念珠菌性外阴阴道炎患者阴道分泌物中白念珠菌分泌型天冬氨酸蛋白酶表达.pdf

4 8 8史堡廛丛型盘查!Q Q!堡!旦笠!鲞筮!塑!也旦!婴型!，垒!趔堕!Q Q i，y!，盟旦!念珠菌陛外阴阴道炎患者阴道分泌物中白念珠菌分泌型天冬氨酸蛋白酶表达廉翠红刘维达赵敬军【摘要】目的探讨白念珠菌分泌型天冬氨酸蛋白酶(s A P)家族在白念珠菌无症状性阴道寄居向症状性阴道炎发展过程中的表达。方法分别从1 0 例无症状携带者、1 4 例念珠菌性外阴阴道炎患者和1 0例复发性念珠菌性外阴阴道炎患者的阴道分泌物标本中直接提取R N A，逆转录成c D N A 后进行R T P c R。结果所有无症状携带者和患者均表现出对s A P 2 和s A P 4 6 的阳性扩增。1 0 例无症状携带者中无一个标本表现出对S A P l 和s A P 3 的阳性扩增而念珠菌性外阴阴道炎患者和复发性念珠菌性外阴阴道炎患者阴道分泌物标本提取的R N A 可见9 个s A P 基因的不同表达，并且均不同程度地表现出对s A P l和s A P 3 的阳性扩增。结论念珠菌性外阴阴道炎的发病可能与s A P 基因的不同表达有关。【关键词】念珠菌病，外阴阴道；天冬氨酸内肽酶类；基因表达E x p r 鹤s i o no fS 心t o r yA s p a r 哆lP r o t e i I I a s ei nH 唧a nV u l v o v a g i n a lC a n d i d i 嬲i sL M C“i 一 o，峪彤形e i 一如：2 日H0 五，耐M n Y 珊t 打“把矿眈m m D f o 肼劬i 船s eAc 如州旷娩d i c 耐诂M e s&P e 矗i 昭i o n 胁d 记耐C b 如胛，喇i n 譬2 1 0 0 4 2，C h i n a【A b s t m c t Jo b j e c t i v eT oi n v e s t 培a t et h ed i f f e r e n t i a le x p r e s s i o no fs e c r e t o r ya s p a r t y lp m t e i n a s ei np a t i e n t sw i t hv a 鲥n a lCd 6 如唧si n f e c t i o na n di na s y m p t o m a t i cc a n d i d a lc a 耐e r s M e t h o d sS e c r e t o r ya s p a n y lp I D t e i n a s ee x p r e s s i o nw a sd e t e 珊i n e dw i t hr e v e r s et r a n s c r i p t i o n P C Ri nv a g i n a ls p e c i m e n st a k e nf 而m 1 0a s v m p t o m a t i cc a n d i d a lc a I T i e r s，1 4p a t i e n t sw i t hv u l v o v a g i n a lc a n d i d i a s i s(V V C)a n d1 0p a t i e n t sw i t hr e c u r r e n tV V C(R V V C)R e s l l l t sS A P 2a n dS A P 4t oS A P 6s u b f a m i l vw e r ed e t e c t e di nb o t hc a n d i d a lc a r r i e r sa n dp a t i e n t sw i t hv a 西n a lc a n d i d i a s i s S A P la n dS A P 3t r a n s c r i p t sw e r en o to b s e r v e di n1 0a s v m p t o m a t i cc a n d i d a lc a r r i e r s A 1 l 9S A Pg e n e sw e r ed i f f e r e n n ve x p r e s s e di nV V Ca n dR V V Cp a t i e n t s S A P la n dS A P 3t m n s c“p t sw e r ef b q u e n t l va