岛津液相色谱操作培训——基础知识.pdf

1Shimadzu International Trading(Shanghai)Co.Limited岛津液相色谱操作培训岛津液相色谱操作培训-基础知识基础知识岛津国际贸易（上海）有限公司岛津国际贸易（上海）有限公司分析中心分析中心2Shimadzu International Trading(Shanghai)Co.Limited免费咨询电话800-810-0439400-650-0439维修部010-85252375（北京）021-64451437（上海）020-87108631（广州）保税库010-85252353http:/任何问题请联系我们3Shimadzu International Trading(Shanghai)Co.Limited1969GPC系统开发1972LC-1（LC-830）销售与DuPont签订许可合同后制造销售1978LC-3A系列销售CDQR方式的单柱塞型送液单元为特征1981LC-4A系列销售内置微型计算机的全自动HPLC1982LC-5A系列销售世界上首创的微量型LC对应HPLC1984LC-6A系列销售世界上最早的积木型HPLC、现在的HPLC的前身1991LC-10A系列销售世界上最早采用微冲程送液单元和减低噪音技术的检测器1997LC-VP系列销售采用有效性支持功能的积木型HPLC2000LC-2010销售追求性能和操作性更加完善的一体型HPLC2004 LC-20A Prominence销售 为分析实验室带来革新的HPLC 岛津HPLC的历史Started in 19691997THECNLOGYBREAKTHROUGHFlexible HPLC System with Micro-stroke Volume Solvent Delivery UnitLC-VP2000THECNLOGYBREAKTHROUGHLC-20102004THECNLOGYBREAKTHROUGHLC-20A Prominence4Shimadzu International Trading(Shanghai)Co.LimitedLC-20A Prominence5Shimadzu International Trading(Shanghai)Co.Limited第一部分色谱基础知识6Shimadzu International Trading(Shanghai)Co.Limited色谱起源石油醚碳酸钙颗粒色素混合物色谱分离组分7Shimadzu International Trading(Shanghai)Co.Limited0.00.51.01.52.02.53.0min0100200300400500mVMethyl ParabenEthyl ParabenPropyl ParabenButyl Paraben 色谱法：利用组分在两相间分配系数不同而进行分离的技术 流动相：携带样品流过整个系统的流体 固定相：静止不动的一相，色谱柱色谱定义色谱是一种分离技术.色谱的主要目的是对混合物中的目标物分离和定量8Shimadzu International Trading(Shanghai)Co.Limited色谱分类?高效液相色谱High Performance Liquid Chromatography(HPLC)?气相色谱Gas Chromatography(GC)?薄层色谱Thin-Layer Chromatography(TLC)?毛细管电泳Capillary Electrophoresis(CE)9Shimadzu International Trading(Shanghai)Co.Limited色谱优点 同时分析 分离性能好 灵敏度高(ppm-ppb)进样量小(1-100uL)10Shimadzu International Trading(Shanghai)Co.Limited液相色谱：以液体作为流动相的色谱分离方法?适用于高沸点、大分子、强极性和热稳定性差的化合物的分析?流动相具有运载样品分子和选择性分离的双重作用HPLC vs GC气相色谱：以气体作为流动相的色谱分离方法?适用于沸点较低、热稳定性好的中小分子化合物的分析?流动相只起运载样品分子的能力11Shimadzu International Trading(Shanghai)Co.LimitedHPLC分类?正相模式(NP-LC)?反相模式(RP-LC)?反相离子对色谱(IPC)?离子交换色谱(IEC)?