/L盐酸加入测定管中至刻度“２”或“１０％”处。
（3）用酒精棉球消毒采血部位，以采血针采血，用吸血管插入流出的血滴深处，吸血至刻度２０霯处，拭净外壁，将血液立即吹入测定管的盐酸中。反复吸吹，使吸血管中血液全部进入盐酸液中(避免起气泡)。混匀，１０min后，逐滴加入蒸馏水使液体颜色变浅，边加边混匀并与标准比色板比较，至二者颜色相同止。
（4）读出测定管内液体凹面最低处的刻度，即为每１００mL血液中血红蛋白的克数。另一方面刻度表示百分率，可参照血红蛋白计的说明换成克数以核对读数。
5．教学方式
以实验为主，课堂讲授为辅的教学方法，同时配合录象教学。
6．考核要求
掌握各项目的操作方法，了解实验步骤，弄清正常值及临床意义是什么，结果偏低或偏高的原因。
7．实验报告要求
盐酸量的多少及作用时间长短对结果会产生什么影响？为什么？（课后思考题）
实验五 红细胞脆性的测定、红细胞沉降率的测定、
红细胞的凝集现象
1．本次实验的目的和要求
测定红细胞膜对不同低渗溶液的渗透抵抗力．亦即测定正常动物红细胞的渗透脆性。了解红细胞沉降率并掌握其测定方法。了解红细胞凝集现象，并掌握测定血型的方法。
2．实验内容或原理
内容：实验室可完成红细胞脆性实验，血红蛋白含量检测的实验内容。做到改变某些因素时的检测内容，结合实验理解红细胞脆性的概念，分析论证产生的结果。
原理：
（1）通过实验了解正常的红细胞悬于等渗的血浆中，若置于高渗溶液内，则红细胞失去内部液体而皱缩，反之，置于低渗溶液内则水分进入红细胞，使红细胞两面凹陷的圆盘型变为球型，如继续膨大，即发生破裂溶解，形成溶血。
（2）红细胞膜含有凝集原，血浆内含有凝集素。当相应的凝集原和凝集寨相互作用时，就产生红细胞的凝集现象。
3．需用的仪器或试剂等
电子天平、水浴箱、电子称、低速离心机、微量移液器、标准枪架等。
4．实验步骤
（1）取试管10支，按不同比例向各管内加入1％NaCL溶液和蒸馏水，充分混匀．使各试管溶液均为2ml。并在各试管中加人大小相等的血液1滴，用拇指堵住试管口，慢慢倒置一、二次，使血液与管内盐水混合均匀。室温静置1小时，观察结果。
（2）将容积比例为1：4的抗凝血吸到清洁、干燥的血沉管至最高刻度“0”处，绝对避免产生气泡。然后将吸有血液的血沉管垂直置于血沉管架上，按不同时间分别记录。
（3）取一载玻片，在左上角和右上角分别写上“A”和“B”字作为标记。各用小滴管分别吸取A型标准血清及B型标准血清滴人已经记过A和B字样的两侧各一滴。然后再各加人一滴受检者的血液。用细玻棒的一端混合A型血清与血液，用另一端混合B血清与血液。置室温下10-30min后，在低倍镜下观察有无凝集现象。
5．教学方式
以实验为主，课堂讲授为辅的教学方法，同时配合录象教学。
6．考核要求
掌握各项目的操作方法，了解实验步骤，弄清正常值及临床意义是什么，结果偏低
或偏高的原因。
7．实验报告要求
（1）统计全班各血型人数所占比例。（课后思考题）
（2）如果已知1人为Ａ型血，请你设计无标准血清情况下测知全班人血型方案。（课后思考题）

实验六 脊髓反射、反射弧分析、蛙血管内血液流动观察、蛙心起搏点的观察
1、脊髓反射
1．本次实验的目的和要求
本实验通过脊动物反射活动的观察，认识脊髓反射的基本特征和兴奋在中枢神经系统内传导的基本特征。
2．实验内容或原理
脊髓是中枢神经系统的最低级部位，它的机能最简单，便于观察。本实验通过脊动物反射活动的观察，认识脊髓反射的基本特征和兴奋在中枢神经系统内传导的基本特征。
3．需用的仪器或试剂等
1%普鲁卡因、0.5%及1%硫酸、蛙、解剖器械、铁支架、烧杯、滤纸片、纱布。
4．实验步骤
蛙针或断头法破坏蛙脑成脊蛙(最长可存活几个星期)，用短线穿过下颌，悬在铁架台上，待其兴奋性恢复后，进行下面实验。
1.正常脊髓反射活动的观察：