m p l i 6 e di ns o m ep a t i e n t s C o n c l u s i o nI t i ss h o w nt h a tC耐6 恐n 邢i n f e c t i o ni sa s s o c i a t e dw i t hd i f k r e n t i a le x p I s s i o no fi n d i v i d u a lS A Pg e n e s，w h i c hm a yb ei n v o l v e di nt h ep a t h o g e n e s i so fv a g i n a lc a n d j d i a s i s【K e yw o r d s】c a n d i d i a s i s，v u l v o v a g i n a l；A s p a r t i ce n d o p e p t i d a s e s；G e n ee x p r e s s i o n念珠菌性外阴阴道炎的发病涉及该病的致病菌和宿主等诸多方面，白念珠菌是其主要致病菌，我国学者已在白念珠菌毒力因子的磷脂酶和分泌性酸性蛋白酶活力方面做了一些研究，_ 2 ，国内外研究结果大都支持分泌型天冬氨酸蛋白酶(s A P)是白念珠菌的重要毒力因子之一，尤其是在念珠菌性外阴阴道炎发病中起一定作用。迄今为止已鉴定出9 个不同的S A P 基因。为探讨白念珠菌S A P 家族在无症状性阴道寄居向症状性阴道炎发展过程中的表达差异，我们用R T P c R 技术对念珠菌性外阴阴道炎患者及无症状携带者的阴道分泌物中的每个s A P 基因的表达进行了直接分析。基金项目：国家教委高校博士点基金资助项目(2 0 0 1 0 0 2 3 0 1 9)作者单位：2 1 0 0 4 2 南京，中国医学科学院、中国协和医科大学皮肤病研究所 廉翠红(现在深圳市第二人民医院皮肤科5 1 8 0 3 5)、刘维达、赵敬军通讯作者：刘维达，E-m a i l：l i u m y c o h o t m a i l _ c o m材料与方法论著1 标准菌株：白念珠菌(A T C C l l 0 0 6)、克柔念珠菌(A T C C6 2 5 8)、光滑念珠菌(A T C C 2 0 0 1)、星型念珠菌(J c 2 一0 6 9 2)标准菌株由日本大坂发酵研究所提供。都柏林念珠菌标准菌株(9 7“2)由日本千叶大学真核微生物研究所提供。2 研究人群和临床分离菌株：本实验将研究人群分成4 组：阴道念珠菌阴性组，共1 0 例。其阴道分泌物标本在3 个月内分别培养6 次均为念珠菌培养阴性；无症状的白念珠菌携带组，1 0 例，无念珠菌性外阴阴道炎的任何症状或体征，但其阴道分泌物标本在3 个月内分别培养6 次。有1 次以上白念珠菌阳性的培养结果；念珠菌性外阴阴道炎(v v c)患者组，1 4 例，临床症状和体征符合v v c，念珠菌培养鉴定为白念珠菌；复发性V v c(R v V C)患者组，1 0 例，临床症状和体征符合V V c，1 年内发 万方数据史堡廑丛型苤查!塑生!旦箜3 1 鲞箜!塑g!i!旦!墅堂!：丛理壁!堂：y!，丛!：!作次数4 次。念珠菌培养结果鉴定为白念珠菌。将所有念珠菌进行真菌学鉴定其中包括芽管形成试验，厚膜孢子试验，念珠菌显色培养基(C H R O Ma g a rc 帆d i 如)鉴定，A P l 2 0 系统鉴定和4 2 生长试验等。将收集到的每例患者的标本分成两份，一份立即放到液氮中保存，以确保R N A 的完整性，用来进行S A Pm R N A 分析：另一份用于白念珠菌的鉴定和进行c f u 计数。3 阴道分泌物标本中念珠菌总R N A 的提取：液氮中保存的阴道分泌物标本取出后，放入研钵中再加入一定量的液氮进行研磨，直至成细粉状，迅速放人1m L 的T R I z o l(购自G i b c o 公司)使其充分混匀成糊状总R N A 的提取严格按照试剂盒说明步骤进行。提取出的R N A 纯度用紫外分光光度计测定，其质量用琼脂糖凝胶电泳鉴定。4 S A P 肌动蛋白和真菌特异性引物的设定，：S A P l，S A P 2，S A P 3，S A P 7 S A P 8 和S A P 9 各自1 对引物，而s A P 4，s A P 5 和s A P 6 因为它们的序列具有高度同源，故三者为同一对引物：另外有2 对引物用来扩增白念珠菌的肌动蛋白基因(a c t i n，A C T l)；还有1对引物扩增5 8 Sr D N A 基因间隔区(引物序列见表1)。