尺寸排阻色谱(GPC/GFC)12Shimadzu International Trading(Shanghai)Co.Limited反相模式(RP)C18(ODS)C8(octyl)C4(butyl)苯基 TMS 氰基-Si-C18H37Si非极性非极性非极性非极性13Shimadzu International Trading(Shanghai)Co.Limited相互作用力是什么?OHOHC18(ODS)强弱强弱疏水性疏水性疏水性疏水性Si14Shimadzu International Trading(Shanghai)Co.Limited疏水性 如果样品有 CH3CH2CH2-:碳链:芳香基 如果样品有-COOH:羧基-NH2:氨基-OH:羟基作用力强作用力强作用力强作用力强作用力弱作用力弱作用力弱作用力弱15Shimadzu International Trading(Shanghai)Co.Limited反相模式下流动相的选择优化水相（缓冲液）和有机相的比例非常重要甲醇，乙腈和 THF 是常用的有机溶剂在有缓冲液的情况下,缓冲液的浓度和pH值非常重要16Shimadzu International Trading(Shanghai)Co.Limited增加流动相极性20%20%H H2 2OO30%30%H H2 2OO40%40%HH2 2OO1:对羟基苯甲酸甲酯2:对羟基苯甲酸乙酯3:对羟基苯甲酸丙酯4:对羟基苯甲酸丁酯有机相有机相:MeOH17Shimadzu International Trading(Shanghai)Co.Limited固定相极性变化对分离的影响C18(ODS)强强样品样品SiC8样品样品一般一般Si样品样品C4弱弱Si18Shimadzu International Trading(Shanghai)Co.Limited?分析条件?柱:Shim-pack CLC-ODS?流动相:MeOH:H2O=7:3?流速:1.0 mL/min?温度:40 C?进样体积:10 uL?检测器:UV-254 nm?峰1.苯甲酸甲脂2.苯甲酸乙脂3.n-苯甲酸丙酯4.n-苯甲酸丁酯ODS C8 ODS C8 TMS TMS 固定相极性变化对分离的影响19Shimadzu International Trading(Shanghai)Co.Limited离子对试剂 阴离子化合物 氢氧化四丁基铵 溴化四丁基铵 阳离子化合物 丁烷基磺酸钠(C4)戊烷基磺酸钠(C5)己烷基磺酸钠(C6)庚烷基磺酸钠(C7)辛烷基磺酸钠(C8)癸烷基磺酸钠(C10)十二烷基磺酸钠(SDS)离子对色谱20Shimadzu International Trading(Shanghai)Co.Limited离子对色谱影响因素 离子对试剂的类型 离子对试剂的浓度 流动相的 pH 21Shimadzu International Trading(Shanghai)Co.Limited正相色谱硅胶柱:常用氰基柱:常用氨基柱:分析糖二醇基柱:分析蛋白质硅胶硅胶SiSi-Si-CH2CH2CH2CN-Si-CH2CH2CH2NH2-Si-CH2CH2CH2OCH(OH)-CH2(OH)化学键合相化学键合相22Shimadzu International Trading(Shanghai)Co.Limited相互作用力是什么?OHHOSiOHSiOH强强强强弱弱弱弱非常弱非常弱非常弱非常弱氢键力氢键力氢键力氢键力23Shimadzu International Trading(Shanghai)Co.Limited氢键力 如果样品有-COOH:羧基-NH2:氨基-OH:羟基氢键力强.如果样品没有任何官能团，象碳水化合物 如果样品有大的基团,由于空间障碍氢键力弱.24Shimadzu International Trading(Shanghai)Co.Limited正相模式下流动相的选择 主要试剂主要试剂 烷烃(戊烷,己烷,庚烷,辛烷)芳香烃(苯,甲苯,二甲苯)二氯甲烷 氯仿 四氯化碳 辅助试剂辅助试剂 甲基-t-丁基醚(MTBE),乙醚,四氢呋喃(THF),二氧杂环乙烷,嘧啶,乙酸乙酯,乙腈,丙酮,异丙醇,乙醇,甲醇为了调整保留时间，可以选择主要试剂然后再加入辅助试剂。25Shimadzu International Trading(Shanghai)Co.Limited增加流动相极性0%0%MeOHMeOH2%2%MeOHMeOH5%/MeOH5%/MeOH1:邻苯二甲酸二辛酯2:邻苯二甲酸二丁酯3:邻苯二甲酸二乙酯4:邻苯二甲酸二甲酯主要试剂主要试剂:己烷己烷26Shimadzu International Trading(Shanghai)Co.Limited 反相 保留时间重复性好 固定相耐用 正相 对立体异构体有很好的分离(Vitamin E等)保留时间重复性稍差反相色谱与正相色谱的对比27Shimadzu International Trading(Shanghai)Co.Limited离子交换色谱N+RRR样品样品SO3-样品样品+离子吸引力离子吸引力28Shimadzu International Trading(Shanghai)Co.Limited离子交换色谱应用 