(1)屈肌反射和对侧伸肌反射：以培养皿盛0.5％硫酸少许，接触蛙下肢趾尖，观察受刺激侧和对侧下肢的反应。
(2)搔扒反射：以浸有0.5％硫酸的小滤纸片贴于蛙的腹侧部，观察后肢反应的早迟及动作的准确性。
2.兴奋在中枢神经系统内的传导特征：
(1)反射时的测定：依前法用0.25％及1％的硫酸刺激脚趾，用秒表(或电子表)测定反射时。每种浓度重复3次。求其平均值。
(2)反射过程的抑制：先用鳄鱼夹夹住蛙大腿根部的皮肤，待蛙不动后，再将后肢用0.25％(或1％)的硫酸刺激。比较此时反射时与前项的区别。
(3)脊髓内兴奋过程的扩散：用镊子夹蛙左趾，力量由小到大，观察参与反射肌肉的范围和强度。
(4)刺激的综合：用单个电刺激找到刺激阈强度（波宽、电压），然后改用稍弱于阈值强度的连续电刺激，观察频率变为多大时，蛙趾开始后缩。另可用两个电极对蛙趾不远于0.5cm的两点同时给如下阈下刺激，看能否观察到空间总和现象。
(5)当蛙后肢受到电刺激时，引起反射动作，观察当刺激停止时反射作用是否立即停止；若不便观察，增大刺激强度，看反应又有何变化？
3.用剪刀在蛙左侧后肢股部皮肤做一环形切口，将切口以下皮肤剥净，直至趾端（包括趾底），再以0.5％硫酸刺激，结果如何？
4.在右侧后肢股部的背侧，分离出坐骨神经(位置不能太低，分支尽量剪断)，然后将蘸有1％可卡因(或氯仿)的小棉球置于神经干之下，每隔10秒钟，用硫酸刺激一下脚趾，至不出现反应时，立即将浸有1％硫酸的小滤纸片贴于该后肢同侧躯干部的皮肤上，能否观察到可卡因(或氯仿)对坐骨神经传入、传出神经纤维麻痹作用的时间顺序？
5．教学方式
以实验为主，课堂讲授为辅的教学方法，同时配合录象教学。
6．考核要求
掌握测定反射时的方法及各项目的操作，了解实验步骤。
7．实验报告要求
对实验操作中的问题给出正确答案。（课后思考题）

2、反射弧分析
1．本次实验的目的和要求
（1）通过实验证明，任何一个反射，只有当实现该反射的反射弧存在并保证其完整的情况下才能出现。
（2）学习测定反射时的方法。
（3）通过实验证明，任何一个反射，只有当实现该反射的反射弧存在并保证其完整的情况下才能出现。
2．实验内容或原理
机体在中枢神经系统参与下，对刺激所发生的反应叫做反射。反射弧是反射的解剖学基础（反射弧一般包括感受器、传入神经、中枢、传出神经、效应器等五个部分）。要引起反射，首要条件是反射弧必须完整。反射弧的任何一部分受到破坏，反射即不出现。
3．需用的仪器或试剂等
1%普鲁卡因、0.5%及1%硫酸、蛙、解剖器械、铁支架、烧杯、滤纸片、纱布。
4．实验步骤
取蟾蜍一只，用蛙针毁掉全部脑髓，使成脊蛙，用蛙嘴夹夹住脊蟾蜍下颌，悬于铁支架上进行下列实验。
（1）正常反射活动的观察：将蛙的一侧后腿浸入0.5%的硫酸中2-3mm（浸入时间最长不超过10s），可见有屈腿反射出现（当反射出现后，迅速以清水将后腿皮肤上的硫酸洗净）。
（2）用剪刀在同一侧的后肢趾端基部环切皮肤，然后再用手术镊剥净长趾上的皮肤。再以上述方法刺激，观察结果。
（3）在另一侧后肢股部的背侧，沿坐骨神经的方向将皮肤作一切口，将坐骨神经（此神经包括传出和传入神经纤维）分出，并在下面穿一根线，以便将神经提起。然后将蘸有1%普鲁卡因的小棉球置于神经干下，约经半分钟后，再以同样方法刺激，结果如何？如仍有反射出现，则以后每隔一分钟刺激一次，直到不引起反应为止。
5．教学方式
以实验为主，课堂讲授为辅的教学方法，同时配合录象教学。
6．考核要求
掌握测定反射时的方法及各项目的操作，了解实验步骤。
7．实验报告要求
（1）当反射消失时，迅速以浸有硫酸（1%）的小块滤纸贴于与该后肢同侧之躯干部的皮肤上，结果如何？为什么？（课后思考题）
（2）破坏中枢：将滤纸取下，用任氏液冲洗，待反射恢复后，即用探针将脊髓破坏，再刺激身体任何部位，观察有无反射出现？（课后思考题）