2 对扩增白念珠菌肌动蛋白基因(a c t i n，A C T l)的引物可扩增所有试验菌株，包括其他念珠菌属(如克柔念珠菌，光滑念珠菌，星型念珠菌，都柏林念珠菌)产生同样大小的P c R 产物。用来作为阳性对照，同时通过2 对A C T l 引物的扩增结果证实念珠菌的存在与否。5 R T P C R 法测定临床阴道分泌物标本中s A P l。S A P 9m R N A 的表达：每例患者阴道分泌物标本提取的R N A 分别进行1 0 次R T P c R 试验，这包括7 个检测s A P 的反应(S A P l，s A P 2，S A P 3，S A P 4 一S A P 6 S A P 7，S A P 8 和S A P 9)和4 个不同的对照反应具体如下：2 对A c T l 引物证实念珠菌的存在与否：一个阳性对照，即从白念珠菌标准菌株提取的R N A 逆转录后用S A P 2 引物扩增的R T P C R 结果作为阳性对照和一个用d H：0 进行反应的阴性对照。R T P C R 法严格按G i b c o 公司S u p e r s c r i p t l MF i r s t s t r a n ds v n t h e s i ss v s t e m 试剂盒说明书操作，在P c R 薄壁管中制备R N A 引物混合物(反应体系2 0 斗L)：1 0m m o l Ld N T P 混合物1 斗L，寡脱氧胸苷酸1 2 1 8(O 5n U)1 斗L，总R N A 产物(含D E P C H：O)7 L，共9“L，6 5，5m i n，置于冰上至少1m i n，加入1 0 R T 缓冲液2 斗L，2 5m m o 儿M g c l 24 L，0 1m 0 1 LD I T I 2 斗L，R N a s e0 U T1 斗L，4 2，2m i n，每管加1 L(5 0u)s u p e r s c r i t 逆转录酶，混合，4 2，5 0m i n，7 0，1 5m i n，终止反应，置于冰中至少1m i n，短暂离心收集反应物，每管加1 斗LR N a s eH，3 7，2 0m i n。将转录得到的c D N A 模板于一2 0 保存备用。R T P C R 反应扩增S A P l 9 目的片段，反应体表l植删日忿珠困S A 上J l 一9m R N A 明表达及A 叫l和5 8 sr R N A 的引物序列(鹅)登录号泐序列嬲潞s)x s 6 s s 丰蒙i，_ 焉嚣怒嚣茹塞篡鬈：。，蚓s 凇，M s s 6 6 s 丰霾i，-蔷茹茹鬈蒜怒jms 棚，咙s s s 丰纂；，-嚣器篓嚣冀：嚣黧2 dz s-s(3 2)咙s s s 丰鋈i，-嚣篓器：嚣曼，ms A P 5(3 4)3 0 1 9 1丰鎏恶茎美器1 5 6，1 8 l，2 0 6s A P 6(3 4)3 0 1 9 2韦蒙i：篡：ii：器1 5 6，1 8 l，2 0 6s A 胛c s 4，s o-9 s 韦錾；，-嚣誉蒜嚣翟拦：署，-。ss A P sA F s s s o 睾薅；：=鬈怒：；：嚣誊鼍：；，z s s A P 9A F 0 4 s s s 丰薯；：嚣翥：警：蠹：篆：。，4 4上游A5 一g g c t g 昏8 9 a g a c t t g a c c a a c c a t t t g 一373 0 4A C T l(2 9)x 1 6 3 7 7卜游B5，一醐t t t t g t c t g a a c 吐g g t a a c a g 一3 2 7 15 一g g a 殍t g a a a 殍g 醇t t g 昏c a a t a c 一37箍鬻嬖篙呈嚣黟s s 45 一t c c t c c g c t t a t t g a t a t g c j积为5 0 0 斗L，包括：c D N A 模板2 0 斗L，2 5m m o l LM g C l 23 0 L，1 0m m o l Ld N T P 混合物1 O 斗L，1 0 P C R 缓冲液5 O 斗L，上游和下游引物各(1 0 m o l L)1 0 L，T a qD N A 聚合酶(5U 斗L)O 5 斗L，加d H 2 0 至5 0 0 斗L。设计T o u c h d o w n 反应程序进行R T P C R 反应 3 ：9 4 预变性3m i n 后，进行T o u c h d o w n 循环的退火温度如下：6 6 3 0s，2 个循环，6 5 3 0s，2 个循环，6 4 3 0s，2 个循环，6 3 3 0s2 个循环，接着是6 2 3 0s，3 5 个循环。