生物领域(蛋白质,农药,氨基酸分析)离子分析 阳离子交换剂 强阳离子交换剂(SCX)(R-SO3-)弱阳离子交换剂(WCX)(R-COO-)阴离子交换剂 强阴离子交换剂(SAX)(R4N+)弱阴离子交换剂(WAX)(DEAE)29Shimadzu International Trading(Shanghai)Co.Limited尺寸排阻色谱法（SEC）流出顺序流出顺序30Shimadzu International Trading(Shanghai)Co.Limited第二部分柱子基本性能参数31Shimadzu International Trading(Shanghai)Co.Limited硅胶纯度填料硅胶的纯度与残留金属离子浓度色谱柱尺寸 填料床的长度和内径颗粒形状球型或不规则型粒径平均颗粒直径,通常3-10m表面积颗粒外表面和内部孔表面的总和,以m2/g表示孔径颗粒的孔或腔的平均尺寸,范围80-300碳百分率与基体物质相连的键合相的量封尾用短链将裸露的硅羟基键合后封闭起来表征色谱柱的参数32Shimadzu International Trading(Shanghai)Co.Limited表征色谱柱性能的参数 容量因子 理论塔板数 理论塔板高度 分离度 拖尾因子33Shimadzu International Trading(Shanghai)Co.Limited容量因子,kt1 =组分峰的保留时间t0=死时间(非保留时间)t0t1k=t0 t1-t034Shimadzu International Trading(Shanghai)Co.Limited理论塔板数,N中国/日本药典:N=5.54 x(Rt/W 1/2)2美国药典:N=16 x(Rt/W)2WW1/2H1/2HRtArea理论塔板高度,HH=L/NL：色谱柱长N：理论塔板数35Shimadzu International Trading(Shanghai)Co.Limited分离度,Resolution相邻两峰完全分离其分离度 Rs1.5.36Shimadzu International Trading(Shanghai)Co.Limited完全分离时的分离度Rs=1.0Rs=1.5峰形不是三角形峰形不是三角形，而是高斯分布，而是高斯分布37Shimadzu International Trading(Shanghai)Co.Limited拖尾因子，TT=W0.05/2d0.05W0.05：5峰高处峰宽d0.05：5峰高处的前半峰宽d0.05W0.05H0.05H38Shimadzu International Trading(Shanghai)Co.Limited第三部分 HPLC硬件基础知识 日常分析注意点39Shimadzu International Trading(Shanghai)Co.Limited液相色谱简易流程图输液泵输液泵进样器进样器色谱柱色谱柱柱温箱柱温箱检测器检测器溶剂溶剂数据处理数据处理40Shimadzu International Trading(Shanghai)Co.Limited采用“HPLC”级溶剂避免使用会引起柱效损失或保留特性变化的溶剂对试样有适宜的溶解度溶剂粘度要小与检测器相匹配流动相的选择41Shimadzu International Trading(Shanghai)Co.Limited水的等级 水的等级纯化水蒸馏水去离子水波长(nm)纯化水去离子水因为不纯物的存在，去离子的吸光率较高纯化水中去除了无机和有机的污染物吸光率吸光率42Shimadzu International Trading(Shanghai)Co.LimitedHPLC用水可以通过以下几个方法得到：专门的纯水机或超纯水机:理想的HPLC用水应为18.2M的超纯水，并通过0.22m的滤膜，除去热源、有机物、无机离子等。去离子水重蒸；二次或三次重蒸水；不管采用何种途径，配制流动相应用新鲜水。水的等级43Shimadzu International Trading(Shanghai)Co.Limited 未注入样品时空白梯度的色谱图水中不纯物的出峰水中不纯物的出峰水中的不纯物保留在柱中，随之被乙腈洗脱水中的不纯物保留在柱中，随之被乙腈洗脱.水的等级44Shimadzu International Trading(Shanghai)Co.Limited 有机溶剂的等级 HPLC级 优级纯 分析纯都经过蒸馏和0.45u的过滤(除纤维毛,未溶解的机械颗粒)优级纯的纯度比分析纯大,但里面含有防腐剂和抗氧化剂HPLC级经过0.2u的过滤,且除去有紫外吸收的杂质微量分析、梯度洗脱微量分析、梯度洗脱有机溶剂的等级45Shimadzu International Trading(Shanghai)Co.Limited甲醇乙腈正己烷甲醇乙腈正己烷分析纯级和 HPLC 级溶剂的吸光度比较图有机溶剂的等级46Shimadzu International Trading(Shanghai)Co.Limited选择缓冲液的步骤1.