3、蛙血管内血液流动观察
1．本次实验的目的和要求
学习用显微镜观察蛙肠系膜微循环内各血管及血液状况；了解微循环各组成部分的结构和血流特点；观察某些药物对微循环的影响。
2．实验内容或原理
微循环是指微动脉和微静脉之间的血液循环，是血液和组织液进行物质交换的重要场所。经典的微循环包括微动脉、后微动脉、毛细血管前括约肌、真毛细血管网、通血毛细血管、动-静吻合支和微静脉七部分。
由于蛙类的肠系膜组织很薄，易于透光，可以在显微镜下或利用图像分析系统直接观察其微循环血流状态、微血管的舒缩活动及不同因素对微循环的影响。
在显微镜下，小动脉、微动脉管壁厚，管腔内径小，血流速度快，血流方向是从主干流向分支，有轴流（血细胞在血管中央流动）现象；小静脉、微静脉管壁薄，管腔内径大，血流速度慢，无轴流现象，血流方向是从分支向主干汇合；而毛细血管管径最细，仅允许单个细胞依次通过。
3．需用的仪器或试剂等
实验药品：蟾蜍、任氏液、20%氨基甲酸乙酯溶液、1：10000去甲肾上腺素等。
仪器与器械：显微镜、有孔蛙板、蛙类手术器械、蛙钉、吸管、注射器（1～2mL）等。
4．实验步骤
1.实验准备
取蟾蜍一只，称重。在尾骨两侧进行皮下淋巴囊注入20%氨基甲酸乙酯（3mg.g-1）,约10～15min进入麻醉状态。用大头针将蛙腹位（或背位）固定在蛙板上，在腹部侧方做一纵行切口，轻拉出一段小肠袢，将肠系膜展开，小心铺在有孔蛙板上，用数枚大头针将其固定。
2.实验项目
（1）在低倍显微镜下，识别动脉、静脉、小动脉、小静脉和毛细血管，观察血管壁、血管口径、血细胞形态、血流方向和流速等有何特征？
（2）用小镊子给予肠系膜轻微机械刺激，观察此时血管口径及血流有何变化？
（3）用一小片滤纸将肠系膜上的任氏液小心吸干，然后滴加几滴1：10000去甲肾上腺素于肠系膜上，观察血管口径和血流有何变化？出现变化后立即用任氏液冲洗。
5．教学方式
以实验为主，课堂讲授为辅的教学方法，同时配合录象教学。
6．考核要求
学习用显微镜观察蛙肠系膜微循环内各血管及血液状况；了解微循环各组成部分的结构和血流特点；观察某些药物对微循环的影响。
7．实验报告要求
（1）低倍镜下如何区分小动脉、小静脉和毛细血管？各血管中血流有何特点？如何与生理机能相适应？（课后思考题）
（2）试解释不同药物引起血流变化的机制。（课后思考题）
4、蛙心搏点的观察
1．本次实验的目的和要求
用结扎的方法来观察蛙的心博起点，以及心脏不同部位传导系统的自动节律性高低。
2．实验内容或原理
心脏的特殊传导系统具有自动节律性，但各部分的自动节律性高低不同。蛙的心博起点是静脉窦（哺乳动物是窦房结），自动节律性也以静脉窦（窦房结）为最高。正常心脏的每次博动都由静脉窦（窦房结）发出，沿心房传至房室结，再由房室结经房室束传至心室肌肉。若阻断心脏的正常传导，则出现不同的收缩障碍。
3．需用的仪器或试剂等
蛙或蟾蜍、任氏液、20%氨基甲酸乙酯溶液、1：10000去甲肾上腺素、显微镜、蛙类手术器械、蛙钉、吸管、注射器（1～2mL）、蟾蜍、蛙板、解剖用具、线、玻璃解剖针、秒表。
4．实验步骤
（1）认识蛙心各部分的构造和名称：自心脏腹面认识心室、心房、动脉圆锥（动脉球）和主动脉。然后用玻璃解剖针向前翻转蛙心，从心脏背面区别静脉窦和心房。
（2）观察蛙心各部分收缩的顺序：自心脏背面观察静脉窦、心房、心室三部分。观察它们的跳动次序，并记数每分钟的收缩次数。
（3）用小镊子在静脉窦与心房之间穿一丝线，并进行结扎。此时心房与心室均停止于舒张状态，而静脉窦依然博动。记数其频率。待心房和心室又开始收缩后，记数单位时间内静脉窦和心房、心室的收缩频率，两者是否一致？说明什么问题？
（4）另取一线，在心房与心室之间结扎，观察心脏跳动有何变化？
5．教学方式