R T P C R 循环的时间如下：变性9 4 退火6 2 和延伸7 2，均为3 0s，最后7 2 后延伸7m i n。结果1 阴道分泌物标本中自念珠菌总R N A 纯度和质量的鉴定：提取的游游游F 匕F6977D【)O3(ANRrS85 万方数据主堡廛丛型苤查!塑!笙!旦箜!鲞筮!塑!垫旦!望塑!：垒!耻塾!鲤!，y!，堕!：!图1l 例无症状携带者分离菌株的s A P l 一9 的R T P C R 结果图2l 例V V c 患者分离菌株的s A P l 9 的R T P c R 结果图3l 例R v v c 患者分离菌株的s A P l 一9 的R T P c R 结果图2、3 中，M：分子量标记；w：阴性对照；P c：阳性对照；A：肌动蛋白A；B：肌动蛋白B。由于篇幅所限，各组仅选取了l 例患者分离菌株的s A P l 一9 的R T P c R 结果R N A 纯度经测定A A 抛比值介于1 7 1 9 之间，表明R N A 无污染总R N A 电泳可见1 8 S 和2 8 S 两一条带。通过对提取的总R N A 用扩增5 8 Sr R N A 的真菌特异性引物直接进行P C R 和R T P C R 反应来检测提取的R N A 标本中有无D N A 的污染，直接进行P C R，结果为阴性，说明在分离的R N A 标本中无D N A 污染，而R T P C R 反应可见预期的扩增片段。2 s A P l 9 基因在人阴道分泌物标本中的体内表达情况：所有念珠菌培养阴性的标本其肌动蛋白m R N A 和9 个S A P 基因的表达均为阴性，证明这些标本中无白念珠菌存在。同时无特异性或非特异性R T P c R 扩增产物的存在也表明了没有与标本中其他R N A 的交叉反应。l o 例无症状携带者中无一个标本表现出s A P l和s A P 3 的阳性扩增(图1)。而1 0 个标本却均表现出对s A P 2、S A P 4 6 的阳性扩增，另外有6 个标本分别表现出S A P 8 和S A P 9 的阳性扩增。所有1 4 例v v C 患者A C T 扩增均为阳性结果(图2)，证实阴道分泌物标本提取的R N A 中有白念珠菌m R N A 的存在。l 例患者(V 7)得到的阴道分泌物标本表现为9 个S A P 基因均表达；S A P l 基因在9例患者中表达；s A P 8 在1 1 例患者中表达；S A P 3 在7 例患者中表达；S A P 7 和S A P 9 分别在1 2 例患者中表达；所有1 4 例患者阴道分泌物标本均表达S A P 2，S A P 4 6。所有1 0 例R v v C 患者A C T 扩增结果均为阳性(图3)，证实阴道分泌物标本提取的R N A 中有白念珠菌m R N A 存在。1 例患者(R 6)得到的标本表现出9 个s A P 基因均表达；s A P l 在7 例患者中表达；S A P 3 在4 例患者中不表达；S A P 7 和S A P 8 分别在9例患者中表达：所有1 0 例患者均表达s A P 2，s A P 4 6 和S A P 9。讨论本研究确立了一个方便可信且敏感的方法直接从V V C 患者阴道分泌物标本中检测白念珠菌S A Pm R N A 表达。9 个s A P 基因的特异性引物的扩增结果表明所有的9 个基因均可在体内表达，并且首次提供了v v c、R v v c 及携带者不同群体问9 个s A P蛋白酶表达的一般情况。本研究提示很可能是由于携带者和患者的阴道环境条件(如乳酸杆菌数，p H值等)不同，使念珠菌从定植到感染过程表现出不同的蛋白酶表达模式。体外研究表明在富含蛋白的培养基上s A P 2 是白念珠菌主要的蛋白酶 4，5 。我们的结果同样支持这一结论s A P 2 可在所有的V V c 和R V V c 患者及所有携带者中表达。这可能与s A P 2 能降解许多组成阴道的宿主蛋白有关，从而有助于白念珠菌获得其生长的基本营养和或有助于其粘附和侵人到阴道黏膜。同时我们发现包括携带者在内所有菌株均表达S A P 4 6 而小鼠模型研究表明在念珠菌性阴道炎模型中有S A P l 和S A P 2 表达 6 ，并表明S A P 2 可能在鼠阴道念珠菌病发病中是更重要的 7 。这也同时表明该蛋白酶家族在人类念珠菌性阴道炎和鼠阴道炎模型中的表达是不同的。