确定最佳分离状态时的流动相pH2.选择具有与流动相pH相近的pKa 的缓冲液（即使浓度稀也具有较强能力的缓冲液）3.确认检测波长下缓冲液是否有大的吸收（在波长210nm附近进行检测时，不能用醋酸和 柠檬酸的缓冲液）缓冲盐47Shimadzu International Trading(Shanghai)Co.LimitedpK1pK2pK3醋酸4.87柠檬酸3.134.766.40磷酸2.167.2112.32缓冲盐常用代表性的弱酸的pKa值48Shimadzu International Trading(Shanghai)Co.Limited缓冲液的使用?使用前必须过滤?使用后一定要进行清洗，以免造成腐蚀、磨损、阻塞:用含5%甲醇的水溶液冲洗30min（1ml/min），再用甲醇冲洗30min?用纯水冲洗泵头清洗管路?易受到细菌和霉菌的影响不能直接用有机溶剂冲洗缓冲盐溶液缓冲液49Shimadzu International Trading(Shanghai)Co.Limited流动相的更换不互溶的流动相不能直接更换缓冲盐不能直接用有机溶剂更换水正己烷异丙醇缓冲盐有机溶剂水50Shimadzu International Trading(Shanghai)Co.Limited-乙腈黏度低乙腈黏度低在相同流速时有较低的柱压-当和水混合时黏度有变化当和水混合时黏度有变化柱压也相应有变化 乙腈和甲醇 黏度溶剂的黏度Water/methanolWater/methanolWater/acetonitrileWater/acetonitrilePressure(MPa)Water(100%)Organic solvent(100%)Water/Organic solvent 1:151Shimadzu International Trading(Shanghai)Co.Limited过滤：过滤：0.45um或更小孔径滤膜或更小孔径滤膜目的：除去溶剂中的微小颗粒，避免堵塞色谱柱，尤其是使用无机盐配制的缓冲液时。滤膜类型：滤膜类型：聚四氟乙烯滤膜：适用于所有溶剂，酸和盐。醋酸纤维滤膜：不适用于有机溶剂，特别适用于水基溶剂。尼龙66滤膜：适用于绝大多数有机溶剂和水溶液，可以用于强酸，不适用于二甲基甲酰胺。再生纤维素滤膜：蛋白吸收低，同样适用于水溶性样品和有机溶剂溶剂前处理-过滤52Shimadzu International Trading(Shanghai)Co.Limited脱气：除去流动相中溶解或因混合而产生的气泡脱气：除去流动相中溶解或因混合而产生的气泡气泡对测定的影响：气泡对测定的影响：1）泵中气泡使液流波动，改变保留时间和峰面积2）柱中气泡使流动相绕流，峰变形3）检测器中的气泡产生基线波动溶剂前处理-脱气53Shimadzu International Trading(Shanghai)Co.Limited0 50 100乙醇体积(%)100200氧的饱和容量(uL)氧气在1ml水-乙醇混合溶剂中的溶解度溶剂前处理-脱气54Shimadzu International Trading(Shanghai)Co.Limited常用脱气方法 超声脱气 减压脱气 在线脱气55Shimadzu International Trading(Shanghai)Co.Limited目的单元流速范围特性和应用目的单元流速范围特性和应用LC-20AD 0.0001-10ml/min 无脉动，适于半微量LC 和 LC-MS分析LC-20AT 0.001-10ml/min 非凡的耐用性，适于常量分析LC-20AB0.0001-10ml/min 无脉动，适于半微量LC 和 LC-MS分析分析分析LC-10ATvp 0.001-9.999ml/minLC-10ADvp0.001-9.999ml/min岛津液相输液泵56Shimadzu International Trading(Shanghai)Co.LimitedLC-20AT串联式柱塞往复泵串联式柱塞往复泵LC-20AD并联式微体积柱塞往复泵并联式微体积柱塞往复泵柱塞泵的基本结构LC-10ATvpLC-10ADvp单向阀单向阀单向阀LC-201057Shimadzu International Trading(Shanghai)Co.LimitedLC-20ATLC-20ATLC-20AT58Shimadzu International Trading(Shanghai)Co.LimitedLC-20ADLC-20AD59Shimadzu International Trading(Shanghai)Co.LimitedLC-20ABLC-20AB60Shimadzu International