以实验为主，课堂讲授为辅的教学方法，同时配合录象教学。
6．考核要求
用结扎的方法来观察蛙的心博起点，分辨心脏不同部位传导系统的自动节律性高低。
7．实验报告要求
了解并掌握斯氏第一、第二结扎的位置？（课后思考题）
实验七 心电图的描记、动脉血压的测量
1．本次实验的目的和要求
学习生理实验常规操作技术，掌握血压和心电图的测定方法，明确动脉血压保持相对稳定的调节过程。
2．实验内容或原理
初步了解心电图的描记方法及人的正常心电图，理解其向量特性。了解心音听诊和间接法测量动脉血压的方法。心肌在收缩前先发生电位变化。这些电位变化可通过心肌周围的组织和体液这一容积导体传导到全身。用特定仪器从体表一定部位描记出的电位变化图形称为心电图。心电图反映了心脏的机能活动，也是临床常用的一种诊断方法。
动脉血压是血管内流动的血液对血管壁构成的侧压力。是重要的生命体征。在正常生理情况下，动物的血压相对稳定的维持在一定水平。这是由于神经和体液不断调节心脏的活动和血管平滑肌紧张度的结果，其中以颈动脉窦-主动脉弓减压反射尤为重要，对血压的改变有缓冲作用。但是当内外环境的某些因素发生改变时，动脉血压会发生相应的变化。
3．需用的仪器或试剂等
酒精棉球、心电图机、听诊器、水银柱式血压计。
4．实验步骤
（一）人心电图的描记
心电图机常用的有热笔描记式或阴极示波显示式两种。本实验用心电图引导描记。受试者脱去鞋袜，用酒精棉球擦洗手脚引导部位(去脂层)，静坐于木凳上，双手双脚分开。仪器良好接地，选择适当参数，心电引导线红线(正输入)置左脚趾间，右手持绿线(负输出)，黑线(地线)置右脚趾间，此为标准Ⅱ导联，幅度较大，常用。为使导电良好，可将渗透10% NaCl的棉花置鳄鱼夹与皮肤间。导线接妥后，接通电路开始描记。还可转换成标准Ⅰ、Ⅲ导联描记，红绿线分别接右、左手和左足、左手，黑线位置不变。
（二）动脉血压的间接法测量
参照血压计使用说明书、录像进行操作。随着汞柱缓慢下降，听诊器中声音从无突然出现，或触诊桡动脉出现脉搏时的血压计刻度为收缩压；继续时，听诊器中声音由弱到强，突然变弱或消失时的刻度为舒张压。
5．教学方式
以实验为主，课堂讲授为辅的教学方法，同时配合录象教学。
6．考核要求
掌握血压和心电图的测定方法。
7．实验报告要求
结合教材内容理解心电图及各波、段的含义。（课后思考题）
实验八呼吸运动的调节
1．本次实验的目的和要求
观察各种因素对呼吸运动的影响，进而了解其作用的机理。
观察并分析肺牵张反射以及影响呼吸运动的各种因素。
2．实验内容或原理
呼吸运动是一种节律性运动，其深度和频率受神经系统和体液因素的调节，可随机体活动水平而改变。体内外各种刺激，有的作用于呼吸中枢，有的则由不同的感受器，反射性地影响呼吸运动。肺牵张反射是保证呼吸运动节律的机制之一。血液中CO2分压的改变，是通过中枢性和外周性化学感受器的刺激及反射性调节来保证血液中气体分压稳定的重要机制。
3．需用的仪器或试剂等
兔，手术台，手术器械，张力感受器，气管套管，橡皮管，BL-420系统。
4．实验步骤
（1）连接好张力感受器，开机进入BL-420系统，重要参数设定如下：通道模式-张力；采集频率-800Hz；扫描速度-500ms/div；灵敏度-5mv；时间常数-直流；滤波常数-30Hz；50Hz陷波-开。
（2）实验兔以犬眠宝静脉注射麻醉，仰卧固定于手术台上，剪去颈部与剑突腹面的被毛，切开颈部皮肤，分离出气管与两侧迷走神经；切开气管，插入气管套管，用棉线结扎，并在两侧迷走神经下各穿一条丝线，扎一松结备用。
5．教学方式
以实验为主，课堂讲授为辅的教学方法，同时配合录象教学。
6．考核要求
学会气管套管技术。
7．实验报告要求
（1）血液中CO2增多或缺O2时，呼吸运动有何改变？（课后思考题）
（2）双侧切断迷走神经以后，呼吸运动的变化说明什么问题？（课后