本研究首次检测到S A P 7、s A P 8 和S A P 9 基因在阴道念珠菌病患者体内的表达。也表明了该基因编码的蛋白酶可能与白念珠菌的感染有关，因为S A P 7、S A P 8 和S A P 9 的表达在携带者、V V C 和R V V C 患者中检测到的比例依次升高，在R V V C 中表达最高。s A P 7、S A P 8 和S A P 9 的功能尚不明确，但其在念珠菌病和携带者问不同的表达是应引起我们高度重视的，值得进一步研究。本研究首次表明S A P l 9 基因在V V C 患者及携带者体内的表达情况，提供了该蛋白酶家族在人类念珠菌眭外阴阴道炎中具有一定地位的证据。表明V V C 的发病可能与S A P 基因的不同表达有关。另外，体内s A Pm R N A 的表达模式与实验室培养条件下得到的结果不尽相同，说明白念珠菌s A P 在体内的研究更能准确反映念珠菌致病的实际情况。参考文献1 章强强白念珠菌的毒力研究一磷脂酶活力的测定中华皮肤科杂志。1 9 9 4，2 7：3 0 4 3 0 5 万方数据史堡麈丛型盘查趔!至旦筮!鲞筮!塑h 也堕型堕业垒坠牲堕!Q 堕，!尘!坠盟!：2 王冬云，马慧群，谭升顺，等白念珠菌的毒力研究一分泌性酸性蛋白酶活力的测定中国皮肤性病学杂志，2 0 0 1，1 5：3 7 5 3 7 6 3N 嘲i kJ R，N e w p o nG，w h i t eT C，e ta 1 I nv i v oa I l a l y s i so fs e c r e t e da 8 p a r t y lp m t e i n a s ee x p r e s s i o ni nh u m a no r a lc a n d i d i a s i 8 I I l f 色c tI m m u n 1 9 9 9 6 7：2 4 8 2 2 4 9 0 4H u b eB 训池以6 论锄ss e c r e t e d 鹅p a r t v lp r o t e i n 船e s C u m7 r o p M e d M v c o l，1 9 9 6 7：5 5 6 9 5W h i t e，T C，a n dA g a b i a l lN 踟以i 妇以6 拓帆ss e c r e t e da s p a n y lp r o t e i n a s e s：i s o e n z v m ep a t t e mi sd e t e 瑚i n e db yc e t y p e，a n dl e v e l sa r ed e t e 瑚i n e db ve n v i r o n m e n t a lf a c t o r s J B a c t e r i 0 1，1 9 9 5，1 7 7：4 9 15 2 1 5 5 2 2 1 6D eB e m a r d i sF，C 鹅s o n eA，S t u r t e v a n tJ，e ta 1 E x p r e s s i o no fC 册威一6 k 扔记珊醛S A P la n dS A P 2i n 既p e r i m e n t a lv a 西n i t i s I n f e c t I m m u n 1 9 9 5 6 3：1 8 8 7 1 8 9 27D eB e m a r d i sF A 砌c i aS M o r e l l iLe ta 1 E v i d e n c et h a tm e m b e r so ft h es e c r e t o r ya s p a n y lp r o t e i n a s e sg e n ef a l l l i l y(S A P)，i np a r【i c u l a rS A P 2，a r ev i m l e n c ef a c t o r sf o r d i 如v a g i n i t i s J I r 如c t D i s，1 9 9 9 1 7 9：2 0 1 2 0 8(收稿日期：2 0 0 4 0 9 1 4)东北三省第八届皮肤性病学术会议纪要由中华医学会辽宁、吉林、黑龙江医学会主办，中国医科大学承办，中华医学会皮肤性病分会主任委员陈洪铎院士任主席的东北三省第八届皮肤性病学术会议于2 0 0 5 年6 月9 1 1 日在沈阳市辽宁大厦召开。参加会议的代表超过2 0 0 人。辽宁省卫生厅和中华医学会辽宁分会的有关领导出席了会议并讲话。