Trading(Shanghai)Co.Limited泵工作示意图凸轮柱塞杆柱塞密封圈单向阀泵头流动相入口流动相入口流动相出口流动相出口61Shimadzu International Trading(Shanghai)Co.Limited单向阀结构抛光面球座宝石球单向阀工作原理吸液冲程排液冲程出口单向阀进口单向阀出口单向阀进口单向阀泵头单向阀工作原理62Shimadzu International Trading(Shanghai)Co.Limited输液泵进样器色谱柱柱温箱检测器输液泵进样器色谱柱柱温箱检测器单一或混合溶剂单一或混合溶剂单一或混合溶剂单一或混合溶剂等度洗脱63Shimadzu International Trading(Shanghai)Co.LimitedA 泵进样器色谱柱柱温箱检测器泵进样器色谱柱柱温箱检测器B泵泵AB时间时间B 浓度浓度梯度洗脱64Shimadzu International Trading(Shanghai)Co.Limited梯度洗脱装置：梯度洗脱装置：?高压梯度：用两台高压输液泵将两种溶剂输入?低压梯度：在常压下将两种溶剂（或多元溶剂）混合，然后用高压输液泵将流动相输入到色谱柱中。HPGE梯度混合器低压梯度比例阀LPGE高压常压常压高压高压/低压梯度系统65Shimadzu International Trading(Shanghai)Co.Limited分析时间长分析时间长分析时间长分析时间长分离度差分离度差分离度差分离度差MeOH/H2O=6/4MeOH/H2O=8/2(column:ODS)使用梯度洗脱的原因当等度洗脱时：66Shimadzu International Trading(Shanghai)Co.Limited95%30%甲醇浓度甲醇浓度在最短时间内获得最佳的分离在最短时间内获得最佳的分离使用梯度洗脱的原因当采用梯度洗脱时：67Shimadzu International Trading(Shanghai)Co.Limited梯度洗脱：梯度洗脱：梯度洗脱：梯度洗脱：优点：可提高分离度、缩短分离时间、降低最小检测量和提高分离精度注意事项：注意事项：注意事项：注意事项：?溶剂的纯度要高，否则梯度洗脱的重现性差?梯度混合的溶剂互溶性要好?梯度洗脱应使用对流动相组成变化不敏感的选择性检测器（如紫外吸收检测器或荧光检测器），而不能使用对流动相组成变化敏感的通用型检测器（如示差折光检测器）?查看空白实验的数据?遵守分析周期（最初的分析数据不采用）梯度洗脱要点68Shimadzu International Trading(Shanghai)Co.Limited1.使用流动相溶解样品-减少溶剂峰，尤其是组分峰靠近溶剂峰时尤为重要-保证样品在流动相中的溶解度，避免样品在系统中，尤其在柱中产生沉淀2.进样前最好使用0.45um 的滤膜进行过滤如果样品很脏，要使用0.22um的滤膜进行过滤3.对于含有复杂基质的样品，最好前处理后再进样。样品前处理69Shimadzu International Trading(Shanghai)Co.Limited进样器 自动进样器 手动进样器原理：（六通阀）注入方式：1）全量注入2）部分注入70Shimadzu International Trading(Shanghai)Co.Limited手动进样器的原理图load 位置位置inject 位置位置柱柱泵泵柱定量环泵泵柱定量环 71Shimadzu International Trading(Shanghai)Co.Limited进样量和检测器响应的关系示意图进样体积检测器响应值定量环体积的一半3倍定量环体积全量注入部分注入手动进样器的进样体积72Shimadzu International Trading(Shanghai)Co.Limited 部分注入：部分注入：一般要求进样量最多为定量环体积的一半，如20l的定量环最多进样10l的样品，并且要求每次进样体积准确、相同 全量注入：全量注入：进样量最少为定量环体积的3至5倍，即20l的定量环最少进样60至100l的样品，这样才能完全置换样品定量环内残留的溶液，达到所要求的精密度及重现性。部分注入和全量注入73Shimadzu International Trading(Shanghai)Co.Limited交叉污染的原因红色表示残留样品74Shimadzu International Trading(Shanghai)Co.Limited手动进样方法 一般的方法1.在进样状态下清洗针口2.在装填状态下插入微量注射器3.注入样品4.切到进样状态75Shimadzu International Trading(Shanghai)Co.Limited 便捷的方法（不需清洗）1.进样状态下插入微量注射器2.切换到装填状态3.注入样品4.