会议共收到论文2 0 4 篇其中特别演讲1 5 篇，临床病理讨论1 3 篇，大会交流1 7 6 篇。本次会议有以下特点：以继续教育方式为主，增设了临床病理专题讨论。内容丰富：邀请了多名国内外知名专家作特别演讲，其中有来自意大利的P i e m n c e s c oM o r g a n t i 作美容皮肤病学方面、澳大利亚的s t e p h e nk e 作皮肤癌方面的特别演讲。来自复旦大学华山医院的廖康煌教授作抗组胺药与过敏性皮肤病、天津医科大学总医院的傅志宜教授作性传播感染近况及最新进展、中国医学科学院皮肤病研究所李文忠教授作麻风防治新进展、南京医科大学第一附属医院的赵辨教授作特应性皮炎发病机制和治疗现状、北京大学第三医院的李林峰教授作普特彼最新研究进展、解放军空军总医院的刘玮教授作中国女性皮肤颜色测定和分级、中国医学科学院皮肤病研究所周展超教授作皮肤年轻化工程的理想光源、广州军区广州总医院的杨慧兰教授作3 0 8n m 准分子激光治疗白癜风的特别演讲。另外，还有来自辽宁的林熙然教授作特应性湿疹皮炎综合征、白义杰教授作疱疹后神经痛的治疗和预防、何春涤教授作如何拍好皮肤病临床照片、李铁男主任医师作白癜风诊断及治疗的相关问题、赵玉铭教授作天疱疮患者头发毛囊抗体沉积的检测，来自吉林的金学洙教授作医学真菌的检查方法及真菌病的诊断，来自黑龙江的于淞教授作疑难病例讨论的特别演讲。会议日程合理，临床病理讨论引人如胜，学术气氛活跃，讨论热烈，与会代表受益匪浅。有1 3 家公司支持了这次会议，他们是：科医人激光公司、香港藤泽药品有限公司、西安杨森制药有限公司、奇致激光技术有限公司、北京康联医用设备有限公司、深圳健安医药有限公司、拜耳医药保健有限公司、香港澳美制药厂有限公司、沈阳同联集团、北京诺华制药有限公司、天津华立达生物工程有限公司、大连亚维药业有限公司、山东正大福瑞达制药有限公司，其中香港藤泽药品有限公司、西安杨森制药有限公司、深圳健安医药有限公司还举办了卫星会并邀请了多名专家进行了继续教育讲座。会议期间选举产生了新一届辽宁省皮肤性病学会委员会，陈洪铎院士任名誉主任委员，何春涤任主任委员，刘晓明、李铁男、表贞淑、韩秀萍任副主任委员，高兴华、涂彩霞、金贵和、杨素华任常务委员，肖汀任秘书；并召开了全体委员会议。(肖汀)真菌性皮肤病的实验室检查和诊疗新进展学习班通知经卫生部批准，将于2 0 0 5 年9 月8 1 4 日在福建医科大学附属第一医院举办国家继续医学教育项目“真菌性皮肤病的实验室检查和诊疗新进展”学习班，项目批号：2 0 0 5 0 4 一1 2 一0 3 9(国)，学习结业可获国家I 类继续教育学分1 2 分。项目主持人程波主任邀请国内知名专家参加授课。教学分理论课和实验课，理论课学习内容：真菌和医学真菌概论和真菌病的治疗学；真菌病的诊断技巧，展示多种少见真菌病的临床图片和诊断思路；皮肤癣菌、念珠菌、马拉色菌、孢子丝菌、暗色真菌、组织胞浆菌、曲霉、毛霉、青霉、隐球菌等常见致病真菌的生理学、致病性、菌种鉴定、诊断和治疗新进展。实验课内容包括：学员亲自参加标本的采集、保存和处理，真菌的直接镜检、接种培养和药敏试验，真菌病理读片，数十种致病真菌的鉴定。联系电话：0 5 9 1 8 7 9 8 2 2 3 2或8 7 9 8 2 5 0 7，联系人：纪明开(手机1 3 0 7 5 9 5 9 0 4 9)、程波(手机1 3 9 6 0 9 1 3 7 7 0)、刘茁(小灵通0 5 9 1 8 7 2 0 7 2 6 8)。全国现代激光技术在皮肤美容领域的应用及最新进展学习班办班消息经有关部门批准，上海第二医科大学附属第九人民医院皮肤科、激光美容中心于2 0 0 5 年9 月2 1 2 5 日举办全国现代激光技术在皮肤美容领域的应用及最薪进展国家继续教育学习班。主要内容：国内外医用激光器研究进展、配置及选用，激光治疗色素性疾病、血管性疾病、激光脱毛、激光治疗瘢痕、皱纹等，光子嫩肤、光子脱毛及治疗痤疮、E 光技术等新进展。学习班为期4天，学习期满合格者颁发结业证书，可获得I 类继续教育学分8 分。拟参加者请速寄报名信件并注明：姓名、性别、职务、单位、地址、邮编、电话等。报名截止日期：2 0 0 5 年9 月1 0 日。会务费7 0 0 元，食宿统一安排，费用自理。地址：上海制造局路6 3 9 号，邮编2 0 0 0 1 1，联系人：朱玉兰，孙月娣，刘健航，电话：0 2 1 5 3 0 7 7 8 0 7，0 2 1 5 3 5 9 1 3 5 3，E-m a i l：c i a s y d o n l i n e s b 舢 万方数据念珠菌性外阴阴道炎患者阴道分泌物中白念珠菌分泌型天冬念珠菌性外阴阴道炎患者阴道分泌物中白念珠菌分泌型天冬氨酸蛋白酶表达氨酸蛋白酶表达作者：廉翠红，刘维达，赵敬军，LIAN Cui-hong，LIU Wei-Da，ZHAO Jing-jun作者单位：廉翠红,LIAN Cui-hong(深圳市第二人民医院皮肤科,518035)，刘维达,赵敬军,LIU Wei-Da,ZHAO Jing-jun(210042,南京,中国医学科学院、中国协和医科大学皮肤病研究所)刊名：中华皮肤科杂志英文刊名：CHINESE JOURNAL OF DERMATOLOGY年，卷(期)：2005,38(8)被引用次数：1次 参考文献(7条)参考文献(7条)1.De Bernardis F;Arancia S;Morelli L Evidence that members of the secretory aspartyl proteinasesgene family(SAP),in particular SAP2,are virulence factors for Candida vaginitis外文期刊 1999(1)2.Bernardis F;Cassone A;Sturtevant J Expression of Candida dbicans SAP1 and SAP2 in experimentalvaginitis外文期刊 19953.White TC;Agabian N Candida albicans secreted aspartyl proteinases:isoenzyme pattern is determinedby cell type,and levels are determined by environmental factors 19954.Hube B Candida albicans secreted aspartyl proteinases 19965.Naglik JR;Newport G;White TC In vivo analysis of secreted aspartyl proteinase expression in humanoral candidiasis外文期刊 19996.王冬云;马慧群;谭升顺 白念珠菌的毒力研究-分泌性酸性蛋白酶活力的测定期刊论文-中国皮肤性病学杂志2001(6)7.章强强 白念珠菌的毒力研究-磷脂酶活力的测定 1994 本文读者也读过(10条)本文读者也读过(10条)1.冯静.涂亚庭.林能兴.冯爱平.FENG Jing.TU Ya-ting.LING Neng-xing.FENG Ai-ping 白念珠菌分泌型天冬氨酸蛋白酶基因在急性念珠菌性外阴阴道炎中的表达期刊论文-中华皮肤科杂志2005,38(4)2.冯静 急性外阴阴道念珠菌病与白念珠菌分泌型天冬氨酸蛋白酶基因表达的研究学位论文20043.王丛 Napsin A对原发性肺腺癌与肺部转移性腺癌鉴别诊断作用的研究学位论文20064.王凯丽.张宏.WANG Kai-li.ZHANG Hong 白念珠菌分泌型天冬氨酸蛋白酶研究进展期刊论文-国际皮肤性病学杂志2006,32(2)5.付萍.李学平.张佩莲.刘晓莉 7例系统性念珠菌感染磷脂酶、可溶性IL-2受体测定分析会议论文-20066.叶夏云.骆志成.武三卯.李文竹.周晓黎.薛晓云 白念珠菌细胞外磷脂酶活力与其对氟康唑耐药性之间关系的研究期刊论文-西北国防医学杂志2004,25(2)7.李永平 运用GLGI技术鉴定白念珠菌LongSAGE标签学位论文20058.李蕾.邹先彪.杨宇光 白假丝酵母菌天冬氨酸蛋白酶真核表达质粒pcDNA3.1/SAP2的构建期刊论文-中国感染控制杂志2008,7(4)9.付萍.刘晓莉.李学平.FU Ping.LIU Xiao-li.LI Xue-ping 白念珠菌磷脂酶与其毒力关系的研究期刊论文-临床皮肤科杂志2005,34(3)10.张宏.石婧.乔建军.Zhang Hong.Shi Jing.Qiao Jianjun 氟康唑对白念珠菌菌丝相与酵母相体外药物敏感性差异比较期刊论文-中国麻风皮肤病杂志2006,22(1)引证文献(1条)引证文献(1条)1.佘晓东.韩峻松.吕雪莲.张晓娜.占萍.张翼.刘维达 阴道念珠菌病患者阴道分泌物总RNA提取方法的研究期刊论文-中华皮肤科杂志 2008(8)本文链接：http:/