切换回进样状态手动进样方法76Shimadzu International Trading(Shanghai)Co.Limited柱温箱 分析结果重现性好 提高柱效 降低柱压 保证检测稳定性77Shimadzu International Trading(Shanghai)Co.Limited?柱压低于20MPa?柱温在40左右，最高使用温度为50?缓冲液pH使用范围为27.5?流动相有机溶剂比例过低,柱效下降快ODS柱的使用注意点硅胶在pH为34时稳定性最好碱浓度越低，流动相含水量越低，硅胶越稳定。硅胶在pH为34时稳定性最好碱浓度越低，流动相含水量越低，硅胶越稳定。78Shimadzu International Trading(Shanghai)Co.Limited色谱柱的类型及适用范围硅胶基底聚合物基底pH 范围2-7.5宽范围有机溶剂所有有限制压力 20MPa低压温度宽范围50 79Shimadzu International Trading(Shanghai)Co.Limited分析柱的维护1.在使用新柱之前，最好用强溶剂在低流量下(0.2-0.3 ml/min)冲洗30 min，长时间未用的分析柱也要同样处理2.定期使用强溶剂冲洗柱子3、使用缓冲盐时，要先用含5%甲醇的水溶液冲洗，再用有机溶剂冲洗4、净化样品5、分离条件6、不使用时，要盖上盖子，避免固定相干涸80Shimadzu International Trading(Shanghai)Co.Limited常用检测器?紫外检测器（包括二极管阵列检测器）?荧光检测器?示差折光检测器?电导检测器?蒸发光散射检测器?质谱检测器81Shimadzu International Trading(Shanghai)Co.Limited?原理：基于被分析组分对特定波长紫外光的选择性吸收?定量基础：朗伯-比耳定律，AkCL?优点：1）灵敏度高2）对温度和流速不敏感3）可用于梯度洗脱?缺点：仅适用于测定有紫外吸收的物质紫外检测器82Shimadzu International Trading(Shanghai)Co.Limited二极管阵列检测器83Shimadzu International Trading(Shanghai)Co.Limited二极管阵列检测器（SPD-M20A）-二十一世纪标准紫外检测器色谱定性依据：保留时间常规紫外检测器峰纯度二极管阵列检测器二极管阵列检测器84Shimadzu International Trading(Shanghai)Co.Limited样品池样品池二极管阵列二极管阵列光栅光栅D2/W 灯灯每一组分可在每一波长处得到一吸光度值每一组分可在每一波长处得到一吸光度值二极管阵列检测器85Shimadzu International Trading(Shanghai)Co.Limited1）采集三维谱图2）峰纯度检验3）光谱库检索4）可以发现单波长检测时未检测到的峰二极管阵列检测器的优点86Shimadzu International Trading(Shanghai)Co.Limited原理：基于被分析组分发射的荧光强度进行检测?优点：1）灵敏度高，是最灵敏的检测器之一2）选择性好3）对温度和流速不敏感，可用于梯度洗脱?缺点：仅适用于测定可产生荧光的物质?可检测物质：多环芳烃、霉菌毒素、酪氨酸、色氨酸、卟啉、儿茶酚氨等（具有对称共轭体系）荧光检测器87Shimadzu International Trading(Shanghai)Co.Limited?原理：连续测定流通池中溶液折射率来测定试样中各组分浓度。?优点：通用型检测器，?缺点：1）对温度变化敏感2）对溶剂组成变化敏感，不能用于梯度检测3）属于中等灵敏度的检测器示差折光检测器88Shimadzu International Trading(Shanghai)Co.Limited原理：根据物质在某些介质中电离后所产生的电导率的变化来测定电离物质含量，广泛应用于离子色谱法。?优点：对流动相流速和压力的改变不敏感，可用于梯度洗脱?缺点：对温度变化敏感（温度每升高1度，电导率增加2%-2.5%)?用途：主要用于离子色谱，检测无机和有机离子电导检测器89Shimadzu International Trading(Shanghai)Co.Limited原理:流出物在检测器中被高速氮气喷成雾状液滴，溶剂挥发后，溶质形成微小颗粒，被载气带到检测系统，进入散射室中，检验散射光的强度。优点:消除了溶剂干扰以及温度变化带来的基线漂移，可梯度洗脱，灵敏度高，是HPLC的通用型检测器缺点：不能使用不挥发性盐作流动相，如磷酸盐蒸发光散射检测器90Shimadzu International Trading(Shanghai)Co.Limited质谱检测器 强大的定性和选择性能力多组份样品的准确定性；未充分分离组份峰的鉴别；消除杂质干扰；可作为便捷的定性分析用于合成和衍生反应的研究；作NMR预分析的质谱鉴定；